外周免疫刺激诱导小鼠下丘脑室旁核和视上核中Ⅰ型IL-1受体表达的变化

目的　通过研究外周免疫刺激后免疫性细胞因子受体在下丘脑神经内分泌核团中的表达变化 ,揭示这些核团与神经免疫调节的关系。　方法　小鼠腹腔内给予细菌内毒素脂多糖 (lipopolysaccharide ,LPS)或葡萄球菌肠毒素B(staphylococcalenterotoxinB ,SEB) ,用免疫组织化学方法观察脾脏核增殖抗体 (PCNA)及下丘脑室旁核和视上核中Ⅰ型IL 1受体的表达 ,并采用双标记技术观察Ⅰ型IL 1受体阳性神经元和加压素及催产素表达的关系。　结果　 1 与对照组比较 ,LPS或SEB引起脾脏核增殖抗体的表达明显增强。 2 Ⅰ型IL 1受体在正常小鼠脑内的表达很广泛。与对照组比较 ,LPS或SEB引起Ⅰ型IL 1受体在小鼠下丘脑室旁核和视上核中表达显著增强。 3 在正常下丘脑室旁核和视上核中Ⅰ型IL 1受体阳性的神经元既有加压素能的 ,又有催产素能的。　结论　下丘脑室旁核和视上核参与了免疫反应的调节 ,这两个核团中的部分加压素能神经元和催产素能神经元在神经免疫调节中可能具有重要作用     

大鼠下丘脑室旁核和视上核内神经激肽B受体和加压素的共存研究

目的研究神经激肽Ｂ受体（ＮＫ３受体）免疫反应产物在大鼠下丘脑室旁核和视上核的分布及其与加压素的共存。方法免疫组织化学染色,标本在光镜和电镜下观察。共存研究采用相邻切片染色法。结果致密的ＮＫ３受体阳性产物分布于室旁核的后大细胞部和视上核的主部。免疫电镜观察发现ＮＫ３受体阳性反应产物出现于室旁核和视上核的胞体和树突内。在相邻切片上观察到室旁核和视上核内有相当数量的ＮＫ３受体阳性神经元,同时含有加压素,它们主要分布于室旁核的后大细胞部和视上核的主部。结论根据本研究和以往的机能学的研究结果,推测下丘脑室旁核和视上核内的ＮＫ３受体阳性神经元可能参与调控机体内环境改变时下丘脑加压素的释放。     

切除两侧肾上腺对大鼠下丘脑加压素、催产素神经元的影响

为了进一步确定加压素(VP)在应激反应中的作用,我们应用免疫组化和免疫电镜观察了切除两侧肾上腺对大鼠下丘脑室旁核和视上核的神经内分泌细胞的影响,发现下丘脑室旁核VP神经元处于功能亢进状态,其合成、储存和分泌VP的功能均亢进,而视上核的加压素(VP)神经元以及室旁核和视上核的催产素(OT)神经元的功能状态均无明显改变,提示室旁核的VP神经元可能是参与下丘脑—垂体—肾上腺这一应激反应轴调节的重要因素。     

高渗刺激诱导大鼠下丘脑室旁核和视上核神经激肽B受体阳性神经元表达Fos

目的研究神经激肽Ｂ受体（ＮＫ３受体）与机体渗透压调节之间的可能关系。方法用双重免疫组织化学染色技术,高渗刺激采用静脉内注射１．５ｍｏｌ／ＬＮａＣｌ的方法,观察了下丘脑室旁核和视上核内ＮＫ３受体阳性神经元在高渗刺激下的Ｆｏｓ表达情况。结果高渗盐水可诱导下丘脑室旁核和视上核内大量神经元表达Ｆｏｓ。在室旁核,双标细胞约占ＮＫ３受体阳性神经元的８８％,约占Ｆｏｓ阳性细胞的７１％;在视上核的主部,双标细胞约占ＮＫ３受体阳性神经元的７４％,约占Ｆｏｓ阳性细胞的４３％。结论室旁核和视上核内ＮＫ３受体阳性神经元可能参与大鼠渗透压调节过程。     

高渗刺激诱导大鼠下丘脑室核和视上核神经激肽B受体阳性神经？…

目的 研究神经激肽Ｂ受体与机体渗透压调节之间的可能关系。方法 用双重免疫组织化学染色技术，高渗刺激采用静脉内注射１．５ｍｏｌ／Ｌ ＮａＣｌ的方法，观察下丘脑室旁核和视上核ＮＫ３受体阳性神经元在高渗刺激下的Ｆｏｓ表达情况。结果 高渗盐水可诱导下丘脑室旁核和视上核内大量神经元表达Ｆｏｓ。     

