水溶性伊红Y不同配置法对HE染色效果的影响

HE染色效果除与组织是否新鲜、固定是否及时以及脱水包埋过程是否恰当有关外,染色液的配置和使用也是重要的环节之一,染色液的质量最终决定染色的效果[1].本实验室使用伊红染色剂均是水溶性伊红Y,在长期的工作实践中发现,采用不同的伊红配置法所得的染液,HE染色效果差异明显,为了使染色效果更佳、更稳定和更可控,我们对伊红的配置方法和染色效果进行对比实验,现将实验过程及结果详述如下.     

Harris苏木精染色的常见问题及解决方法

在常规病理诊断过程中,常用的是Harris苏木精和沉淀酸化伊红Y乙醇液染色(H-E染色).染色质量是由多种因素决定,但苏木精细胞核染色是其中关键的方面,根据笔者多年来的经验,现就在染色过程中存在的常见问题和改进方法进行探讨.     

介绍一种冷冻切片快速染色方法

制作优质的冷冻切片,以缩短染色时间、提高染色细胞的核浆清晰度最为重要。我们试将苏木精。伊红按比例配成混合液使整个染色过程在1min内完成,且不必经过盐酸乙醇分化,染色鲜艳而稳定,现介绍如下。1材料和方法1．1染液配制（1）冷冻固定液：85％乙醇85ml,4％甲醛10ml,冰醋酸5ml。（2）苏木精伊红混合染色液：沉淀酸化伊红Y乙醇应用液1份,哈雷苏木精液3份混合供染色用。1．2切片制作取手术新鲜组织置恒冷式切片机载物台上,－20℃冷冻后6μm切片,玻片附贴切片后即刻用冷冻固定液固定10S,水稍洗,滴加苏木精伊红混合染色液至液体覆…     

赤灵芝中醇溶性蛋白提取工艺研究

目的研究不同工艺参数对赤灵芝醇溶性蛋白提取率的影响,为探索赤灵芝醇溶性蛋白的工业化生产提供参考。 方法以赤灵芝为原料,采用乙醇提取醇溶性蛋白,并通过单因素实验和正交实验研究浸提时间、温度、pH、液料比及提取次数对醇溶性蛋白提取率的影响,确定赤灵芝醇溶性蛋白提取的最佳工艺。 结果单因素实验结果表明,提取时间2b,料液比1：40,醇溶性蛋白含量最高。正交实验得出各因素对灵芝醇溶性蛋白提取率的影响程度大小依次为：pH值〉料液比〉提取温度〉乙醇浓度,醇溶性蛋白提取的最佳工艺参数为：乙醇浓度60％,pH2．5,料液比1：40,提取温度60℃。 结论通过单因素实验和正交实验确定了赤灵芝醇溶性蛋白的最佳提取工艺参数,为赤灵芝醇溶性蛋白的工业化生产提供了参考依据。     

全自动染色机染色过程中伊红染液的应用体会

HE染色是病理学技术中最常用的染色方法之一.随着病理学技术的快速发展,全自动染色机以其稳定、高效、良好的染色效果逐渐代替了手工染色,但是,在具体使用过程中,经常出现伊红不易上色现象,致使胞质着色不良,影响染色效果.本文现结合作者实验中的工作体会,介绍全自动染色机代替手工染色后伊红染液改进的使用方法.     

盐酸化伊红溶液在病理小标本包埋操作中的应用

正病理科日常工作中经常会遇到各种小标本,如内镜活检及穿刺活检组织的病理标本制作。由于标本体积小,经过脱水处理后体积更小,易遗漏给后期病理标本制作带来一定的困难,目前取材时多采用小标本伊红滴染法,使组织在包埋过程中易于识别,提高包埋速度和质量~([1])。作者在实际工作中发现,水溶性和醇溶性伊红滴染小标本脱水后仍出现着色过淡现象,这给小组织包埋和后续切片带来一定的影响。作者参照胥维勇等~([2])方法,配置盐酸化伊红溶液滴染小组织,     

