糖基化对肿瘤恶性表型的影响

蛋白质糖基化是重要的蛋白质翻译后修饰方式,在细胞生长、发育及分化各个阶段的调节中起着非常重要的作用.几乎所有肿瘤都存在蛋白质糖基化的异常修饰,调节着肿瘤的增殖、侵袭、转移、多药耐药及免疫逃逸,并且在肿瘤的诊断、治疗等方面发挥着重要作用.因此,针对糖基化的靶向治疗较经典靶向药物治疗具有一定的优势,且具有成为肿瘤治疗新途径的巨大潜力.本文将对糖基化修饰对肿瘤恶性表型的影响作一综述.     

肿瘤表型抑制和抗癌基因

癌细胞积聚了能使其逃避正常增殖控制的遗传学变化。肿瘤发生似乎就是通过细胞水平的隐性突变引起。在体外将致癌细胞和正常细胞融合,结果提示,转化和恶性表型的出现是由正常细胞遗传信息的丢失或失活引起。在肿瘤细胞和正常细胞的杂交体中,肿瘤亲本的增殖控制发生异常,可部分或完全地通过正常亲本基因恢复。这些假定的基因称为“隐性癌基因”、“肿瘤抑制基因”或“抗癌基因”。它们的功能异常将导致肿瘤发生。另一方面,人体和动物的许多肿瘤中,原癌基因发生遗传变化,癌基因被激活。若将激活的癌基因(如ras基因)引入非恶性培养细胞中,将致     

反义c-fos寡脱氧核苷酸对淋巴瘤细胞株SAC-IIB2恶性表型抑制的研究

利用ＲＴ－ＰＣＲ克隆出共刺激分子人Ｂ７的全部编码ｃＤＮＡ，将其插入Ｅ１区替代的腺病毒载体ｐＡｘｌｃｗ，选择左向转录的ＣＤ８０重组腺病毒载体ｐＡｘｌｃｗ，ＣＩｈＣＤ８０，与经ＥｃｏＴ２２Ｉ酶切的Ａｄ５腺病毒ＤＮＧＡ－末端太复合物共转染２９３细胞，通过同源重组获得人ＣＤ８０的笔制缺陷性重组腺病毒，扩增到的病毒嘀度为４×１０＾９ｐｆｕ／ｍｌ．     

DAPK对IFN-γ抑制PGCl_3细胞恶性表型的影响

目的探讨肿瘤转移抑制基因DAPK对IFN-γ抑制高转移肺癌PGCl3细胞株运动、侵袭、黏附、克隆形成率的影响。方法用脂质体介导的基因转染方法,借助真核质粒表达载体pcDNA3.1,将抑癌基因DAPK转入高转移肺癌PGCl3细胞中,经G418筛选,获得稳定表达的细胞克隆。观察DAPK增强INF-γ抑制PGCl3细胞增殖、运动、侵袭、黏附、克隆形成率。结果DAPK基因转染的PGCl3细胞对INF-γ敏感。IFN-γ抑制转染DAPK基因的PGCl3细胞的增殖、侵袭能力、运动能力、黏附能力、克隆形成率,而且IFN-γ的影响呈剂量依赖性。结论肿瘤转移抑制基因DAPK增强INF-γ抑制PGCl3细胞的恶性表型。     

MEX3A对结肠癌细胞恶性表型的影响及其机制研究

目的:探讨MEX3A在结肠癌组织中的表达及其对结肠癌细胞恶性表型的影响并探索其机制。方法:TCGA数据库分析MEX3A在结肠癌组织及正常组织中的差异表达及其与患者临床病理分期和预后的相关性,并通过免疫组化进一步验证。采用慢病毒对结肠癌细胞中MEX3A的表达进行敲低,检测细胞的增殖、凋亡、迁移及侵袭能力。裸鼠皮下荷瘤后对肿瘤生长进行测量记录。Flag融合表达质粒过表达MEX3A后进行COIP实验。采用质谱进行蛋白质定性检测(Shotgun)与MEX3A互作的蛋白质。生物信息学分析后进行COIP验证,对互作蛋白表达进行挽救实验验证。结果:MEX3A在结肠癌组织中表达显著上调且与患者临床病理特征及预后相关。采用慢病毒敲减MEX3A表达后,结肠癌细胞增殖能力显著被抑制,凋亡则显著增加。细胞转移能力检测结果显示,结肠癌细胞的迁移及侵袭能力显著被抑制。小鼠体内实验结果表明,敲减MEX3A表达后,肿瘤在体内的生长明显被抑制。蛋白质定性检测及COIP验证结果显示,EIF2AK2、LAMB3及MSI2与MEX3A蛋白存在相互作用。在敲减MEX3A表达后分别过表达EIF2AK2、LAMB3及MSI2后细胞...     

