丹参酮对肥厚心肌L-型钙电流的影响

目的心肌肥厚是导致心力衰竭、心律失常和猝死的高危因素.丹参酮已被证实能够有效地拮抗心肌肥厚的发生,但是对于其能否改变肥厚心肌上存在的电生理异常尚不清楚.方法本实验拟通过膜片钳和胞内钙测定技术,观察比较丹参酮和卡托普利对"一肾一夹"手术导致的肥厚心肌细胞膜上动作电位时间、L-型钙通道电流和胞内钙离子浓度的影响,来阐明丹参酮预防心脏肥厚发生心律失常可能的电生理基础.结果丹参酮可以显著的缩短肥厚心肌细胞中存在的动作电位时间延长(P＜0.001)、降低膜电容和ICa,L峰值幅度(P＜0.001),但不影响ICa,L密度,并能够显著减少胞内钙离子浓度.结论丹参酮能够在抗心肌肥厚的同时通过减少钙内流、缩短动作电位时间,起到预防心律失常的作用.     

L-型钙电流与心房电生理重构的研究进展

心房颤动的发生机制目前仍未清楚。心房电重构理论的提出为研完房颤的发生开辟了一个新领城。本文就近年来对心房快速除板所致的心房肌电生理重构、L-型钙电流的改变。L-型钙通道的分子重构。细胞内Ca^2 超负荷以及它们在房颤发生、发展和维持中的作用的研完进展予以综述。     

异丙酚对家兔心室外膜心肌细胞动作电位和L-型钙电流的影响

目的研究异丙酚对家兔左、右心室心外膜心肌细胞动作电位和L-型钙电流的影响。方法酶解法分离家兔左、右心室心外膜心肌细胞。全细胞膜片钳技术记录左、右心室心外膜心肌细胞动作电位和L-型钙电流(ICa-L)在使用异丙酚前后的变化。结果在电流钳制下,左、右心室心外膜心肌细胞动作电位都具有从0期到4期的动作电位形态,2相平台期有心外膜心肌细胞特有的穹窿样突起。异丙酚使右室心外膜心肌细胞动作电位失去2相平台期穹窿样突起,呈三角形尖锥锋形。左、右心室心外膜心肌细胞动作电位时程复极化50%和90%(APD50和APD90)在异丙酚作用后都明显缩短,其中右室心外膜心肌细胞APD50和APD90缩短最为明显(P<0.05或0.01)。在电压钳制下,异丙酚使左、右心室心外膜心肌细胞ICa-L在同一指令电位下,电流幅度均明显减小,但右室心外膜心肌细胞ICa-L的减小幅度明显强于左室同层ICa-L的减小幅度(P<0.01)。异丙酚还使左、右心室心外膜心肌细胞ICa-L的I-V曲线上移,并且使右室心外膜心肌细胞ICa-L的I-V曲线处在所有I-V曲线最上部。结论异丙酚对右室心外膜心肌细胞动作电位和ICa-L的影响程度明显强于左室,从而引起左、右心外膜心肌细胞电不均一性。     

磷酸肌酸钠对急性心肌梗死大鼠心室肌细胞动作电位和L型钙电流的影响

目的 探讨磷酸肌酸钠对急性心肌梗死大鼠心室肌细胞动作电位（AP）和L型钙电流（Ica-L）的影响.方法 采用结扎大鼠左前降支的方法制备急性心肌梗死大鼠模型,应用膜片钳技术中电流钳记录急性心肌梗死大鼠游离心室肌细胞动作电位,用全细胞膜片钳技术记录急性心肌梗死大鼠游离心室肌细胞离子流.结果 磷酸肌酸钠组急性心肌梗死大鼠的心室肌细胞与对照组心室肌细胞相比,动作电位幅值（APA）下降,差异有统计学意义（P＜0.01,n＝7）,动作电位时程（APD）有明显延长（P＜0.01,n＝7）;磷酸肌酸钠明显增加急性心肌梗死大鼠的心室肌细胞L-型钙电流幅值（P＜0.01,n＝7）.结论 磷酸肌酸钠降低急性心肌梗死大鼠动作电位幅值（APA）,延长动作电位时程（APD）;磷酸肌酸钠增加急性心肌梗死大鼠的心室肌细胞L-型钙电流幅值.     

