Survivin基因与肿瘤治疗策略

Survivin基因是近年来发现的重要的凋亡抑制基因,具有抑制凋亡和参与细胞周期调控的双重功能.大量的研究报道了在基础和临床实验中survivin基因与放、化疗的敏感性的密切关系.由于survivin基因的重要功能,加之其具有基因治疗最理想的条件,即它在肿瘤组织中表达率高,与正常组织中的表达相比,它同时具有高特异性的特点,因而目前研究关注于以survivin基因为靶点的基因治疗,抑制survivin基因的表达,增加肿瘤的自发性凋亡和放、化疗诱导的凋亡,抑制肿瘤生长,提高肿瘤对放、化疗的敏感性.基因治疗途径包括：1）改变survivin基因功能区的关键位点,使其不能生成正常功能的蛋白.2）通过黄素蛋白（flavopivid0l）抑制周期素依赖蛋白激酶（Cdc2）活性,使其不能对survivin Thr（34）位点磷酸化,从而抑制了survivin蛋白的正常功能.3）从RNA水平抑制surviyin表达的基因沉默技术.上述研究已得到了可喜的结果,过渡到临床实验是进一步努力的目标.     

survivin基因与肿瘤放化疗的敏感性及相关基因治疗

研究显示调亡抑制蛋白survivin与肿瘤放化疗抵抗密切相关,可通过对survivin基因的修饰,抑制survivin基因的表达,使其丧失凋亡抑制功能,从而增加肿瘤的自发性凋亡及放化疗诱发的凋亡,抑制肿瘤生长,提高肿瘤对放化疗的敏感性.     

survivin在肿瘤治疗中的研究进展

survivin是新近发现的凋亡抑制基因,具有在正常终末分化组织中不表达而在各种肿瘤组织中高表达的特性,在抑制凋亡的同时还参与细胞周期调控,是一个具有潜在价值的肿瘤标志物。在多种肿瘤表达的普遍性及相对于正常组织的特异性使得survivin可作为肿瘤基因治疗的一个重要的新靶点;利用反义寡核苷酸、RNA干扰等技术可明显降低survivin的表达,诱导凋亡。为肿瘤的基因治疗提供了研究的新方向。     

Survivin基因与肿瘤放疗和化疗的敏感性

凋亡抑制蛋白Survivin具有调节细胞周期和抑制凋亡的功能,在多数恶性肿瘤组织中表达丰富,但在正常成熟组织中不表达,这种特性使其成为目前恶性肿瘤治疗的新靶点。抑制Survivin基因的表达,可明显增加肿瘤的自发性凋亡和放化疗诱导的凋亡,抑制肿瘤生长,提高肿瘤对放化疗的敏感性。     

Survivin基因与肿瘤放疗和化疗的敏感性

凋亡抑制蛋白Survivin具有调节细胞周期和抑制凋亡的功能，在多数恶性肿瘤组织中表达丰富，但在正常成熟组织中不表达，这种特性使其成为目前恶性肿瘤治疗的新靶点。抑制Survivin基因的表达，可明显增加肿瘤的自发性凋亡和放化疗诱导的凋亡，抑制肿瘤生长，提高肿瘤对放化疗的敏感性。     

生存素与血液肿瘤的研究进展

Survivin(生存素)基因是近年来发现的一种新的抗凋亡因子,属凋亡蛋白抑制因子(inhibitorapoptosisprotein,IAP)家族,具有抑制细胞凋亡作用并在细胞的有丝分裂过程中起重要的作用。Survivin广泛表达于人类恶性肿瘤组织,其表达与肿瘤预后不良及肿瘤化疗耐药密切相关。其在多种血液肿瘤中均有表达。本文就survivin的分子结构、组织分布、作用机理、在血液肿瘤中的表达及其在肿瘤中的治疗进行综述。     

生存素在非小细胞肺癌中的表达及与细胞凋亡的关系

目的探讨生存素(survivin)蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及与细胞凋亡的关系. 方法采用免疫组化的方法检测60例NSCLC和16例肺良性组织中survivin的表达,用TUNEL技术检测60例NSCLC的凋亡情况. 结果肺癌组织中survivin表达的阳性率为63.3%(38/60),而在正常组织中无一例表达;survivin蛋白的表达与肺癌TNM分期(P<0.05)、淋巴结转移(P<0.05)和细胞分化程度(P<0.01)有密切关系,但与肿瘤组织学类型、年龄、性别无明显关系(P>0.05).survivin在NSCLC中的表达水平与癌细胞的凋亡指数(AI)呈负相关(r＝-0.231,P<0.05). 结论 survivin蛋白的异常表达而引起的细胞凋亡抑制在NSCLC的发生中起一定作用,其过度表达提示NSCLC预后不良;survivin基因有望成为肺癌基因治疗的新靶点.     

