不同剂量的天花粉蛋白对Caski细胞凋亡的影响

目的 探讨天花粉蛋白(TCS)对人宫颈癌Caski细胞生长的抑制作用及量-效关系.方法 不同浓度TCS作用于体外培养人宫颈癌Caski细胞株,采用吖啶橙荧光染色,荧光显微镜观察TCS对Caski细胞的生长抑制作用;透射电镜和TUNEL检测法观察Caski细胞凋亡及TCS诱导Caski细胞凋亡的量效关系.结果 TCS对Caski细胞的生长具有明显的抑制作用,透射电镜和TUNEL法证实该抑制作用是通过诱导细胞凋亡实现的.在一定浓度范围内,细胞凋亡数与TCS的浓度之间有剂量依赖性.结论 TCS能诱导体外培养Caski细胞凋亡,最佳浓度为60μg/ml.     

虎杖苷通过PI3K/AKT/mTOR信号通路诱导人宫颈癌细胞凋亡的初步研究

通过观察虎杖苷对宫颈癌HeLa细胞体外生长的抑制作用,初步探讨其诱导凋亡的可能机制。不同浓度的虎杖苷(50,100,150μmol·L~(-1))处理HeLa细胞后,采用MTT法检测虎杖苷对HeLa细胞增殖的抑制作用,AO/EB染色法荧光显微镜观察HeLa细胞凋亡的形态学变化;Annexin/PI双标记法检测HeLa细胞凋亡率;流式细胞仪分析HeLa细胞周期分布;RTPCR和Western blot法检测HeLa细胞中PI3K,AKT,mTOR,P70S6K的mRNA和蛋白表达。结果显示,虎杖苷显著抑制HeLa细胞增殖,且具有一定剂量依赖性;虎杖苷能够引起HeLa细胞发生S期阻滞,促进细胞凋亡,显著下调HeLa细胞中PI3K,AKT,mTOR,P70S6K的mRNA和蛋白表达。表明虎杖苷具有抑制宫颈癌HeLa细胞增殖及诱导凋亡的作用,其机制可能与抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路及其下游基因蛋白表达有关。     

天花粉蛋白对结肠癌SW-620细胞株增殖、黏附和迁移的实验研究

目的 研究天花粉蛋白对结肠癌SW-.620细胞株增殖、黏附和迁移的影响.方法 采用MTT比色法检测天花粉蛋白对SW-620细胞的增殖影响;Hochest33258观察天花粉蛋白诱导SW-620细胞凋亡;流式细胞术检测天花粉蛋白对细胞周期和细胞凋亡的影响;细胞黏附和划痕实验检测天花粉蛋白作用后细胞黏附和迁移的改变.结果 1.天花粉蛋白对SW-620细胞的生长具有明显的抑制作用,并呈时间和质量浓度依赖性;2.天花粉蛋白可将SW-620细胞阻滞于S期,并能诱导其凋亡;3.天花粉蛋白具有改变SW-620细胞与人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的黏附作用,并使其迁移能力下降.结论 天花粉蛋白能抑制SW620细胞的增殖、诱导其凋亡,并能改变其黏附和迁移能力.     

瓜蒌含药血清对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响

目的研究瓜蒌水煎剂含药血清对宫颈癌HeLa细胞增殖的抑制作用,探讨其抗癌作用机制。方法采用血清药理学方法制备瓜蒌含药血清,MTT法检测含药血清对HeLa细胞生长的抑制作用,Wright’s-Giemsa染色和吖啶橙-EB染色在倒置显微镜和荧光显微镜下观察细胞的形态学变化;琼脂糖凝胶电泳检测凋亡细胞DNA Ladder。结果 HeLa细胞经不同剂量的瓜蒌含药血清作用24,48 h后,细胞体外抑制作用明显,呈量效、时效关系;倒置显微镜观察可见HeLa细胞膜皱缩,细胞核固缩,核染色质边缘化,并出现凋亡小体;荧光显微镜下可见晚期的凋亡细胞被染成红色,细胞固缩成球状;琼脂糖凝胶电泳显示凋亡细胞发生了DNA断裂,呈梯状条带。结论瓜蒌含药血清对HeLa细胞具有明显的增殖抑制作用,其作用机制与诱导细胞凋亡相关。     

