豚鼠爆震性聋CaM-PKⅡ活性的变化规律

目的探讨CaM-PKⅡ在爆震性聋病理过程中的可能作用。方法通过放射免疫进行研究。结果爆震后即刻豚鼠耳蜗基底膜CaM-PKⅡ的总活性较爆震前明显降低(P<0.01),Ca2 CaM非依赖活性占总活性的23.26%,较爆震前明显增高。爆震后20天CaM-PKⅡ的总活性稍有恢复,与爆震前相比,仍有显著差异(P<0.01),Ca2 /CaM非依赖活性占总活性百分比无明显差异(P>0.05)。爆震后40天与爆震后20天相比CaM-PKⅡ的总活性和Ca2 /CaM非依赖活性均无明显变化(均P>0.05)。结论CaM-PKⅡ可能参与爆震性聋的病理调节过程。     

神经生长因子对大鼠爆震性听力损伤的保护作用

目的 探讨神经生长因子(nerve growth factor,NGF)对大鼠爆震性听力损伤的保护作用。方法 制作强脉冲噪声致聋大鼠模型30只，10只肌肉注射NGF4周(爆震前l周至爆震后3周)，10只注射等量的生理盐水作对照，10只作正常对照，测定爆震前后脑干听觉诱发电位(auditory brain-stem response,ABR)阈值及扫描电镜观察耳蜗毛细胞变化。结果 爆震后3dNGF组ABR反应阈恢复较生理盐水组显著快，2ld后，NGF组ABR已恢复正常水平，而生理盐水组未能恢复正常水平。扫描电镜示：爆震后3h：生理盐水组大鼠外毛细胞静纤毛排列扭曲、倒伏、紊乱、融合及部分缺失，NGF组大鼠外毛细胞静纤毛有轻度紊乱及松散；爆震后3d：生理盐水组大鼠外毛细胞静纤毛病变无明显恢复，NGF组大鼠外毛细胞静纤毛病变已不明显；爆震后lld：生理盐水组病变减轻，NGF组病变基本恢复；爆震后2ld：生理盐水组病变减轻，但有部分病变没有完全恢复，NGF组病变完全恢复。结论 NGF能防止受损的毛细胞进一步变性坏死，对听觉有明显的保护作用。     

爆震后豚鼠耳蜗螺旋神经节细胞超微结构改变及其中睫状神经营养因子的表达

目的探讨爆震后豚鼠耳蜗听阈明显升高时螺旋神经节细胞超微结构改变及其中睫状神经营养因子表达的变化。方法复制爆震致聋豚鼠模型,不同时段测ABR阈值,取耳蜗做病理,观察耳蜗螺旋神经节细胞数量和超微结构的变化；用免疫组化检测耳蜗螺旋神经节细胞内CNTF的表达。结果爆震组21d的耳蜗螺旋神经节细胞在二下组为(25．00±7．16)个,而正常对照组为(52．00±5．32)个。以上数据组间统计学差异有显著意义。豚鼠螺旋神经节细胞透射电镜观察见爆震组震后3d出现线粒体明显肿胀,线粒体嵴断裂；21d后线粒体数量明显减少,且有畸形；经爆震声暴露后21d的豚鼠耳蜗中轴切片上CNTF阳性反应细胞数量减少,而且染色分布不均匀。结论爆震对耳蜗螺旋神经节细胞的数量和超微结构均有明显影响,同时在早期干扰螺旋神经节细胞内CNTF的表达。     

神经生长因子联合强化铁营养防治大鼠爆震性聋的实验研究

目的 探讨神经生长因子（nerve growth factor，NGF）联合强化铁营养（fortified iron nutition，FIN）防治大鼠爆震性聋的可能性。方法 制作强脉冲噪声致聋大鼠模型40只，于爆震前1周至爆震后2周，8只肌肉注射NGF，8只喂强化铁饲料，8只肌肉注射NGF并喂强化铁饲料，8只注射等量的生理盐水作对照，8只作正常对照。测定爆震前后脑于听觉诱发电位（auditory brain stem response，ABR）阈值，扫描电镜观察耳蜗毛细胞变化。结果 ABR反应阈：爆震后3d：联合用药组恢复较NGF组和FIN组快，较生理盐水对照组明显快，并于14d后已完全恢复正常，NGF组及FIN组明显恢复，而生理盐水对照组恢复不明显；扫描电镜示：爆震后3h：生理盐水组大鼠外毛细胞静纤毛排列扭曲、倒伏、紊乱、融合及部分缺失，NGF组及FIN组大鼠外毛细胞静纤毛有轻度紊乱及松散，联合用药组大鼠外毛细胞静纤毛有轻度紊乱；3d后：生理盐水组大鼠外毛细胞静纤毛病变无明显恢复，NGF组及FIN组大鼠外毛细胞静纤毛病变已减轻，联合用药组大鼠外毛细胞静纤毛病变已明显减轻；14d后：生理盐水组病变减轻，NGF组及FIN组病变明显减轻，还未完全恢复，联合用药组病变完全恢复。结论 NGF和强化铁营养能防止大鼠受损的毛细胞进一步变性和坏死，两者联合应用有协同作用，效果更明显。     

