灵芝多糖对小鼠巨噬细胞内三磷酸肌醇和二酰基甘油的作用研究

为研究灵芝多糖（ＧＬＢ７） 对小鼠腹腔巨噬细胞（ ＭΦ） 三磷酸肌醇（ＩＰ３） 和二酰基甘油（ＤＡＧ） 的作用,确定其对ＭΦ信号转导途径,采用细胞培养、放射免疫分析及离子交换层析和薄层层析法测定了小鼠腹腔ＭΦ中ＩＰ３ 和ＤＡＧ 的变化。结果显示ＧＬＢ７ 能引起小鼠ＭΦ中ＩＰ３ 和ＤＡＧ 浓度升高。ＩＰ３ 的达峰时间为３０ｓ,百日咳毒素（ＰＴＸ） 对此现象有抑制作用;ＤＡＧ 的合成出现两个峰,第一个峰迅速短暂,峰值位于３０ｓ,第二个峰是持续近２ｍｉｎ 的迟发峰。表明ＩＰ３／Ｃａ２ ＋ 和ＤＡＧ／ＰＫＣ 两条信息途径均参与了灵芝多糖对ＭΦ的免疫调节     

灵芝多糖对小鼠T细胞三磷酸肌醇和二酰基甘油体外作用的研究

 目的 研究灵芝多糖（GLB₇）对小鼠T细胞三磷酸肌醇（IP₃）和二酰基甘油（DAG）的作用,确定其对T细胞信号转导途径。方法 采用细胞培养、放射免疫分析、离子交换层析和薄层色谱法测定小鼠脾脏T细胞中IP₃和DAG的变化。结果 GLB₇引起小鼠T细胞中IP3和DAG浓度升高。IP₃的达峰时间为30 s,百日咳毒素（PTX）对此现象有抑制作用;DAG的合成出现两个峰,第一个峰迅速短暂,峰值位于30 s,第二个峰是持续时间较长的迟发峰。GLB₇对活化的T细胞中IP₃和DAG未产生明显影响。结论 IP₃/Ca²⁺和DAG/PKC两条信息途径均参与了灵芝多糖对T细胞的免疫调节。     

补脾健脺饮干预2型糖尿病大鼠糖脂代谢的实验研究

目的:观察补脾健脺饮对2型糖尿病大鼠糖脂代谢的影响。方法:制成糖尿病大鼠模型,分成正常组、模型组、盐酸吡格列酮组、补脾健脺饮高剂量组、补脾健脺饮中剂量组、补脾健脺饮低剂量组,4周后检测血糖、血脂等。结果:补脾健脺饮对链脲佐菌素致大鼠2型糖尿病模型具有降低葡萄糖耐量和改善血脂的作用。结论:补脾健脺饮对糖尿病大鼠糖脂代谢有明显改善作用。     

以天然产物双半乳糖基二酰甘油酯为乳化剂的亚微乳的制备及稳定性研究

目的：探讨双半乳糖脂二酰甘油酯(digalactosyl diglyceride,DGDG)作为一种乳化剂使用的可行性。方法：以香叶油为模型药物,油中乳化法制备初乳,通过单因素考察优化制备工艺,采用星点设计-效应面法(central composite design-response surface methodology,CCD-RSM)对处方进行优化,并对其稳定性进行初步研究。结果：确定的最终制备工艺为：60 ℃,油中乳化法制备初乳,于组织匀浆机中匀浆10 min,高压均质于80 Pa下循环10次,0.22 μm微乳滤膜滤过灭菌,充氮灌封即得。最优处方为：DGDG用量1.6%;大豆油用量1.1%;油酸钠用量0.16%。其中香叶油用量为0.3%。所得亚微乳外观细腻洁白,所制3批样品粒径为168.0～169.3 nm,Zeta电位为-25.53～24.90 mV,pH 8.48～8.52,最佳处方的验证结果与预测值相差1.8%。在高温、光照条件下稳定性良好。结论：DGDG可作为香叶油亚微乳的乳化剂使用。     