刺五加多糖对人宫颈癌HeLa细胞体外增殖和凋亡作用的实验研究

目的探讨刺五加多糖对人宫颈癌HeLa细胞体外增殖的抑制作用及凋亡的影响。方法采用MTT法、DNA琼脂糖凝胶电泳法、免疫组化SP法检测刺五加多糖对HeLa细胞增殖、凋亡作用及促凋亡蛋白Bax的表达情况。结果刺五加多糖对HeLa细胞抑制作用显著,其抑制程度随剂量增加而增强;琼脂糖凝胶电泳显现细胞凋亡的特征性DNA梯形条带,免疫组化显示细胞中Bax蛋白的表达增强。结论刺五加多糖对HeLa细胞有较强的抑制作用,能诱导其凋亡,其机制之一与Bax蛋白的表达增强有关。     

乳浆大戟提取物诱导HeLa细胞凋亡及其机制研究

目的研究乳浆大戟提取物诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡的作用及其分子机制。方法采用MTT法和克隆形成实验检测乳浆大戟提取物对宫颈癌HeLa细胞的生长和增殖抑制作用;利用Annexin V-FITC/PI双染和DAPI细胞核染色法检测乳浆大戟提取物诱导细胞凋亡情况;线粒体膜电位检测凋亡细胞的线粒体膜电位变化情况;流式细胞仪和Westernblot法分别分析细胞周期及细胞周期蛋白变化情况。结果①乳浆大戟提取物以时间和剂量依赖的方式显著抑制宫颈癌HeLa细胞的生长和增殖;②乳浆大戟提取物能使宫颈癌HeLa细胞线粒体膜电位显著降低,诱导细胞发生凋亡性细胞死亡;③乳浆大戟提取物能够显著阻滞宫颈癌HeLa细胞在G0/G1期,降低Cyclin D1、Cyclin E和CDK4的表达水平,增加P21的表达水平。结论乳浆大戟提取物通过下调Cyclin D1、Cyclin E和CDK4的表达和上调P21的表达,使HeLa细胞阻滞在G0/G1期,进而显著抑制宫颈癌HeLa细胞生长和增殖,诱导细胞依赖线粒体通路的凋亡性死亡。     

蜈蚣提取物诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡及其机制的研究

目的研究蜈蚣提取物对宫颈癌HeLa细胞生长的抑制及其作用机制。方法观察不同浓度的不同蜈蚣提取物对宫颈癌HeLa细胞的生长抑制情况:运用体外细胞培养技术,以不同浓度的蜈蚣提取物以及阳性对照药顺铂作用于培养的HeLa细胞48h,采用MTT法测定细胞代谢率,以流式细胞术观察DNA含量和凋亡的变化情况,DNA片断化分析和western Blot测定Bax,Caspase 3蛋白水平的表达。结果HeLa细胞用4,8,16mg/ml的乙醚、乙醇蜈蚣提取物处理48h后,细胞存活率显著降低;DNA周期改变明显,亚G1峰与对照组有显著性差异;DNA-Ladder典型;Western Blot提示蜈蚣提取物作用HeLa细胞后Bax,caspase 3蛋白表达,凋亡率显著增高。结论中药蜈蚣乙醚、乙醇提取物在体外对宫颈癌HeLa细胞的生长有明显地抑制作用,机制与改变细胞DNA周期,促进凋亡有关。     

