酸性罗氏培养基加大豆汁快速培养结核分枝杆菌的研究

结核分枝杆菌生长缓慢，营养要求比较高。为了能较快地分离出结核分枝杆菌，国内外科研机构和临床试验室都在不断探索，改良、研制、合成组分不同的结核分枝杆菌分离培养基。我们发现用大豆汁取代蒸馏水制备的酸性罗氏培养基培养结核分枝杆菌生长较快，菌落典型，时间大为缩短，具有一定的实用价值，现报告如下。     

纤支镜灌洗液经变色液体培养基快速培养结核分枝杆菌对涂阴肺结核诊断价值的研究

目的评价纤维支气管镜小量肺泡灌洗液经变色液体培养基快速培养结核分枝杆菌对涂阴肺结核的诊断价值。方法对40例涂阴肺结核患者分别行纤支镜小量肺泡灌洗、刷检或活检，将灌洗液经变色液体培养基快速培养结核分枝杆菌。结果纤支镜肺泡灌洗40例，灌洗液培养出结核分枝杆菌17例，阳性率42．5％，刷检32例，阳性5例，活检8例，阳性3例，刷检＋活检阳性率20％，P〈0．05有统计学意义。快速培养检出时间平均13．5天。结论纤支镜灌洗液经变色液体培养基快速培养结核支杆菌，可提高涂阴肺结核中结核分枝杆菌的检出率，缩短了细菌培养检出时间，值得应用     

结核分枝杆菌快速培养方法的建立及临床应用初步观察

目的 观察结核分枝杆菌在自制培养基上的生长情况，建立快速培养方法。方法将改良罗氏培养基的成分进行改进，自制5种培养基，每种3支，每支接种菌量10-3mg，观察结核分枝杆菌标准株生长情况。并以第5号培养基3种成分不同浓度做正交叉实验，得出最佳浓度。收集临床标本，在自制培养基上培养观察。结果 结核分枝杆菌标准株在5种自制培养基上，菌落开始生长天数及典型菌落出现天数均比改良罗氏培养基短，两者差异均具有显著性（P〈O．01）。第5号培养基以25％牛肉浸液，20％当归浸液，20％党参浸液的浓度最佳，结核分枝杆菌标准株接种后第3～5d开始生长，第7～9d出现典型的“菜花状”菌落。临床标本接种在改良罗氏及自制培养基上，阳性分离率差异无显著性（f—O．09，P〉O．05），两种培养基上典型菌落形成的平均天数差异有显著性（f一6．828，P〈O．001）。结论 结核分枝杆菌标准株在自制第5号培养基上生长快，培养时间短，为该菌培养提供了一种新的快速培养基，在临床上有一定的实用价值，值得进一步研究、推广。     

BACTEC MGIT 960和BACT/ALERT 3D系统快速培养和鉴定痰中抗酸杆菌

目的对抗酸染色阳性痰行分枝杆菌培养和鉴定。方法采用萋一尼氏抗酸染色法对临床诊断肺结核患者的晨痰涂片直接镜检，抗酸染色阳性痰经BACTEC960和BACT/ALERT3D系统进行分枝杆菌培养，分别经对硝基苯甲酸（PNB）和噻吩-2-羧基肼（TCH）培养基生长试验行分枝杆菌菌群和结核分枝杆菌复合群菌种鉴定。结果抗酸染色阳性痰标本的分枝杆菌培养阳性率100％，大多数为结核分枝杆菌（9／10），少数为非结核分枝杆菌（1／10），最快6天即可报告分枝杆菌阳性培养。结论BACTEC 960和BACT／ALERT3D系统具有快速培养分枝杆菌作用，抗酸染色阳性痰有必要行分枝杆菌培养和鉴定，有利于肺结核与非结核分枝杆菌病的鉴别诊断、结核分枝杆菌菌种鉴定和抗结核药物敏感性试验。     

