鼻咽癌外周血免疫指标研究

目的寻找合适的鼻咽癌外周血诊断指标。方法设立鼻咽癌组(83例)和非鼻咽癌、非肿瘤的其他疾病对照组(105例)。用ELISA法分别测试9种细胞因子在血浆中的含量,并进行统计分析。结果白细胞介素(IL)-4在鼻咽癌组显著上升,IL-6、IL-12、转化生长因子-β、干扰素-γ在鼻咽癌组显著下降(P<0.05)。结论上述细胞因子的组合变化有望用于鼻咽癌诊断。     

鼻咽癌患者微波热疗联合放疗前后T细胞亚群的变化及预后价值

OBJECTIVE: To assess the prognostic value of changes of peripheral blood T cell subsets after thermoradiotherapy for nasopharyngeal carcinoma (NPC). METHODS: Peripheral blood T cell subsets in 20 normal subjects (control group), 30 NPC patients undergoing thermoradiotherapy, and 20 NPC patients undergoing radiotherapy were detected by flow cytometry. RESULTS: The percentages of CD3+CD4+ and CD8+CD28+ cells were decreased and the percentages of CD3+CD8+ and CD8+CD28- cells increased as compared with the measurements in normal persons. One month after thermoradiotherapy, the percentages of CD3+CD4+ and CD8+CD28+ cells further decreased and the percentages of CD3+CD8+ and CD8+CD28- cells further increased, which continued to worsen 3 months after the treatment and appeared to be related to the survival of the patients. CONCLUSION: T cell subsets of NPC patients are abnormal and their immune functions depressed in NPC patients within a long period after thermoradiotherapy. CD8+CD28+ and CD8+CD28- T cell subsets can be significant for prognostic assessment in these patients after thermoradiotherapy.     

鼻咽癌高癌家系外周单个核细胞蛋白质组学研究

目的：寻找鼻咽癌高癌家系鼻咽癌的癌变机制、早期诊断、治疗和预后监测的外周血特异性分子标志物。方法利用双向凝胶电泳技术(2-DE)分别分离鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者、鼻咽癌高癌家系成员及健康对照组外周血单个核细胞的总蛋白,经蓝银染色后进行图像分析,并对差异表达的蛋白质点进行识别,利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱得到肽质量指纹图谱,搜索数据库鉴定部分差异蛋白质点。结果建立了鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者、鼻咽癌高癌家系成员及健康对照组外周血单个核细胞的2-DE图谱;发现并鉴定了鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者、鼻咽癌高癌家系成员及健康对照组之间的差异表达大于2倍的蛋白质点19个,这些差异蛋白质点主要为蛋白质合成与分解、抗氧化应激、分子伴侣、细胞结构相关蛋白质、三大代谢相关酶类以及信号传导相关蛋白质等。结论通过对鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者、鼻咽癌高癌家系成员及健康对照组外周血单个核细胞的比较蛋白质学研究,筛选并鉴定到19个与鼻咽癌高癌家系鼻咽癌发生相关的蛋白质,其中HSP27、Protein S100-A9、Prohibitin可能成为鼻咽癌高癌家系鼻咽癌癌变机制、早期诊断、治疗及预后监测的外周血特异性分子标志物。     

鼻咽癌放疗效果与血红蛋白浓度关系的研究

目的 探讨鼻咽癌放射治疗的生存率和局控率与血红蛋白浓度的关系。方法 自1993年3月至2000年6月收治经病理确诊的348例鼻咽癌患者的临床及随访资料,于放射治疗前根据血红蛋白（Hb）浓度分为正常组（Hb≥120 g/L）、轻度贫血组（95 g/L≤Hb〈120 g/L）和中重度贫血组（Hb〈95 g/L）。根据放疗中血红蛋白浓度的变化分为两组（血红蛋白浓度升高组及血红蛋白浓度降低组）。全部病例均于根治性放疗,常规分割,对其生存率及局控率予以观察分析。结果 血红蛋白浓度明显影响鼻咽癌患者的生存率,放疗前升高血红蛋白浓度可提高鼻咽癌患者的局控率,放疗中血红蛋白的升高及降低对鼻咽癌的生存率也有明显影响。结论 贫血—低血红蛋白引起血液携氧能力下降,可造成肿瘤乏氧,从而使肿瘤细胞对放射线抗拒,最后导致疗效降低,影响患者生存质量和生存率。升高血红蛋白可提高鼻咽癌生存率。     