青蒿琥酯对T细胞淋巴瘤细胞株凋亡诱导作用的实验研究

目的：探讨青蒿琥酯对T细胞淋巴瘤细胞株Jurkat细胞的凋亡诱导作用及其可能的作用机制。方法：采用Mrrll比色法检测青蒿琥酯对Jurkat细胞体外生长的抑制作用;细胞形态学、DNA琼脂糖凝胶电泳、DNA的PI染色等观察和检测Jurkat细胞的凋亡;Western-blot法检测Jurkat细胞凋亡过程中Bcl-2、Bax、Caspase-8和ICAD蛋白表达水平的变化。结果：青蒿琥酯对Jurkat细胞的生长有明显的抑制作用,且生长抑制率与药物作用浓度呈正相关（P〈0．01）,呈浓度依赖性;其增殖抑制作用与诱导细胞凋亡有关;随药物浓度的增高Bcl-2和ICAD蛋白表达量逐渐下降,而Bax蛋白表达上调,Caspase-8蛋白出现明显的剪切激活带。结论：青蒿琥酯具有诱导Jurkat细胞凋亡作用,既能通过线粒体途径又能通过外源性途径诱导Jurkat细胞凋亡。     

天花粉蛋白抑制胃癌细胞生长及其分子机制研究

目的观察天花粉蛋白(trichosanthin,TCS)对人胃癌细胞SGC7901诱导凋亡的作用及机制。方法应用荧光显微镜观察0、7、14、28μmol/L TCS对SGC7901细胞形态学的影响及细胞计数。应用流式细胞仪测定各浓度TCS对SGC7901细胞周期及凋亡的作用。应用Western Blot法观察SGC7901Caspase-9、Caspase-3、PARP、pERK、ERK蛋白表达。结果 TCS处理后的SGC7901出现了皱缩、变形,对SGC7901细胞的生长有明显的抑制作用,并且阻滞于S期。TCS诱导SGC7901发生凋亡,呈浓度依赖性(r=0.901,P0.05)。Caspase-9、Caspase-3、PARP蛋白表达降低,呈浓度依赖性(r=-0.984,r=-0.991,r=-0.951,P0.05)。并且随着TCS浓度的升高,ERK表达降低,呈药物浓度依赖性(r=-0.957,P0.05),TCS处理(7μmol/L和14μmol/L)激活ERK,磷酸化ERK升高(P0.05)。结论 TCS可以抑制SGC7901细胞的生长,诱导细胞凋亡,其机制与ERK信号通路有关。     

青蒿琥酯对U937细胞凋亡的诱导作用及其对Bcl-2、Bax、ICAD和Caspase-8表达的影响

目的：探讨青蒿琥酯对急性髓系白血病细胞株U937细胞的凋亡诱导作用及其可能机制。方法：采用MTT比色法检测青蒿琥酯对U937细胞体外生长的抑制作用;细胞形态学、DNA琼脂糖凝胶电泳、DNA的PI染色等观察和检测U937细胞的凋亡;Western-blot法检测U937细胞凋亡过程中Bcl-2、Bax、Caspase-8和ICAD蛋白表达水平的变化。结果：青蒿琥酯对U937细胞的生长有明显抑制作用,且生长抑制率与药物作用浓度呈正相关（P〈0.01）,呈浓度依赖性,48小时IC50值为24.48μg/ml;其增殖抑制作用与诱导细胞凋亡有关;随药物浓度的增高Bcl-2和ICAD蛋白表达量逐渐下降,而Bax蛋白表达上调,Caspase-8蛋白出现明显的剪切激活带。结论：青蒿琥酯具有诱导U937细胞凋亡作用,既能通过线粒体途径又能通过外源性途径诱导U937细胞凋亡。     

天花粉蛋白对子宫颈癌Hela细胞Survivin基因的影响

目的:研究天花粉蛋白(TCS)对子宫颈癌Hela细胞Survivin基因表达的影响,以探讨TCS诱导Hela细胞凋亡的机制。方法:MTT法检测TCS对Hela细胞增殖的影响,倒置显微镜观察细胞形态;RT-PCR和Western blot分析TCS对Hela细胞Survivin基因表达的影响;流式细胞仪分析TCS对Hela细胞周期的影响。结果:①TCS显著性抑制Hela细胞增殖;②TCS处理后Hela细胞Survivin mRNA水平无明显改变,但蛋白表达水平显著降低;③TCS降低Hela细胞周期中G2/M期细胞比率,但增加S期细胞的数量。结论:通过下调凋亡抑制因子Survivin的表达而诱发Hela细胞凋亡,可能是TCS抑制Hela细胞增殖的分子机制。     