两种染色法判定左前臂骨缺损修复骨组织的成熟度

背景：苏木精-伊红染色和Masson染色是常用的两种评价骨组织修复程度的方法,但上述两种方法能否有效地评价骨缺损修复过程中骨组织成熟度,目前尚缺乏相关研究。 目的：比较Masson染色和苏木精-伊红染色两种方法判定骨组织成熟度的敏感性。 方法：构建新西兰白兔15 mm桡骨缺损的动物模型,植入丝素蛋白/羟基磷灰石/骨髓基质干细胞的组织工程化骨,分别于术后第4,8,12周随机选取6只动物摄X射线平片,随后处死取材,进行大体标本观察、Masson染色及苏木精-伊红染色组织学观察。 结果与结论：X射线片与大体标本可见兔桡骨缺损逐渐修复,新生骨走向成熟骨。术后4周,苏木精-伊红染色在材料与骨的结合部及中间的材料上均形成大量新生软骨,有类骨样组织形成及有少量编织骨出现;Masson染色主要表现为绿色,可见到少许红染。术后8周,苏木精-伊红染色出现更多的新生骨组织,并更趋于成熟,出现了成熟的骨细胞及大量编织骨,有血管形成;Masson染色主要表现为红-绿相间。12周时,苏木精-伊红染色新生骨逐渐改建,形成髓腔,有大量板层骨相互融合成片;Masson染色主要表现为红色。说明Masson染色结合苏木精-伊红染色能较好判定新生骨走向成熟骨的过程,但在判定骨质成熟度时Masson染色较苏木精-伊红染色更直观。     

伊红（Y）染液配制方法的改进

伊红（Ｙ）染液配制方法的改进张灿云邵阳市中心医院病理科苏木素一伊红染色（ＨＥ染色）是病理组织学常规制片最基本的染色方法，伊红（Ｙ）为ＨＥ染色中胞浆染色的重要试剂。在日常工作中，使用常规配制的伊红液有时会出现着色不良，甚至拒染等现象。为了消除这种现象，...     

利用甲苯胺蓝-伊红显色神经元胞周蛋白聚糖

蛋白聚糖(proteoglycans)是氨基聚糖与核心蛋白质的共价结合物,是细胞外基质的主要成分之一.有关神经系统蛋白聚糖的染色在国内少见文献报道,笔者在利用甲苯胺蓝进行Nissl 小体染色过程中,发现通过快速伊红复染及乙醇分化可同时简单清晰地显示神经元胞周蛋白聚糖.     

整块组织HE染色方法的改进

应用苏木精,伊红对组织、器官进行块染是组织学技术的一种普通染色方法.按传统方法进行块染往往出现组织块内外着色不均匀,染色不易掌握.在实践中,经过多次摸索,探讨掌握了一个比较理想的染色液的配比浓度,克服了上述弊端,取得了良好的染色效果.     

疏松结缔组织铺片法改良

疏松结缔组织分布广泛,其中含有三种纤维和六种细胞.为使一张铺片中两种纤维和三种细胞呈现不同颜色,我们对Weigeyt方法进行改良,同时选用伊红Y和番红花O显示胶原纤维和肥大细胞,又选用健康妊娠期小白鼠、并给炎症刺激.制出的铺片满意,方法稳定可靠.1 材料和方法1.1 动物和试剂(1)选用健康妊娠期小白鼠并给刀割伤一次.(2)试剂:1注射液0.5%台盼兰生理盐水.2 固定液1:9甲醛90%乙醇混合液.3染色液 碱性复红染液:碱性复红4g间苯二碱4g蒸馏水200ml.配后加浓硫酸4ml即可应用;1%伊红水溶液(染前滴几滴冰醋酸促染);1%番红花O水溶液(染前滴几滴苯胺油促染).     

