胚胎移植技术在纯种德国美利奴羊选育中的应用研究

本研究对 2 8只纯种德国肉用美利奴供体羊进行超排处理 ,供体羊共计排卵 453枚 ,平均每只羊 1 6 .1 8± 4.0 4枚 ,共回收可用胚胎 385枚 ,平均每只羊 1 3.75± 4.0 1枚。将 385枚胚胎移植给 32 6只受体羊 ,产羔率达到 77.6 1 %。结果表明 :①供体羊的年龄对超数排卵效果没有明显的影响 ;对性成熟不久的供体羊 ,初次诱发排卵时适当降低FSH剂量可与成年经产母羊一样有较好的超排效果。排卵点分别为1 6 .86± 4.6 1个 (育成羊 )、1 5.6± 3.40个 (成年羊 ) ,可用胚 1 4.1 5± 4.45枚 (育成羊 )、1 3.4± 3.56枚 (成年羊 ) ;②合理的饲养管理是受体羊胚胎移植后受胎率的关键 ,补饲条件下受体羊产羔率 ( 81 % )显著高于典型草原放牧型受体羊的产羔率 ( 76 .1 % ) ;③供受体羊的发情同步差对受体羊的产羔率有重要的影响 ,同步差 0h、± 1 2h的受体羊产羔率 ( 76 .54 % )显著高于同步差± 2 4h的产羔率 ( 52 .54 % )。     

内蒙古白绒山羊超数排卵及鲜胚移植技术的应用研究

本试验以 138、15 0和 162IU三种剂量FSH ,在供体羊发情的第 15、16、17d开始超排 ,34只供体羊的超排结果为排卵点平均 13.4 1± 6.70个 /只 ;胚胎平均回收 12 .5 6± 6.30枚 /只 ;可用胚胎平均 10 .2 4± 6.14枚 /只。第 16、17d起 ,剂量为 15 0IU组的超排效果最好 ,但无显著差异 (P >0 .0 5 )。将 2 69枚胚胎移植给 2 4 9只受体 ,妊娠率为 70 .2 8% ;产羔率为 67.0 6% ;共产 178只羔羊。受体羊与供体羊发情同期化程度、黄体质量、胚龄等因素对妊娠率影响较大 ,但统计学上无显著差异 (P >0 .0 5 )。用氯前列烯醇诱导发情不影响受体妊娠率     

影响德国美利奴母羊两次超排移植效果因素分析

对同一批德国美利奴羊供体母羊采用输卵管法、子宫角法进行超排胚移,使用的FSH总剂量也不同,取得不同的效果： 采用输卵管法,FSH总剂量为84单位/只,对17只供体母羊进行超排,采胚13只,平均每只供体采集胚胎11.77枚,其中可用胚胎10.92枚.移植受体142只,产羔61只,产羔率42.96%;采用子宫角法,FSH总剂量为120单位/只对上述17只供体母羊进行超排,采胚13只,平均每只供体采集胚胎6.23枚,其中可用胚胎6.07枚,移植受体78只,产羔51只,产羔率66.82%.结果显示：不同的采胚方法、不同的超排剂量、供体羊的年龄、体重对供体羊的超排效果有影响;而不同的孕激素材料、母羊的生理状态以及体膘对受体的同期发情和移植后的受胎率有影响。     

特克塞尔羊在山西右玉的胚胎移植效果

选取12只纯种特克塞尔羊作为供体,采用递减法注射FSH进行超排,采用人工授精进行配种,手术法回收胚胎,鉴定后移植。164只右玉绵羊作为受体,采用两次PG注射法进行同期发情。结果表明:12只供体获得胚胎共129枚,可用胚胎109枚,每只供体羊获得9.1枚可用胚胎,胚胎合格率为84.50%。134只受体表现发情,发情率为81.70%,其中同期发情的羊108只,同期发情率65.85%。109枚胚胎移入97只受体,其中12只移植双胚。61只受体被确认为妊娠,产下52只羔羊,产羔率为53.60%。12只供体手术后产下17羔羊。     

阿尔巴斯白绒山羊胚胎移植技术应用效果研究

利用胚胎移植技术,小剂量FSH处理供体母羊(阿尔巴斯型)30只,发情30只,输卵管采卵30只,获可用胚胎306枚,平均可用胚10.2枚/只;移植受体母羊(低产绒山羊)220只,妊娠173只,妊娠率77.92%;产羔183只,产羔率为105.78%;移植胎数与产羔数比为1.7:1.     