以天然产物双半乳糖基二酰甘油酯为乳化剂的亚微乳的制备及稳定性研究

目的：探讨双半乳糖基二酰甘油酯(digalactosyl diglyceride,DGDG)作为一种乳化剂使用的可行性。方法：以香叶油为模型药物,油中乳化法制备初乳,通过单因素考察优化制备工艺,采用星点设计-效应面法(central composite design-response surface methodology,CCD-RSM)对处方进行优化,并对其稳定性进行初步研究。结果：确定的最终制备工艺为,60 ℃,油中乳化法制备初乳,于组织匀浆机中匀浆10 min,高压均质于80 Pa下循环10次,0.22 μm微孔滤膜滤过灭菌,充氮灌封即得。最优处方为：DGDG用量1.6%;大豆油用量1.1%;油酸钠用量0.16%。其中香叶油用量为0.3%。所得亚微乳外观细腻洁白,所制3批样品粒径为168.0～169.3 nm,Zeta电位-25.53～24.90 mV,pH 8.48～8.52,最佳处方的验证结果与预测值相差1.8%。在高温、光照条件下稳定性良好。结论：DGDG可作为香叶油亚微乳的乳化剂使用。     

褐藻羊栖菜化学成分的研究

目的 研究褐藻羊栖菜Sargassum fusiforme的化学成分.方法 采用硅胶柱色谱、ODS柱色谱和制备液相色谱进行分离,根据理化性质和波谱数据鉴定结构.结果 从羊栖菜乙醇提取物正己烷部位中分离得到6个甾醇类化合物和2个糖脂类化合物,分别鉴定为岩藻甾醇(Ⅰ)、24R,28R-和24S,28S-环氧-24-乙基胆甾醇(Ⅱ)、24-氢过氧基-24-乙烯基胆甾醇(Ⅲ)、29-氢过氧基豆甾-5,24(28)-二烯-3β醇(Ⅳ)、(24S)-5,28-豆甾二烯-3p,24-二醇(Ⅴ)、(24R)-5,28-豆甾二烯-3p,24-二醇(Ⅵ)、1-O-十四碳酰基-3-O-(6'-硫代-a-D-脱氧吡喃葡萄糖基)甘油(Ⅶ)、1-O-十六碳酰基-3-O-(6'-硫代-a-D-脱氧毗喃葡萄糖基)甘油(Ⅶ).结论 化合物Ⅳ、Ⅷ和Ⅶ为首次从马尾藻属海藻中分离得到,化合物Ⅱ和Ⅲ为首次从羊栖菜中分离得到;首次利用正相制备液相色谱技术从羊栖菜中分离得到马尾藻甾醇的24S(Ⅴ)和24R(Ⅵ)异构体.     

糖脂清颗粒对2型糖尿病大鼠心肌组织AT1R表达影响的实验研究

目的:观察糖脂清颗粒对2型糖尿病大鼠心肌组织血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)蛋白和m RNA表达的影响,探讨其干预2型糖尿病大鼠心肌纤维化的机制。方法:雄性SD大鼠,采用高糖高脂饲料和一次性小剂量(30mg/kg)2%链脲佐菌素(STZ)溶液腹腔注射制作2型糖尿病模型。将模型大鼠分为模型组、厄贝沙坦组和糖脂清颗粒高、中、低剂量组,另取5只正常大鼠设为正常组,分别给药或生理盐水8周后,检测心肌组织AT1R蛋白及m RNA的表达。结果:糖脂清高、中剂量组大鼠心肌组织AT1R蛋白及m RNA表达明显低于模型组,糖脂清低剂量组AT1R m RNA表达也较模型组显著降低。结论:糖脂清颗粒通过抑制心肌组织AT1R蛋白及m RNA的表达,抑制糖尿病大鼠心肌纤维化的发展。     

基于内源性大麻素探讨皂术抗纤方治疗肝纤维化大鼠的作用机制

目的:基于内源性大麻素研究皂术抗纤方对肝纤维化大鼠的药理效应及其作用机制.方法:按照随机数字表法将40只Wistar雄性大鼠随机分为正常组、模型组、皂术抗纤方组和安络化纤丸组,每组10只.模型组、皂术抗纤方组和安络化纤丸组给予四氯化碳(CCl4)腹腔注射8周,复制肝纤维化模型.第5～8周,皂术抗纤方组、安络化纤丸组分别...     