栝蒌根提取物对Hela细胞作用的初步研究

目的：研究栝蒌根提取(简称栝蒌根)物体外对Hela细胞毒作用,探讨其抑癌作用机理。方法：用M1vr法检测栝蒌根对Hela细胞毒作用,扫描电镜和透射电镜观察细胞超微结构变化,DNA琼脂糖凝胶电泳法检测其生化特征改变。结果：Hela细胞经栝蒌根作用24～48h后,细胞体外杀伤作用明显,呈量效、时效关系(r>0．880,P<0．01);电镜观察可见Hela细胞表面微绒毛明显减少或消失,胞膜发泡,细胞核固缩,核染色质浓缩边集,并出现凋亡小体;细胞DNA经琼脂糖凝胶电泳可见典型的梯形带。结论：栝蒌根提取物对Hela细胞具有良好的抗癌活性,其作用机制与诱导细胞凋亡相关。     

茶氨酸对人宫颈癌Hela细胞增殖作用的影响

目的研究茶氨酸对人宫颈癌Hela细胞增殖和凋亡的影响。方法 MTT法测定茶氨酸不同浓度不同时间对Hela细胞增殖活性的影响;荧光显微镜观察Hela细胞的形态变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果茶氨酸对Hela细胞具有显著增殖抑制作用,并呈浓度和时间依赖性;荧光显微镜观察发现茶氨酸处理组的Hela细胞有典型的凋亡特征;流式细胞仪检测结果显示,与空白组比较,茶氨酸处理后的Hela细胞的凋亡率显著增加(P<0.01)。结论茶氨酸对人宫颈癌Hela细胞的增殖具有抑制作用,且其与诱导Hela细胞凋亡有关。     

桑皮素对人宫颈癌Hela细胞增殖与凋亡的影响

目的探讨桑皮素对人宫颈癌Hela细胞的增殖抑制及其凋亡诱导作用。方法用10、15、20μmol/L桑皮素作用Hela细胞24 h后,在扫描电镜、透射电镜及倒置显微镜下观察细胞形态学变化;利用MTT法检测桑皮素对Hela细胞的增殖的影响;应用Hoechst单染实验检测Hela细胞的凋亡情况;采用qRT⁃PCR和Western blot检测Bax、Bcl⁃2 mRNA及蛋白的表达。结果桑皮素(2.5、5、7.5、10、15、20、25μmol/L)处理Hela细胞24、48 h,能明显的抑制Hela细胞增殖(P<0.05),且呈浓度依赖性。桑皮素(10、15、20μmol/L)处理Hela细胞24 h,细胞呈现早期凋亡。与0μmol/L桑皮素组比较,桑皮素(10、15、20μmol/L)能显著上调Bax mRNA及蛋白表达(P<0.05),下调Bcl⁃2 mRNA及蛋白表达(P<0.05)。结论桑皮素通过上调Bax表达和下调Bcl⁃2表达,从而诱导Hela细胞发生凋亡。     

蜈蚣多糖对Hela细胞的增殖抑制作用研究

目的 研究蜈蚣多糖对人宫颈癌细胞Hela细胞的抑制作用及作用机制.方法 用MTT法检测蜈蚣多糖对Hela细胞生长的抑制作用;流式细胞仪和Annexin V-FITC/PI双荧光染色分别检测蜈蚣多糖对Hela细胞周期及凋亡情况的影响.结果 在一定浓度范围内蜈蚣多糖可显著抑制Hela细胞的增殖,改变Hela细胞的细胞周期,使细胞阻滞于G2/M期,并能诱导细胞凋亡.结论 蜈蚣多糖可能通过改变Hela细胞的细胞周期,诱导细胞凋亡,从而对Hela细胞的增殖有一定的抑制作用.     

