维甲酸致大鼠肛门直肠畸形中Hoxd-13基因表达的研究

目的 探讨Hoxd-13基因表达与大鼠肛门直肠畸形形成之间的相关性.方法 维甲酸制作大鼠肛门直肠畸形动物模型,分别于妊娠第12、13、14、16、18、20 d时行剖宫取仔,所得标本部分行HE染色观察,各组切片均根据HE染色结果选取2～3张进行Hoxd-13基因表达的原位杂交检测,并对Hoxd-13基因表达部位和强度(平均灰度值G值表示)进行统计学分析.结果 胚胎学研究表明实验组胚胎从妊娠12d时发育即较对照组延迟,随时间延长畸形逐步发展,到妊娠16d时,肛门直肠畸形、显性脊柱裂和尾畸形已经形成.对照组胚胎中Hoxd-13基因表达在肛门直肠和泌尿生殖系未完全形成之前的泌尿直肠隔下方的泄殖腔内层和原始的后肠内层,实验组则缺如.表达水平(G值)经统计方差分析,差异具有统计学意义(F=23.165,P＜0.05).各组均数两两对比结果显示对照组中除妊娠12d时灰度值稍高外,其余各组间无明显差异,灰度值均值随妊娠天数增加呈降低趋势,即表达有增强趋势;实验组规律则不甚明显,但总体上仍呈灰度值降低、表达增强趋势.结论 在泄殖腔结构转化过程中泄殖腔和后肠内皮处Hoxd-13基因表达缺如与肛门直肠畸形形成相关,Hox基因可能是维生素A信号系统产生肛门直肠畸形的下游基因.     

Hoxd-13在肛门直肠畸形大鼠肛门直肠表达的研究

目的 通过观察Hoxd-13在正常和肛门直肠畸形大鼠胚胎肛门直肠发育过程中的表达情况,探讨Hoxd-13基因在肛门直肠畸形发生机制中的作用.方法 研究对象分为肛门直肠畸形组(n=75)和对照组(n=108),应用乙烯硫脲致畸Wistar大鼠(n=20)建立肛门直肠畸形动物模型,分别在E13、E14、E15、E16、E18和E21(Ex表示大鼠妊娠第x天)剖宫取胎,正中矢状面连续石蜡切片,进行Hoxd-13免疫组化染色,连续动态观察Hoxd-13在正常和肛门直肠畸形大鼠胚胎肛门直肠发育过程中的表达,并联合应用RT-PCR方法研究Hoxd-13 mRNA在各时期的表达情况.结果 ①免疫组化染色结果:正常大鼠胚胎中,Hoxd-13表达于尿直肠隔的间质以及后肠、泄殖腔膜和尿生殖窦的上皮层.肛门直肠畸形组大鼠胚胎中,在E13～16,Hoxd-13在尿直肠隔间质、后肠上皮层、泄殖腔膜或瘘管上皮层的表达减弱,平均光密度值明显减小,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05).在2组大鼠胚胎中,Hoxd-13的表达随着胎龄的增长呈总体增加的趋势.②RT-PCR结果:Hoxd-13mRNA扩增条带在肛门直肠畸形组呈弱带或无带,在对照组均呈亮带.其相对表达量随着胎龄的增长呈总体增加的趋势.在E13～16,肛门直肠畸形组Hoxd-13mRNA的表达水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).RT-PCR结果与免疫组化结果一致.结论 Hoxd-13在肛门直肠畸形大鼠胚胎尿直肠隔间质以及后肠上皮层、泄殖腔膜或瘘管上皮层表达减弱,Hoxd-13基因表达异常可能与肛门直肠畸形的发生有关.     