雌激素抑制大鼠心室肌细胞L-型钙电流机制的研究

目的 :探讨雌激素抑制大鼠心肌细胞 L -型钙电流 （ICa,L）的可能途径。方法 :通过胶原酶消化得到单个大鼠心室肌细胞 ,膜片钳全细胞电压钳方法记录 ICa,L。结果 :雌激素 （1～ 30μmol/ L ）可剂量依赖性地抑制 ICa,L,雌激素对ICa,L的抑制作用并不能被雌激素受体的阻断剂 Tamoxifen和 ICI 182 780所阻断。细胞外灌流耦联了牛血清白蛋白（BSA）的雌激素 [β- estradiol6 - （o- carboxy- m ethyl） oxime:BSA（EST- BSA） ],不能透过细胞膜 ]也能抑制 ICa,L,但同样浓度的 EST- BSA细胞内灌流对 ICa,L并没有明显的抑制作用。结论 :雌激素可能是通过膜表面上特异的受体介导了其对 L-型钙电流的抑制作用     

黄芪总黄酮对豚鼠心室肌细胞L-型钙电流及钠电流的作用

目的探讨黄芪总黄酮(TFA)对豚鼠心室肌细胞L-型钙电流(ICa-L)及钠电流(INa)的作用。方法实验用胶原酶酶解法急性分离豚鼠心室肌细胞,利用全细胞膜片钳的方法记录心室肌细胞的ICa-L及INa。结果(1)应用TFA(20 mg.kg-1)后ICa-L从(-0.313±0.14)nA下降到(-0.402±0.27)nA,差异有统计学意义(P<0.01)。(2)应用TFA(20 mg.kg-1)后与对照组比较,INa峰值从(-8.43±2.03)nA升高到(-6.37±1.58)nA,差异有统计学意义(P<0.01)。结论TFA可以增加豚鼠心室肌细胞ICa-L的幅值,TFA可显著降低豚鼠心室肌细胞INa的幅值。     

甲状腺素诱发大鼠心肌肥厚时瞬时外向钾电流、内向整流钾电流和钙电流的变化

目的 研究甲状腺素诱发大鼠心肌肥厚模型的心肌细瞬时外向钾电流、内向整流钾电流和钙电流的变化。方法 以ipL-甲门面腺素造成大鼠心肌肥厚模型后,用膜片钳技术记录心肌细胞瞬时外向钾电流、内向整流钾电流和L型钙电流。结果 肥厚组心肌细胞瞬时外向钾电流幅度和心坎产增加,激活动力学特性无改变;内向整流钾电流幅度和密度也增加,激活动力学特性也无改变;而钙电流幅度、细胞膜电容增加,电流密度不变,半数激活电压（V1/2）向负电位方向移动,斜率（k)减小。结论 在甲状腺素诱发大鼠心肌肥厚模型中瞬时外向钾电流、内向整流钾电流和钙电流特性均发生了变化,这是造成肥厚心肌电生理异常的离子基础。     

T型钙通道阻断剂对肥厚心肌L型钙通道电流及单细胞mRNA表达的影响

钙通道阻断剂咪拉地尔对T型钙通道有较高的选择性,在整体模型中对L型钙通道的作用尚不明确。本研究联合运用膜片钳技术及单细胞RT-PCR方法,研究二肾一夹肥厚     

黄芪总黄酮对急性心肌梗死大鼠心室肌细胞L-型钙电流及钠电流的作用

目的研究黄芪总黄酮（TFA）对急性心肌梗死（Am）大鼠心室肌细胞L-型钙电流（L—ICa）及钠电流（INa）的作用。方法设正常对照组、AMI组及TFA实验组。大鼠开胸左前降支结扎造成AMI,开胸前5min实验组大鼠舌静脉注射剂量为20mg／kg的TFA溶液50ul。用胶原酶酶解法急性分离AMI模型大鼠心室肌细胞,采用全细胞膜片钳记录技术记录左前降支供血区心外膜细胞的L—ICa及INa的作用。结果①应用TFA（20mg／kg）后,L—ICa从（0．313±0．14）nA增加到（0．402±0．27）nA,差异有统计学意义（P〈0．01,n=6）。②应用TFA（20mg／kg）后与对照组比较,峰值从（-8．43±2,03）nA下降到（-6．37±1．58）nA,差异有统计学意义（P〈0．01,n=6）。结论TFA可以增加AMI大鼠心室肌细胞L—ICa的幅值,TFA可显著降低AMI大鼠心室肌细胞INa的幅值。     