小鼠下丘脑室旁核的亚区

综合运用Nissl染色,HRP逆行标记,Gomori染色,加压素、催产素免疫细胞化学和生物图象参数测量等方法对小鼠下丘脑室旁核的细胞组成及分布特点进行分析。结果表明小鼠室旁核除大细胞神经元和小细胞神经元外还有数量较多的中等神经元。三者混杂分布。该核团前、后部,内、外侧,及外侧的腹、背部其细胞密度,含催产素、加压素的神经分泌细胞的分布特点以及投射联系等均有差异。依据这些特点,小鼠下丘脑室旁核可分为五个亚区:前亚区(PVA);内侧亚区(PVM);背外侧亚区(PVLd);腹外侧亚区(PVLv),后亚区(PVLp)。     

大鼠双侧海马伞离断对脂多糖诱导的下丘脑催产素能神经元功能活动的影响

为观察去海马传入对免疫应激时下丘脑室旁核、视上核催产素能神经元功能活动的影响 ,以探索海马调控外周免疫反应的脑内环路 ,本研究预先切断大鼠双侧海马伞 ,2 8d后腹腔内注射细菌内毒素脂多糖 (lipopolysaccharide,LPS,75 0μg/kg) ,用免疫组织化学双标记方法 ,以 F os蛋白作为神经元功能活动的标记物 ,观察下丘脑催产素能神经元中即刻早期基因的表达变化。结果显示 :双侧海马伞离断后 ,下丘脑室旁核中因腹腔脂多糖刺激而发生活化的催产素能神经元活化百分率显著下降 ;而视上核中催产素能神经元的活化未受明显影响。上述结果表明 ,海马对下丘脑 -垂体 -肾上腺轴以及免疫系统的抑制作用部分是通过其支配的下丘脑室旁核的催产素能神经元来完成的。     

大鼠下丘脑室旁核和视上核内神经激光肽B受体和加压素的共？…

研究神经激肽Ｂ受体免疫反应产物在大鼠下丘脑旁室核和视上核的分布及其与加压素的共存。方法免疫组织化学染色，标本在光镜和电镜下观察。共存研究采用相邻切片染色法。结果致密的ＮＫ３受体阳性产物分布于室旁核的后大细胞部和视上核的主部。     

大鼠下丘脑催产素样和加压素样神经元与5—羟色胺及儿苯酚胺能传入纤维…

用免疫组织化学ＡＢＣ双标记法，显示下丘脑各神经分泌核区中催产素样免疫反庆，加压素样免疫反就神经元及５－羟色胺样免疫反应和儿茶酚胺能，即酷胺酸羟化酶免疫瓜纤维末梢，对这两种单胺能纤维末梢在视上核，室旁核及各种神经分泌副核中的分布，与ＯＴ－ｌｉ和ＶＰ－ｌｉ神经元相关的特点及异同加以分析。结果显示，５－ＨＴ－ｌｉ纤维未梢在下丘脑视上核、室旁核及各神经分泌副核中，与ＯＴ－ｌｉ及ＶＰ－ｌｉ神经元相接触，并在     

小鼠室旁核内雌激素受体与催产素、加压素表达的免疫组化研究

目的研究雌激素的核受体ER-α和ER-β以及催产素、加压素在成年雌性小鼠下丘脑室旁核内的表达。方法采用硫酸镍铵增强显色的免疫组化SP法检测ER-α、ER-β、催产素和加压素在室旁核内的表达。结果雌激素的两种核受体在室旁核内都有表达,但是以ER-β为主（P〈0.001）,其免疫阳性产物均在细胞核内,未见核外免疫阳性反应。催产素的免疫阳性产物主要在细胞核周围的胞浆即核周质内,而加压素的免疫阳性物质除了在核周质内有很强的反应外,在突起内也可见很强的免疫反应。ER-α的免疫阳性胞体主要在大细胞部内侧,而ER-β、催产素和加压素的免疫阳性胞体主要在背侧帽部或大细胞部的外侧。结论室旁核内两种雌激素受体可能都参与了对催产素和加压素的调节,但ER-β可能发挥了主要的调节作用。     