Tcf4在肛门直肠畸形大鼠胚胎发育中的表达

目的 观察Tcf4在大鼠正常和畸形肛门直肠发育过程中的表达,探讨Tcf4在正常和肛门直肠畸形的胚胎发生机制中的作用.方法 用乙烯硫脲(ethylenethiourea,ETU)致畸Wistar孕鼠24只肛门直肠畸形动物模型,切片于显微镜下观察,确定肛门直肠畸形的存在.标本经显微镜下观察后分为正常组和肛门直肠畸形组.正中矢状面、连续切片,Tcf4免疫组化染色.连续动态对比观察Tcf4在正常和畸形大鼠胚胎泄殖腔及肛门直肠发育过程中的空间分布情况.常规制备胎鼠冰冻切片,解剖显微镜下手工显微切割方法准确切取泄殖腔标本,从中提取总RNA和总蛋白,通过RT-PCR和Western blot方法分别研究Tcf4 mRNA和Tcf4蛋白在正常和畸形大鼠胚胎泄殖腔及肛门直肠的表达.结果 ①免疫组化结果:Tcf4在大鼠发育过程中正常胚胎泄殖腔中表达,在13 d和14 d主要表达于尿直肠隔和泄殖腔膜,胚胎15 d时在尿生殖膈与泄殖腔膜融合处Tcf4表达较强,16 d时肛膜破裂,肛门直肠形成,Tcf4在直肠黏膜层表达.Tcf4在肛门直肠畸形胎鼠泄殖腔和直肠黏膜层表达较弱或呈现阴性表达.②Western blot和RT-PCR半定量检测结果:在发育期的后肠中Tcf4蛋白和Tcf4 mRNA的表达表现出时间依赖性的特点,在肛门形成的关键时期即14 d、14.5 d和15 d时Tcf4的表达水平达到高峰,一旦肛门形成其表达量随即开始降低,畸形组与正常组相比较,Tcf4蛋白和Tcf4 mRNA的表达在14～15 d明显降低,有统计学意义(P<0.05).结论 在肛门直肠畸形大鼠胚胎中,在肛门直肠形成的关键时期(13～16d),Tcf4存在着时空表达不平衡的特点;在正常大鼠胚胎期泄殖腔和直肠发育过程中,Tcf4可能起重要作用.泄殖腔/后肠Tcf4的表达下调可能与肛门直肠畸形的发生有关.     

肛门直肠畸形胎鼠直肠末端Gli2、BMP4基因的表达

目的探讨乙烯硫脲（ETU）致畸胎鼠直肠末端Gli2、BMP4基因在胎鼠直肠肛门及其畸形发生过程中的表达和作用。方法取妊娠SD大鼠30只,按受孕时间配对分成2组,实验组（n=15）于孕10d灌胃注入10g／LETU （125mg／kg）,对照组n=15）予等量蒸馏水。两组分别于孕13d、14d、15d、16d和17d剖宫取胎鼠直肠末端1cm提取RNA,采用RT—PCR和RealtimePCR法检测Gli2、BMP4基因在直肠肛门发育不同时期的表达情况。结果采用RT-PCR法检测Gli2、BMP4基冈在直肠肛门发育不同时期的表达情况．发现在胎鼠第13～17天,实验组直肠末端Gli2、BMP4mRNA的表达水平均明显低于正常胎鼠直肠末端（P〈0．05）。而Realtime PCR检测Gli2、BMP4mRNA表达时,发现实验组Gli2的表达在胚胎第13天、第14天、第15天分别为（0．73＋0．07、0．60＋0．09、0．81＋0．06）,勺对照组相比显著降低（P〈0．05）,而在孕第16天、第17天实验组Gli2表达比对照组虽有下降,但无统计学意义;实验组BMP4的表达在孕第3～17天均较对照组下降,差异有统计学意义。结论直肠肛门的正常发育需要Shh信号通路的正常表达,Shh信号通路中转录因子Gli2和靶基囚BMP4的异常表达在肛门直肠畸形发生过程中起重要作用,ETU可能影响Shh信号转导通路和肛门直肠畸形发生。     