反义IGF-Ⅱ对人肝癌细胞株HepG2恶性表型的抑制

目的　探讨反义胰岛素样生长因子Ⅱ (反义IGF -Ⅱ )对人肝癌细胞株HepG2 恶性表型的抑制。方法　化学合成人IGF -Ⅱ 5’端部分cDNA片段 ,将其克隆于真核表达载体pcDNA3 ,通过脂质体介导转入体外培养的HepG2 人肝癌细胞 ,观察细胞生物学特性的改变。结果　将反义IGF -Ⅱ转导入HepG2 肝癌细胞后 ,细胞内IGF -Ⅱ表达量减少 (荧光强度由 19.9± 3.1降至 6 .2± 1.8,(P <0 .0 1) ,细胞增殖率下降、凋亡率增加 (由 4 .3%± 0 .5 0 %增加至 8.6 %± 0 .5 0 % ,(P <0 .0 1)、AFP分泌水平降低 (由5 .4 7μg/l± 0 .5 6 μg/l降至 1.95 μg/l± 0 .10 μg/l,(P <0 .0 1)。 结论　反义IGF -Ⅱ可显著抑制人肝癌细胞恶性表型 ,对于治疗原发性肝癌可能具有潜在应用价值。     

ICA,PJM逆转肿瘤细胞恶性表型及其机制的研究

目的:研究ICA,PJM逆转肿瘤细胞恶性表型,提高免疫效应细胞识别和杀伤的作用和机制。方法:MTT法检测ICA,PJM对PG细胞增殖的影响以及对CD3AK杀伤敏感性的影响;RT-PCR法检测ICA,PJM对bcl-2和c-fos基因mRNA表达水平的影响;流式细胞术检测细胞表面HLA-A,B,C抗原表达的变化以及c-fos,bcl-2蛋白表达水平的变化。结果:ICA,PJM对PG细胞有明显的增殖抑制作用,可以提高细胞表面HLA-A,B,C分子的表达和c-fos蛋白的表达,抑制bcl-2基因的表达,提高CD3AK细胞对PG细胞的杀伤活性。结论:ICA,PJM可以逆转肿瘤恶性表型,提高免疫效应细胞对肿瘤细胞的识别和杀伤。     

大蒜素抑制肿瘤生长机制的实验研究

目的:研究大蒜素对肿瘤中血管内皮生长因子(VEGF)及其上游调节基因HIF-1α表达的影响,并探讨其抑制肿瘤生长的机制.方法:皮下荷瘤小鼠体内注射不同刺量的大蒜素,监测肿瘤生长情况;处死小鼠后以ELISA法检测小鼠血清VEGF的表达;realtime-PCR法检测肿瘤中VEGF和HIF-1α mRNA的表达;免疫组化法检测肿瘤中CD34的表达并量化微血管教;蛋白质印迹法检测HIF-1α蛋白的表达.结果:不同剂量大蒜素均对小鼠皮下肿瘤生长有抑制作用,且呈剂量依赖关系.低、高剂量大蒜素对肿瘤的抑制作用与对照组相比分别为71.4%和40.8%;小鼠体内以及肿瘤处的VEGF表达都显著降低,与对照组相比分别为64.5%和62.9%(血清)、34.6%和32.3%(瘤内);同时HIF-1α蛋白表达亦降低,分别是对照组的26.7%和25.1%;肿瘤组织中的CD34表达也明显减少,与对照组相比分别为16.8%和14.4%,P<0.01.结论:大蒜素可以通过抑制肿瘤VEGF的生成,进而抑制肿瘤血管的形成,可能是通过先阻断VEGF的上游调控基因HIF-1的表达来实现的,这为肿瘤临床药理学研究提供一定的理论基础.     