奶牛鲜胚移植黄牛技术应用研究报告

1989—1990年,针对四川农村黄牛散饲养的情况,进行了奶牛鲜胚移植黄牛应用技术及其经营管理的研究,并用西门塔尔牛×本地黄牛的杂种母牛(以下简称西杂牛)作供体,进行了超排采胚与移植黄牛探索。用FSH和PGF_2α常规超排法和加预处理超排法,共处理黑白花奶牛供体58头,有效率81.0％(47/58),头均获卵7.2±5.2枚(340/47),获可用胚4.7±4.3枚(220/47);鲜胚移植黄牛受体92头,受胎率44.6％(41/92)。超排西杂牛供体27头,有效率85.2％(23/27),头均获卵5.9±4.6枚(136/23),获可用胚2.8±2.6枚(64/23);鲜胚移植黄牛受体17头,受胎率41.2％(7/17)。结果显示:2—3胎、3.5—5.4岁、产犊后90天以上健康母牛供体的超排效果最佳;供体发情周期的第3—5天,用低剂量FSH预处理可提高超排效果和获卵数;在农村异地远距离运送鲜胚,桑椹胚的移植受胎率显著高于囊胚;产后180天以上、非哺乳期、发情与供体同步或提前1天的受体黄牛,移植受胎率最高;结合农村黄牛改良,用西杂牛作供体就地采胚移植黄牛,不仅降低胚移成本费 用,也使黄牛直接生产出二、三代级进杂交牛,加快了杂交改良进程,有一定生产价值和经济效益。在以上基础上,提出了一套适合农村的奶牛鲜胚移植黄牛的技术与经营管理措施,为在农村条件下开展该项技术提供了试验依据和新     

胚胎移植技术在云南半细毛羊上的应用研究

本研究重点对半细毛羊同期发情、超数排卵及胚胎移植技术进行研究,以期获得适于胚胎移植技术规模化的高效、简化、稳定的程序,提高胚胎移植效率及产业化提供技术支撑。用孕酮类海绵栓和Folligon同期发情处理的受体羊同期发情率达90.3%,91.4%的发情羊集中在去栓后20~36h,其中在20~24h之间发情的母羊占发情羊的67.7%,。Folligon在240I.U~260I.U之间对绵羊同期发情处理是适宜剂量。用CIDR对超排母羊同期发情处理,以同期发情开始处理之日计为0d,第15d开始连续4d、每天2次平行注射FSH(Ovagen)。结果表明,Ovagon对半细毛羊超排均获得较好的超排反应。外源孕酮能有效克服由于黄体退化引起的采胚效率降低的现象。成年羊在可用胚获得率(P<0.05)、A级胚率(P<0.05)胚胎退化率(P<0.01)和受精率(P<0.01)方面均显著高于育成羊,胚胎回收率无显著差异(P>0.05)。在平均黄体数、采胚数、可用胚数、退化胚数、未受精卵数方面,成年羊虽然也高于育成羊,但经t-检验分析差异均不显著。腹腔内窥镜和手术法移植的产羔率分别为69.64%和64.20%尽管手术法移植产羔率略低于腹腔内窥镜法,但二者差异不显著(P>0.05)。双胚移植产羔率高于单胚移植,但二者之间差异不显著(P>0.05)。结果表明,孕酮海绵栓—PMSG法用于云南半细毛羊同期发情能够保证大规模绵羊胚胎移植时供体胚胎与受体子宫环境的同步性。随着高效超数排卵技术的建立和腹腔内窥镜技术应用于受体移植,胚胎移植技术将在云南半细毛羊育种计划中发挥越来越重要的作用。     

