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1.
目的 研究具药用价值的海洋微藻杜氏盐藻Dunaliella salina和亚心形扁藻Platymonassubcordiformis在不同培养容器以及光照下的细胞生长情况,为促进海洋微藻生物资源的培养保存提供参考.方法 选取杜氏盐藻和亚心形扁藻2种海洋微藻为生物材料,在植物培养箱中分别利用三角瓶和试管,在正常光照和遮光光照条件下开展为期10 d的一次性培养试验,利用倒置显微镜和血球计数板观测微藻细胞密度,统计分析不同培养容器和光照对2种海洋微藻生长影响的作用.结果 在该实验条件下,2种海洋微藻的细胞生长均表现出初期生长缓慢、中期生长快速、后期生长放缓的趋势.杜氏盐藻在三角瓶中正常光照培养条件下的生长最好(504× 104个/mL),其次为在试管中正常光照培养的条件下(364× 104个/mL);亚心型扁藻细胞在三角瓶中正常光照培养的条件下生长最好(227×104个/mL),其次为在三角瓶中遮光处理的条件下(177× 104个/mL).结论 培养容器(三角瓶和试管)和光照(正常光照和遮光)对2种海洋微藻生长的影响均具有统计学意义,在进行微藻生物资源培养和保存时,应充分考虑或利用这2种因素的作用. 相似文献
2.
目的研究角毛藻Chaetocerossp.、绿色巴夫藻Pavlovaviridis、叉鞭金藻Dirateriainornate和杜氏盐藻Dunaliella salina4株经济海洋微藻的细胞生长特性,为微藻在医药学相关行业的开发与应用提供参考依据。方法采用室内实验方法,以添加f/2营养液的人工海水为培养介质,在植物培养箱中利用三角瓶进行微藻培养试验,测定微藻细胞密度,并计算细胞生长速率。结果4株经济海洋微藻的细胞生长呈现明显的缓慢期、快速期和平稳期阶段。角毛藻、绿色巴夫藻、叉鞭金藻和杜氏盐藻的最大细胞密度有明显差别,分别为6.71×10^6、4.916×10^7、1.225×10^7和4.64×10^6个/mL。对4株微藻在1—5d、5~9d、9~13d和13~17d几个时间段的生长速率进行比较分析,结果表明角毛藻、绿色巴夫藻、叉鞭金藻的生长速率在1~5d阶段最大,分别为0.57、0.48、0.55/d;而杜氏盐藻的生长速率在5~9d阶段最大,为0.68/d。结论实验选用的4株海洋微藻的细胞生长特征存在一定异同,在选育微藻株系开展微藻开发利用研究时应该考虑微藻细胞生长繁殖的差异性。 相似文献
3.
目的研究硅藻门的三角褐指藻Phaeodactylum tricornutum、甲藻门的东海原甲藻Prorocentrum donghaiense和金藻门的球形棕囊藻Phaeocystis globosa的细胞增殖情况,为认识其基本生物学特性,推动海洋微藻在医药保健食品行业的应用提供参考。方法选取上述3种海洋微藻为生物材料,以添加f/2营养液的人工海水为培养介质,在植物培养箱中利用三角瓶开展为期2周的一次性培养实验。利用倒置显微镜和血球计数板观测微藻细胞密度,采用最小二乘法拟合法计算微藻日生长速率。结果 3种海洋微藻的细胞生长均经历缓慢期、快速期和平稳期3个阶段;实验结束时,三角褐指藻、东海原甲藻和球形棕囊藻的细胞密度分别约为1.126×107、1.167×107和1.210×107个/mL;其最大生长速率分别出现在第2天(1.11/d)、第4天(1.13/d)和第3天(1.02/d)。结论 3种海洋微藻的细胞增殖具有多样性;它们的最大细胞密度和日生长速率出现的时间或程度均存在一定的差异,提示在进行经济微藻培养生长过程中必须考虑各藻种的细胞增殖特性。 相似文献
4.