EphB2在肛门直肠畸形大鼠胚胎发育中的表达

目的 观察EphB2在大鼠正常和畸形肛门直肠发育过程中的表达,探讨EphB2在正常和肛门直肠畸形的胚胎发牛机制中的作用.方法 ①用乙烯硫脲(ethylenethiourea,ETU)致畸wistar孕鼠24只,制成肛门直肠畸形动物模型,根据切片观察后分为给药无畸形组(n=90)和畸形组(n=108),胎龄13～20 d的正常胎鼠(n=111)作为正常对照组;②正中矢状面、水平面连续切片,EphB2免疫组化染色.连续动态对比观察EphB2在正常和畸形大鼠胚胎泄殖腔及肛门直肠发育过程中的表达;③常规制备胎鼠冰冻切片,解剖显微镜下手丁显微切割方法 准确切取泄殖腔标本,从中提取总RNA,通过RT-PCR方法 研究EphB2 mRNA在正常和畸形大鼠胚胎泄殖腔及肛门直肠的表达.结果 免疫组化结果 :①EphB2在大鼠发育过程中正常及给药无畸形绢胚胎泄殖腔中表达,在13d和14d主要表达于尿直肠隔和泄殖腔膜.胚胎15d时在尿牛殖膈与泄殖腔膜融合处EphB2表达较强,16 d时肛膜破裂,肛门直肠形成,EphB2在直肠黏膜层表达;②EphB2在肛门直肠畸形胎鼠泄殖腔和直肠黏膜层亦有表达,测量单位面积内累积光密度值,胎龄13～16 d时与正常对照组和给药无畸形组比较,光密度值明显减小,有统(P0.05).RT-PCR半定量检测结果 :①在正常和畸形组大鼠胚胎中均能检测出EphB2表达,在胎龄13～16 d为表达高峰期,胎龄16d后逐渐降低;②畸形组与正常对照组和给药无畸形组相比较,EphB2 mRNA的表达在13～16d明显降低,有统计学意义(P<0.05).结论 EphB2可能在正常大鼠胚胎期泄殖腔和直肠发育过程中起重要作用.泄殖腔EphB2的表达减弱可能与肛门直肠畸形的发生有关.     

肛门直肠畸形大鼠泄殖腔胚胎发育过程中细胞凋亡的研究(英文)

目的肛门直肠正常胚胎发育过程中,细胞凋亡发挥重要作用。该研究调查了肛门直肠畸形(anorectal malformation,ARM)胎鼠泄殖腔胚胎发育过程中细胞凋亡情况,以了解ARM胚胎发育过程中细胞凋亡的作用。方法在胚胎发育的第10天,通过胃管注入乙烯硫脲(125 mg/kg)致畸孕鼠,诱导ARM胚胎。在胚胎发育的第13,13.5,14,15和16天,利用苏木素-伊红和TUNEL染色技术检测正常对照胚胎(n=102)和ARM胚胎(n=147)泄殖腔凋亡细胞的分布。结果对照组胚胎第13天尿直肠隔可见凋亡细胞,随着胚胎发育,尿直肠隔间质内的凋亡细胞逐渐增多;直肠背侧间质可见大量凋亡细胞。胚胎第14天,直肠末端和未来肛门开口处的泄殖腔膜开始出现凋亡细胞。胚胎第15天,尿直肠隔与泄殖腔膜融合,尿直肠隔间质内的凋亡细胞一直向下延伸到融合部位。ARM胎鼠与对照组胎鼠相比,在胚胎发育过程中尿直肠隔间质、直肠背侧间质和泄殖腔膜的凋亡细胞均明显减少。ARM胎鼠尿直肠隔的发育明显延迟,未与泄殖腔膜融合。结论在泄殖腔的胚胎发育过程中,尿直肠隔间质、直肠背侧间质和泄殖腔膜细胞凋亡的异常是导致ARM的原因之一。细胞凋亡的正常调控是保证肛门直肠胚胎期正常发育的关键机制之一。     

大鼠肛门直肠畸形的胚胎发育研究

目的：观察大鼠正常的和畸形的肛门直肠发育过程，探讨肛门直肠畸形的胚胎发生机制。方法：用乙烯硫脲（ethylenethiourea,ETU）致畸21只孕鼠共生产泄殖腔畸形和无肛畸形胎鼠（204只）。胎龄12．5－20d的正常（n=223)及泄殖腔发育畸形的胎鼠正中矢状连续切片HE染色。连续动态对比观察泄殖腔及肛门直肠的发育过程。结果：泄殖腔发育过程中，胎龄15d前的正常鼠胚，尿直肠隔将泄殖分为腹侧的尿生殖窦和背侧的直肠两部分，二者共同相通于泄殖腔管，尿直肠隔下降与泄殖腔膜的距离逐渐减小，直至胚胎15d时与泄殖腔膜融合，直肠与膀胱分离。16d时肛膜破裂，直肠与尾沟相通。ETU致畸的胎鼠泄殖腔发育中有以下下特点；（1）尿直肠隔始终未与泄殖腔膜融合；（2）泄殖腔构型异常；（3）泄殖腔膜过短；（4）没有尾沟形成。ETU致畸胎鼠中所有的无肛畸形均为泄殖腔畸形和直肠尿道瘘。结论：鼠胚胎15d时尿直肠隔与泄殖腔膜融合。胚胎16d肛膜完全破裂，直肠与外界相通。泄殖腔构型的变化以及尿直肠隔下降并与泄殖腔隔合使直肠与膀胱分离。尿直肠隔与泄殖腔膜融合是直肠和膀胱分离的决定因素。肛门直肠畸形发生与泄殖腔构型异常以及尿直肠隔未与泄殖腔膜融合等因素有关。尿直肠隔未与泄殖腔融合是ETU诱导的大鼠肛门直肠畸形发生的直接原因。     

