加强基础与临床研究 进一步提高创伤骨科治疗水平

加强基础与临床研究进一步提高创伤骨科治疗水平徐莘香近年来国内外有关骨愈合方面的研究主要集中在激素调节钙－磷代谢的系统作用和骨生长因子的局部调节作用，ＢＭＰ的研究尤为活跃。随着分子生物学和基因工程学的发展，应用重组ＤＮＡ技术首先克隆得到ｈＢＭＰ－１、ｈ...     

BMP及其诱导成骨的分子生物学基础

ＢＭＰ及其诱导成骨的分子生物学基础谭祖键李起鸿自１９６５年Ｕｒｉｓｔ报道了用脱钙骨基质（ＤＢＭ）植入肌肉诱导间充质细胞分化形成新骨以来，这一研究得到迅速发展。ＤＢＭ经进一步分离提纯得到一种蛋白质物质，被命名为骨形态发生蛋白（ＢＭＰ）。目前对ＢＭＰ的生...     

β转化生长因子增强人重组骨形态发生蛋白—2诱导成骨的调节机理

随着分子生物学的发展，多种生长因子参与骨和软骨的生成过程逐渐为人们所认识。骨形态发生蛋白（ＢＭＰ）为一种诱导成骨因子，目前已能利用基因工程获得具有生物活性的ｒｈＢＭＰ２〔１〕，体外和体内实验均证明ｒｈＢＭＰ２〔１〕有明显骨诱导活性〔２〕。它能诱导...     

骨诱导及BMP的研究现状与展望

骨诱导及ＢＭＰ的研究现状与展望胡蕴玉骨诱导的概念是在本世纪６０年代，继Ｕｒｉｓｔ对脱钙骨基质（ＤＢＭ）和骨形态发生蛋白（ＢＭＰ）的开创性工作之后确立的。实际上早在１９３４年和１９３８年，Ｌｅｖａｎｄｅｒ就依据Ｓｐｅｍａｎ胚胎诱导细胞转化机理，首次提出...     

多孔β—磷酸三钙和骨形态发生蛋白复合物异位诱导骨的实？…

目的 研究β－磷酸三钙（β－ＴＣＰ）和骨形态发生蛋白（ＭＢＰ）的复合物（β－ＴＣＰ／ＢＭＰ）诱导成骨的作用。方法 在理化性质检测和生物安全性评价的基础上进行小鼠体内诱导成骨的实验，评价该材料的骨诱导能力。结果 多孔β－ＴＣＰ钙磷比为１．５，平均孔径为４００μｍ，平均气孔率为４２．３％，抗压强度为０．８２６ＭＰａ（１ＭＰａ＝７７７７．８ｍｍＨｇ），在生理盐水中有一定的溶解度。溶血、急性毒性和致热检测     

骨形态发生蛋白4（BMP4）基因表达在骨折愈合过程中的定位研究

创伤后，骨组织的再生修复十分完全，其修复常无瘢痕残留。骨组织之所以有如此完美的愈合能力，是因为骨骼组织内存在有成骨因子，即骨生长因子。骨形态发生蛋白（ｂｏｎｅｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃｐｒｏｔｅｉｎ，ＢＭＰ）因其直接诱导软组织成骨而受重视。本文应用ＢＭＰ４ｃＤＮＡ探针检测骨折愈合过程中外骨痂内ＢＭＰ４基因表达的定位与分布，探讨ＢＭＰ４基因表达在闭合性骨折愈合外骨痂形成中的作用。用６４只健康ＳＤ大鼠制备闭合性胫骨骨折动物模型。分别于骨折后１２小时、１、３、５、７、９、１４及２８天取材。取材后行恒冷切片，用地高辛素标记的ＢＭＰ４ｃＤＮＡ探针进行原位核酸分子杂交。大鼠骨折后１２小时～３天，骨折周围血肿内细胞及肌肉中新出现的间充质细胞内ＢＭＰ４ｍＲＮＡ表达检测为阳性信号。表明创伤激活ＢＭＰ４ｍＲＮＡ的表达，并呈区域性参与骨折的修复，也说明骨折血肿及周围软组织在骨折愈合过程中具有非常重要的地位。     

活性锻烧骨的临床应用

把骨形态发生蛋白（ＢｏｎｅＭｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃＰｒｏｔｅｉｎ，ＢＭＰ按１：２０的重量比例，与煅烧异种松质骨（ＴｒｕｅＢｏｎｅＣｅｒａｍｉｃ，ＴＢＣ）组成活性煅烧骨（ＢＭＰ／ＴＢＣ复合物）经动物实验揭示该复合体具有良好的填充修复骨缺损的能力，临床应用５３例病人，４８例随访８个月～３．５年，平均１８．６月，均取得满意疗效，作者认为自制煅烧骨是理想的载体。活性煅烧骨（ＢＭＰ／ＴＢＣ复合物）具有高效     