HERG 基因调控 NF-κB 通道抑制骨肉瘤恶性表型的研究

目的：检测HERG（human ether-à-go-go-related gene）钾离子通道在骨肉瘤中的表达,并探索小干扰 RNA（siRNA）沉默 HERG 表达后对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响及可能的调控机制。方法采用反转录定量聚合酶链反应（RT-PCR）、Western blotting 和免疫组织化学法检测骨肉瘤 MG-63细胞和组织中 HERG 的表达。实验分组为：HERG-siRNA 处理为实验组,control-siRNA 处理为对照组,未行任何处理为空白组。分别采用 CCK-8法、克隆形成、流式细胞仪和 Tunel 法检测 MG-63细胞增殖、生长和凋亡的变化。最后采用 Western blo-tting检测骨肉瘤细胞中核转录因子-κB（NF-κB）信号通路相关蛋白的表达水平。结果HERG 在骨肉瘤细胞和组织中异常高表达。CCK-8法结果示,实验组[（75．34±4．45）％]与对照组[（100．60±5．31）％]和空白组[（100．00±5．66）％]的细胞增殖水平相比,差异有统计学意义（t ＝3．64,P ＝0．007;t ＝3．43,P ＝0．009）。克隆形成结果示,实验组（134．30±11．82）与对照组（225．30±11．56）和空白组（232．80±12．21）的克隆形成数相比,差异有统计学意义（t ＝5．51,P ＝0．002;t ＝5．80,P ＝0．001）。流式细胞凋亡结果示,实验组[（28．10±2．21）％]与对照组[（9．36±2．42）％]和空白组[（10．92±2．51）％]的早期凋亡所占比例相比,差异有统计学意义（t ＝5．72,P ＝0．005;t ＝5．14,P ＝0．007）。Tunel 法结果示,实验组[（31．57±2．08）％]与对照组[（10．35±1．82）％]和空白组[（7．96±0．88）％]的凋亡指数相比,差异有统计学意义（t ＝7．69,P ＝0．002;t ＝10．48,P ＝0．001）。抑制 HERG 表达可明显下调 NF-κB 信号通路中细胞凋亡抑制蛋白-1（cIAP-1）、X 染色体连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）、Bcl-2和 Survivin 的活性,同时还下调磷酸化 NF-κB 抑制蛋白（IκB）α和 NF-κB p65的表达水平。结论HERG 在骨肉瘤中高表达,其通过调控 NF-κB 信号通路参与骨肉瘤细胞增殖和凋亡过程,有望成为骨肉瘤治疗和诊断的新靶点。     

BRMS1对肿瘤转移抑制机制研究进展

目的:综述乳腺癌转移抑制基因1(BRMS1)在抑制肿瘤转移中的作用机制的研究进展.方法:应用Medline及CNKI期刊全文数据库系统,以“基因、转移抑制和BRMS1”为关键词,检索1996-01-2011-12的相关文献.纳入标准:1) BRMS1的发现及其名称来源;2)BRMS1的结构及其功能;3)BRMS1在肿瘤中的表达;4)BRMS1与肿瘤细胞远处转移关系.根据纳入标准符合分析的文献26篇.结果:BRMS1与其他肿瘤转移抑制基因一样,主要抑制肿瘤的转移,并不影响肿瘤的生长,通过许多复杂的机制,如调节细胞间的缝隙连接信号转导及其他转移抑制基因的表达来抑制转移.结论:对BRMS1基因的深入研究有助于进一步深化对肿瘤转移的认识,为恶性肿瘤的分子诊断和基因治疗提供新的思路.     

ACA抑制肿瘤形成的机制

引言癌症严重威胁着人类的生命。药物在癌症治疗中起着举足轻重的作用。研究抗癌药物的作用机制,对癌症的防治具有重要的意义。本文就ACA抑制肿瘤形成的机制做一简单综述。1ACA的来源及抑制肿瘤效果ACA((1’S)1’acetoxychavicolacetate)是Languasgalanga(Zingiberacease)根的提取物,这种植物主要种植在中国、印度、以及东南亚的一些国家,Languasgalanga(Zingiberacease)的根被认为具有抗氧化的活性。近年来的研究表明,ACA在抗癌症方面更加表现出诱人的前景。2ACA抑制肿瘤形成的机制2.1ACA抑制了自由基迸发细胞受到外界刺激,会诱导自由基的迸发。当防御系统功能低下时,异常增多和积累的自由基对生物机体造成一系列的氧化损伤,导致细胞膜损伤,DNA碱基氧化,DNA链断裂,染色体变形,蛋白质失活等。已有研究表明,自由基参与了肿瘤形成的信号传导途径,在致癌过程中起着重要的作用。Nakamura等[1]在TPA诱导鼠皮肤癌形成的实验中,用Genistein和HC(1’hydrooxychavicol)做对照实验,结果发现ACA抑制了TPA诱导的细胞H...     

