人参皂甙对老龄大鼠海马CA3区神经元超微结构影响的定性,定量研究

应用透射电镜技术结合图像分析观察了老龄大鼠海马ＣＡ３区神经元超微结构的改变，并对比观察了人参皂甙对超微结构的影响，结果表明：老龄组社会脂褐素数量比青年组增加６倍，面积增加９倍；而给药组脂褐素数量比老龄 组减少，面积减少３１％。     

人参皂甙降低老龄大鼠海马CA3区神经元酸性磷酸酶活性的光、电镜观察

实验选用健康的Wistar大鼠,应用光、电镜酶细胞化学方法结合图像分析观察了老龄大鼠海马CA3区神经元的酸性磷酸酶的衰老变化,同时对比观察了人参皂甙对上述改变的影响.光镜结果表明:酸性磷酸酶含量老龄组比青年组增加36%,而给药组较老龄组减少20%;电镜结果表明:酸性磷酸酶反应产物面积老龄组比青年组增加5倍,给药组较老龄组减少2.5倍(P<0.01).光、电镜结果均提示老龄时海马CA3区神经元酸性磷酸酶活性增高,而人参皂甙具有降低酸性磷酸酶活性的作用.     

人参皂甙降低老龄大鼠海马CA3区神经元酸性磷酸酶活性的光,电镜观察

实验选用健康的Ｗｉｓｔａｒ大鼠，应用光、电镜酶细胞化学方法结合图像分析观察了老龄大鼠海马ＣＡ３区神经元的酸性磷酸酶的衰老变化，同时对比观察了人参皂甙对上述改变的影响。光镜结果表明：酸性磷酸酶含量老龄组比青年组增加３６％，而给药组较老龄组减少２０％；电镜结果表明：酸性磷酸酶反应产物面积老龄组比青年组增加５倍，给药组较老龄组减少２．５倍（Ｐ〈０．０１）。光、电镜结果均提示老龄时海马ＣＡ３区神经元酸性磷     

大鼠杏仁中央核神经紧张肽和强啡肽神经元的年龄变化及牛膝的干预作用-免疫组织化学及图像定量分析研究

采用免疫组织化学ABC法结合图像定量分析观察杏仁中央核内神经紧张肽和强啡肽标记神经元的年龄变化及牛膝的抗衰老作用.结果:神经紧张肽神经元随月龄增加呈现细胞数减少、细胞面积增加和灰度值增大(P<0.05),22月龄大鼠发现有形态改变.强啡肽神经元左右两侧不同步变化,左侧在9月龄呈现细胞数减少,细胞面积增加、灰度值增大(P<0.05),在22月龄还可见形态改变;右侧在22月才出现细胞数减少、细胞面积增加、灰度值增大(P<0.05),未见明显的形态改变.牛膝喂药组与同月龄大鼠相比,神经紧张肽和强啡肽神经元的细胞数减少、细胞面积增加和灰度值的增大均降低(P<0.05),未见明显的形态改变,证实牛膝有延缓衰老之功效.     

吗啡处理大鼠海马线粒体定量分析及超微结构观察

目的通过对慢性吗啡处理大鼠海马CA1、CA3区神经元线粒体的定量分析及超微结构观察,为阿片类药物依赖的神经元可塑性改变补充理论资料。方法剂量递增法建立大鼠吗啡依赖模型。取海马CA1、CA3区组织进行透射电镜观察和线粒体体视学定量分析。结果海马CA1、CA3区模型组线粒体体积密度(Vv)、数密度(Nv)、表面积密度(sv)均较对照组增大(分别为P<0.05,P<0.01,P<0.01),比表面积(δ)减小(P<0.01)。超微结构观察:对照组线粒体结构正常;模型组线粒体数量增多,基质电子密度增高,肿胀、可见嵴断裂及空泡变。结论吗啡慢性处理造成了神经元线粒体形态结构的代偿性适应改变,从而影响整个神经元的结构和功能可塑性。     

促红细胞生成素对视网膜色素变性的RCS大鼠的作用

为观察促红细胞生成素对视网膜色素变性的RCS大鼠的作用,探讨其对视网膜变性神经元保护的可能机制。我们把出生后雄性RCS大鼠48只,随机分为给药组和对照组。RCS大鼠给药组从生后5d开始腹腔注射重组人促红细胞生成素(rhEPO),每5d注射一次,剂量为4000IU/kg。RCS大鼠对照组注射生理盐水,剂量同上。HE染色和TUNEL检测观察rhEPO对视网膜色素变性神经元的保护作用。应用免疫组织化学方法检测caspase2蛋白的表达。结果显示:(1)RCS大鼠给药组20d,25d,感光细胞的数目与对照组大鼠相比明显增加(P<0.05);(2)RCS大鼠给药组25dTUNEL检测阳性细胞数目与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);(3)生后25d到40d,RCS大鼠给药组和对照组在节细胞层和内核层观察到caspase2阳性染色,RCS大鼠给药组在20d和25d内核层caspase2阳性细胞数目多于对照组(P<0.05)。结果提示:在RCS大鼠视网膜变性的早期,rhEPO对神经元起保护作用,可以使感光细胞得到更多存留;rhEPO对视网膜变性神经元的早期保护作用可能是通过抑制凋亡的方式进行的;caspase2蛋白在视网膜的一过性高表达提示其参与了视网膜感光细胞的凋亡过程,rhEPO可减少其早期的表达,对早期变性的神经元发挥保护作用。     