抗结核药物对非结核分枝杆菌菌种鉴定的试验

报告２２种非结核分枝杆菌典型株对１２种抗结核药物的敏感性试验结果,２２种非结核分枝杆菌在食ＴＨ１３２１,ＴＢ１,ＰＡＳ,ＩＮＨ培养其呈现不同程度耐药性,胞内分枝杆菌等１３种非结核分枝杆菌在含ＳＭ,ＥＭＢ,ＲＦＰ培养基呈现不同程度耐药性,鸟分枝杆菌等６种非结核分支杆菌在含ＮＦＬＸ,ＯＦＬＸ,ＣＦＬＸ培养基呈现不同程度耐药性,海分枝杆菌等３种非结核分枝杆菌在含ＣＰＭ培养其呈现不同程度耐药性,龟分枝杆菌     

发展中国家使用固体和液体培养基进行结核分枝杆菌培养的费用和成本效益研究

背景：发展中国家已经提出通过开展结核分枝杆菌（以下简称结核分枝杆菌）培养来加强结核病（TB）控制工作。目的：研究赞比亚国家结核病参比实验室自制的和商业生产的改良罗氏培养基（HLJ和CLJ）,以及自动和手工的液体培养基（AMGIT和MMGIT）费用和成本效益。方法：费用是从供应商的角度根据每月平均结核分枝杆菌培养标本量来进行估算的。成本效益的估计是建立在研究期间收益。结果：4种培养方法,每个标本培养成本相当（均在28-32美元之间）。发现1个结核分枝杆菌阳性样本,使用手动液体培养MMGIT、自动液体培养AMGIT、商业生产的改良罗氏培养CLJ和实验室自制的改良罗氏培养HLJ,成本分别为197美元,202美元,312美元和340美元。4种培养方法,当培养标本量达到最大时,发现1个结核分枝杆菌阳性样本成本均高于95美元。当仅对涂片阴性的样本进行检测时,应用手动液体培养MMGIT确定1个额外的结核分枝杆菌阳性样本需要487美元,其他方法价格更高。结论：基于成本效益的理由,液体培养基相比传统的固体培养基更好,特别是液体培养基的产量大大高于传统罗氏培养基。结果表明：总体上,结核分枝杆菌培养成本较高,将培养扩展到标本量较低的基层防治机构可能会导致更高的成本。     

酸性罗氏培养基加大豆汁快速培养结核分枝杆菌的研究

结核分枝杆菌生长缓慢,营养要求比较高。为了能较快地分离出结核分枝杆菌,国内外科研机构和临床试验室都在不断探索,改良、研制、合成组分不同的结核分枝杆菌分离培养基^[1]。我们发现用大豆汁取代蒸馏水制备的酸性罗氏培养基培养结核分枝杆菌生长较快,菌落典型,时间大为缩短,具有一定的实用价值,现报告如下。     

西安市结核病的病原学调查

目的调查西安市结核病的分枝杆菌菌种类型及其分布。方法采用抽样调查方法收集结核病患者的痰标本及其背景资料,用痰涂片、痰培养以及PCR方法检测,用鉴别培养基对分离菌株进行菌种鉴定。结果共收集574例拟诊结核病病例,实验室检测1602份痰标本。采用痰涂片、痰培养和PCR3种方法联合应用,阳性者260例,分枝杆菌检测阳性率45.30。137例分枝杆菌培养阳性者中,结核分枝杆菌复合体占73.72,其中结核分枝杆菌和牛分枝杆菌分别为67.88和5.84;11.68为非结核分枝杆菌,14.60为混合感染,其中11.68为结核分枝杆菌与牛分枝杆菌,2.92为结核分枝杆菌与非结核分枝杆菌混合感染。结论西安市结核病的致病菌复杂,包括结核分枝杆菌、牛分枝杆菌和非结核分枝杆菌,尤其是非结核分枝杆菌混合感染应予以高度重视。     