目的 探讨自发性高血压大鼠(spontaneously
hypertensive rats, SHR)主动脉平滑肌细胞(aorta smooth muscle cell, ASMC)与心肌内成纤维细胞(cardiac
fibroblast, CFB)在体外培养生长的特性。方法 16周龄自发性高血压大鼠(SHR)和正常大鼠(WKY)测血压后处死,取心脏与胸主动脉,组织块法分别培养CFB与ASMC)。分别观察(1)CFB 相似文献
5.
目的 探讨建立体外大鼠Tenon’s囊成纤维细胞的培养方法,并对体外培养的Tenon’s囊成纤维细胞的生长特性进行观察。方法 选用健康年幼的SD大鼠40只,采用断颈法将其处死,摘除眼球,无菌条件下,分离剪下Tenon’s囊组织,采用植块法对Tenon’s囊成纤维细胞进行体外培养;通过细胞形态学观察和细胞免疫组化染色技术对其细胞性质进行鉴定;通过细胞记数和MTT法对其生长特性进行研究。结果 原代培养的大鼠Tenon’s囊组织块接种后,约48h即可见细胞由组织块中爬出,培养8~10d,细胞汇合程度大约可达70%左右;培养14~16d,细胞完全汇合;在细胞汇合程度达到70%-80%时,可以进行细胞传代,传代细胞接种后4—5h大部分细胞贴壁,10-12d左右传代细胞完全汇合。光镜下观察,可见Tenon’s囊成纤维细胞,在汇合程度低时细胞呈细长梭形外观,汇合程度高时细胞可呈多边形改变。免疫组化染色可见Tenon’s囊成纤维细胞角蛋白染色阴性,波蛋白染色阳性。细胞生长曲线显示,在2—8d细胞处于对数生长期。结论 体外成功地培养了大鼠Tenon’S囊成纤维细胞,这不仅为青光眼滤过泡瘢痕化防治的基础研究提供了一种新的细胞来源,同时为抗结膜瘢痕化药物的研究和开发提供了一种新的简便实用的细胞来源途径。 相似文献
6.
目的研究人外周血单个核细胞、单核源性巨噬细胞在体外培养环境中的生长曲线情况。方法以密度梯度离心法和贴壁法分离、纯化正常人的外周血单个核细胞。以佛波醇酯促进单核源性巨噬细胞的分化成熟。用MTT法检测单个核细胞、单核源性巨噬细胞的生长曲线。采用单因素方差分析进行统计学检验。结果单个核细胞接种第1天的细胞数量明显多于第3、5、6、7天(P〈0.05),但接种后第2~7天的细胞数量相对稳定(P〉0.05)。单核源性巨噬细胞分化成熟后第1~6天的OD,细胞数量较稳定。但第7天的细胞数量明显少于前6天(P〈0.05)。结论体外培养第2~7天的外周血单个核细胞处于生长平台期。体外培养的单核源性巨噬细胞在分化成熟后的第1~6天处于生长平台期。 相似文献
7.
目的 运用Logistic和Gompertz模型对中国实验用小型猪(CEMP)早期生长发育进行拟合并比较分析,找出对CEMP适宜的生长曲线模型.方法 测定CEMP封闭群所选个体不同周龄的体质量,离乳前按每周统计;离乳后按每2周龄统计体质量数据.用Logistic和Gompertz模型对封闭群种猪体质量早期生长发育进行拟合分析.结果 通过对比Logistic和Gompertz模型分别拟合CEMP的生长过程发现,Gompertz模型生长曲线估测的结果与实际情况更为接近.Gompertz模型估测本研究建立的封闭群最大体质量是31.13 kg,拐点日龄101.31 d,拐点体质量11.45 kg,从估测日增重看,从7日龄的0.0343 kg/d,逐渐增加到101.3日龄的最大值0.1603 kg/d,而后逐渐减小,表现为生长速率先增加后减少.结论 本研究为CEMP封闭群选育和饲养工作建立了适宜的生长曲线模型,对改善饲养管理方法和繁殖育种等方面都有参考意义. 相似文献
8.
