聚合酶链反应限制酶切分析及病毒分离检测巨细胞病毒感染

在人类巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）直接早期蛋白Ｅｃｏ ＲＩＪ ＤＮＡ片段内,自行设计两对引物,建立套式ＰＣＲ检测ＨＣＭＶ ＤＮＡ,同时结合病毒分离检测临床标本。结果发现２３例新生儿肝炎综合征患儿中,１０例病毒分离及套式ＰＣＲ均阳性;１例病毒分离阴性,但套式ＰＣＲ阳性。对５８例妊娠早期孕妇血标本进行检测,套式ＰＣＲ阳性率９％,病毒分离阳性率则为７％。     

套式聚合酶链反应及限制酶分析对孕妇巨细胞病毒感染及其母婴？…

用套式聚合酶链反应（ｎＰＣＲ）及限制酶分析，病毒分离和特异性抗体测定检测孕妇外周血，脐带血及互胎组织巨细胞病毒（ＨＣＭＶ０。结果３６７例孕妇中，孕早、中、晚期ＨＣＭＶ阳性率分别为８．６％、１．６％和７．０％，ｎＰＣＲ检出率（４．９％）高于病毒分离（３．０％，Ｐ〈０．０２５）。６份ｎＰＣＲ阳性母血中，３份配对脐血ｎＰＣＲ阳性。提法：ｎＰＣＲ能提高诊断ＨＣＭＶ的特异性与敏感性，对孕妇及胎儿／新生儿ＨＣ     

肝细胞肿瘤患者癌组织中HBx基因的检测

目的通过检测肝细胞肿瘤（ＨＣＣ）患者癌组织中ＨＢｘ基因探讨乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）在 ＨＣＣ中的重要性。方法根据ＨＢｘ基因ＤＮＡ序列设计引物,采用特异性聚合酶链式反应（ＰＣＲ） 对３１例病理确诊并经手术切除后的ＨＣＣ患者癌组织进行了检测,同时采用ＰＣＲ方法检测了同一 患者血清ＨＢＶ ＤＮＡ。结果ＰＣＲ显示３１例ＨＣＣ患者癌组织中ＨＢｘ基因和血清中ＨＢＶ ＤＮＡ 的阳性率分别为７７．４％（２４／３１）和３２．３％（１０／３１）。结论ＨＢｘ基因片段广泛存在于ＨＣＣ患者癌 组织中并且在癌细胞中可能存在整合。     

HBV感染孕妇血清HBVM与TORCH抗体检测

目的了解ＨＢＶ感染孕妇血清ＨＢＶＭ与ＴＯＲＣＨ抗体阳性率。方法应用ＥＬＩＳＡ法筛查出９３例ＨＢＶ感染孕妇,并用ＰＣＲ检测ＨＢＶ－ＤＮＡ。分娩时取脐血测弓形体（Ｔｏｘ）、风疹病毒（ＲＶ）、巨细胞病毒（ＣＭＶ）、单纯疱疹病毒Ⅱ型（ＨＳＶ－Ⅱ）四种病原血清特异性ＩｇＭ和风疹病毒ＩｇＧ抗体。结果９３例ＨＢＶ感染孕妇中ＴＯＲＣＨ总感染率４７．３１％。单项抗体阳性率２５．８１％,７例为２项抗体阳性,２例３项抗体阳性。原发宫内感染以Ｔｏｘ最高（１２．９０％）,ＣＭＶ次之（６．４５％）,随后ＨＳＶ－Ⅱ（５．３８％）,ＲＶ最低（３．２３％）。孕妇ＨＢｓＡｇ阳性组,ＰＣＲＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率７６．９２％,ＴＯＲＣＨ感染率６１．５４％。ＨＢｓＡｇ阴性组,ＰＣＲＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率３８．８９％,ＴＯＲＣＨ感染率３７．０４％。结论脐血ＴＯＲＣＨ感染率与母血ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、ＨＢＶ－ＤＮＡ相关（相关系数分别为０．１４、０．２９、０．１５）。乙肝感染孕妇ＴＯＲＣＨ的抗体筛查对优生优育是非常有用的指标。     

PCR检测乙型肝炎患者血清HBV DNA

ＰＣＲ检测乙型肝炎患者血清ＨＢＶＤＮＡ湖南省儿童医院（４１０００７）李梨平湖南中医学院第一附属医院（４１０００７）王伟华本文应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术直接检测病毒性肝炎患者血清中的ＨＢＶＤＮＡ，以探讨ＰＣＲ技术在ＨＢＶ感染诊断中的应用以及ＨＢＶＤ...     