不同禁水时间老龄大鼠下丘脑大细胞分泌神经元的免疫电镜观察

电镜观察了不同禁水时间老龄大鼠下丘脑视上核和室旁核分泌神经元，即加压素和催产素神经元及胶质细胞的超微结构变化，结果显示，禁水6与12h后，上述两核团中的分泌神经元胞体增大，胞质中粗面内质网（RER）排列紧密且规则，高尔基（Golgi)器的未成熟分泌颗粒及神经分泌颗粒增多，轴突内神经分泌颗粒少见，胶质细胞成份减少，突起回缩；相邻两神经元胞膜直接接触，质膜并列现象及突触增多，而在禁水24h后，神经元胞体内的神经分泌颗粒有减少，轴突中的神经分泌颗粒却增多并聚集成膨大区域，以上结果提示老龄大鼠视上核和室旁核的分泌神经元在禁水时其合成激素的功能是活跃的，而且催产素神经元的结构变化与加压素神经元结构变化是相似的，胶质细胞的结构变化为神经元质膜并列及突触的形式提供了有利条件。     

LPS对大鼠下丘脑视上核nNOS和c-fos表达的影响

为探讨下丘脑视上核(SON)在神经免疫调节中的作用,本实验应用免疫组化技术观察了腹腔注射脂多糖(LPS)后大鼠下丘脑视上核nNOS和c-fos表达的变化。结果表明:LPS可使大鼠视上核内nNOS和c-fos阳性细胞的OD值显著增高,且视上核内部分神经元可同时表达nNOS和c-fos。结果提示,视上核可能为免疫调节的高级整合中枢之一,可能通过NO和／或c-fos途径调节免疫功能。     

抗利尿激素研究的若干进展

人和大多数哺乳动物的抗利尿激素为精氨酸加压素(arginine vasopressin, AVP)。经典的理论认为,加压素和催产素由视上核和室旁核的大细胞神经元(magnocellular neu-rone)合成,经下丘脑-神经垂体束移行至神经垂体。近年来应用免疫组织化学、电镜等研究的结果表明,室旁核的小细胞加压素神经元(parvocellular vasopressin neurones)及脑干中的某些大细胞神经元也能合成加压素。加压素至少经四个途径被输送到脑的各部     

免疫抑制剂雷帕霉素对LPS免疫激发大鼠脑内免疫相关核团神经元Fos和nNOS表达的影响

观察免疫抑制剂雷帕霉素对大鼠中枢免疫核团Fos和nNOS表达的影响,并探讨雷帕霉素对中枢免疫调节的作用。将大鼠分为雷帕霉素(10mg/kg)实验组和生理盐水对照组。两组动物分别给药后,腹腔注射免疫激发剂细菌脂多糖(LPS,25mg/kg),用免疫组织化学方法显示并计数下丘脑室旁核、视上核和孤束核中Fos蛋白阳性、nNOS样免疫阳性神经元和Fos/nNOS双标神经元数量,并对数据进行统计学处理。结果显示:实验组动物的下丘脑室旁核、视上核和孤束核内Fos、Fos/nNOS神经元数目较对照组均显著减少(P<0.01)。这一结果表明免疫抑制剂雷帕霉素降低了中枢免疫相关核团内因LPS免疫应激所引起的nNOS的表达,提示雷帕霉素在抑制机体免疫机能的同时,也降低了神经-内分泌系统对免疫的抑制作用。     

精氨酸加压素阳性神经元在大鼠下丘脑的定位

目的:观察大鼠精氨酸加压素(AVP)及其mRNA阳性神经元在下丘脑的分布和形态特征。方法:以尼氏染色作参照,运用免疫组化和原位杂交观察AVP及其mRNA在下丘脑的表达。结果:下丘脑AVP及其mRNA阳性的神经元由吻侧到尾侧依次出现于视上核,视上核和视交叉上核,视上核、视交叉上核和室旁核,视上核和室旁核及视上核、下丘脑前核和室旁核。AVP及其mRNA阳性神经元仅占据视上核背内侧;在第三脑室室管膜膜内或膜下可见AVP阳性神经元的胞体或突起;在不同核团内AVP阳性神经元的形态存在差异。结论:AVP及其mRNA阳性神经元在下丘脑不同核团内具有特异性分布;AVP阳性触液神经元可能是调节脑脊液和脑组织之间AVP含量的桥梁。     