目的:探讨miR-223对胃癌细胞生长和侵袭的影响,并研究miR 2-23的靶基因及其功能。方法利用实时定量 PCR 检测原发性胃癌和转移性胃癌间miR-223的表达水平。利用脂质体 Lipo-fectamine TM 2000在胃癌细胞中瞬时转染miR-223的 ASO以及对照寡核苷酸,运用平板克隆形成和tran-swell侵袭实验检测细胞生长和侵袭。生物信息学方法预测miR-223的靶基因,分别利用GFP报告载体实验和Western blot检测转染miR-223 ASO和对照细胞中靶基因3′UTR的荧光强度以及靶基因的蛋白水平。在细胞中转染靶基因的siRNA和对照,利用Western blot检测靶基因的蛋白表达情况,并检测细胞的克隆形成和侵袭能力。结果实时定量PCR结果显示 miR-223在转移性胃癌中高表达( P <0.05)。与对照组细胞相比,转染miR-223 ASO的细胞克隆数目减少(P<0.05),发生侵袭的细胞减少(P<0.05)。生物信息学显示EPB41L33’UTR含有miR-223的结合位点。与对照组相比,miR-223 ASO降低EPB41L33′UTR的荧光强度(P <0.05),而对突变的3′UTR没有明显影响。 miR-223 ASO组细胞中EPB41L3的蛋白水平较对照组升高(P<0.05)。转染EPB41L3 siRNA的细胞中EPB41L3的蛋白水平较对照组降低,而克隆形成和侵袭能力较对照组明显升高(P<0.05)。结论 miR-223通过抑制miR-223的表达而调控胃癌细胞的生长和侵袭,暗示miR-223可能与胃癌的生长和转移相关。 miR-223具有作为胃癌分子治疗和预后靶标的潜能。 相似文献
9.
以早期尖锐湿疣(CondylomaAcurminatum,CA)为研究对象,通过在鸡胚绒毛尿囊膜的种植,考察其促血管生长作用(AGA),并与有强AGA的基底细胞场进行比较。结果发现,早期CA这种良性增殖性病变也有明显的AGA。推测其物质基础可能是某种形式的AF。探讨了CA的AF物质的产生方式。 相似文献
10.
[目的] 探讨中药补骨脂活性成分补骨脂酚(BAK)诱导人肝癌Hep3B细胞生长抑制的机制。 [方法] 采用噻唑蓝法(MTT法)检测BAK对人肝癌Hep3B细胞生长抑制作用;相差显微镜观察BAK处理后Hep3B细胞形态变化;Hoechst/Mitotracker/Rhodamine荧光探针染色结合高内涵细胞成像系统分析BAK对线粒体功能的影响;免疫印迹法(Western blot法)考察BAK处理后自噬标志性蛋白溶酶体相关蛋白1(LAMP1)、微管相关蛋白1轻链3(LC3)、SQSTM1蛋白(p62)以及线粒体自噬标志性蛋白PTEN诱导假定激酶1(PINK1)、帕金蛋白(Parkin)、线粒体融合蛋白2(MFN2)、线粒体膜蛋白(Tom20)的表达情况;MTT法考察线粒体自噬抑制剂氯喹(CQ)、巴弗洛霉素A1(Baf-A1)对BAK诱导的肝癌细胞生长抑制的影响。 [结果] BAK时间剂量依赖性抑制Hep3B细胞生长;高内涵实验结果表明BAK能够升高线粒体质量,降低线粒体膜电位;BAK可以上调LAMP1、LC3、PINK1、Parkin表达量,下调p62、 MFN2及Tom20蛋白表达;加入线粒体自噬抑制剂可显著逆转BAK诱导的Hep3B细胞生长抑制。 [结论] 补骨脂酚通过线粒体自噬抑制人肝癌Hep3B细胞生长。 相似文献
11.
<正>川乌为毛茛科植物乌头(Aconitum carmichaelii Debx.)的干燥母根,有大毒,具有祛风除湿、温经止痛之功效,常用于风寒湿痹、关节疼痛、心腹冷痛等疾病的治疗[1]。川乌化学成分复杂,主要含有生物碱类成分,其中,二萜生物碱是川乌的特征有效成分,具有抗炎、镇痛、镇静、心血管及中枢神经等方面的作用[2-7]。近年来,对二萜生物碱的国内外研究报道较多,现主要从多种二萜生物碱成分的同时检测、药动学研究进展等方面对其作一综述。1二萜生物碱类化学成分川乌中二萜生物碱具有显著的生理活性。根据 相似文献
12.