丙型病毒性肝炎研究进展

丙型病毒性肝炎研究进展梁瑞林１９８９年美国加州的Ｃｈｉｒｏｎ公司首先成功地从受感染的黑猩猩的血液标本中克隆了丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＣＤＮＡ［１］。第二代（ＰＣＲ）和第三代（ＲＩＢＡ－Ⅲ与Ｍａｔｒｉｘ系统）抗－ＨＣＶ检测方法的建立和应用，极大地推进了丙...     

巢式PCR检测新生儿先天畸形心脏组织中的B19—DNA的研究

为探讨人微小病毒Ｂ１９感染与先天性心脏病病因学的关系。用巢式聚合酶链反应技术，检测１１例新生儿先天性心脏病心脏心肌标本中的Ｂ１９病毒ＤＮＡ，并取曲同期１１例先天畸形死亡患儿的心肌组织作对照，同时作ＣＭＶ，ＨＳＶ，ＴＯＸ的ＰＣＲ检测。结果：病例组中Ｂ１９ ＤＮＡ阳性２例，ＣＭＶ－ＤＮＡ阳性１例，ＴＯＸ，ＨＳＶ均阴性，对照组中，１例ＣＭＶ－ＤＮＡ阳性，其余各病原体均阴性。     

慢性丙型肝炎患者外周血单核细胞中丙型肝炎病毒RNA正、负链的检测

选择ＨＣＶ基因组５’非编码区的两对引物，利用逆转录巢式ＰＣＲ技术对３５例慢性丙型肝炎患者的血清中正链ＨＣＶＲＮＡ、ＰＢＭＣ中正、负链ＨＣＶＲＮＡ进行检测。结果血清中正链ＨＣＶＲＮＡ阳性率为６２．９％（２２／３５），ＰＢＭＣ中正链ＨＣＶＲＮＡ的阳性率为５４．３％（１９／３５），负链ＨＣＶＲＮＡ的阳性率为３４．３％（１２／３５）。同时对第２次ＰＣＲ的阳性产物进行限制性片段长度多态性分析（ＲＦＬＰ），进一步证实ＰＣＲ产物为ＨＣＶ特异性扩增产物，结果说明ＨＣＶ能在ＰＢＭＣ中存在或复制，即肝细胞并非ＨＣＶ感染与复制的唯一场所。ＰＢＭＣ可能作为病毒长期滞留场所，使病毒感染持续存在，是丙型肝炎易发生慢性化的原因之一。     

肾综合征出血热病毒分型的研究

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法对４株肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）病毒进行了分型。ＨＦＲＳ病毒的ＲＮＡ经逆转录为ＣＤＮＡ后用ＮＴＮ（野鼠型）、ＳＥＯ（家鼠型）两种引物进行体外扩增，经琼脂糖凝胶电泳，ＰＣＲ产物的ＮＤＡ片段与Ｍａｒｋ对照，证实扩增出的产物为ＨＦＲＳ病毒ＤＮＡ片段。ＰＣＲ分型与物异性单克隆抗体（ＭｃＡｂ）间接免疫荧光法分型作比较，结果相符合。     

动脉粥样硬化血管组织中的巨细胞病毒感染

为探讨巨细胞病毒（Ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ，ＣＭＶ）感染与动脉粥样硬化的相关性，应用聚合酶链反应（ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）技术及二次ＰＣＲ法对病例组２６例动脉粥样硬化血管组织石蜡标本和对照组２３例正常血管组织石蜡标本进行检测。结果：应用传统ＰＣＲ技术检测到病例组１７例ＣＭＶＤＮＡ阳性，阳性率为６５４％（１７／２６），对照组５例阳性，阳性率为２１７％（５／２３）；应用二次ＰＣＲ法检测到病例组２０例阳性，阳性率７６９％（２０／２６），对照组８例阳性，阳性率３４８％（８／２３）。结果表明，ＣＭＶ潜伏感染与动脉粥样硬化具有密切联系