以脂肪酸合成酶FabH为靶标的化合物体外抗结核作用的初步研究

目的研究结核分枝杆菌脂肪酸合成酶FabH为靶标的化合物的体外抗结核活性，研制新的高效、安全的抗结核药物。方法以平板滤纸法测定化合物对草分枝杆菌的抑菌圈，以试管抑菌法检测化合物对结核分枝杆菌药物敏感株和耐多药分离株的抑制作用。结果18种化合物在500μmol／L浓度时对草分枝杆菌的抑菌圈为1．8～2．4cm，其中7种化合物在250μmol／L和125μmol／L浓度时对草分枝杆菌的抑菌圈为1．5～2．2cm。结核分枝杆菌H37Rv标准株在分别含3mmol／L的18种化合物的培养基上培养2周时，绝大多数含化合物培养基上未见细菌生长；培养4周时，No．115、No．131、No．128、No．129、No．137化合物的抑菌作用较明显。结核分枝杆菌耐多药分离株HB240在分别含3mmol／L的11种化合物的培养基上培养2周和4周时，No．115化合物均显示明显的抑菌作用。结论以脂肪酸合成酶FabH为靶标的大多数化合物在体外都具有不同程度的抗结核活性，尤其是No．115化合物对草分枝杆菌、结核分枝杆菌敏感株和耐药株都具有明显的抑制作用。     

永磁场对结核分枝杆菌生长影响的初步观察

近年来,不少学者致力于结核分枝杆菌快速培养的研究,但大多着眼于培养基本身的改变,即需加入若干种特殊的成份^[1-3]。我们在常规的改良罗氏培养基的基础上,将一定强度的永磁场作用于结核分枝杆菌,收到了明显的培养效果,现报告如下。     

120例矽肺结核患者结核分枝杆菌L型致病情况研究

目的探讨研究120例矽肺结核患者结核分枝杆菌L型致病情况的价值。方法对矽肺结核组和矽肺患者，分别进行痰结核分枝杆菌和痰结核分枝杆菌L型培养，并对结果进行对照观察。结果矽肺结核120例痰结核分枝杆菌培养阳性14例，阳性率11．6％，同时出现结核分枝杆菌L型培养阳性10例，占71．4％；痰结核分枝杆菌L型培养阳性58例，阳性率48％（P〈0．01）。结论结核分枝杆菌L型培养方法方便快速，能提高结核分枝杆菌的检出率，对矽肺结核的早期诊断及减少矽肺结核复发的漏、误诊有肯定的价值。     

牛分枝杆菌肺结核17例报告

为提高对牛分枝杆菌结核病的认识，现将它的分布情况、诊断、治疗探讨如下。1材料与方法1.1观察对象1993年7月～1997年10月本所门诊因症就诊病例。1.2细菌学检验1.2.1采用厚涂片法（美尼氏）1.2.2痰菌培养痰标本经酸处理，接种于改良罗氏（L—J）培养基。1.2.3菌型鉴别人、牛型结核分枝杆菌鉴别，采用对硝基苯甲酸（PNB）培养基（0·sing／ml）和喷吩谈酸动（TCH、T。H，sing／ml）鉴别培养基，用以区分人、牛型结核分枝杆菌与非结核分枝杆菌，并辅以硝酸还原，荣酸产生等其他特征。1.2.4耐药性测定以绝对浓度法间接法测定全部分离株对5…     

多位点PCR用于安徽391株分枝杆菌分离株的快速鉴定

摘要：目的 评价多位点PCR用于分枝杆菌临床分离株快速鉴定效果。方法 收集从临床结核病患者分离到的抗酸染色阳性的培养物,经PNB/TCH鉴别培养基进行培养鉴定后,采用聚合酶链反应(PCR)对16SrRNA、Rv0577、IS1561、Rv1510、Rv1970、Rv3877/8和Rv3120 基因位点进行扩增,鉴定至种,再经rpoB-PRA、hsp65和rpoB基因测序进行验证。结果 共对391株分枝杆菌临床分离株应用多位点PCR进行了鉴定,结果显示结核分枝杆菌378株,非洲分枝杆菌I型6株,非结核分枝杆菌7株。7株非结核分枝杆菌分别为鸟分枝杆菌1株,马赛分枝杆菌2株,胞内分枝杆菌4株。而PNB/TCH鉴别培养基培养鉴定结果为结核分枝杆菌复合群385株,非结核分枝杆菌6株。多位点PCR结果与rpoB-PRA、hsp65和rpoB基因测序结果一致。结论 多位点PCR技术鉴定分枝杆菌菌种结果准确可靠,且具有简便和快速等优点,有较大的分子流行病学应用价值,且对于临床诊断和治疗都具有重要意义。     