獾子油的化学成分研究

目的: 研究獾子油的化学成分及HPLC-ELSD法测定獾子油与猪油的区别,为獾子油的质量标准研究奠定基础。 方法: 采用硅胶柱色谱,制备薄层色谱法对獾子油进行分离纯化,波谱法进行结构鉴定。采用HPLC对獾子油和猪油的指纹图谱进行比较,色谱条件为Phenomenex Hyper C₁₈色谱柱,流动相CH₃CN-CH₂CL₂(75:25),流速1.0 mL·min^-1,柱温30 ℃,采用蒸发光散射检测器,漂移管温度70 ℃,氮气压力3.5 bar。 结果: 从獾子油中分离得到2个甘油酯类化合物。结构鉴定为三油酸甘油酯(1)和1-亚油酸-2,3-二油酸甘油酯(2)。獾子油与猪油在化学成分上存在差别。 结论: 化合物1,2均为首次从该动物油脂中分离得到。     

糖脂平颗粒剂对2型糖尿病肥胖大鼠胰岛素抵抗影响的实验研究

目的:观察糖脂平(TZP)颗粒剂对2型糖尿病(2DM)肥胖大鼠胰岛素抵抗(IR)的影响.方法:采用高脂饮食和链脲佐菌素(STZ)制造2DM肥胖大鼠IR模型,设立空白组、阳性药物对照组、TZP高中低剂量组,观察大鼠体重、Lee's指数、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、胰岛素抵抗指数(IRI)、胰岛素敏感指数(ISI)的变化.结果:TZP颗粒剂能明显降低2DM肥胖大鼠的体重、Lee's指数及TG、TC、LDL-C、IRI水平和明显升高ISI,而对HDL-C无明显作用.结论:TZP颗粒剂可在一定程度上调节血脂代谢,从而有效地改善了2DM肥胖大鼠的IR状态.     

海蒿子含氮有机化学成分研究

目的对海蒿子Sargassum pallidum全草进行含氮有机化学成分研究。方法采用D101大孔吸附树脂柱色谱、正相硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、ODS柱色谱、高效液相色谱等方法对含氮有机化学成分进行分离纯化,并根据其理化性质和核磁共振谱、质谱等光谱学技术鉴定所分离化合物的结构。结果从海蒿子全草70%乙醇提取部位分离得到了10个化合物,分别鉴定为(-)-伞形香青酰胺(1)、(-)-栝楼酯碱(2)、(-)-金色酰胺醇酯(3)、核黄素(4)、β-腺苷(5)、2′-Ο-甲氧基尿嘧啶核苷(6)、环(L-丙氨酸-L-脯氨酸)(7)、胸腺嘧啶核苷(8)、1-(β-D-ribofuranosyl)-1H-1,2,4-triazone(9)、2,3-二氢-4(1H)-喹诺酮(10)。结论化合物1、2、4~7、9为首次从马尾藻属植物中分离得到。     

羊栖菜多糖对S180荷瘤小鼠红细胞相关生化功能影响的研究

 目的分析羊栖菜多糖对S₁₈₀荷瘤小鼠红细胞相关生化功能影响的研究。方法建立肿瘤动物模型,分高、中、低剂量腹腔给予羊栖菜多糖7 d,采集红细胞,制备红细胞悬液,运用激光共聚焦扫描技术测定荷瘤小鼠红细胞内[Ca²⁺]的变化;运用相关试剂盒测定红细胞膜表面唾液酸含量和Na⁺,K⁺-ATPase及Ca²⁺,Mg²⁺-ATPase活性的变化;用流式细胞仪分析红细胞膜电位水平的变化;采用高效毛细管电泳法测定红细胞电泳合淌度的变化。结果羊栖菜多糖能降低荷瘤小鼠红细胞内[Ca²⁺],升高膜表面唾液酸的含量,增强膜表面Na⁺,K⁺-ATPase及Ca²⁺,Mg²⁺-ATPase的活性,提高红细胞膜电位水平,提高红细胞的电泳合淌度。结论羊栖菜多糖可调节或恢复S₁₈₀荷瘤小鼠红细胞多种生理生化功能。     

海藻-甘草含药血清对M22诱导的Nthy-ori-3-1细胞增殖的作用研究

目的 探讨海藻-甘草含药血清对人甲状腺正常细胞Nthy-ori-3-1增殖的作用,为进一步研究海藻与甘草配伍抗甲状腺肿大的作用机制奠定基础。方法 体外培养Nthy-ori-3-1细胞,使用不同浓度的促甲状腺激素受体人单克隆抗体M22作用于Nthy-ori-3-1细胞不同时间,观察M22作用的最佳浓度及时间。制备海藻-甘草含药血清,M22刺激细胞24 h后,分别给予5%、10%、15%、20%海藻-甘草含药血清干预24 h,采用CCK-8法检测各组细胞增殖情况。流式细胞术检测细胞周期分布和凋亡情况;透射电镜观察细胞形态;免疫荧光检测微管相关蛋白轻链3(microtubule-associated protein light chain3,LC3)表达情况;Western blotting检测Beclin1蛋白表达。结果 M22明显刺激Nthy-ori-3-1细胞增殖,0.125μg/mL的M22作用24 h时促增殖作用最佳（P<0.01）。经海藻-甘草含药血清干预后,细胞增殖明显抑制（P<0.05、0.01）,细胞呈现明显的凋亡形态学变化,G0/G1期细胞比例明显升高（P&l...     