大豆异黄酮对培养心肌细胞钙电流和动作电位的影响

目的 观察大豆异黄酮（SI）对大鼠心肌细胞动作电位的影响和培养心室肌细胞钙电流的作用。方法 采用悬浮玻璃微电极法和全细胞膜片钳方法。结果 SI能剂量依赖性地降低动作电位幅值（APA）、超射（OS）、最大除极速率（Vmax）、缩短复极50％及90％水平的动作电位时程（APD50、APD90）；SI 0.1pg/ml对L-型钙电流可见不同程度的抑制作用。结论 SI可使心肌细胞动作电位除极参数降低，动作电位时程缩短，对钙电流的抑制作用可减轻心肌细胞钙超载，进而保护心肌。     

不同旋体氨氯地平对大鼠心室肌细胞动作电位和L-型钙离子流的影响

目的 探讨不同旋体氨氯地平(amlodipine,Aml)对大鼠心室肌细胞动作电位和L-型钙离子流(ICa-L)的影响.方法 采用酶消化法获得大鼠耐钙心室肌细胞,以全细胞膜片钳技术分别观察并记录加入0.1、0.5、1、5和10 μmol/L左旋、右旋和混旋Aml后大鼠心室肌细胞动作电位、ICa-L及通道动力学参数的变化.结果 (1)加入0.1、0.5、1、5和10 μmol/L左旋、右旋和混旋Aml后,动作电位最大上升速率、动作电位幅度和超射无明显变化(P＞0.05);但左旋和混旋Aml对动作电位时限影响表现为随着浓度增加动作电位时限逐渐缩短(P＜0.05),且相同浓度的左旋Aml对动作电位时限影响比混旋Aml更明显(P＜0.05),而不同浓度右旋Aml对动作电位时限无影响(P＞0.05).(2)加入0.1、0.5、1、5和10 μmol/L左旋和混旋Aml后,ICa-L及峰值电流呈浓度依赖性降低、稳态激活曲线和稳态失活曲线左移(P＜0.05),且相同浓度左旋Aml对Ica-L和通道动力学参数影响比混旋Aml更明显(P＜0.05),但不同浓度右旋Aml对,ICa-L及通道动力学参数均无影响(P＞0.05).结论 左旋和混旋Aml对L-型钙通道有阻滞作用,表现为,ICa-L降低,动作电位时限缩短,而右旋Aml对L-型钙通道无阻滞作用,因而对ICa-L和动作电位时限无影响.     

The Effect of Extrogenous Phosphocreatine on L-type Calcium Current in Ischemic Guinea Pig Ventricular Myocytes

Objectives Heart failure （HF） is one of the most common outcome for all kinds of heart diseases, the effects of energetic therapy on HF remains controversial, especially to ischemic HF. The aim of this study was to explore the effect of exogenous phosphocreatine with different concentration on L-type calcium（I Cc-L） current in ischemic ventricular myocytes of guinea pig and to investigate its underlying electrophysiological mechanism for the treatment of ischemic HF. Methods Single ventricular myocytes were isolated enzymatically from left ventricle of guinea pig. Peak I Ca-L current were recorded using patch clamp techniques in the whole-cell configuration when myocytes had been superfused with normal Tyrode solution, simple ischemic solution, ischemic solution containing phosphocreatine with different concentration for 10 minutes respectively. Results Peak I Ca-L current density of myocytes superfused with simple simulated ischemic solution was remarkably inhibited by 80.6 ± 5.2% compared with myocytes superfused with normal Tyrode solution（P〈0.05）. Ischemic solution containing phosphocreatine of 5, 10, 20, 30mmol/L inhibited Peak I Ca-L current density by （53.8±6.7）%, （41.8 ± 8.2）%, （38.1±7.4）%, （36.6±9.7）% respectively. There was no statistical significance among phosphocreation of 10, 20, 30 mmol / L. Conclusions Extrogenous phosphocreatine could reverse the inhibition of I Ca-L current under ischemic condition, which could be the ionic basis for the treatment of ischemic heart failure. 0-10 mmol/L phosphocreatine exerted significant dose-effect relationship which no longer existed as concentration more than 10 mmol/L. It is supposed that phosphocreatine increased I Ca-L current by many pathways rather than simple substrate for ATP synthesis.     