以脂肪酸合成酶FabH为靶标的化合物体外抗结核作用的初步研究

目的研究结核分枝杆菌脂肪酸合成酶FabH为靶标的化合物的体外抗结核活性,研制新的高效、安全的抗结核药物。方法以平板滤纸法测定化合物对草分枝杆菌的抑菌圈,以试管抑菌法检测化合物对结核分枝杆菌药物敏感株和耐多药分离株的抑制作用。结果18种化合物在500μmol/L浓度时对草分枝杆菌的抑菌圈为1.82.4 cm,其中7种化合物在250μmol/L和125μmol/L浓度时对草分枝杆菌的抑菌圈为1.52.2 cm。结核分枝杆菌H₃₇Rv标准株在分别含3mmol/L的18种化合物的培养基上培养2周时,绝大多数含化合物培养基上未见细菌生长;培养4周时,No.115、No.131、No.128、No.129、No.137化合物的抑菌作用较明显。结核分枝杆菌耐多药分离株HB240在分别含3mmol/L的11种化合物的培养基上培养2周和4周时,No.115化合物均显示明显的抑菌作用。结论以脂肪酸合成酶FabH为靶标的大多数化合物在体外都具有不同程度的抗结核活性,尤其是No.115化合物对草分枝杆菌、结核分枝杆菌敏感株和耐药株都具有明显的抑制作用。     

空调对结核分枝杆菌医院内传播的影响

目的 探索医院空调对结核分枝杆菌院内传播的影响。方法 用罗氏固体平板培养基，分别采集医院内中央空调控温区、分体空调控温区和无空调区的空气标本，经36．5℃培养28d。根据菌落形态、抗酸染色特性作出初步鉴别，然后经一系列生化试验确定结核分枝杆菌。结果 结核分枝杆菌检出率中央空调控温区为31．1％；分体空调控温区为15．6％；不用空调控温区为4．4％，相互间有明显差异。结论 医院空调特别是中央空调对结核分枝杆菌院内传播有一定的促进作用，应该引起必要的重视。     

沿海地区11例手部分枝杆菌感染分析

目的探讨沿海地区手部非结核分枝杆菌感染的体外培养技术和要领，为临床确诊，治疗提供直接证据。方法对2001年6月－2004年9月收治的28例可疑手部分枝杆菌感染作组织块匀浆后的涂片抗酸染色，分枝杆菌培养，分枝杆菌生化分型，分枝杆菌的核酸测序分型。结果分枝杆菌培养阳性11例，具体为海分枝杆菌占8例，偶发1例，鸟1例，结核1例，其中直接抗酸染色检查阳性2例。结论手部慢性可疑分枝杆菌感染患者应同时做抗酸染色及分枝杆菌培养。非结核分枝杆菌感染尤其是海分枝杆菌远比结核分枝杆菌常见，是沿海地区手部非典型感染的主要致病因素。在分枝杆菌培养时必须同时在30℃、35℃两种温度下进行培养。     

MPB64抗原检测快速诊断结核分枝杆菌的临床价值

目的比较痰涂片抗酸染色、改良酸性罗氏培养、MPB64的免疫胶体金法用于检测结核分枝杆菌特异性的分泌蛋白质MPB64,评价MPB64的免疫胶体金法在结核分枝杆菌快速检测中的应用价值。方法选取438例确诊肺结核患者痰液,进行痰涂片抗酸染色、7H9液体培养基和改良酸性罗氏培养基培养、基于MPB64的免疫胶体金法检测,对结果进行比较分析。并选取痰涂片确认为阳性的标本33例,用米氏7H9液体培养和基于MPB64的免疫胶体金法进行检出时间对比。结果痰涂片阳性率为14.8%,罗氏培养阳性率为20.7%,7H9液体培养阳性率24.8%,MPB64的免疫胶体金法阳性率为25.1%。基于MPB64的免疫胶体金法在培养的第15天检出32例阳性;而单纯的7H9液体培养加抗酸染色检测法在第15天只检出11例阳性。结论7H9液体培养配合基于MPB64的免疫胶体金法可以作为一种较为敏感和特异的检测结核分枝杆菌感染的方法,并可以有效的区分结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌。     