丙泊酚抑制肿瘤机制的研究进展

中国恶性肿瘤的发病率和病死率一直居高不下,不仅严重威胁着人们的生命健康,也极大地加重了国民经济负担.手术切除在实体肿瘤治疗中占有重要地位,但仍有部分肿瘤术后发生复发及转移.丙泊酚作为目前最为常用的全身麻醉药物之一,广泛用于肿瘤手术治疗中.近年来,研究发现丙泊酚维持麻醉对肿瘤手术患者的预后有利,且丙泊酚可通过多种信号通路抑制肿瘤细胞的增殖、转移,减轻免疫抑制,改善对化疗药物的敏感性.本综述就近年来丙泊酚抑制肿瘤的相关机制进行整理和总结.     

EGCG对肿瘤生物抑制机制影响的探讨

目的：探讨表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）通过押制血管内皮生长因子（VEGF）的血管生成效应减少肿瘤生长和血管生成。方法：MTT法检测内皮细胞生长、Transwell检测内皮细胞迁移，同时检测内皮细胞体外小管形成情况及Matrigel胶塞体内实验检测体内血管生成情况；建立异位胃癌裸鼠模型，检测肿瘤生长及肿瘤组织微血管密度，明确EGCG对肿瘤生长和血管生成的抑制作用及其机制。结果：体外实验显示，随着EGCG处理时间和剂量的增加，VEGF诱导生长的内皮细胞教呈时间和剂量依赖性地减少；随着EGCG剂量的增加，VEGF诱导迁移的内皮细胞数和形成的小管样结构也剂量依赖性地减少，差异有统计学意义，P〈0．05；Matrigel胶塞体内实验也显示EGCG抑制VEGF诱导的胶塞血管化；动物实验显示治疗组肿瘤生长缓慢，生长曲线明显低于对照组，平均肿瘤抑制率为60．4％，P〈0．01；治疗组肿瘤组织微血管密度显著降低，P〈0．01。结论：EGCG可以抑制VEGF诱导的血管生成，从而抑制肿瘤生长和血管生成。     

EGCG对肿瘤生物抑制机制影响的探讨

目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)通过抑制血管内皮生长因子(VEGF)的血管生成效应减少肿瘤生长和血管生成。方法:MTT法检测内皮细胞生长、Transwell检测内皮细胞迁移,同时检测内皮细胞体外小管形成情况及Matrigel胶塞体内实验检测体内血管生成情况;建立异位胃癌裸鼠模型,检测肿瘤生长及肿瘤组织微血管密度,明确EGCG对肿瘤生长和血管生成的抑制作用及其机制。结果:体外实验显示,随着EGCG处理时间和剂量的增加,VEGF诱导生长的内皮细胞数呈时间和剂量依赖性地减少;随着EGCG剂量的增加,VEGF诱导迁移的内皮细胞数和形成的小管样结构也剂量依赖性地减少,差异有统计学意义,P<0.05;Matrigel胶塞体内实验也显示EGCG抑制VEGF诱导的胶塞血管化;动物实验显示治疗组肿瘤生长缓慢,生长曲线明显低于对照组,平均肿瘤抑制率为60.4%,P<0.01;治疗组肿瘤组织微血管密度显著降低,P<0.01。结论:EGCG可以抑制VEGF诱导的血管生成,从而抑制肿瘤生长和血管生成。     

肿瘤细胞恶性表型调控的细胞工程研究

以细胞杂交为主的细胞工程学近年来取得了令人嘱目的进展。在核质关系、基因定位、基因转移、杂交瘤单克隆抗体以及肿瘤细胞去恶性化等诸多领域均日益显示出其广阔的应用前景。十几年来,各国学者运用细胞工程学的一些主要技术方法,对肿瘤细胞去恶性     

乳腺癌转移抑制基因1抑制肿瘤转移的机制

乳腺癌转移抑制基因1(BRMS1)具有抑制肿瘤细胞转移的能力,可明显减少转移灶的发生,但不影响肿瘤的生长.其作用机制复杂,与细胞间通讯、磷酸肌醇信号转导以及与转录核因子-KB(NF-KB)的相互作用等有关.故探讨BRMS1抑制肿瘤转移的机制,希望用于肿瘤基因治疗.     