胰岛素样生长因子结合蛋白6在维甲酸诱导的大鼠马蹄内翻足畸形中的表达研究

目的 探讨大鼠先天性马蹄内翻足(CCF)软骨组织内胰岛素样生长因子结合蛋白6(IGFBP-6)的表达规律.方法 应用生物学活性物质全反式维甲酸(ATRA)构建大鼠CCF动物模型;光镜和透射电镜观测大鼠的足部软骨组织病理学改变;RT-PCR及Western印迹杂交检测胎鼠足部软骨组织中IGFBP-6 mRNA及蛋白质的表达水平.结果 120 mg/kg的ATRA诱导实验组35%的胎鼠出现CCF畸形,其他畸形包括:内翻足、小脑畸形、腭裂、无尾畸形等;在骨骼畸形胎鼠的足部距骨内软骨发生中心带缩小,软骨细胞数量减少,软骨细胞核内粗面内质网扩张,线粒体嵴紊乱;正常胎鼠软骨组织内IGFBP-6基因呈低水平表达状态,而骨骼畸形胎鼠IGFBP-6的mRNA和蛋白质表达则明显升高300%和197%(P＜0.05).结论 正常大鼠软骨组织内IGFBP-6基因有低表达.CCF大鼠软骨组织内IGFBP-6的高表达可能与骨骼发育畸形的发生密切相关.     

维甲酸对先天性马蹄内翻足相关致病基因表达影响的研究

目的 研究维甲酸对于先天性马蹄内翻足相关基因表达的影响.方法 选取的SD大鼠交配后,分为对照组和实验组.对照组随机选取孕SD大鼠2只,于怀孕10 d时以橄榄油灌胃一次.实验组选取孕SD大鼠6只,于怀孕10 d时以140 mg/kg的维甲酸剂量(40 mg/ml溶于橄榄油中)灌胃一次.于孕16～18 d待孕鼠分娩.对照组孕鼠所产幼鼠为对照组,实验组孕鼠所产幼鼠根据是否出现后肢畸形分为畸形组及非畸形组.取两组新生幼鼠后肢软骨及肌肉组织,应用RT-PCR方法测定组织中HoxA9、TBX-3、CASP10基因表达情况,并与对照组正常新生幼鼠比较.结果 2只对照组SD孕大鼠共产仔22只,未发现畸形或死胎.6只实验组SD孕大鼠中有一只在灌胃后2 d死亡,余下可利用5只孕鼠共产仔49只,其中死胎6只,无肛无尾畸形1只,后肢出现类马蹄内翻足畸形的共30只,未出现下肢畸形共19只.畸形出现率为61.2%(30/49),并以此将实验组分为畸形组与非畸形组.荧光RT-PCR结果:实验组中畸形组在HoxA9及TBX-3基因的平均拷贝数分别为(7.00±0.52、4.55±0.52)明显低于对照组(7.92±0.47、4.99±1.02)和非畸形组(8.07±0.28、4.94±0.24),P<0.001,P<0.05;而在CASP10基因的平均拷贝数4.34±0.35则明显大于对照组3.51±0.42和非畸形组3.29±0.50(P<0.001).而对照组与非畸形组在各个基因的拷贝数比较上则无明显差异(P>0.05).结论 维甲酸能成功诱导出SD大鼠新生幼鼠类马蹄内翻足畸形的模型;维甲酸对于SD大鼠的TBX-3、HoxA9、CASP10基因的表达均有影响;维甲酸可能与通过影响TBX-3、HoxA9、CASP10基因的表达导致SD新生大鼠产生类马蹄内翻足样畸形.     