基于硬组织切片染色的颈椎钩椎关节的解剖研究

目的利用硬组织切片技术、苏木精—伊红染色及甲苯胺蓝染色方法对成人钩椎关节的组织形态及各层结构进行观察,并对钩椎关节的解剖结构进行探讨。方法选取成年男性全颈椎标本,截取C₂~C₆钩椎关节进行福尔马林固定,脱水,于光固化机中包埋聚合。利用硬组织切片机对标本进行切片处理,磨片机对标本进行磨片处理,并使用苏木精—伊红及甲苯胺蓝进行染色。观察染色后钩椎关节组织形态及结构特点。结果苏木精—伊红染色的钩椎关节骨切片可清晰见到椎体及椎间盘被钙盐沉积分开,上下椎体切面可见粉染骨小梁,骨小梁间可见骨髓组织。甲苯胺蓝染色的钩椎关节骨切片可见成骨细胞和破骨细胞的各种骨组织形态,椎体切面可见体积、宽度、分布均正常的蓝色骨小梁。结论硬组织切片技术可以较完整保留钩椎关节的固有组织形态,经苏木精—伊红染色、甲苯胺蓝染色均可清晰观察到钩椎关节各层结构及形态特征。     

大鼠膝关节软骨不同染色方法的差异

背景:国内外学者对关节软骨对软骨进行了大量研究,需要用不同的染色方法对研究结果进行分析,但将多种染色方法同时应用于软骨研究及探讨染色机制的较少。目的:探讨不同染色方法对大鼠膝关节软骨染色的优缺点。方法:取正常大鼠膝关节软骨,行苏木精-伊红、番红O、阿尔辛蓝、甲苯胺蓝、番红-阿尔辛蓝、番红-固绿染色,观察软骨结构。结果与结论:苏木精-伊红、番红O、甲苯胺蓝染色均可观察到潮线,分别为蓝色、红色和蓝色,番红O和甲苯胺蓝染色强度朝潮线方向增强,番红O染色对潮线的观察优于其他染色方法。苏木精-伊红染色关节软骨4层结构清晰,软骨细胞呈柱状排列,基质呈均匀呈嗜碱性染色。番红O染色显示4层结构层次清楚,基质深层染色最红。阿尔辛蓝染色显示,pH1.0时软骨细胞周边部分被阿尔辛蓝强烈染色,pH2.5时阿尔辛蓝染色较深。甲苯胺蓝染色显示组织结构层欠清,胞核染色清晰,胞浆几乎不着色,基质呈淡蓝紫色。番红-阿尔辛蓝染色显示软骨表面及基质呈不均一的红色,深层颜色较深,软骨细胞周围蓝染;番红-固绿染色显示软骨基质呈均匀的红色,软骨下骨呈绿色,软骨组织与骨组织分对比鲜明。提示上述各种方法均可观察到软骨的四层结构,但以番红O染色显示软骨各层和潮线结构最佳;苏木精-伊红染色观察软骨细胞形态变化较其他方法清楚。     

大Y染色体在连续流产的临床表现

目的 探讨大Y染色体在连续流产中的临床效应.方法 采用外周血淋巴细胞常规染色体标本G显带染色,同一染色体核型中以Y染色体≥18号染色体为大Y染色体.结果 422对夫妻染色体检查中,有169例男性被检查为大Y染色体.结论 大Y染色体在连续流产中具有不可忽视的临床效应.     

三种特殊染色方法的改进

随着病理技术的发展,免疫组织化学、原位杂交等技术越来越普及,与此同时,传统的特殊染色技术仍然是病理学诊断和鉴别诊断必不可少的技术.尤其在肾、骨髓活检组织的病理学诊断中,特殊染色与苏木精-伊红染色、免疫组织化学、电镜有着同等重要的地位.     