白花蛇舌草多糖对人宫颈癌Hela细胞和人肝癌Bel-7402细胞生长的影响

目的研究白花蛇舌草多糖对体外培养的人肝癌Bel-7402细胞和人宫颈癌Hela细胞生长的影响。方法常规法体外培养人肝癌Bel-7402细胞和人宫颈癌Hela细胞,设空白对照组、阳性对照组和供试药物组(大、中、小剂量),分别采用MTT法和流式细胞仪检测白花蛇舌草多糖对人宫颈癌Hela细胞和人肝癌Bel-7402细胞的生长抑制率和凋亡率;采用倒置显微镜观察细胞形态学变化。结果白花蛇舌草多糖可抑制人肝癌Bel-7402细胞和人宫颈癌Hela细胞的生长,并促进其凋亡,其作用效果与其浓度正相关,与空白对照组相比具均有显著性差异(P﹤0.01)。结论本研究结果提示,白花蛇舌草多糖具有较好的抗肿瘤活性。     

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??OBJECTIVE To observe the effects of lappaconitine sulfate on proliferation, cycle and apoptosis of human cerical neoplasm Hela cells and its possible mechanism.METHODS Cell Counting Kit-8 (CCK-8) was adopted to observe the inhibitory effects of lappaconitine sulfate on the proliferation of Hela cells and calculated its half maximal inhibitory concentration (IC₅₀). The technology of flow cytometry, propidium iodide (PI) single stained method and Annexin-V-FITC/PI double stained method were employed to measure the cell cycle and apoptosis of Hela cells after lappaconitine sulfate treatment.RESULTS Lappaconitine sulfate could inhibit the proliferation of human cerical neoplasm Hela cells in vitro, and the inhibition presented obvious dose-effect relationship (r=0.990 5, P??0.01). The IC₅₀ of lappaconitine sulfate on Hela cells was 0.421 mg??mL^-1. After dealt with lappaconitine sulfate, Hela cells indicated remarkable cell cycle arrest at G₀/G₁ phase, and the apoptotic ratio was gradually increased with the concentration of lappaconitine sulfate.CONCLUSION Lappaconitine sulfate could inhibit the growth of human cerical neoplasm Hela cells, change the distribution of cell cycles and induce their apoptosis.     

白英提取液对Hela细胞凋亡及Fas/FasL基因表达的影响

目的:探讨白英提取液对Hela细胞凋亡及Fas/FasL基因表达的影响。方法:采用MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测凋亡,二步法免疫组化检测Fas蛋白表达,半定量RT-PCR检测Fas和FasL mRNA表达。结果:白英提取液对Hela细胞增殖有较强的抑制作用,且这种作用呈一定的剂量-时间依赖性;细胞凋亡率明显升高;Fas基因mRNA和蛋白表达显著上升,FasL mRNA表达明显下降。结论:白英提取液通过上调Fas基因和下调FasL基因表达,诱导细胞凋亡,从而抑制Hela细胞增殖。     

越橘花色苷对宫颈癌Hela细胞凋亡及抗氧化能力的影响

目的探讨越橘花色苷对宫颈癌Hela细胞的作用机制。方法以不同浓度的越橘花色苷作用于宫颈癌Hela细胞48h后,通过Gimsa染色观察越橘花色苷抑制Hela细胞的形态学改变,通过流式双染观察Hela细胞凋亡情况,通过RT．PCR观察Hela内P53的表达,并测定Hela细胞内的SOD、GSH、MDA值。结果Gimsa染色可见越橘花色苷可使Hela细胞光泽度下降,细胞数减少,稀疏,细胞变小、核固缩。流式双染可见,随着橘花色苷浓度升高,凋亡率升高。与对照组比较,越橘花色苷浓度达到30mg／ml时,P53的表达量最高,差异有统计学意义（P〈0．05）。与对照组比较,30mg／ml和40mg／ml的越橘花色苷组SOD和GSH含量升高,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论越橘花色苷可通过上调抑癌基因P53的表达,增强细胞凋亡,并提高Hela细胞的抗氧化能力,从而达到抑制宫颈癌Hela细胞的作用。