目的 探讨低度恶性潜能多房囊性肾瘤(multilocular cystic renal cell neoplasm of low malignant potential,MCRCNLMP)的超声造影表现。方法 收集术前常规超声及超声造影检查并经手术病理证实的21例MCRCNLMP病灶,对比常规超声及彩色多普勒超声,观察其超声造影表现,根据Bosniak标准分级,分析总结其超声造影特点。结果 21例MCRCNLMP病灶内常规超声仅有1例未见囊内分隔,余20例均可见数条分隔,平均厚度为(2.15±0.90)mm,囊内分隔的厚度与分隔血流相关(P=0.020)。21例病灶超声造影均可见明显增强分隔,平均厚度为(2.54±0.66)mm,在超声造影与常规超声上病灶内分隔厚度的差异有统计学意义(P=0.023),而在超声造影与常规超声上病灶内分隔条数的差异无统计学意义(P=0.305)。MCRCNLMP病灶按Bosniak标准分级分为ⅡF级~Ⅳ级,其中大部分病灶为Bosniak Ⅲ级。结论 超声造影诊断MCRCNLMP较常规超声能准确鉴别分隔上有无血供,临床上筛查时若测及囊性团块内较多分隔的病灶建议行超声造影检查。 相似文献
13.
目的观察蝎毒多肽(APBMV)对鼻咽癌CNE-2Z细胞株细胞膜电位的影响.方法细胞经培养传代,分组处理.空白对照组加生理盐水,其他3组分别加入浓度为8,12和16mg/L的APBMV.采用玻璃微电极细胞内记录法测定CNE-2Z细胞膜电位,MTT法观察APBMV对CNE-2Z细胞的毒性作用.结果CNE-2Z细胞经APBMV处理48h后,细胞膜负电位(13.00±3.58)mV明显小于空白对照组(23.00±8.21)mV,P<0.01,细胞膜呈去极化状态;CNE-2Z细胞代谢MTT的能力下降,显示明显的毒性反应.结论APBMV可能具有膜毒素的作用,通过降低CNE-2Z细胞膜电位,继而影响肿瘤细胞的增殖. 相似文献
14.
目的:探讨蔡氏扶正消癌汤对人低分化胃癌细胞BGC-823体外生长的影响。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)还原法检测蔡氏扶正消瘢汤对BGC-823生长的影响,并观察蔡氏扶正消瘦汤对BGC-823细胞形态的影响。结果:蔡氏扶正消瘦汤生药能抑制BGC-823的生长。在实验浓度范围内,随着剂量的增加,抑制作用更加明显;同一剂量下,72h内药物作用时间越长,抑制作用越明显。结论:蔡氏扶正消瘦汤能够抑制低分化胃癌细胞BGC-823的生长。 相似文献
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目的:探讨蔡氏扶正消癥汤对人低分化胃癌细胞BGC-823体外生长的影响.方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)还原法检测蔡氏扶正消癥汤对BGC-823生长的影响,并观察蔡氏扶正消癥汤对BGC-823细胞形态的影响.结果:蔡氏扶正消癥汤生药能抑制BGC-823的生长.在实验浓度范围内,随着剂量的增加,抑制作用更加明显;同一剂量下,72 h内药物作用时间越长,抑制作用越明显.结论:蔡氏扶正消癥汤能够抑制低分化胃癌细胞BGC-823的生长. 相似文献
16.
目的探讨凉血活血汤在体外对进行期寻常型银屑病患者外周血树突状细胞(DC)的干预作用。方法采用体外培养患者DC,经复方中药作用后,流式细胞仪分析检测细胞表型的变化,MTT法观察DC诱导淋巴细胞增殖的变化,ELISA法观察DC分泌细胞因子的改变。结果患者的DC经凉血活血汤作用后,CD83的表达均明显上调,CD86的表达及刺激混合淋巴细胞增殖的能力均有一定的抑制;使Th1型细胞因子产生显著性降低,而Th2型细胞因子产生增加。结论凉血活血汤对寻常型银屑病患者的DC的抗原递呈能力起到一定的调节作用,对Th1型细胞因子的分泌起强烈抑制作用,对Th2型细胞因子的分泌起促进作用。 相似文献
17.