Survivin反义RNA真核表达载体的构建及鉴定

恶性肿瘤无限增殖的主要原因是细胞凋亡调控障碍.Survivin是新近发现的凋亡抑制蛋白家族(inhibitor of apoptosis protein,IAP)成员[1],特异性表达人类多种常见肿瘤中,而不存在于正常成人组织,能抑制caspase活性而发挥抗凋亡作用[2].有研究表明[3-4],应用反义策略阻断survivin表达可提高肿瘤细胞对化疗药物的敏感性,诱导凋亡的发生,已成为肿瘤治疗的新亮点.     

PUMA——非常有前景的肿瘤基因治疗靶点

PUMA(p53上调凋亡调控因子)是2001年发现的Bcl-2蛋白家族中的一员,是p53的下游基因,因为具有强大的促凋亡作用而备受关注.肿瘤组织中的PUMA可被化疗药物诱导而表达增加,同时,PUMA诱导多种肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤细胞增殖,而且,PUMA与有化疗和放疗有协同作用,增加肿瘤细胞对放化疗的敏感性.PUMA的作用与p53状态无关,是非常有前景的肿瘤基因治疗靶点.     

survivin与肿瘤治疗的研究进展

survivin是近年来发现的一种肿瘤凋亡抑制蛋白,可抑制细胞凋亡、调节细胞周期和促进细胞分裂以及参与血管生成,与化疗药物的耐药性和放疗抵抗有关.其在恶性肿瘤中表达具有高度特异性,几乎所有恶性肿瘤组织都存在高表达,而在正常成人组织中却未表达.survivin已成为具有潜在价值的肿瘤标志物,与肿瘤诊断、治疗和预后相关,有望成为肿瘤治疗的新靶点.本文就survivin的分子生物学结构、肿瘤治疗中的临床意义和survivin相关的肿瘤治疗作一综述.     

生存素反义寡核苷酸促进顺铂诱导骨肉瘤细胞凋亡

目的:探讨生存素(survivin)反义寡核苷酸(antisenseoligonucleotide,ASODN)对顺铂(diamminedichloroplatinum,DDP)诱导骨肉瘤细胞凋亡的促进作用。方法:通过合成靶向survivin的ASODN转染骨肉瘤OS732细胞并与DDP联合作用,同时设空白对照组、正义(SODN)组及DDP组进行比较。采用RTPCR、免疫细胞化学法检测各组细胞survivinmRNA和蛋白表达状态,流式细胞仪(flowcytometry,FCM)、吖啶橙/溴化乙锭(acridineorange/ethidiumbromide,AO/EB)染色法检测各组细胞凋亡水平和形态,MTT法检测细胞生长抑制情况。结果:与空白对照组、SODN组及DDP组相比,ASODN转染组细胞survivinmRNA及蛋白表达明显减弱,细胞凋亡水平较空白对照组、SODN组相应提高,细胞萎缩、染色质浓缩呈典型凋亡改变,细胞生长相对受抑;上述指标在ASODN+DDP组变化更为明显,其细胞凋亡指数(apoptoticindex,AI)和细胞生长抑制率(inhibitionratio,IR,61.36%)明显高于各单“药”组(SODN组6.81%、ASODN组31.82%和DDP组41.35%)及SODN+DDP组(45.45%),P<0.05。结论:ASODN能够特异性封闭骨肉瘤OS732细胞中survivin基因表达,使其功能相应受抑,增加细胞对DDP敏感性,进而增进DDP诱导骨肉瘤细胞凋亡效应。     

BRCA1 modulates malignant cell behavior,the expression of survivin and chemosensitivity in human breast cancer cells

BRCA1 is a multifunctional tumor‐suppressive protein. Many functional aspects of BRCA1 are not fully understood. We used a shRNA approach to probe the function of BRCA1 in human breast cancer cells. Knocking down BRCA1 expression by shRNA in the wild‐type BRCA1 human breast cancer MCF‐7 and MDA‐MB‐231 cells resulted in an increase in cell proliferation, anchorage‐independent growth, cell migration, invasion and a loss of p21/Waf1 and p27^Kip1 expression. In BRCA1 knocked‐down cells, the expression of survivin was significantly up regulated with a concurrent decrease in cellular sensitivity to paclitaxel. We also found that cells harboring endogenous mutant or defective BRCA1 (MDA‐MB‐436 and HCC1937) were highly proliferative and expressed a relatively low level of p21/Waf1 and p27^Kip1 by comparison to wild‐type BRCA1 cells. Cells harboring mutated BRCA1 also expressed a high level of survivin and were relatively resistant to paclitaxel by comparison to wild‐type cells. Increase resistance to paclitaxel was due to an increase in the expression of survivin in both the BRCA1 knocked‐down and mutant BRCA1 cells because knocking down survivin expression by siRNA restored sensitivity to paclitaxel. We conclude that BRCA1 down‐modulates the malignant behavior of breast cancer cells, promotes the expression of p21/Waf1, p27^Kip1 and inhibits the expression of survivin. Moreover, loss of BRCA1 expression or function leads to an increase in survivin expression and a reduction in chemosensitivity to paclitaxel. © 2009 UICC     