连翘化学成分与抗氧化活性研究

目的:对中药连翘进行化学成分的分离与鉴定,并对连翘酯苷A的抗氧化活性进行研究.方法:连翘85％的乙醇提取物经D101大L树脂,以水和不同体积分数乙醇洗脱,60％与30％乙醇洗脱部分采用硅胶柱色谱、凝胶色谱和制备液相等手段纯化;利用理化和谱学分析(NMR、ESI-MS)的方法进行结构鉴定.利用DMPD+法和DPPH法测试连翘酯苷A的抗氧化活性.结果:分离得6个化合物,分别鉴定为连翘酯苷A(forsythoside A)(1)、木通苯乙醇B(calceolarioside B)(2)、芦丁(rutin) (3)、连翘苷(forsythin) (4)、异橄榄脂素(isoolivil) (5)、胡萝h苷(daucosterol)(6).结论:连翘酯苷A有很好的抗氧化活性.     

甘肃省黄芪细菌性叶斑病病原的分离和鉴定

目的：明确甘肃省黄芪细菌性叶斑病的病原。方法：通过植物病原细菌形态学、生理生化指标测定,以及16S rDNA、rpoB和rpoD基因位点联合构建系统发育树,对黄芪细菌性叶斑病病原菌进行鉴定。结果：病原菌在营养琼脂（NA）培养基上培养24 h后菌落直径为1～3 mm,圆形或近圆形,乳白色、光滑凸起、半透明状、边缘整齐;革兰染色反应为阴性,好氧型,在10～40℃均能生长,在pH为5.7、6.8的环境中生长良好,在2%、5%NaCl环境下可生长;可利用葡萄糖、木糖、甘露糖、柠檬酸盐及硝酸盐;在代谢活动中可产生酪氨酸酶、过氧化氢酶、苯丙氨酸脱氨酶;分解色氨酸,液化明胶;不产生卵磷脂酶、淀粉水解酶及乙酰甲基甲醇。致病性测定初步验证了黄芪细菌性叶斑病的致病菌;16S rDNA、rpoB和rpoD基因序列分析进一步确定引起黄芪细菌性叶斑病的病原菌为绿黄假单胞菌Pseudomonas viridiflava(Burkholder)Dowson。结论：明确了甘肃省黄芪细菌性叶斑病的病原,为黄芪细菌性叶斑病的有效防治提供参考。     

根腐菌和锈腐菌对人参总皂苷的化学趋向性响应研究

目的研究人参根腐菌Fusarium solani和人参锈腐菌Cylindrocarpon destructans对人参总皂苷的化学趋向性响应。方法采用平板法和孢子悬滴萌发法分别测定了2种病原菌及其孢子在3种趋化参数(质量浓度、温度和p H值)条件下对人参总皂苷的化学趋向性响应。结果人参根腐菌对低质量浓度的人参总皂苷表现出较强的化学趋向性,趋化移动指数(CMI)为1.294 8,病原菌孢子萌发率(SGR)为66%,趋化生长速率(CGR)为0.533,病原菌菌丝生长量(MG)为0.522 0 mg/m L;人参锈腐菌则对中质量浓度的人参总皂苷表现出较强的化学趋向性,CMI为1.255 6,病原菌SGR为63%,CGR为0.465,MG为0.449 4 mg/m L。结论低、中质量浓度(0.2~20 mg/L)的人参总皂苷对人参根腐菌的化学趋向性有促进作用,人参锈腐菌对4种质量浓度的人参总皂苷均具有化学趋向性响应,而且受此趋化影响下的2种病原菌的SGR、CGR和MG也都得到了显著的提高,但都随皂苷质量浓度的增加而减弱。     