异种脱蛋白BMP复合骨修复骨缺损实验研究

异种骨移植常由于强烈的免疫排斥反应失败。本文报告将小牛骨经脱蛋白处理（即脱去主要的抗原物质），后再复合进去骨形成蛋白（ｂｏｖｉｎｅＢｏｎｅＭｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃｐｒｏｔｅｉｎ，简称ｂ－ＢＭＰ）使其成为既无抗原性，又利于骨形成的异种脱蛋白ＢＭＰ复合骨。将其植入新西兰白兔尺骨缺损（２ｃｍ），观察愈合结果。免疫学、放射学和组织学检查表明，植入异种脱蛋白ＢＭＰ复合骨，各组实验动物术后无任何免疫反应。４周均显示植入骨与骨床界线模糊，８周植入骨内可见大量成片新生骨细胞及新生血管长入。实验结果表明经处理后的大块异种骨移植，不但无任何免疫排斥反应，且可达到预期修复骨缺损的目的。     

无名异冲剂在骨折愈合中对DNA和BMP含量影响的实验研究

目的探讨无名异冲剂治疗骨折的作用机理。方法新西兰家兔５５只造成双侧桡骨３ｍｍ缺损的骨折后随机分为用药组和对照组,于术后１、２、３、４、５周取骨痂制成石蜡切片,以Ｆｅｕｌｇｅｎ反应和免疫组化技术分别显示ＤＮＡ和ＢＭＰ,进行图像定量分析。结果在骨折愈合过程中,骨痂中骨折修复细胞ＤＮＡ指数和骨痂局部ＢＭＰ含量的总体变化趋势两组相同;用药组第１、２周骨痂ＤＮＡ指数和ＢＭＰ含量明显高于同期的对照组（Ｐ＜００１）;用药组ＢＭＰ高峰出现在第２周,对照组出现在第３周。结论无名剂冲剂能促进骨折修复细胞的增殖,增加成骨细胞的活性,诱导ＢＭＰ合成,加速骨折愈合。     

绝经后骨质疏松与胰岛素样生长因子

目的骨质疏松是老年妇女常见病。绝经后骨丢失主要原因是骨重建单位的骨吸收与骨形成之间平衡失调。胰岛素样生长因子－１（ＩＧＦ－１）是由肝和骨骼合成的生长因子,它参与骨重建,增强成骨细胞活性。方法应用单光子骨密度仪测量非优势前臂桡尺骨中远端１／３交界处桡骨骨密度（ＢＭＤ）,ＢＭＤ低于０．６０１ｇ／ｃｍ２（ｘ－２ｓ）则诊断为骨质疏松。据此将７６名妇女分为绝经前正常妇女（ＮＯＰ１）、绝经后非骨质疏松妇女（ＮＯＰ２）和绝经后骨质疏松妇女（ＯＰ）三组,测定受试者ＩＧＦ－１水平及其他骨代谢指标。结果随着增龄和绝经年限延长,ＩＧＦ－１是维持骨质的重要因子,绝经后妇女增龄,雌激素缺乏,Ｅ２、ＰＴＨ升高可引起血清ＩＧＦ－１水平下降,ＯＰ组低于ＮＯＰ１、ＮＯＰ２组（Ｐ＜０．０５）。所有受试者的ＩＧＦ－１与ＢＭＤ、Ｅ２呈显著正相关（Ｐ＜０．００１）、与年龄（Ａｇｅ）、甲状旁腺激素（ＰＴＨ）呈显著负相关。结论绝经后骨质疏松为高转换率骨质疏松,ＩＧＦ－１水平下降,导致骨吸收超过骨形成,引起骨丢失和骨质疏松。表明ＩＧＦ－１合理用药可以预防骨质疏松     

多孔β—TCP／BMP复合人工骨的研制和动物体内的相关研究

多数人工骨缺损修复材料无骨诱导活性，为使人工植骨材料具有骨诱导活性并可在体内降解，本研究采用可降解陶瓷β－磷酸三钙（β－ＴＣＰ）与骨形成蛋白（ＢＭＰ）复合形成具有骨诱导能力的人工骨。将β－ＴＣＰ／ＢＭＰ、单纯ＴＣＰ、羟基磷灰石（ＨＡ）和ＴＣＰ／ＨＡ分别植入１６８只小鼠股部肌肉内，在２４、７２小时，１、２、４、８周取材，作大体观察、组织形态学观察、扫描电镜观察及碱性磷酸酶（ＡＬＰ）检测。另将上述材料植入５５只兔桡骨１．５ｃｍ缺损中，分别在２、４、８、１２、１６周取材，作大体、Ｘ线、组织形态学观察及计算机图像分析。研究结果显示：将β－ＴＣＰ／ＢＭＰ植入小鼠肌袋后１周软骨生成，４周有造血骨髓的板层骨生成。ＡＬＰ检测１、２周水平最高。植入材料与骨组织之间无纤维组织间隔。在兔桡骨缺损修复的研究中发现，β－ＴＣＰ／ＢＭＰ的骨缺损修复作用最强，１６周植入材料的降解达５３％，成骨量亦最多。研究结果表明：β－ＴＣＰ／ＢＭＰ是一种可降解、具有较强骨诱导能力、生物相容性较好的人工骨。     