鼻咽癌染色体端粒联合的研究

采用Ｇ带技术，对２５例鼻咽癌患者外周血和鼻咽癌细胞株ＣＮＥ的染色体端联联合现象进行观察，结果表明：鼻咽癌细胞端拉联合率显著高于对照组，在两组中，端粒联全在各号染色体上的分布基本一致。     

鼻咽癌患者微波热疗联合放疗前后T细胞亚群的变化及预后价值

目的 探讨微波热疗联合放疗前后鼻咽癌患者外周血中T细胞亚群的变化及其预后价值。方法 用流式细胞仪检测了20例非癌症患者(对照组)和30例鼻咽癌患者微波热疗联合放疗前后及20例单纯放疗鼻咽癌病人T细胞亚群。结果 与对照组相比,鼻咽癌病人外周血CD3⁺CD4⁺细胞百分率及CD8⁺CD28⁺细胞百分率降低(P<0.01),CD3⁺CD8⁺细胞和CD8⁺CD28⁺细胞百分率明显升高(P<0.01),CD4/CD8比值降低(P<0.01)。微波热疗联合放疗后1个月,病人外周血CD3⁺CD4⁺细胞百分率及CD8⁺CD28⁺细胞百分率进一步降低,CD3⁺CD8⁺细胞和CD8⁺CD28^-细胞百分率继续升高,3个月后上述结果仍进一步恶化,且与病人的存活期限有明显关系。结论 微波热疗联合放疗后病人的T细胞免疫功能在较长时间内是受抑制的。CD8⁺CD28⁺和CD8⁺CD28^-T细胞亚群的检测对微波热疗联合放疗病人的预后有重要临床意义。     

MCT1在鼻咽癌病人外周血MDSC中的表达及意义

目的 检测单羧酸转运体1(MCT1)在鼻咽癌病人和正常人外周血髓系抑制性细胞(MDSC)中的表达并探讨其临床意义.方法 随机收集经病理确诊的鼻咽癌病人和正常人外周血各10例,红细胞裂解液处理后,采用BD FACSAriaⅢ流式细胞仪分选出MDSC(CD11b+CD33+ HLA-DR-),q-PCR检测比较两组MCT1 mRNA水平的差异.结果 鼻咽癌病人外周血中MDSC的比例(19.77 ±4.77)％显著高于正常人(0.84±0.18)％,P＜0.001;且前者MCT1 mRNA水平(4.05±0.56)为后者(2.15±0.33)的1.88倍,差异有显著性意义(P＜0.01).结论 鼻咽癌病人外周血中的MDSC可能是凭借其在数量上的优势及能量代谢上的特性,更好地发挥免疫抑制效应.     