过表达miR-202对甲状腺癌细胞恶性表型的影响及作用机制

目的探讨过表达miR-202对甲状腺癌细胞恶性表型的影响及作用机制。方法选取2017年1月至2018年12月间深圳大学附属第一医院收治的行手术治疗的甲状腺癌患者的癌组织及癌旁正常组织各32例,用qRT-PCR检测miR-202在甲状腺癌组织中的表达,对甲状腺癌细胞进行miR-202模拟物转染或miR-202模拟物与ROCK1表达载体共转染,采用qRT-PCR检测转染效率,用CCK8实验和Caspase-3实验检测转染后甲状腺癌细胞的增殖和凋亡能力。采用qRT-PCR检测miR-202模拟物转染后ROCK1、E-cadherin、Twist、N-cadherin和MMP2的表达。采用双荧光素酶报告基因法检测ROCK1与miR-202之间的靶向关系。结果 miR-202在甲状腺癌组织中下调,miR-202的上调可抑制甲状腺癌细胞增殖,促进甲状腺癌细胞凋亡。miR-202上调促进E-cadherin表达,抑制N-cadherin、Twist和MMP2的表达。ROCK1是miR-202的靶基因,miR-202通过靶向ROCK1调控甲状腺癌细胞的增殖和凋亡能力及相关基因表达。结论 miR-202通过靶向ROCK1基因调节甲状腺癌细胞的增殖和凋亡。     

LncRNA NKILA对肿瘤恶性生物学行为的影响及机制

NKILA(NF-kappaB interacting lncRNA)是一种新近发现的长链非编码RNA,其在诸多恶性肿瘤中呈现异常表达.现有研究已证实NKILA主要通过NF-κB信号通路参与调控肿瘤的发生和发展,对肿瘤的诊断、治疗和患者预后的评估都有重要意义.本文将对NKILA在多种肿瘤中的异常表达情况和生物学功能作一...     

恶性间叶肿瘤的间叶-上皮表型转化研究进展

相对于上皮性肿瘤的上皮-间叶表型转化（epithelial to mesenchymal transition,EMT）及间叶-上皮表型转化（mesenchymal to epithelial transition,MET）的研究,恶性间叶性肿瘤中MET相关研究较少。MET在分子水平上反映为上皮性标志物如E-钙粘素E-cadherin的上调和间叶性标志物如波形蛋白Vimentin的下调,其过程涉及始动信号、转录因子调节、表面标志物的改变、信号通路改变等多个环节。本文概述了恶性间叶肿瘤中与MET紧密相关的TGF-β等始动因素、SNAI等关键转录因子、miRNA调节因素对重要细胞信号通路等影响及MET对肿瘤的演进及转归的影响等方面的研究,为针对MET的临床应用奠定基础。      

半枝莲抑制肿瘤血管生成的作用及其机制研究

背景与目的:以血管再生作为靶点的诸多化学合成药物在有效抑制血管生成的同时具有不可抵抗的副作用,近年来国内外都在致力于从天然药物中开发肿瘤血管生成阻断剂。作为传统抗癌有效药物半枝莲,其阻断血管生成的作用研究少见报道。本实验拟探讨其对肿瘤血管生成的抑制作用及其可能的机制。方法:采用Matrigel栓、原代人脐静脉内皮细胞(humanumbilicalvascularendotheialcell,HUVEC)建立体内外血管生成模型,观察半枝莲对血管生成的影响;通过Transwell小室趋化实验检测半枝莲对宫颈癌细胞HeLa培养上清诱导内皮细胞迁移能力的影响;采用酶联免疫吸附法(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA)检测半枝莲对HeLa细胞血管内皮细胞生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)蛋白水平的影响。结果:半枝莲能明显抑制Matrigel栓内微血管的形成;体外小管形成实验发现,20%、40%半枝莲含药血清组小管形成数为(5.6±1.1)、(1.0±0.7),与同浓度空白血清组(9.8±1.3和13.4±1.1)相比有显著性差异(P值分别为0.001、0.000)。经20%、40%半枝莲含药血清处理后内皮细胞迁移数分别为(19.75±2.63)、(14.00±2.58),明显少于同浓度空白血清组(24.25±2.06和26.50±4.65)(P值分别为0.038、0.006)。40%含药血清作用24、48h后HeLa细胞VEGF表达量分别为(138.67±9.50)、(93.84±41.11),与空白血清组(195.82±2.43和193.68±18.37)相比具有显著性差异(P值分别为0.006、0.036)。结论:半枝莲能有效抑制肿瘤血管生成,其机制可能与阻断内皮细胞迁移、下调VEGF蛋白表达有关。