内源性骨形态发生蛋白研究进展

内源性骨形态发生蛋白研究进展张子军，卢世壁从脱钙骨基质的诱导成骨作用，到骨形态发生蛋白（ＢＭＰ）的提纯和命名，Ｕｒｉｓｔ的杰出贡献奠定了今天诱导成骨研究的基础。多学科研究的介入大大加快、深化了ＢＭＰ的认识。许多临床、实验研究显示了生物合成或提取ＢＭＰ...     

骨诱导性载体复合骨形态发生蛋白的双重成骨作用

本文用猪骨基质明胶（ｐＢＭＧ）复合猪骨形态发生蛋白（ｐＢＭＰ）植入小鼠肌肉内，以期达到ｐＢＭＧ和ｐＢＭＰ双重诱导成骨的叠加作用，并与单独植入的明胶海绵、ｐＢＭＧ、ｐＢＭＰ和无机骨－ｐＢＭＰ（ＡＯＢ－ｐＢＭＰ）的成骨效应相比较。结果显示，含有ｐＢＭＰ的各组术后４天有明显的间充质细胞化，新骨在１０天左右开始形成。ＡＬＰ的活性高峰出现在术后２１～２８天，组间钙、磷含量差异具有高度显著性（Ｐ＜０．０１），明胶海绵组最低，而ｐＢＭＧ－ｐＢＭＰ组含量最高。各组的钙、磷相关系数为高度正相关。作者讨论了ｐＢＭＧ复合ｐＢＭＰ后的双重成骨作用及其优越性，认为ＡＬＰ主要由诱导性新骨成熟期的成骨细胞和骨细胞所产生，新骨中的钙、磷含量因呈高度正相关，两者均可作为新骨定量的指标，但以钙含量为主。     

活性煅烧骨的临床应用

把骨形态发生蛋白（ＢｏｎｅＭｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃＰｒｏｔｅｉｎ，ＢＭＰ）按１∶２０的重量比例，与煅烧异种松质骨（ＴｒｕｅＢｏｎｅＣｅｒａｍｉｃ，ＴＢＣ）组成活性煅烧骨（ＢＭＰ／ＴＢＣ复合物），经动物实验揭示该复合体具有良好的填充修复骨缺损的能力，临床应用５３例病人，４８例随访８个月～３．５年，平均１８．６月，均取得满意疗效。作者认为自制煅烧骨是理想的载体。活性煅烧骨（ＢＭＰ／ＴＢＣ复合物）具有高效的诱导成骨能力，不引起免疫排斥反应，来源丰富，易于大量加工贮存，有广阔的临床应用前景。     

反义人骨形态发生蛋白2基因逆转录病毒表达载体的构建及其对？…

目的 从分子水平探讨骨形态发生蛋白２（ＢＭＰ－２）基因对骨肉瘤生物学行为的影响,并为骨肉瘤的基因治疗提供理论依据。方法 将人ＢＭＰ－２基因约１。０ｋｂ的ｃＤＮＡ片段反向插入逆转录病毒表达载体ＰＤＯＲ,构建人ＢＭＰ－２基因的反义逆转录表达载休,然后用脂质体将重组的ＰＤＯＲ－ＢＭＰ－２质粒转染至人的骨肉瘤细胞ＯＳ－９９０１,经Ｇ４１８筛选并获得了性克隆。用免疫组织化学卵白素－生物素过氧化酶（ＡＢＣ）方     

成骨蛋白的生物学与应用

成骨蛋白又称骨形态发生蛋白，成骨蛋白－１（ＯＰ－１）又称ＢＭＰ－７与ＢＭＰ－２的均属转化生长因子β（ＴＧＦ－β）超家族成员，将重组人ＯＰ－１和ＢＭＰ－２应用于骨缺损的动物实验的结果令人满意，并已开始向临床应用过渡。     