比利时蓝白花肉牛超数排卵及胚胎移植试验

用FSH +Ctoprostenol药物组合 ,超排处理 1 7头次比利时蓝白花肉牛 ,共采卵 70枚 (头均 4.1 2± 2 .74) ,可用胚 47枚 (头均 2 .76± 2 .30 ) ;以非手术方法移植 34头受体 ,妊娠 1 3头 ,妊娠率 38.2 % ,获 8头犊牛     

供、受体绵羊处理同步性和发情同步差对移植胚胎成活率的影响

研究供受体羊同期发情处理的同步性和发情同步差对移植胚胎成活率的影响。结果:与供体羊同期处理的受体、比供体羊提前1d处理的受体、比供体羊晚一天处理的受体和比供体羊提前2d处理的受体移植胚胎后,移植单胚和双胚胎成活率分别为64.18%和55.44%、56.93%和33.33%、54.5%和43.33%、20.00%和16.67%。同期处理组,均以发情同步差在0~12h内的受体羊妊娠率和胚胎成活率为最高,其值为75.94%和65.74%,其次为同步差在12~24h,受体羊的妊娠率和胚胎成活率分别为61.46%和55.88%;同步差大于24h以上,受体羊的妊娠率和胚胎成活率显著下降。非同期处理组,部分供、受体羊同期发情,并获得57.41%~66.67%的受体羊妊娠率。可见:随着供、受体发情同步差的增大,受体羊的妊娠率和移植胚胎成活率下降,非同期处理的供、受体羊的同期发情在胚胎移植生产中也发挥着重要作用。     

羊生产性胚胎移植的组织与技术程序

从生产实际出发 ,系统论述了羊生产性胚胎移植的组织及技术程序。主要包括 :胚胎移植条件的准备 ;生产场技术助手的培训 ;选择适宜的供、受体羊 ,并加强饲养管理 ;在适宜的季节 ,用宁波激素厂促卵泡素 (FSH) 2 50～ 30 0IU(绵羊 )和 30 0～350IU(山羊 ) ,或用中科院动物所FSH 7.5mg(绵羊 )和 9～ 1 2mg(山羊 ) ,以减量法进行供体超排 ;供、受体比例为 1 :8～ 1 2 ;用炔诺酮阴道栓配合促性腺激素 ,或用氯前列烯醇 (PG)进行受体同期发情处理 ;从供体子宫角手术回收的桑椹胚～早期囊胚 ,移植于受体羊子宫角 ;完整的记录体系     

奶牛胚胎移植引进技术的消化吸收

1986—1990年,本试验用FSH、PGF_2α等激素及非手术采卵或移植方法,对47头黑白花奶牛进行超排采卵,结果超排有效率为93.6％(44/47);头均获可用胚胎数5枚;可用胚胎收得率60％(218/361)。对234头黑白花奶牛进行鲜(冻)胚胎移植,经检胎220头受体牛的受胎结果,鲜胚移植受胎率51.7％(45/81);冻胚移植受胎率42.1％(56/133)。最终年度鲜胚移植受胎率66.7％(14/21),冻胚移植受胎率45.8％(22/48)。一次超排采卵并移植的个体最好水平——可用胚收得率89.5%(17/19),受胎率80％(4/5),繁殖率75％(6/8)。     

波尔山羊腹腔内窥镜鲜胚移植试验

2002年10-11月在山东省东营市蓝海集团绵野公司种羊场使用两种超排药物对40只经产波尔山羊进行超排处理．供体羊有两只未发情．超排有效率为95％(38／40)。共回收胚胎388枚．其中可用胚311枚．每只获胚胎10．21枚(388／38)，平均可用胚8．18枚(311／38)，可用胚率80．15％(311／388)。同期处理受体399只，有320只发情，同期率为80．20％．运用腹腔内窥镜技术移植受体267只．其中44只供体移植双胚。经试情150只受体未返情，受胎率为56．18％(150／267)。     

多胎多浪羊群胚胎移植扩繁试验

(目的)绵羊多胎基因在多浪羊品种群体中携带率较低,为增加携带多胎基因多浪羊群的数量,提高多浪羊的繁殖率和养殖效益,本试验选择携带多胎基因的多浪羊作为供体进行了胚胎移植扩繁试验.(方法)选取经检测携带有多胎基因的种公羊4只、母羊19只,通过同期发情、超数排卵和手术法采卵,腹腔镜移植技术给普通生产群的多浪羊受体移植.(结果)供体平均生产可用胚胎9.26枚(176/19),鲜胚移植受胎率为59.5％,另外制作A级冷冻胚胎57枚.(结论)结果表明胚胎移植技术能够有效地用于携带有多胎基因羊繁殖生产,达到迅速扩群的目的.     