陈旧性心肌梗死对家兔动作电位时程跨室壁离散及L型钙电流的影响

探讨陈旧性心肌梗死 (MI) (MI后 3个月 ) ,远离MI中心区的心肌细胞电活动的改变。结扎家兔左前降支造成MI模型 ,3个月后酶解分离左室游离壁远离MI中心区的三层 (Epi、M、Endo)心肌细胞 ,采用全细胞膜片钳技术记录单细胞动作电位 (AP)和L型钙电流 (ICa ,L) ,并观察三层心肌细胞AP时程 (APD)的离散性 (TD APD)变化。结果 :MI后 3个月 ,远离MI区的三层心肌细胞的APD明显延长 ,其中Endo心肌细胞的APD明显短于Epi和M心肌细胞(P <0 .0 1)。陈旧性MI组 (OMI)与假手术组 (Sham)及对照组 (Control)比较 ,TD APD显著增加 (2 88.32± 19.5 6vs2 2 8.4 5± 13.94 ,2 10 .32± 17.4 3ms ,P <0 .0 1)。且在OMI组 ,ICa ,L的幅值增加 ,但密度降低 ,其中Endo的ICa,L密度降低最明显 (+10mV时 ,从 16 .12± 1.6 0降至 10 .73± 0 .0 6pA/pF ,降低了 33.4 3% ,Epi从 16 .5 9± 0 .5 0降至 11.75±0 .6 9pA/pF ,降低了 2 9.17% ,M细胞从 18.70± 1.0 3降至 13.2 7± 1.0 5pA/pF ,降低了 2 9.0 3% ,P <0 .0 5 )。结论 :MI3个月后远离MI区的心肌细胞ICa ,L密度明显降低 ,且以Endo降低最明显 ,三层心肌细胞的APD明显延长 ,并且En do心肌细胞的APD明显短于Epi和M心肌细胞 ,TD APD明显增加     

缬草单萜氧化物对兔单个心室肌细胞L-型钙电流的影响

利用全细胞膜片钳记录技术研究30μg/L和100μg/L缬草单萜氧化物(VMO)对兔单个心室肌细胞L型钙电流(ICaL)和动作电位的影响。结果:30μg/L和100μg/L的VMO使兔心室肌细胞ICaL峰值由6.04±0.59pA/pF分别减至3.99±0.31pA/pF和2.31±0.24pA/pF(n=8,P<0.01);VMO使ICaL的电流电压曲线上移,但不改变其激活电位、电位峰值和反转电位;VMO还使钙电流失活曲线左移。30μg/LVMO可使动作电位时程(APD)明显缩短,APD50和APD90分别缩短了50.3%和29.6%(n=16,P<0.05),而静息电位和动作电位幅值无明显改变。结论:VMO对LCaL具有浓度依赖性阻滞作用。这可能是其对心血管作用的重要机制之一。     

Ghrelin对大鼠心室肌细胞L型钙电流的影响

目的：研究一种具有生长激素释放活性的脑肠肽（Ghrelin）对大鼠心室肌细胞L型钙电流的影响。方法：采用酶解消化法获得大鼠单个心室肌细胞,通过全细胞膜片钳技术研究不同浓度（10 nmol/L、100 nmol/L及1μmol/L） Ghrelin对L型钙电流的影响。结果：10 nmol/L、100 nmol/L及1μmol/L Ghrelin依次抑制大鼠心室肌细胞L型钙电流峰电位,抑制率分别为：8.95%±2.13%、31.18%±4.78%及64.63%±8.57%,（P<0.05）;I-V曲线上移,通道半数失活电压从（-1.34±1.9） mV分别降至（-8.04±1.32）mV、（9.76±1.17）mV及（-11.81±0.73）mV（P<0.05）,并延长失活后恢复时间由给药前τ值63.23±9.32,分别增至98.95±10.74、109.56±13.42和127.39±16.13,差异有统计学意义（P<0.05）。结论：Ghrelin通过加快L型钙电流的失活及延长失活后恢复时间,具有浓度依赖性地抑制L型钙电流。     

兔急性心肌梗死后梗死周边带心肌细胞L-型钙通道的变化

探讨L型钙通道在急性心肌梗死 (AMI)后室性心律失常发生中的作用及其机制。方法 :以开胸冠状动脉结扎法制备兔AMI模型 ,1周后处死动物分离心室肌细胞 ,采用全细胞膜片钳记录技术观察梗死周边缺血带心外膜心室肌细胞L型钙通道电流 (ICa L)的变化 ,以正常心肌ICa L为对照。结果 :AMI 1周时兔梗死周边区心室肌细胞L型钙电流受到抑制 ,其电流峰值由正常状态下的 - 5 .58± 1 .53pA/pF(对照组 ,n =1 0 )降至 - 3 .52± 0 .93pA/pF(AMI组 ,n=6) ,最大峰电流下降 2 9.1 % ,P <0 .0 5 ,I V曲线上移 ;其失活曲线左移 ,半数最大失活电位由 - 1 3 .1± 4 .2mV左移至 - 2 5 .9± 7.0mV ,P <0 .0 5 ,失活速度加快。结论 :AMI后 1周梗死周边带心外膜心室肌细胞L型钙通道受抑制 ,可能为AMI后室性心律失常发生的机制之一。     