沉默MALAT1上调miR-1表达增加胆囊癌对5-FU的敏感性

目的:明确MALAT1调控miR-1影响胆囊癌（gallbladder carcinoma，GBC）细胞对5-FU敏感性的机制。方法:qRT-PCR检测MALAT1和miR-1在GBC细胞GBC-SD、NOZ和SGC-996中的表达；MTT法和流式细胞术检测正常和5-FU处理的GBC细胞的增殖和凋亡；双荧光素酶报告基因实验检测MALAT1和miR-1的靶向关系。结果:qRT-PCR检测结果显示，与人正常胆囊上皮细胞H69相比，MALAT1在GBC细胞GBC-SD、NOZ和SGC-996中表达上调；双荧光素酶报告基因实验结果显示，MALAT1可靶向调控miR-1，负性调节miR-1的表达；MTT法和流式细胞术检测结果显示，敲低MALAT1抑制GBC细胞的增殖和诱导凋亡，增加GBC细胞对5-FU的敏感性，过表达miR-1结果与敲低MALAT1一致；沉默MALAT1可部分逆转敲低miR-1 inhibitor 对GBC细胞活力、凋亡以及对5-FU药物敏感性的影响。结论:沉默MALAT1 上调miR-1表达，增加GBC细胞对5-FU的敏感性。     

survivin—siRNA联合化疗药物对乳腺癌MCF-7细胞凋亡及逆转耐药的研究

目的观察靶向survivin的siRNA联合紫杉醇和表柔比星对乳腺癌MCF-7细胞凋亡及逆转耐药的影响。方法构建靶向survivin的siRNA表达质粒,转染乳腺癌MCF。7细胞,荧光定量聚合酶链反应（PCR）,Westernblot技术检测转染前后survivin基因表达的变化,CCK．8法检测靶向survivin的siRNA联合紫杉醇、表柔比星对MCF-7细胞药物敏感性的影响,利用流式细胞术检测细胞凋亡作用。结果survivin—siRNA-2能有效抑制survivinmRNA（0．30±0．03）和蛋白的表达（0．37±0．09）（P〈0．05）;紫杉醇[24、48h抑制率分别为（38．5±4．0）％、（41．7±6．3）％]、表柔比星[24、48h抑制率分别为（37．0±8．6）％、（40．6±12．1）％1均可抑制MCF-7细胞增殖并诱导部分细胞凋亡;当与survivin—siRNA联合时上述作用显著加强f紫杉醇24、48h抑制率分别为（76．0±2．9）％、（85．1±4．0）％;表柔比星24、48h抑制率分别为（74．6±5．6）％、（82．5±4．8）％1（P〈0．05）,并且细胞抑制率呈现时间、剂量依赖性。结论利用RNA干扰阻断survivin基因表达同时联合相应化疗药物可以显著增强MCF-7细胞对药物敏感性并促进其凋亡,该方法在乳腺癌治疗中具有潜在的临床应用价值。     

An oncolytic adenovirus regulated by a radiation-inducible promoter selectively mediates hSulf-1 gene expression and mutually reinforces antitumor activity of I131-metuximab in hepatocellular carcinoma

Gene therapy and antibody approaches are crucial auxiliary strategies for hepatocellular carcinoma (HCC) treatment. Previously, we established a survivin promoter-regulated oncolytic adenovirus that has inhibitory effect on HCC growth. The human sulfatase-1 (hSulf-1) gene can suppress the growth factor signaling pathways, then inhibit the proliferation of cancer cells and enhance cellular sensitivity to radiotherapy and chemotherapy. I¹³¹-metuximab (I¹³¹-mab) is a monoclonal anti-HCC antibody that conjugated to I¹³¹ and specifically recognizes the HAb18G/CD147 antigen on HCC cells. To integrate the oncolytic adenovirus-based gene therapy and the I¹³¹-mab-based radioimmunotherapy, this study combined the CArG element of early growth response-l (Egr-l) gene with the survivin promoter to construct a radiation-inducible enhanced promoter, which was used to recombine a radiation-inducible oncolytic adenovirus as hSulf-1 gene vector. When I¹³¹-mab was incorporated into the treatment regimen, not only could the antibody produce radioimmunotherapeutic effect, but the I¹³¹ radiation was able to further boost adenoviral proliferation. We demonstrated that the CArG-enhanced survivin promoter markedly improved the proliferative activity of the oncolytic adenovirus in HCC cells, thereby augmenting hSulf-1 expression and inducing cancer cell apoptosis. This novel strategy that involved multiple, synergistic mechanisms, including oncolytic therapy, gene therapy and radioimmunotherapy, was demonstrated to exert an excellent anti-cancer outcome, which will be a promising approach in HCC treatment.