鼻咽癌患者放疗前、后外周血淋巴细胞亚群的变化研究

目的观察鼻咽癌患者放化疗前、后外周血淋巴细胞亚群的变化。方法应用流式细胞仪对40例健康正常人群(对照组)和32例鼻咽癌患者(鼻咽癌组)放化疗前、后的外周血T淋巴细胞亚群、B淋巴细胞及NK细胞等进行检测,并比较鼻咽癌患者放疗前后和健康人群的检测值。结果鼻咽癌组放疗前外周血中CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、B细胞均值较对照组下降,差异均有统计学意义(t值分别为2.243、2.765、1.943、2.036,P值分别为0.020、0.009、0.031、0.028);外周血中CD8+、NK细胞均值较对照组升高,差异均有统计学意义(t值分别为-1.768、-2.865,P值分别为0.043、0.007);鼻咽癌组放疗后淋巴细胞亚群外周血中CD4+、CD4+/CD8+均值较放疗前下降,差异均有统计学意义(t值分别为5.219、5.665,P值分别为0.000、0.000);外周血中CD8+、B细胞均值较放疗前升高,差异均有统计学意义(t值分别为-2.959、-2.922,P值分别为0.004、0.004);鼻咽癌组放疗前后CD3+、NK细胞均值差异均无统计学意义(t值分别为1.576、-0.328,P值分别为0.117、0.703)。结论鼻咽癌患者免疫功能下降,外周血T、B淋巴细胞及NK细胞的检测对判断患者的免疫功能有参考作用。放疗可使鼻咽癌患者CD4+/CD8+明显下降,放疗期间应辅以免疫治疗。     

鼻咽癌患者外周血白细胞及血清中EB病毒DNA的检测

目的探讨鼻咽癌患者外周血白细胞及血清中EB病毒DNA的分布及其与鼻咽癌的关系.方法采用多聚酶链反应检测24例鼻咽癌患者(实验组)及10例头颈部其它部位肿瘤(对照组-1)和10例慢性鼻咽炎患者(对照组-2)外周血白细胞及血清中EB病毒的DNA.同时采用免疫酶法检测以上各组患者血清中EB病毒VCA-IgA抗体的效价.结果发现实验组中10例患者外周血白细胞中EB病毒DNA为阳性,阳性率为41.67%(10/24).对照组-1阳性率为10%(1/10),对照组-2患者外周血白细胞中EB病毒DNA均为阴性.实验组与对照组-2比较阳性率差异有显著性(P＜0.05).在以上三组患者血清中EB病毒DNA均为阴性,三组间无差异.实验组VCA-IgA与对照组-1,对照组-2分别比较阳性率其差异均有显著性(P＜0.01).结论有些鼻咽癌患者外周血白细胞中可检测出EB病毒DNA.血清中未能检测出EB病毒DNA.鼻咽癌患者外周血白细胞EB病毒DNA的存在与血清VCA-IgA的效价之间有一定的关系.     

分枝扩增法检测鼻咽癌患者外周血EB病毒基因

目的：应用分枝扩增法（RAM）检测鼻咽癌患者外周血EB病毒基因。方法：利用人工合成的EB病毒EBER-1靶基因序列,建立分枝扩增的方法。以EB病毒阳性细胞株Raji和EB病毒阴性的人白血病细胞株NB4作对照,检测鼻咽癌患者外周血中EB病毒基因,并用PCR方法作对比。结果：RAM法能够检测样品中10个分子的靶基因,32例鼻咽癌患者标本中,28例阳性(87.5%),与PCR法的检测结果相一致。结论：RAM法敏感、特异、简便易行。     