神经生长因子基因转染对爆震性听力损伤毛细胞的保护作用

目的观察人类神经生长因子口基因（human beta-nerve growth factor，hNGFβ）转染对爆震性听力损伤毛细胞的保护作用。方法选用20只白色纯种豚鼠，制备豚鼠爆震性耳聋模型（172dB SPL），爆震前后分别行听觉脑干诱发电位（ABR）检测，选爆震前后听阈阈移大于75dB SPL的豚鼠，共15只，随机分为2组，其中I组10只，为实验组（导入目的基因Ad-hNGFβ），Ⅱ组5只，为人工外淋巴液（artificial perilymphatic fluid，APF）对照组（导入APF）；另外选正常白色纯种豚鼠5只，作为正常组，不接受爆震和转染。进行爆震前和基因转染后ABR反应阈测定、耳蜗电镜扫描观察及免疫组织化学染色检测Ad-hNGFβ蛋白表达。结果基因导入后第1周，可见Ad-hNGFβ在豚鼠耳蜗内成功转染，耳蜗各回均有表达，强度基本相等。基因导入后第1周，Ⅰ组豚鼠ABR反应阈恢复显著快于Ⅱ组豚鼠ABR反应阈；4周后，Ⅰ组豚鼠ABR已恢复正常水平，而Ⅱ组豚鼠ABR未能恢复正常水平。扫描电镜示，基因导入后第1周，Ⅰ组豚鼠外毛细胞静纤毛有轻度紊乱及松散，Ⅱ组豚鼠外毛细胞静纤毛排裂扭曲、倒伏、紊乱、融合及部分缺失；4周后，Ⅰ组豚鼠外毛细胞静纤毛病变完全恢复，Ⅱ组豚鼠外毛细胞静纤毛病变减轻，部分病变没有完全恢复。结论腺病毒介导的hNGFβ基因在爆震损伤后豚鼠耳蜗中能高效表达，对听觉有明显的保护作用。     

强次声波对豚鼠Corti器外毛细胞脱氢酶活性的影响

目的 观察强次声波暴露后豚鼠Corti器外毛细胞（OHC）的脱氢酶活性变化及形态变化。方法 将20只豚鼠随机等分为对照组和4个实验组（每组4只）,置于频率8Hz、强度为135dB的次声声场中连续暴露90min。采用“Adobe Photoshop”软件测定豚鼠耳蜗OHC琥珀酸脱氢酶（SDH）显色灰度值（GSV）,比较强次声波暴露前、后8h、2d、5d和21d时OHC的SDH的活性变化,并在光镜下观察耳蜗损伤情况。结果 次声暴露后各组动物耳蜗OHC的SDH显色灰度值明显高于正常对照组（P＜0．01）,光镜下观察发现散在性或局限性OHC肿胀及缺失,细胞境界不清,SDH染色浅谈,且部分OHC的缺失为永久性改变。结论 强次声波能影响OHC的能量代谢,从而明显降低耳蜗OHC的功能,并可导致豚鼠耳蜗OHC永久性的损伤。     

腺病毒介导的NGF基因转染对爆震性听力损伤耳蜗螺旋神经节细胞的保护作用

目的观察人类神经生长因子β基因（human beta—nerve growth factor，hNGFβ）转染对爆震性听力损伤耳蜗螺旋神经节细胞的保护作用。方法制备30只白色纯种豚鼠爆震性耳聋模型，爆震后第7天，20只豚鼠经耳蜗底周鼓阶骨壁钻孔向外淋巴腔内导入腺病毒携带hNGFβ基因（adenovirus—mediated hNGFβ，Ad—hNGFβ），10只豚鼠经耳蜗底周鼓阶骨壁钻孔向外淋巴腔内导入人工外淋巴液（artificial perilymphatic fluid，APF）作为对照组，分别于第1、4、8周取材，进行免疫组织化学染色和HE染色。结果基因导入后第1周，可见Ad—hNGFβ在耳蜗内成功转染，耳蜗各回均有表达，第4周仍可见表达，但较第1周时减弱，第8周时未见表达。第4周HE染色显示，基因导入组螺旋神经节细胞明显多于对照组，差异有统计学意义。结论Ad—hNGFβ基因在爆震损伤后耳蜗中能高效和较长时间表达，它对爆震性听力损伤的耳蜗螺旋神经节细胞有保护作用。     