肛门直肠畸形大鼠胚胎后期肠管Cajal间质细胞的研究

目的 研究肛门直肠畸形(ARM)胎鼠胚胎后期16 d(E16)、21d(E21)小肠、结肠和直肠Cajal间质细胞(ICC)的发育情况.方法 体重250～300 g的wistar大鼠,雌雄鼠夜间合笼交配.早晨雌鼠阴道涂片,发现精子被认为是E0.孕鼠随机分成4组,E16对照组孕鼠2只、实验组孕鼠8只,E21对照组孕鼠2只、实验组孕鼠6只.胚胎第10天实验组孕鼠经胃管注入125 mg/kg的ETU,对照组孕鼠经胃管注入等量生理盐水.E16、E21孕鼠腹腔注射10%水合氯醛6 ml/kg,剖宫取出所有胎鼠,辨认胎鼠是否存在畸形及畸形类型.选取对照组胎鼠、实验组无畸形胎鼠和ARM胎鼠,在大体显微镜下解剖整个肠管.选取距盲肠8cm处小肠,距盲肠2咖处结肠,距肛门0.5 cm处直肠各一段.使用c-kit抗体通过SABC免疫组织化学方法研究E16和E2t对照组、实验组乙烯硫脲(ETU)诱导无畸形胎鼠、实验组ETU诱导ARM胎鼠小肠、结肠和直肠c-kit抗体表达情况.结果 E16对照组小肠、结肠、直肠肌间神经从周围可见中等量c-kit抗体染色阳性细胞,肌层部分细胞c-kit抗体染色阳性.E21对照组肌间神经丛周围c-kit抗体染色阳性细胞增多,可见阳性细胞网络形成.E16、E21实验组无畸形胎鼠小肠、结肠、直肠和实验组ARM胎鼠小肠与对照组相比,阳性细胞面积百分比、平均光密度值、积分光密度值和对照组相比,P>0.05,差异无统计学意义.而实验组ARM胎鼠结肠,直肠阳性细胞面积百分比、平均光密度值和积分光密度值明显减小P<0.05,差异有统计学意义.结论 ARM胎鼠胚胎后期小肠ICC发育正常而结肠、直肠ICC发育异常,这可能影响生后肠管ICC网络的形成和功能的发挥,可能是ARM术后便秘的病因之一.     

改良后矢状入路骶会阴肛门成形术Ⅰ期根治新生儿中位肛门直肠畸形

目的 总结我院2004年1月至2006年12月改良后矢状入路骶会阴肛门成形术Ⅰ期根治新生儿中位肛门直肠畸形的临床疗效.方法 38例新生儿先天性中、高位肛门直肠畸形,中位28例,高位10例;女5例,男33例.分为Ⅰ期组(中位畸形不伴严重畸形)和分期组(高位畸形和不符合Ⅰ期根治条件的中位畸形).Ⅰ期根治手术采用改良后矢状人路肛门成形术;分期手术采用造瘘-根治(Pena术)-关瘘.观察伴发畸形、胎龄和出生体重、根治手术时年龄和根治手术时间,比较总住院时间、总费用.统计并发症,随访术后肛门功能临床评分.结果 Ⅰ期组22例;分期组16例,10例高位畸形,6例中位畸形(2例早产儿,2例伴脊柱畸形,2例严重心脏畸形),两组平均胎龄、出生体重、第一次手术年龄和根治手术时间均无统计学差异(P＞0.05).近期并发症Ⅰ期组1例发生肠梗阻、肠穿孔,骶部伤口皮肤愈合情况与分期组相同;远期并发症分期手术较多,包括直肠黏膜脱垂和污粪.Ⅰ期组随访16例,术后肛门功能临床评分优为12例,良4例.Ⅰ期组住院时间(12.06±0.85)d,住院费用(10681.1±1759.5)元,显著低于分期组(P＜0.0001).结论 改良后矢状入路肛门成形术保留提肛肌与耻骨直肠肌环联合体,对新生儿中位肛门直肠畸形Ⅰ期根治手术临床近期疗效等同于以往的分期手术.     