鼻咽癌病人血浆和外周血白细胞EB病毒DNA定量分析

目的比较鼻咽癌(NPC)病人治疗前后血浆、外周血白细胞Epstein-Barr病毒(EBV)DNA水平的变化及癌组织EBV整合状况,探讨这些变化与NPC临床病理变化的关系.方法对150例初诊NPC病人治疗前后血浆和外周血白细胞、75名正常人血浆和外周血白细胞、49例NPC组织及47例鼻咽慢性炎组织EBV-DNA进行荧光定量聚合酶链反应(RQ-PCR)分析.结果 NPC病人治疗前血浆EBV-DNA水平及检出率分别为82 500拷贝/ml(中位数)和92%,均显著高于治疗后(0拷贝/ml,19%)和正常人(0拷贝/ml,12%)(P<0.05),而NPC病人治疗后和正常人血浆EBV-DNA水平和检出率差异均无显著意义(P>0.05).NPC病人治疗前外周血白细胞EBV-DNA水平及检出率(0拷贝/肌动蛋白,24%)与治疗后(0拷贝/肌动蛋白,14%)和正常人(0拷贝/肌动蛋白,16%)三者间差异均无显著意义(P>0.05).NPC病人治疗前、后及正常人血浆EBV-DNA水平与对应外周血白细胞EBV-DNA水平均无显著相关性(P>0.05).EBV-DNA(荧光定量PCR法)和EBER1(原位杂交法)在NPC组织检出率均为100%,显著高于鼻咽慢性炎组织中EBV-DNA和EBER1检出率(分别为40%和0)(P<0.05).NPC组织EBV-DNA水平为27.8拷贝/肌动蛋白(中位值),显著高于鼻咽慢性炎组织(0拷贝/肌动蛋白)(P<0.0001),NPC组织EBV-DNA水平与对应癌组织内EBER1阳性细胞占组织总细胞比率(中位值0.35)有显著正相关性(相关系数r= 0.513)(P<0.0001).NPC病人治疗前血浆EBV-DNA水平随临床TNM分期越晚而显著增高(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期中位值分别为2500、32 590、86 000和166 200拷贝/ml)(P=0.004).而NPC治疗前外周血白细胞EBV-DNA水平在TNM各期均为0拷贝/肌动蛋白,差异无显著意义(P>0.05).结论研究结果提示NPC病人血浆EBV-DNA水平是反映NPC肿瘤消长情况的灵敏、可靠的指标,可在分子水平对NPC的TNM分期进行补充.NPC病人血浆EBV-DNA水平与外周血白细胞EBV-DNA水平没有相关性,提示血浆EBV-DNA可能来源于肿瘤细胞的裂解释放,并反映病人体内瘤荷大小.     

鼻咽癌p16基因表达与外周血T-AgNORS水平的关系

目的观察p16基因产物在鼻咽癌(NPC)中的表达状态,探讨其与NPC的转移及与外周血T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白(AgNORS)水平的关系.方法采用S-P免疫组织化学方法检测65例NPC初治患者癌组织中p16基因产物表达,并对治疗前患者外周血T-AgNORS含量进行检测.结果鼻咽癌组织中p16 基因蛋白表达率为24.6%(16/65),明显低于鼻咽黏膜炎组织83.9%(26/31)(P<0.01).T1和T2期患者p16蛋白表达阳性率稍高于T3和T4患者,但无统计学意义(P>0.05).p16蛋白表达与颈淋巴结转移及放疗后复发和转移无关(P>0.05).p16 基因蛋白表达阳性患者外周血T-AgNORS含量显著高于阴性者(t=5.721,P<0.001).结论提示p16基因蛋白的低表达可能涉及鼻咽癌的发生和发展过程,反映了p16 基因表达与外周血T淋巴细胞核仁组成区形成有关,可能反映了机体的免疫调节机能.     

鼻咽癌细胞凋亡与细胞增殖的原位观察

In order to observe the apoptosis and proliferation of cells in nasopharyngeal carcinoma(NPC) and pericarcinomatous tissue(PCT), 49 cases of NPC and partly PCT were detected by in situ end-labelling (ISEL) technique and proliferating cell nuclear antigen(PCNA) immunohistochemical staining. The results showed that: 1. Massive distribution of ISEL positive cells was frequently exhibited in vesicular nucleus cell carcinoma(VNCC) of NPC, in which no apoptotic pattern character was found. 2. The positive rate and the staining intensity index(SII) of ISEL signals in NPC were higher than that in PCT(P < 0.05); the positive correlation between ISEL SII and PCNA SII was found in NPC(r = 0.341, P < 0.05), whereas the positive rate and the SII of ISEL signals were significantly lower than that of PCNA (P < 0.01). 3. The ISEL SII and the PCNA SII in VNCC were obviously higher than that in poorly differentiated squamous cell carcinoma(PDSCC) (P < 0.01, P < 0.05). Patients with VNCC had a high five-year survival rate. The results suggest that there is a relationship between cellular proliferation and cellular apoptosis in NPC.     