复合骨形态发生蛋白胎儿骨修复长骨缺损的实验研究

寻找满意的骨形态发生蛋白（ＢＭＰ）的载体一直是应用ＢＭＰ修复骨缺损研究中的一个重要课题，为探讨胎儿骨（ＦＢ）能否成为ＢＭＰ载体，制备了复合ＢＭＰ胎儿骨（ＢＭＰ／ＦＢ），将其植入兔桡骨中段１５ｍｍ人工缺损处，以单纯ＦＢ植入、异体骨（ＡＬＢ）植入、空白作为对照，通过Ｘ线摄片，光镜观察，电子探针钙磷元素测定等方法了解各组骨缺损修复速度和愈合程度。结果发现ＢＭＰ／ＦＢ植入侧４周时骨缺损处有大量间充质细胞聚集，８周形成骨小梁，ＦＢ基本被吸收，１２周出现部分板层骨，钙磷值达到正常桡骨皮质骨水平，１６周骨细胞成熟，髓腔再通，外观塑形较好，在不同时间点骨缺损修复程度，ＢＭＰ／ＦＢ组明显优于ＦＢ组，ＦＢ组优于ＡＬＢ组，空白组骨缺损则被纤维组织，脂肪组织等填充。实验证明ＦＢ是一种良好的ＢＭＰ载体。     

脱蛋白骨、骨形态发生蛋白和三种生长因子重组合人工骨成骨能力的比较研究

目的　比较三种重组合人工骨的成骨能力。方法　在５０ 只兔的１００ 个颅骨缺损动物模型中分别植入：①牛脱蛋白骨（ｂ Ｄ Ｐ Ｂ）／牛骨形态发生蛋白（ｂ Ｂ Ｍ Ｐ）／肿瘤坏死因子α（ Ｔ Ｎ Ｆα）;②ｂ Ｄ Ｐ Ｂ／ｂ Ｂ Ｍ Ｐ／碱性成纤维细胞生长因子（ｂ Ｆ Ｇ Ｆ）;③ｂ Ｄ Ｐ Ｂ／ｂ Ｂ Ｍ Ｐ／表皮细胞生长因子（ Ｅ Ｇ Ｆ）;④ｂ Ｄ Ｐ Ｂ／ｂ Ｂ Ｍ Ｐ。植入后１、２、４、６ 及８ 周行组织学检查及 Ｘ 线摄片; 植入后１０ 及４２ 天行　３５ Ｓ和４５ Ｃａ 液闪计数及灰重测定。结果　成骨能力：ｂ Ｄ Ｐ Ｂ／ｂ Ｂ Ｍ Ｐ／ Ｔ Ｎ Ｆα＞ ｂ Ｄ Ｐ Ｂ／ｂ Ｂ Ｍ Ｐ／ｂ Ｆ Ｇ Ｆ（ Ｐ＜ ０．０１） ＞ ｂ Ｄ Ｐ Ｂ／ｂ Ｂ Ｍ Ｐ／ Ｅ Ｇ Ｆ（ Ｐ＜ ０．０１）;ｂ Ｄ Ｐ Ｂ／ｂ Ｂ Ｍ Ｐ／ Ｅ Ｇ Ｆ 与 ｂ Ｄ Ｐ Ｂ／ｂ Ｂ Ｍ Ｐ 无显著性差异（ Ｐ＞ ０．０５）。结论　 Ｔ Ｎ Ｆα与 Ｂ Ｍ Ｐ及载体复合后,在体内对骨修复产生明显的促进作用,在载体／骨诱导因子／生长因子的重组合人工骨模式中, Ｄ Ｐ Ｂ／ｂ Ｂ Ｍ Ｐ／ Ｔ Ｎ Ｆα是一种有价值的骨移植材料。     

PcDNA3-hBMP3基因转染关节软骨细胞及其稳定表达

目的 探讨外源性基因ｈＢＭＰ３在软骨细胞获得稳定表达的可能性。方法 将和ＢＭＰ３的ｃＤＮＡ构建于真核表达载体ＰｃＤＮＡ３,形成重组真核表达载体ＰｃＤＮＡ３－ｈＢＭＰ３,转染培养状态下兔关节软骨细胞。利用重组ＤＮＡ和基因克隆技术构建重组真核表达载体ＰｃＤＮＡ３－ｈＢＭＰ３;利用细胞２和细胞基因转染技术体外转染ｈＢＭＰ３基因至关节软骨细胞;     

纯化天然骨唾液蛋白的体内成骨活性

目的 评价骨唾液蛋白（ｂｏｎｅ ｓｉａｌｐｒｏｔｅｉｎ,ＢＳＰ）在大 本内的成骨活性。方法 应用从牛骨中提取纯化的ＢＳＰ与经盐酸胍处理诱导活性的不溶性骨基质（ｉｎｓｏｌｕｂｌｅ ｂｏｎｅ ｍｔｒｉｘ,ＩＢＭ）或提纯的１型胶原形成共价交联的复合物,将ＢＳＰ－ＩＢＭ复合物和ＢＳＰ－１型胶原复合物分别植入直径８ｍｍ的大鼠颅骨骨缺损和胸部皮下组织内。不含ＢＳＰ的ＩＢＭ或１型胶原也分别植入上述部位作为对照。