不同高渗刺激对下丘脑视上核和室旁核神经元功能状态的影响

视上核和室旁核是下丘脑中两个与渗透压感受、加压素分泌以及水平衡调节密切相关的核团。为了搞清楚这两个核团在不同刺激条件下的激活状态和反应特性,本文采用慢性和急性渴觉刺激模型,免疫组化和ELISA检测相结合的方法对视上核和室旁核内的Fos表达以及血清加压素水平进行了测定。慢性刺激组动物给予2% NaCl盐水持续2d,而急性刺激组动物皮下直接注射2mol/L的NaCl盐水2.5ml,两组动物的进食保持正常。结果表明,这两种不同的刺激方式引发的Fos表达模式基本相似,视上核、室旁核、下丘脑外侧区以及正中视前区、穹窿下器和终板血管下器等区都检测到大量的Fos阳性胞核。但Fos染色的深浅程度和Fos胞核的数量却在两组之间有明显的差异:急性组胞核浓染,数量多;慢性组胞核淡染,数量少。ELISA检测的结果与此相反,急性组动物血清中加压素的水平很低,与对照组没有明显差异;而慢性组动物血清中的加压素水平很高,几乎是对照组的2倍。以上结果提示,下丘脑神经元的激活和分泌功能与刺激方式密切相关,选择单一刺激模式、单一指标来揭示和衡量其功能状态是缺乏说服力的。     

大鼠下丘脑弓状核神经元的神经支配

用ＨＲＰ逆行追踪和免疫细胞化学与电镜结合法研究了下丘脑弓状核神经元的神经支配。结果表明，室旁核向弓状核投射的神经元中，有一部分为催产素免疫反应阳性，一部分为后叶加压素免疫反应阳性，视上核也有部分ＯＴ免疫反应阳性神经元发出纤维投射至弓状核。将零乱毒素Ｂ亚单位结合ＨＲＰ注入第三脑室后，可见弓状核内有逆行标记细胞，电镜观察发现弓状核内的脑啡肽免疫反应阳性的树突接受ＨＲＰ反应阳性的触液神经元的轴突形成突触     

老年大鼠下丘脑视上核和弓状核的超微结构变化

观察老年大鼠下丘脑视上核腹侧大细胞神经元和弓状核神经元的超微结构,结果显示:老年大鼠视上核腹侧血管加压素(VP)神经元的胞体较成年鼠大,胞质结构比较致密,内含许多核糖体颗粒,粗面内质网分散成小泡状,神经分泌颗粒增多,溶酶体、线粒体、高尔基氏复合体数量都较多.而弓状核内的暗细胞和亮细胞的核糖体减少,高尔基氏复合体和线粒体都变化,还有少数神经元固缩,细胞质内胞器明显减少,呈现变性现象.结果提示:老年期下丘脑视上核VP神经元机能增强;而弓状核内两种细胞都显示机能减弱的征象.老年时下丘脑各核团神经元的这种不协调性变化,可能是动物衰老的一种重要表现.     

P物质对大鼠下丘脑催产素及加压素免疫反应性神经元Fos癌蛋白 …

为研究Ｐ物质激活的下丘脑大细胞神经分泌神经元及其分布，将Ｐ物质注入大鼠侧脑室，用Ｆｏｓ癌蛋白免疫组织化学结合催产素或加压素抗血清免疫组织化学的双标记法，检测了下丘脑各大细胞神经分泌核区域激活的催产素及加压素免疫反应性神经元。结果表明：Ｆｏｓ免疫强化反应性的神经元主要见于第三脑室周围区及室旁核，在视上核及其他下丘脑大细胞神经分泌核区仅见到少数至少数Ｆｏｓ免疫反应性神经元。     

大鼠下丘脑室旁核的神经支配

本文应用ＨＲＰ追踪、免疫细胞化学与电镜方法研究了大鼠下丘脑室旁核的神经支配。结果显示，中缝背核向室旁核投射的神经元中，部分为５－ＨＴ免疫反应阳性；被盖背外侧核的部分５－ＨＴ神经元也发出纤维投射至室旁核。将ＣＢ－ＨＲＰ注入第三脑室后，电镜下发现室旁核内ＥＶＫ免疫反应阳性树突接受ＨＲＰ反应阳性轴突形成突触，ＨＲＰ免疫反应阳性的树突与阴性轴突的传入形成突触，提示室旁核内ＥＮＫ神经元受触液神经元的突触调控，同时触液神经元又受到其他神经元的突触调控。