先天性肛门直肠畸形大鼠胚胎盆底肌发育的形态学研究

目的 观察乙烯硫脲致畸的肛门直肠畸形大鼠模型横纹肌复合体(SMC)胚胎发育规律及演变过程,为探讨肛门直肠畸形患儿术后排便功能障碍的发病机制提供理论基础.方法 以乙烯硫脲制作肛门直肠畸形大鼠模型,取不同胎龄(16、18、20、21 d)的畸形组和对照组胚胎,行矢状面、冠状面及横断面连续切片,HE染色和Myogenin免疫组化染色,观察正常及肛门直肠畸形(ARMs)大鼠胚胎SMC的发生及演变过程.结果 16d时SMC较为松散地环绕直肠末端,畸形组的SMC的位置、形态及走行与正常组非常相似.从18d开始正常组肌结构明显增粗,与直肠关系渐紧密,畸形组SMC明显向头侧、腹侧及中线移位,形成一聚集于尿道后方,向头侧、腹侧和中线移位的紧缩环结构,SMC肌束间充填大量的脂肪组织,结构紊乱.这一形态改变在此后的胚胎发育过程中(18～21 d)持续存在.结论 在正常及ARMs的大鼠胚胎中,SMC最初于16 d可以观察到.ARMs大鼠胚胎的SMC在16 d时位置、形态及走行与正常组无明显差异,从18d起开始出现异常,表现为向腹侧、头侧及中线移位,以后延续上述改变,最终表现为SMC位置、形态异常,肌束间脂肪组织增多.SMC的形态改变晚于肛门直肠畸形的发生.     

肛门直肠畸形合并先天性巨结肠的诊治

目的 总结儿童先天性肛门直肠畸形(ARM)合并先天性巨结肠(HD)的临床特点,探讨其病因和适宜的诊治方法.方法 回顾性分析2004年1月至2008年4月6例ARM合并HD患儿的临床资料、诊治过程及预后情况.年龄1岁8个月～1I岁,平均4.1岁;男女比例1:5.所有病例于ARM矫正手术后有不同程度便秘、腹胀等症状,钡灌肠显示结直肠均有显著的扩张,仅有2例可见明确痉挛段和移行段.6例患儿直肠肛管测压直肠肛门抑制反射不能引出.2例采用经肛门Soave术式,4例采用经腹肛门Soave巨结肠根治术.结果 术后病理检查6例标本远端肠壁内均未见神经节细胞.免疫组化组织蛋白酶D:近段阳性,远端阴性.结论 对于ARM患儿,特别是对于ARM畸形矫正术后仍有便秘的患儿要警惕合并HD的可能.此外,ARM合并HD患儿往往同时存在有多种畸形,在胚胎发育过程中这些畸形的发生可能存在着一定的关联.     

Gluteus maximus flap transplantation for anrectal dysfunction after anorectal malformation operation

目的 评价臀大肌瓣转移肛提肌加强术治疗肛门直肠畸形术后排便功能障碍的恢复情况.方法 选择28例先天性肛门闭锁术后排便功能障碍的患儿,年龄4～14岁,男19例,女9例,单纯肛提肌功能不良的18例,肛提肌和肛门外括约肌功能均不良的10例,全部行臀大肌瓣转移肛提肌加强术,术前均行盆底肌MRI、钡灌肠及臀大肌肌电图检查,手术前后均行结肠传输试验、肛门直肠测压和排便功能评分.术后对患儿进行6～48个月的随访,平均24个月.结果 28例手术患儿中26例获得随访,术前臀大肌肌电图均显示臀大肌功能良好,钡灌肠显示直肠无扩张,结肠传输试验表现为出口梗阻,盆底肌MRI见28例患儿肛提肌发育薄弱或不对称,排便功能评分结果示28例患儿均差.肛管静息压手术前后分别为(16.77±4.25) mmHg和(18.67±4.48)mmHg、肛管最大收缩压在手术前后分别为(61.05±14.37) mmHg和(72.12±16.76)mmHg,差异均无统计学意义(P＞0.05),术后单纯肛提肌功能不良的排便功能评分达优6例,良10例,肛提肌和肛门外括约肌功能均不良的排便功能评分优0例,良2例,差8例.优良率占69.23％.结论 对于肛提肌功能不全所导致的排便功能障碍,行臀大肌瓣转移肛提肌加强术可改善排便功能,部分括约肌功能不良的患儿术后可能失禁不能改善或者加重,需要进一步的手术或训练治疗.     