Ventricular Action Potential and L-Type Calcium Channel in Infarct-Induced Hypertrophy in Rats

Calcium Channel in Infarct-Induced Hypertrophied Rat Ventricle. Introduction : The present investigation was aimed at characterization of: (1) action potential parameters; and (2) L-type calcium channels in the hypertrophied ventricular tissue surviving an extensive healed myocardial infarction in the rat.
Methods and Results : Myocardial infarction was produced in Wistar rats by ligation of the left coronary artery. One to 2 months later, their hearts were subjected to electrophysiologic study. The main difference in subendocardial transmembrane potentials recorded with intracellular microelectrodes was an increase in action potential duration (APD). In the left ventricle, the infarcted/sham-operated APD ratio ranged from 2.7 to 7.2, whereas in the right ventricle it ranged from 1.6 to 2.3 in different regions. When compared with control ceils, ventricular myocytes from infarcted hearts were found to be larger (P < 0.01) and showed a reduction (P < 0.05) in L-type calcium current (I_Ca,L) density obtained by whole cell, patch clamp (at 0 mV: 4.44 ± 0.41 in infarcted vs 8.03 ± 1.22 pA/pF in normal). The time course of decay of the currents could be fitted by two exponential functions in both normal and infarcted hearts. There was a tendency toward an increase in the time constant of the slower component of inactivation, T₂, significant only at +20 mV (215 ± 25 vs 151 ± 15 msec).
Conclusions : Cardiac hypertrophy of healed infarction in rats is associated with lengthening of the action potential in both ventricles. The main alteration observed in I^Ca,Lwas a decrease in the current density. Thus, alteration of the calcium channel is not the determinant factor of APD increase     

新生大鼠心肌细胞短暂外向钾电流下降与心肌肥大的相关性研究

在某些心力衰竭患者中常观察到心肌细胞短暂外向钾电流 (Ito)下降和动作电位时程 (APD)延长 ,笔者主要探讨Ito下降与心肌肥大的关系及内在机制。用Ito阻断剂 ,4 氨基吡啶 (4 AP) ,处理新生大鼠心室肌细胞 ,观察作为心肌肥大指标的细胞膜电容和3 H 亮氨酸 (3 H Leu)掺入量 ,同时测Ito振幅和APD。结果 :Ito振幅下降近 5 0 %(1 5 0 .3± 1 8.6pA ,n =7vs 74 .0± 1 1 .5pA ,n =1 1 ,P <0 .0 5 )。APD50 (5 0 %复极 )显著的延长 (75 .8± 1 4 .1ms,n =7vs2 0 1 .7± 2 3.5ms,n =1 1 ,P <0 .0 5 )。膜电容和3 H Leu掺入量分别增加 4 7%和 31 % (P均 <0 .0 5 )。L 型钙通道阻断剂维拉帕米 ,能抑制 4 AP诱导的APD延长以及膜电容和3 H 亮氨酸掺入量的增加。环孢素A(CsA)也可抑制 4 AP诱导的膜电容和3 H Leu掺入量的增加 ,但对APD影响不明显。结论 :Ito下降通过延长APD ,致细胞内钙增加 ,激活钙调神经磷酸酶反应途径 ,可能引起心肌肥大     

胡椒碱对H2O2致兔心房肌细胞动作电位时程及L型钙电流异常的保护作用

目的:研究胡椒碱(PIP)对H2O2引起的单个兔心房肌细胞动作电位时程（APD）及L型钙电流(ICa,L)异常的保护作用。方法:采用全细胞膜片钳技术,观察10和50 μmol/L的H2O2引起单个兔心房肌细胞APD及ICa,L的改变,以及预先应用7 μmol/L的PIP对其的作用。结果:7 μmol/L的PIP对正常兔心房肌细胞APD、ICa,L及L型钙通道动力学无明显影响。在10和50 μmol/L的H2O2作用下,兔心房肌细胞APD50和APD90明显缩短(P<0.05),静息膜电位（RMP）绝对值显著下降(P<0.05),ICa,L峰值由(39.3±5.4) pA/pF降低至(32.8±2.0) pA/pF(P<0.05),电流-电压曲线上移,通道稳态激活曲线右移,通道稳态失活曲线左移,但恢复时间不变。预先给予7 μmol/L的PIP可明显减轻H2O2对APD、ICa,L的抑制作用(P<0.01),对L型钙通道动力学的异常影响。结论:PIP可减轻氧化应激对心房肌细胞APD、ICa,L的影响。