鼻咽癌染色体端粒长度变化的研究

为探讨人自咽癌染色体端行为民癌变的关系,应用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交对３０例鼻咽癌和３０例与之年龄、性别配对的正常对照进行了分析,结果：鼻咽癌的端粒长度与对照上比显著缩短。在自咽癌中,１６．１７％显示端粒伸长,７６．６７％显示端粒缩短,而６．６７％显示与对照相同的端粒长度。分析了３０例正常人外周血淋巴细胞端粒长度的变化,可见染色体端粒的长度随年龄而逐渐缩短（ｒ＝－０．３９１３,Ｐ〈０．０５）,并且     

端粒缩短在鼻咽癌发病作用中的研究

OBJECTIVE: To explore the role of telomere shortening in the pathogenesis of nasopharyngeal carcinoma (NPC). METHODS: Southern blotting was employed to determine the mean telomere length (MTL) in 42 tumor samples and 15 samples of the tissues adjacent to the tumors obtained from 42 NPC patients, along with the tissue specimens from 17 patients with chronic nasopharyngitis. RESULTS: In NPC tissues, the length of the MTL was 4.5+/-2.3 kb, obviously shorter than those of the MTL in tissues adjacent to the tumor 14.6+/-2.8 kb and in chronic nasopharyngitis 15.8+/-3.1 kb. CONCLUSION: Telomere shortening may play an important role in the pathogenesis of nasopharyngeal epithelium cell malignancies.     

供者特异性抗原经外周输注诱导免疫耐爱的研究

为探索诱恨免疫耐受的途径和方法,作者受用大鼠异位心脏（颈部）移植模型,经外周途径输注不同品系供者的不同生抗原,包括供体特异性输血（ＤＳＴ）、供体特异脾细胞９ＤＳＳＬ）、供体特异性骨髓细胞（ＤＳＢＭ）。结果显示：ＤＳＴ、ＤＳＳＬ和ＤＳＢＭ均能诱导受者对移植物产生特生免疫耐受,其中以脾细胞和骨髓细胞效果最好,平均移植物存活时间分别达到４２．９±６．６７和４０．３±１１．６天,混合淋巴细胞反应（ＭＬＲ）     

原发性胆汁性肝硬化患者外周血临床免疫指标分析

目的 分析原发性胆汁性肝硬4E（PBC）患者外周血细胞免疫及体液免疫临床指标。方法 以流式细胞术分析51例PBC患者外周血细胞亚群，并同时检测血清中自身抗体、免疫球蛋白和补体成分。结果 PBC组常规细胞亚群检测结果与健康对照、肝炎后肝硬化组相似，但PBC组中CD4CD45RA细胞比值均低于其他两个对照组，CD4CD45RO则高于对照组，在不同临床分期PBC患者间则无明显差异。51例PBC患者中抗线粒体抗体（AMA）阳性为100％，46例M2抗体为阳性（90．2％），抗核抗体（ANA）阳性率为82．4％，肝特异性自身抗体中抗-ASGPR阳性12例，SMA阳性者共有3例，未检出LKM-1，LC-1和SLA。PBC患者组血清免疫球蛋白IgG，IgM和IgA平均水平均高于肝炎后肝硬化组与健康对照组（P〈0．05），不同临床分期患者间水平差异无显著性，3种亚类血清浓度升降呈一致性改变，而补体C3，C4水平在此3个实验组间未存在明显区别（P〉0．05）。结论 常规的细胞免疫检测如T细胞亚群分析对病情或疾病阶段的判断帮助不大，自身抗体与免疫球蛋白检测的应用目前主要限于辅助该病的诊断。     