神经生长因子基因转染联合强化铁营养防治豚鼠爆震性聋的实验研究

目的 探讨人类神经生长因子β基因(human beta-nerve growth factor,hNGFβ)转染联合强化铁营养(fortified iron nutrition,FIN)防治豚鼠爆震性聋的可能性.方法 制作强脉冲噪声(172 dBSPL)致聋豚鼠模型35只,爆震后第7天,10只豚鼠经耳蜗底周鼓阶骨壁钻孔向外淋巴腔内导入腺病毒携带hNGFβ基因(adenovirus-mediated hNGFβ,Ad-hNGFβ)为基因组,10只豚鼠导入hNGFβ基因并进行强化铁营养为联合组,10只豚鼠经耳蜗底周鼓阶骨壁钻孔向外淋巴腔内导入人工外淋巴液(artificialperilymphatic fluid,APF)为APF组.5只豚鼠作正常对照组,不经暴露噪声,也不用药物治疗.测定爆震前及基因转染后豚鼠脑干听觉诱发电位(auditory brain stem response,ABR)阈值.取材时间:基因导入后第1周及第4周实验组各取5只动物进行耳蜗取材,并进行免疫组织化学染色和HE染色,检测Ad-hNGFβ蛋白表达并进行螺旋神经节细胞计数.结果 基因导入后第1周,可见Ad-hNGFβ在耳蜗内成功转染.耳蜗各回均有表达,强度基本相等;联合组豚鼠ABR反应阈恢复较基因组快,较APF组明显快;4周后,联合组豚鼠ABR反应阈完全恢复正常,基因组基本恢复正常,APF组未能恢复;联合组豚鼠螺旋神经节细胞数目多于基因组,两者均明显多于对照组,计数结果差异有统计学意义(P<0.01),且细胞形态与正常相近.结论 腺病毒介导的hNGFβ基因联合强化铁营养能协同作用防治豚鼠爆震性听力损伤.     

铁缺乏大鼠畸变产物耳声发射与耳蜗毛细胞的改变

目的 观察不同饲养期铁缺乏大鼠畸变产物耳声发射（DPOAE）的改变与耳蜗毛细胞改变的关系，探讨铁缺乏引起听毛细胞损伤的可能机制。方法 以缺铁饮食饲养法复制缺铁Wistar大鼠模型33只，标准饮食喂养33只作对照。每组分别于喂养第4，8，12周各随机取11只测双耳DPOAE幅值，并处死做耳蜗扫描电镜。结果 缺铁组第4周，36．4％耳数（8／22）出现DPOAE幅值中、高频率段下移，但扫描电镜下未发现毛细胞病理改变；缺铁至第8周，59．1％耳数（13／22）出现DPOAE幅值中、高频率段程度较重的下移，13耳中，3个耳蜗出现不同程度外毛细胞静纤毛散乱、扭曲、倒伏、融合等病理改变；缺铁至第12周，55．6％耳数（10／18）DPOAE幅值中、高频率段下移。10耳中，5个耳蜗出现不同程度外毛细胞静纤毛散乱、扭曲、倒伏、融合。缺失等病理改变，病变范围扩大。结论铁缺乏可使Wistar大鼠DPOAE以及耳蜗毛细胞发生改变。DPOAE改变发生在毛细胞改变之前，DPOAE幅值下降到一定程度延缓或停止，但毛细胞病理改变仍有加重趋势。     

神经生长因子防治爆震性聋的近期疗效观察

目的 观察神经生长因子(nerve growth factor，NGF)防治爆震性聋的临床效果。方法 参加实弹演习的炮手125例，分防治组48例(射击前2周至射击后2周肌肉注射NGF)、治疗组43例(射击后1—14d肌肉注射NGF)和对照组34例(不注射NGF)。测定射击前，射击后1，7和14d纯音听阈。结果 爆震后1d：防治组仅1例(2．1％)出现听阈提高(为轻度聋)，治疗组有3例听阈提高(7．0％，其中2例轻度聋，1例为中度聋)，对照组有6例听阈提高(17．6％，并有重度听力异常)；爆震后7d：防治组1例及治疗组中2例轻度听力异常者听力均恢复正常，治疗组中1例中度者转为轻度；14d后：治疗组听力全部恢复正常，而对照组中无听力好转者。结论 神经生长因子对防治爆震性聋有积极作用。