目的: 检测生长激素对体外培养的结直肠癌细胞的影响,并探讨其作用机制?方法:结肠癌细胞株Lovo细胞随机分组,加或不加不同浓度的生长激素孵育不同时间后,以MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞术分析细胞周期,Annexin V/PI双染色法检测细胞凋亡情况?结果:MTT法测定表明,生长激素对Lovo细胞有明显的促进增殖效应,12~24 h起效,48 h时达高峰,生长激素达到一定浓度后,其促增殖作用不再增加?流式细胞仪检测生长激素对结肠癌细胞的影响显示:浓度为200 ng/ml的生长激素作用Lovo细胞24 h后,G0/G1细胞比例下降,S期细胞比例明显上升,G2/M期细胞比例稍上升,凋亡指数无明显变化(P=0.187);72 h时, G0/G1期细胞下降更为明显,S期细胞比例上升亦更为明显,G2/M期细胞上升明显,凋亡细胞比例明显增高(P < 0.01)?结论:生长激素对Lovo细胞有明显的促增殖作用,并有受体饱和效应?该作用是通过改变细胞周期分布,促进G0/G1期细胞向S期?G2/M期细胞转变实现的? 相似文献
18.
目的观察鱼藤酮对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(pheochromocytoma, PC12细胞)线粒体膜电位及细胞周期的影响,探讨鱼藤酮对多巴胺神经元的损伤机制.方法用流式细胞仪检测PC12细胞线粒体膜电位及细胞周期.结果 5.0 μmol/L鱼藤酮作用于PC12细胞12 h及24 h后,G0/G1期及S期细胞所占比例逐渐下降(P<0.01),而G2/M期细胞比例逐渐升高(P<0.01).单纯鱼藤酮中毒12 h线粒体膜电位即降低.结论大剂量(5.0 μmol/L)鱼藤酮引起线粒体膜电位降低及细胞周期改变,可能导致PC12细胞生长障碍. 相似文献
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Background Epidermal growth factor receptor (EGFR) mutations can predict tumor response to tyrosine kinase inhibitors (TKIs). Detecting EGFR mutations in plasma DNA samples in patients with advanced non-small cell lung cancer is challenging and promising. We compared three methods for detecting plasma EGFR mutations, including direct DNA sequencing, denaturing high-performance liquid chromatography (DHPLC) and Scorpions Amplification Refractory Mutation System (Scorpions ARMS).
Methods Plasma DNA samples from 73 patients with stage IIIB to IV adenocarcinoma were analyzed for EGFR mutations in exons 19 (deletion mutation) and 21 (L858R mutation) using direct DNA sequencing, DHPLC and Scorpions ARMS. Sensitivities of the three methods were compared and the relationship between EGFR mutations and patients’ survival was analyzed.
Results In 73 patients, we detected EGFR mutations in 5 samples (6.9%) by direct DNA sequencing, in 22 samples (30.1%) by DHPLC, and in 28 samples (38.4%) by Scorpions ARMS. EGFR mutations were found in 13 samples in exon 19 and in 9 samples in exon 21 by DHPLC, while we found mutations in 15 samples in exon 19 and in 13 samples in exon 21 by Scorpions ARMS. Among the 73 patients, there was 90.4% concordance between DHPLC and Scorpions ARMS (66/73, κ=0.79, P=0.07). Of the 73 patients, 46 patients were treated with gefitinib, including 18 patients with mutations and 28 patients without mutations as determined by Scorpions ARMS. The 18 patients with mutations had a significantly longer progression-free survival (PFS) time (median PFS was 21.0 months) than the 28 patients without mutations (median PFS was 7.0 months) (P=0.022).
Conclusions Among the three methods for detecting EGFR mutations in plasma DNA samples of patients with advanced lung adenocarcinoma, direct gene sequencing had the lowest sensitivity, while Scorpion ARMS showed the highest mutation detecting capability. DHPLC is slightly less sensitive than Scorpion ARMS. EGFR mutations in exons 19 (deletion mutation) and 21 (L858R mutation) predict a longer PFS. 相似文献
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