新疆南疆绒山羊胚胎移植试验研究

超数排卵胚胎移植(MOET)技术可以迅速扩繁优良畜种,本试验采用CIDR+FSH+PG方法对经产的绒山羊进行超数排卵胚胎移植,发情羊用产绒量在1kg以上的公羊配种,配种后6d手术法从子宫角冲出桑葚胚,将优质胚胎再经手术移回同期发情的受体羊子宫角内"借腹怀胎",用B超仪进行早期妊娠诊断.结果表明:10只供体绒山羊超排,1...     

影响本地杂交黄牛胚胎移植妊娠率的因素分析

本试验选用本地杂交黄牛作为受体,在同一饲养条件下,利用自然发情的方法,移植黑白花奶牛提供的胚胎,移植结果显示:胚胎发育日龄和受体发情日期同步移植,受胎率44.2%,8天受体移植7天桑葚胚,受胎率38.9%,7天受体移植8天囊胚,受胎率35.5%,三者比较差异不显著(P>0.05)。冻胚分别移植A、B、C级黄体的受体,其受胎率分别为40.4%、37.2%、33.3%,三者差异不显著(P>0.05);而鲜胚移植A、B、C级黄体,受胎率分别为48.6%,40.3%,25.8%,A、B级黄体移植受胎率差异不显著(P>0.05),A、C级黄体差异极显著(P<0.01),B、C级黄体差异显著(P<0.05)。不同胚胎质量比较:一、二、三级胚胎移植受胎率分别为50.5%、42.6、25.2%,三者比较,一级、二级胚胎受胎率差异不显著(P>0.05),但二级和三级差异显著(P<0.05),一级和三级差异极显著(P<0.01)。移植单胚和双胚的受胎率分别为25.2%,40.2%,二者差异显著(P<0.05)。     

海南黑山羊幼畜诱导卵泡发育与体外胚胎移植的应用研究

本研究旨在提高海南黑山羊幼畜诱导卵泡超数发育与体外胚胎移植扩繁后代的应用效率。比较了供体羔羊激素处理方案、羔羊卵母细胞体外成熟体系,并通过幼畜体外胚胎移植扩繁。结果发现,采用间隔12 h对供体羔羊连续6次等剂量肌肉注射FSH,在最后一次注射FSH的同时给予250 IU PMSG,获得的卵泡数、卵母细胞数以及体外受精后胚胎卵裂率均显著高于其他实验组。比较羔羊卵母细胞体外成熟体系发现,200 nM C型利钠肽预孵育4 h然后体外成熟26 h的羔羊卵母细胞,体外受精胚胎的卵裂率和囊胚形成显著优于常规成熟组和其他实验组。此外,通过幼畜体外胚胎移植获得了35只健康后代,平均产羔率达42.9%。综上,本研究对于开展JIVET技术体系在黑山羊种群扩繁的应用具有重要的意义。     