基于UPLC定量指纹图谱与UPLC-QE-Plus-MS/MS技术的吴茱萸（石虎）标准汤剂量值传递研究

目的 借助UPLC定量指纹图谱与UPLC-QE-Plus-MS/MS技术,研究吴茱萸Euodiae Fructus[石虎Euodia rutaecarpa(Juss.) Benth. var. officinalis (Dode) Huang]标准汤剂的量值传递规律。方法 通过对18批吴茱萸（石虎）样品进行检测,获得吴茱萸（石虎）饮片和标准汤剂的对照指纹图谱,并采用UPLC-QE-Plus-MS/MS技术,对标定的吴茱萸（石虎）共有峰进行鉴定。通过峰个数传递、相似度比较、有效成分含量转移率、出膏率测定等,对吴茱萸（石虎）标准汤剂的量值传递规律进行研究。结果 在饮片与标准汤剂中共标定25个对照指纹图谱共有峰,包括5个生物碱类化合物（去氢吴茱萸碱、evodiaxinine、吴茱萸酰胺、吴茱萸碱、吴茱萸次碱）、12个有机酸类化合物（咖啡酰葡萄糖酸及其同分异构体、阿魏酰葡萄糖酸及其同分异构体、绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸、阿魏酰奎宁酸等）、7个黄酮类化合物（香树素-7-O-β-D-葡萄糖苷、芦丁、金丝桃苷、柠檬黄素-3-O-芸香糖苷、柯伊利素-7-O-芸香糖苷、水仙苷、异鼠李素-3-O-β-D-...     

Carb/NH2-SPE-GC-MS法快速监测飞龙掌血中4大类农药残留

 目的 建立一种Carb/NH₂-SPE-GC-MS方法快速监测飞龙掌血根皮中4大类40种农药残留。方法 采用Carb/NH₂固相萃取小柱同时处理4类农药样品,采用气相色谱-质谱联用法(GC-MS)进行40种农药残留痕量测定。结果 Carb/NH₂-SPE-GC-MS法与《中国药典》收录的农药残留前处理方法比较,都不具有统计学差异(P>0.05),在处理飞龙掌血多种农药残留时更为简便可行。4大类40种农药在10～200 ng·mL^-1内线性关系良好(r>0.998 2),检测限LODs均在2.5 ng·mL^-1左右,40种农药的精密度、稳定性和加样回收率基本满足方法学考察要求。结论 本实验建立的Carb/NH₂-SPE-GC-MS方法操作简单、快速、灵敏度高,能够对飞龙掌血药材中多组分农药残留进行准确的定性和定量分析。     

不同居群草珊瑚的ITS序列分析及模式识别研究

目的 通过分析不同居群草珊瑚Sarcandra glabra和金粟兰属5种近缘植物的核糖体基因内部转录间隔区(rDNA-ITS)序列,为草珊瑚鉴定和品种鉴别提供模式识别与思路。方法 采集不同产地的草珊瑚18份、金粟兰6份,所有样品提取总DNA,并对其ITS片段进行扩增、测序,并搜索GenBank数据库中收录的其他4种金粟兰属植物的ITS序列,运用ClustalX 2.1软件比较不同产地草珊瑚与其他金粟兰属植物的ITS序列差异,并对其进行聚类分析。结果 草珊瑚样品不同居群间的ITS序列相似度达99%,其中位点总突变率ITS1(2.7%)>ITS2(1.4%),而与金粟兰属其他植物相比,位点总突变率ITS2(20.3%~22.7%)>ITS1(15.9%~18.3%)。聚类分析表明18个不同种群的草珊瑚居群间变异极小,且与金粟兰属5种近缘植物具有显著差异的聚类识别。结论 草珊瑚ITS1与ITS2分别为不同居群间及与不同属近缘植物间比较有效的鉴别序列,具有较多个特异性信息位点的草珊瑚ITS序列用于鉴别金粟兰属5种近缘植物,具显著差异的聚类识别,是草珊瑚和金粟兰属近缘植物鉴定和品种鉴别的有效分子标记。     

羊栖菜化学成分及药理活性研究进展

羊栖菜Sargassum fusiforme是一种生长在太平洋西北部的暖温带至亚热带性藻类植物,用于消痰软坚散结、利水消肿。因其具有多样的药用价值和丰富的营养价值而广受关注,长期研究证据表明羊栖菜在抗阿尔茨海默病、抗抑郁、抗氧化、抗衰老、降血糖、调节肠道菌群、抗肿瘤、抗病毒、抗菌、抗炎、抗凝血等方面均表现出显著的药理活性。对羊栖菜化学成分及其药理作用的前沿研究进行综述,为羊栖菜药理活性物质的合理开发与综合利用提供参考。