同期放化疗治疗中晚期鼻咽癌临床研究

OBJECTIVE: To evaluate the effect of radiotherapy combined with concurrent chemotherapy for the treatment of advanced nasopharyngeal carcinoma. METHODS: From February 2001 to August 2003, 80 cases of nasopharyngeal carcinoma (stage III and IVa) were randomized into two groups to receive radiotherapy with concurrent chemotherapy (Group A, n=40) consisted of leucovorin (CF, 100 mg/m(2), days 1-5), 5-fluorouracil (5-Fu, 500 mg/m(2), days 1-5), cisplatin (DDP, 60 mg/m(2), day 1) for one course followed by another 4 weeks later, or radiotherapy alone (Group B, n=40). In all cases, the radiotherapy followed the same protocol, with the nasopharyngeal (NP) total dose (DT) of 66-76 Gy given in 6.6-7.6 weeks, and cervical lymphnode (LN) DT of 60-72 Gy completed in 6.0-7.2 weeks. RESULTS: All patients completed the treatment course, and the complete response rates of the primary lesions and cervical nodes in A and B groups were 77.5% and 60.0% (P>0.05) and 92.5% vs 70.0% (P<0.05), respectively, which were 92.5% vs 72.5% (P<0.05) and 100% vs 85.0% (P<0.05), respectively, 3 months after treatment. No obvious toxicity was observed in the two groups except for vomiting and leukopenia. CONCLUSION: Radiotherapy with concurrent chemotherapy can improve the elimination rate of advanced nasopharyngeal carcinoma, and can be completed in shorter treatment course in comparison with neoadjuvant chemotherapy before radiotherapy, eligible for clinical practice in the treatment of advanced nasopharyngeal carcinoma.     

新型外周血炎症指标在耳鼻咽喉科疾病中的研究进展

<正>耳鼻咽喉科疾病范围较广,包括但不限于中耳炎、鼻窦炎、扁桃体炎、喉癌等疾病。上诉疾病对患者的生活质量造成了显著的影响,甚至可能导致听力损失、呼吸困难以及语言障碍。因此,研究耳鼻咽喉科疾病具有重要的临床和社会意义。近年来,随着生物医学研究的不断深入和发展,各种新的生物标志物和指标被引入到医学领域,用于评估疾病的发展、预后以及指导治疗方案的制定等。     

鼻咽癌患者外周血HLA-DR-CD33+CD14-CD11b+的MDSC检测

目的 探讨鼻咽癌患者外周血HLA-DR-CD33+ CD14-CD11 b+的髓源性抑制细胞(MDSC)的分布比例,为鼻咽癌免疫治疗提供有益指导.方法 选择该院肿瘤科收治的45例鼻咽癌患者和20例健康志愿者作为健康对照组,均在第1次化疗前和第2周期诱导化疗后7d抽取患者外周血标本,同时抽取健康对照组人群外周血;并在流式细胞仪上做HLA-DR-CD33+CD14-CD1 1b+的MDSC测定.结果 鼻咽癌患者外周血存在MDSC比例明显高于健康对照组(P＜0.05).而且随着Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期分期的升高,鼻咽癌患者外周血MDSC比例也逐渐升高(P＜o.05)..鼻咽角化癌、鼻咽分化型非角化癌和未分化型非危化癌3种不同病理类型鼻咽癌患者外周血MDSC比例均高于健康对照组(P＜0.05).3种不同病理类型的鼻咽癌患者外周血MDSC比例也差异有统计学意义(P＜0.05).经过2周期诱导化疗后各期鼻咽癌的患者外周血MDSC比例均有显著降低(P＜0.05),但其比例水平仍然高于健康对照组人群.结论 鼻咽癌患者外周血HLA-DR-CD33+ CD14-CD1 1b+的MDSC比例明显升高,提示可能与鼻咽癌免疫选避有关,值得进一步研究.