Population-based case-control study of oxoline acid use during pregnancy for birth outcomes

The objective of the study was to check the effect of oxoline acid, a bactericidal drug for the treatment of urinary tract infection during pregnancy, on congenital abnormalities of informative offspring and fetal development. Human data of oxoline acid use during pregnancy have not been reported, but the use of this quinolone derivative is not recommended during pregnancy by the US Food and Drug Administration. The teratogenic and fetotoxic potential of oxoline acid was evaluated in the population-based large data set of the Hungarian Case-Control Surveillance of Congenital Abnormalities between 1980 and 1996. Observed and expected numbers of congenital abnormalities were compared in the newborn infants and fetus of case mothers with oxoline acid treatment. In addition, gestational age and birthweight were evaluated in control newborn infants born to mothers with or without oxoline acid treatment. Of 38,151 newborn infants without any congenital abnormalities (control group), 13 (0.03%) had mothers who were treated with oxoline acid, while of 22,843 cases with congenital abnormalities, five (0.02%) had mothers who were treated with oxoline acid during pregnancy (POR with 95% CI: 0.6, 0.2-1.8). The comparison of observed and expected number of different congenital abnormalities did not show the teratogenic potential of oxoline acid. There was a 0.9 weak shorter gestational age without a smaller birthweight in the newborn infants born to mothers with oxoline acid treatment. Our data did not indicate teratogenic and fetotoxic effect of oxoline acid, however, the number of cases and controls was limited.     

先天性肛门直肠畸形胎鼠腰骶髓副交感神经元发育异常的研究

目的　探讨先天性肛门直肠畸形是否同时存在副交感神经支配异常以及对术后排便功能的影响。方法　 2 0只Wistar孕鼠 ,分为ETU致畸组 (15只 )和对照组 (5只 )。孕 2 0d时 ,将荧光金注射入正常胎鼠直肠壁及畸形胎鼠的直肠盲端肌层内。荧光显微镜下观察副交感神经元的数量 ,形态和分布。结果　①致畸组胎鼠手术存活率为 6 0 .0 % ,而对照组存活率为 71.4 % ;②对照组 :荧光金标记的副交感神经元位于脊髓侧角 ,分布在L6到S1脊髓节段 ,标记神经元数量为 (90 1± 4 6 )个。神经元体积较大。ETU致畸组中外观正常组、低位畸形组、高位畸形组标记神经元数量分别为 (899± 36个 )、(5 88± 10 2 )个和 (2 4 2± 92 )个 ,畸形组与正常组、外观正常组相比 ,统计学差异显著 ,而且神经元细胞体积明显减小。结论　①先天性肛门直肠畸形胎鼠骶髓副交感神经元数目减少 ,体积减小 ,呈发育不良改变。畸形位置愈高 ,神经元数量减少愈明显 ;②本研究结果提示人类先天性肛门直肠畸形术后便秘的发生可能与副交感神经元数量减少有关。     

先天性肛门直肠畸形术后便秘合并巨结肠的临床特点及处理

目的 总结先天性肛门直肠畸形术后顽固性便秘合并巨结肠的临床特点和治疗效果.方法 回顾性分析2005年8月至2010年7月收治的顽固性便秘合并巨结肠23例临床资料,男10例,女13例.首次手术年龄3 d至6岁,术前诊断均为中低位肛门直肠畸形.23例患儿均以肛门成形术后便秘就诊.下消化道气钡造影显示下端结肠及直肠扩张,无移行段,排钡延迟.本次手术年龄1岁2个月至15岁8个月.均采用Soave巨结肠根治术.结果 术前见肛门外观大致正常13例,外观正常合并直肠尿道瘘1例,肛门开口位置前移6例,瘢痕回缩2例,肛门外口狭窄1例.术中进入盆腔后即为扩张肠管,系膜增生增厚,肠壁血管增生粗大.13例单纯经会阴手术,10例经腹会阴手术,其中1例同时回肠末端造瘘.9例巨结肠切除同时,再次行肛门成形术,1例巨结肠切除同时行前矢状入路直肠尿道瘘修补术.病理检查15例切除肠管远近段,可见神经节细胞者,8例肠管远端无神经节细胞者,23例均见肌层增生肥厚,肌纤维变性,肌层排列紊乱.二次术后随诊肛门功能李氏评分5～6分.结论 先天性肛门直肠畸形术后顽固性便秘往往并发巨结肠改变,影像显示为肠管局限性扩张、僵硬和动力紊乱.采取手术治疗,切除病变肠管,做必要的肛门解剖缺陷修复,术后效果良好.