输卵管妊娠组织制片的技巧

目的通过此制片法解决了输卵管妊娠血块组织制片本身的问题,可制作出输卵管妊娠组织的优良切片,便于临床工作和科研及基础医学教学和科研。方法最好选择快速固定液;脱水时也不用常规乙醇脱水,改用丙酮脱水;浸蜡温度应控制在56℃为宜,浸蜡时间控制在1h左右;血块组织切片厚度最好为3μm;苏木精-伊红(HE)染色时,苏木素浸染时间长些,伊红浸染时间短些。结果用此法制作输卵管妊娠组织切片,不是那么脆和硬,也不易碎,能够顺利切出连续蜡带;染色时也不易脱片,染色对比度也好。结论在输卵管妊娠组织制片过程中,只要解决输卵管妊娠血块组织制片本身的问题,就能制作出优良的切片。     

六种固定液对冰冻切片苏木精-伊红染色效果的比较

<正>让冰冻切片的苏木精-伊红(HE)染色效果等同于石蜡切片,固定液的选择是最关键。目前很多相关文献报道说法不一。我们选用组织学常用和易配制的6种固定液进行苏木精-伊红(HE)染色效果的比较观察。     

四种脱钙液对骨和骨髓组织及结构影响的比较

背景：由于骨和骨髓组织结构非常特殊,在常规的病理制片过程中,要同时显示坚韧质硬的骨组织和含有多种幼稚娇嫩造血细胞的骨髓组织是非常困难的。目的：选择一种既能完全除去骨组织中的钙质,又能保护骨髓组织及细胞结构不受破坏的最佳脱钙液。方法：将含骨髓组织的犬长骨组织随机分4组,同等条件下,14%硝酸甲醛生理盐水溶液;14%硝酸水溶液;20%甲盐酸甲醛生理盐水溶液和20%甲盐酸水溶液4种不同脱钙液脱钙,记录脱钙时间,常规脱水、切片、苏木精-伊红染色,镜下观察,对比4种脱钙液对骨和骨髓组织常规病理切片质量和其苏木精-伊红染色效果。结果与结论：14%硝酸甲醛生理盐水溶液组脱钙能力最强,脱钙最均匀,耗时最短,既能有效完全除去骨皮质中的钙质,又能保护骨髓组织及细胞的形态完好,切片质量和苏木精-伊红染色的效果最佳;14%硝酸水溶液组脱钙液,使骨组织疏松发泡,组织变黄,对组织的损伤大,脱钙不均匀,组织切片不完整,制片质量和苏木精-伊红染色的效果最差;20%甲盐酸甲醛生理盐水溶液组对组织的脱钙能力、损伤程度、制片质量和苏木精-伊红染色效果都比14%硝酸甲醛生理盐水溶液组稍差;20%甲盐酸水溶液组对骨和骨髓组织的损伤小,脱钙效果好,切片质量和苏木精-伊红染色的效果佳,介于20%甲盐酸甲醛生理盐水溶液组和14%硝酸水溶液组之间。结果表明,4种脱钙液对骨和骨髓组织都具有良好的脱钙能力,制片质量及苏木精-伊红染色效果比较,14%硝酸甲醛生理盐水溶液> 20%甲盐酸甲醛生理盐水溶液> 20%甲盐酸水溶液> 14%硝酸水溶液;14%硝酸甲醛生理盐水溶液最适用于临床常规病理制片中骨和骨髓组织的脱钙。中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

沉降式液基细胞自动制片系统脱水中途干片对染色质量的影响

美国BD SurePath液基细胞自动制片系统是应用沉降式液基技术的主要代表,该系统主要行巴氏染色,也可对非妇科标本行HE染色[1]。然而,该系统自动染色过程终止于乙醇异丙醇溶液对EA/OG染液或伊红染液的清洗,清洗后的染色过程需人工操作。技术培训要求人工操作步骤保持湿片状态,否则易导致细胞形态变化,但仪器操作说明书中并未指出该点,少数技术文献即使提及,也未给予详细描述[1,2]。因此,日常工作中易导致玻片出现干片,引起染色质量下降。本文旨在评估干片效应对不同类型细胞染色质量的影响程度,在临床工作中有实用价值,现介绍如下。