MPB64分泌蛋白检测鉴定结核分枝杆菌复合群的应用研究

目的 对应用MPB64分泌蛋白检测鉴定结核分枝杆菌复合群进行方法学评价.方法 对临床分离菌株,取BacT/ALERT 3D系统的液体培养液或改良罗氏固体培养基分离培养菌落室温静置约2 h、浊度为1麦氏单位的生理盐水菌悬液0.1 ml为检测样本,应用胶体金标记抗MPB64单克隆抗体采用免疫层析色谱法进行MPB64分泌蛋白检测,而后与菌种鉴定结果相比较.对参考菌株,则同时采用两种样本进行检测.结果 对23株分枝杆菌参考菌株、267株临床分离菌株进行了检测.①对于参考菌株的两种样本,MPB64检测结果均为:结核分枝杆菌、牛分枝杆菌、田鼠分枝杆菌菌株阳性,其他20株非结核分枝杆菌为阴性.分群鉴定准确度为100%.②在111株BacT/ALERT 3D系统分离培养临床株中,55株为结核分枝杆菌,其中51株MPB64检测阳性;56株为非结核分枝杆菌,其中54株MPB64检测阴性.分群鉴定准确度为94.59%.③在156株改良罗氏培养基分离培养临床菌株中,121株为结核分枝杆菌,其中115株MPB64检测阳性;35株为非结核分枝杆菌,MPB64检测全部阴性.分群鉴定准确度为96.15%.④对于所有研究样本,应用MPB64分泌蛋白检测鉴定结核分枝杆菌复合群的敏感度、特异度与准确度分别为94.41%、98.20%和95.86%.结论 应用MPB64分泌蛋白检测鉴定结核分枝杆菌复合群是一种准确、快速、简便而又不需要任何仪器设备的实用型方法,值得临床推广应用.     

结核分枝杆菌胶体金法快速鉴别试剂盒的临床应用观察

目前,传统的分枝杆菌菌种鉴定方法需在改良罗氏L-J培养基、硝基苯甲酸PNB和2-噻吩羧酸肼(TCH)鉴别培养基上初步鉴定结核分枝杆菌(MTb)和非结核分枝杆菌(MOTT)后,再观察细菌菌落形态、生长速度、生长温度和色素,并进行一系列生化试验,操作繁琐、费时,影响因素多;其他,如BACTEC-TB系统的NAP试验和Gen-Probe系统的结核分枝杆菌直接检测(MTD)试验等也可快速鉴别结核分枝杆菌复合群(MTC)和MOTT,但试剂仪器价格昂贵,难以在普通实验室广泛开展。[1]而我们引进的日本旨在检测抗原为结核分枝杆菌分泌的特异性蛋白MPB64的结核分枝杆菌胶体金快速鉴别试剂盒对此进行比较试验,观察其优劣。材料和方法一、材料1.标本来源:收集2006年10月—2007年6月来自本院住院和门诊痰初代分离分枝杆菌阳性标本100份。2.试剂盒:由杭州创新生物检控技术有限公司提供。二、方法1.分枝杆菌涂片和培养检测:按照中国防痨协会制定的《结核病诊断细菌学检验规程》[2]的方法进行。2.传统菌种鉴定实验:分枝杆菌菌株经对硝基苯甲酸(PNB,500ug/ml)培养生长、28℃生长、耐热触酶实验,区分结核分枝杆菌群(MTBC...     

二种结核分枝杆菌药物敏感试验方法的评估

结核分枝杆菌药物敏感试验通常采用L-J常规法中的绝对浓度法,即在固体改良罗氏培养基中加入各种抗结核药物,药物分低浓度和高浓度两种浓度,根据细菌在培养基上的生长情况判断药物敏感试验的结果。目前,许多单位采用BACTEC法,即在12B培养基中加入各种抗结核药物,根据结核分枝杆菌的生长指数 (GI值)判断药物敏感试验的结果,此法与比例法有所相同。本院实验室对300例住院初、复治病人的痰标本分离培养后的结核分枝杆菌,进行了上述二种方法的药物敏感试验,观察二种方法对抗结核药物耐药性的符合率及耐药性的检出率。