Abstract：

Objective To summarize the experience of diagnosis and treatment of intractable constipation in children with repaired anorectal malformation.Methods Between August 2005 and July 2010,23 children with a history of anorectal malformation (ARM) repair were diagnosed with intractable constipation,and underwent surgical treatment at this center.The patients,including 10 boys and 13 girls,underwent primary surgeries to repair low or intermediate type of ARMs.Their ages at the primary surgery ranged from 3 days to 6 years old.Physical examinations found normal appearance of anus on 14 children including 1 with rectourethral fistula,anus antelocation on 6,cicatricial retraction of anus on 2,and anal stricture on 1.The positive barium enema revealed the dilated distal colon and rectum without transition zones,and delayed barium transit time.The patients' age at the second surgery ranged from 1 year and 2 months to 15 years and 8 months old.Results Dilated distal colon and rectum,with increased intestinal wall and mesentery thickness as well as proliferated blood vessels,was found during surgery on all patients.However,no transition zone was observed.To remove the dilated intestine,transanal Soave procedure was performed on 13 children,and the other 10 underwent abdomino-perineal Soave procedure including 1 had additional ileostomy.Besides the megacolon resection,9 patients also underwent anoplasty,and rectourethral fistula was also repaired on 1 patient.At the distal end of the removed intestine,pathological examination revealed ganglion cells in 15 patients,and no ganglion cells in 8 patients.Hypertrophy,degeneration and derangement of the intestinal smooth muscle cells were also observed.After reoperation,patients' anal function was graded as 5 or 6 according to Lizheng's anal function scoring criteria.Conclusions Intractable constipation after ARM repair is usually caused by acquired megacolon.It can be cured by megacolon resection.     

腹腔镜辅助治疗中高位肛门直肠畸形疗效评价

目的 探讨腹腔镜辅助治疗中高位肛门直肠畸形的疗效.方法 回顾分析了2002年9月至2009年9月我科采用腹腔镜辅助肛门直肠成形术(LAARP)治疗的中高位肛门直肠畸形患儿34例,其中男27例、女7例.除1例一穴肛息儿和1例直肠尿道球部瘘患儿Ⅰ期行肛门成形术以外,其余患儿均在出生后行结肠造瘘术,腹腔镜主要用于腹部直肠末端的分离、瘘管的处理以及盆底隧道的形成,手术平均年龄为6.3个月.30例患儿术后获得随访,术后随访时间1～7年,平均3.5年,随访1～2年者11例,2～7年的病例19例,对30例患儿手术后并发症以及排便次数、大便控制能力、污便以及便秘的情况进行调查,并应用Kelly评分进行评价.结果 随访时间大于2年的病例中17例患儿获得较为满意的排便功能,其中5例患儿经过排便功能训练已达到完全正常;10例患儿可实现较为满意的排便控制,偶有污便(每1～2周一次),其中2例患儿出现轻度便秘;排便控制较差,经常有污便或失禁者2例.该组患儿经过有效的肠道管理均可以实现满意的社会生活,该组Kelly评分平均为4.32±1.45.随访时间1～2年的病例均有不同程度的污便,8例患儿排便控制能力较差,经常有污便.排便次数增多(大于3～4次);3例患儿排便控制功能较好,偶有污便,排便次数维持在每天I～2次.该组Kelly评分1.91±1.37.结论 腹腔镜治疗肛门直肠畸形疗效满意,并随着术后年龄的增长,排便控制功能显著提高.

Abstract：

Objective To evaluate postoperative anal functions of patients with intermediate or high anorectal malformations who underwent laparoscopic-assisted anorectal pull-through (LAARP).Methods Thirty four patients (27males、7 females) who underwent LAARP in our department between September 2002 and September 2009 were analyzed Initial colostomy in the newborn period was performed in all patients except 1 cloaca and 1 male patient with rectobular fistula. Laparoscope was used for mobilizing the rectum and repairing the fistula. The average age of operation was 6. 3 months (range from 2 to 24 months). Thirty patients were followed up successfully for 1 to 7 years (average 3. 5 years). Nineteen patients were followed up for more than 2 years while the other 11 patients less than 2 years. Complications and anorectal functions are assesed by questionnaires, including the fecal continence, the degree of soiling and the frequency of bowel openings. All patients were evaluated with Kelly score. Results Most of the patients who were followed up for more than 2 years have satisfactory fecal continence except for two cases. The average Kelly score was 4. 32 ± 1. 45. Patients who were followed up for less than 2 years had various degree of soiling. Eight patients had severe fecal incontinence and regular soiling, with bowel movements are more than 5 times per day. Only 3 patients had acceptable fecal continence, with occasional staining. The bowel movement was 1-2 times per day. The average Kelly score was 1. 91 ± 1. 37. Conclusions The procedure of LAARP can produce satisfactory fecal continence. The continence improves with age.