黑白花母牛血浆硫酸雌酮对雌酮浓度比值同超数排卵反应力的关系

成年及青年黑白花母牛28头,用一种高纯度FSH-P制剂,自周期9—13天开始,按常规方法进行超排处理。冲卵失败2头除外,其余26头,平均有黄体6.58±5.44(M±SD)、总卵胚4.19±4.67、可用胚3.65±4.28。在超排处理前,即周期0、1、3、5、7、9各日共6次,自颈静脉采集血样,分离血浆,用放射免疫法分析血浆雌二醇-17β(E_2 -17β)、雌酮(E_1)和硫酸雌酮(E_1S)浓度。统计分析以上3种激素浓度以及不同激素的浓度比值同超排反应力的关系。发现供体的可用胚数同E_1S/E_1、E_2+E_1十E:S/E_1的比值有关,特别是E_1S/E_1值在各组的分布呈现出明显的规律。按可用胚数和黄体数将供体分为3组:组1包含可用胚≥4(全群平均为3.65)、黄体≥4的个体,其中有7/8(87.5％),周期0天E_1S/E_1值>2;组2为可用胚<4、黄体≥4的个体, 其中仅有1/9(11.1％)E_1S/E_1值>2 (P<0.01);组3为可用胚<4、黄体<4的个体,E_1S/E_1值无一定规律。如按E_1S/E_1值分组,组1,13头(50.0％)为E_1S/E_1值>2的个体,共有可用胚82枚,占全群可用胚总数95枚的83.3％,平均每头6.54枚(全群平均3.65);组2亦为13头,为E_1S/E_l<2的个体,总共仅有可用胚13枚,占总数的13.7％(P< 0.01),平均每头仅1枚。如用周期0天E_1S/E_1值预选供体,可望将超排效率提高80％。     

奶牛胚胎移植引进技术的消化吸收总结报告(1986—1990)

1986—1990年利用FSH对136头黑白花奶牛进行超数排卵处理328次,有效率77.7％,采卵成功率91.4％,共获卵1791枚,其中可用胚胎1127枚,可用率为62.9％,平均每次采卵得可用胚4.84±4.66枚。 冷冻保存胚胎1015枚,解冻后胚胎可用率平均为84.6%。1990年将奶牛冷冻胚胎移植给黄牛和杂种牛205头,妊娠85头,妊娠率为41.6％。通过试验,肯定了国产激素的适宜剂量及其可与进口激素相比的超排效果,但同种FSH不同批号间存在差异。对29头供体母牛重复超排处理129次,各次处理间各项指标差异均不显著,获可用胚≥5枚的供体牛比率,在2—3次重复处理中均显著高于首次,指出由于供体对激素反应的个体效应,筛选对激素反应敏感的供体重复超排是可行的。同时探讨了胚胎品质、发育阶段以及黄体等级与移植妊娠率的关系。     

兔的非同期胚胎移植

为了探明胚胎移植可能的异步程度,我们进行了本项试验。试验采用荷兰白色条纹母兔(供体44只,受体54只)。试验时将不同期(±1天)供体的胚胎取出移入排卵3和4天的受体母兔体内(试验组)。对照组为同期移植。 试验结果为,将2日龄胚胎移入10只排卵3天的母兔输卵管后有3只妊娠。其他胚胎     

小鼠体外受精、胚胎培养及胚胎快速冷冻的研究

本文系统研究了小鼠受精卵的体内发育与运行规律 ,卵母细胞的体外成熟与受精、单细胞胚胎培养及胚胎快速冷冻 ,结果如下 :①注射hCG后 1 2～ 2 0h受精卵发育至原核期 ,42～ 48h为 2 -细胞期 ,48～ 6 0h为 4-细胞期 ,6 0～ 6 8h为 8-细胞期 ,以上各期受精卵均处于输卵管中 ;75～ 78h为桑椹胚 ,78～ 80h为致密桑椹胚 ,90～92h为早期囊胚 ,92～ 96h为囊胚 ,以上各期均处于子宫角中 ;②培养液中添加激素 ,能显著提高卵母细胞的体外受精率 ,添加FCS和激素组的体外受精率又显著高于单独添加激素组 ,FCS还能显著提高胚胎发育率 ;③在培养液中添加EDTA ,能有效克服小鼠胚胎的 2 -细胞阻断 ,其 2 -细胞胚的发育率达 1 0 0 % ,8-细胞胚的发育率达55%以上 ;牛、羊上皮细胞培养上清也能有效克服 2 -细胞阻断。添加乳酸钠和丙酮酸钠可使 2细胞与 8细胞的发育率显著提高 ;④以D -PBS +甘油 +蔗糖为冷冻液 ,以D -PBS +蔗糖为稀释液 ,对小鼠胚胎进行快速冷冻 ,桑椹胚的存活率为 6 9.3% ,早期囊胚的存活率为 6 0 .4%。以上研究为建立小鼠胚胎库提供了基础