Mrh-aFGF对帕金森病大鼠黑质神经元的保护

目的 探讨重组人改构体酸性成纤维细胞生长因子(Mrh-aFGF) 对帕金森病(PD) 大鼠黑质神经元病变的影响。 方法 SD大鼠72只,随机分为4组：对照组、PD组、生理盐水（NS）处理组、　Mrh-aFGF 处理组,每组18只。 6-OHDA 分别注入左侧黑质和腹侧被盖区后建立PD 大鼠模型,侧脑室内注射Mrh-aFGF,用阿扑吗啡诱导旋转行为;Nissl 染色法观察大鼠黑质神经元病理学改变;电子显微镜观察黑质神经元超微结构的变化。 结果 对照组均未出现旋转行为;PD组术后旋转速度逐渐加快;NS 处理组旋转行为未见明显改善;Mrh-aFGF 处理组旋转速度明显减慢(P<0.05);PD组及NS 处理组大鼠损毁侧黑质神经元数目较健侧显著减少(P<0.05);Mrh-aFGF 处理组术后1周、2周、4周损毁侧神经元数目均较PD组及NS 处理组明显增加(P<0.05);PD组大鼠黑质神经元超微结构明显受损,出现核固缩,线粒体肿胀、嵴消失,粗面内质网扩张、脱颗粒,以及突触前后膜肿胀,突触间隙消失,Mrh-aFGF处理组黑质神经元超微结构有明显改善。 结论 Mrh-aFGF能改善PD大鼠的旋转行为,减少PD大鼠黑质神经元的丢失,并改善其黑质神经元的超微结构。     

人参皂甙对老龄大鼠大脑皮质AChE老龄性改变的影响

目的观察大鼠大脑皮质乙酰胆碱酯酶(AChE)阳性纤维的老龄性改变,探讨人参皂甙对其影响。方法24只雌性Wis青tar大鼠随机分为青年组、老龄组及给予人参皂甙的给药组。对各组大鼠大脑皮质进行AChE酶细胞化学染色,图像分析各组大鼠大脑皮质神经纤维AChE含量及AChE纤维的配布情况。结果老龄组大鼠大脑皮质神经纤维AChE平均光密度值较年组明显减少(p<0.01),AChE纤维面积百分比例下降,人参皂甙组大鼠大脑皮质神经纤维AChE平均光密度值较老龄组明显增加(p<0.01),纤维面积百分比例上升。结论人参皂甙可增加老龄大鼠大脑皮质纤维中AChE平均光密度值,促进纤维侧枝出芽和纤维网的生长及重建。     

大鼠苍白球乙酰胆碱酯酶阳性神经元的衰老变化——形态计量学研究

本研究结合组织化学和形态计量学方法,观察幼龄(3月龄)和老龄(24月龄)雄性大鼠苍白球内乙酰胆碱酯酶阳性(AChE-P)神经元的衰老变化。老龄苍白球AChE-P神经元的数量,比幼龄组减少约11.8％;幼龄阳性神经元的突起总长度是老龄组的1.4倍;但在老龄组中,约有8.6％阳性神经元的突起总长度,大于幼龄的平均突起总长度(232.1μm);老龄苍白球AChE-P神经元的灰度值,明显高于幼龄组,但约有6.8％老龄阳性神经元的灰度值低于幼龄的平均灰度值(117.8);老龄苍白球AChE-P神经元的截面积,比幼龄增大约9.2％。形态学观察发现,大部分老龄AChE-P神经元呈退行性改变,但有一部分老龄AChE-P神经元胞体增大,染色加深,突起茂密,分支增多。上述结果表明,苍白球内AChE活性的增龄性下降及其神经元的退行性改变,并不是在所有的AChE-P神经元中同步发生。从而提示,在衰老过程中,苍白球AChE-P神经元可能存在着一种与衰老机制密切相关的代偿机制。     

人参皂甙对老龄大鼠Meynert核及大脑皮质脑源性神经营养因子含量的影响

目的观察Meyaert核（NBM）与大脑皮质神经元内脑源性神经营养因子（BDNF）的老龄性改变,探讨人参皂甙对BDNF蛋白含量表达的影响.方法雌性Wistar大鼠随机分为青年组、老龄组及老龄给药组.老龄给药组大鼠自18个月开始饲以人参皂甙至27月龄.对各组NBM及大脑皮层神经元进行免疫组织化学法染色、图像分析及统计学处理.结果老龄组大鼠NBM及大脑皮质内BDNF含量均显著低于青年组（P＜0.01）.给药组大脑皮质内BDNF含量较老龄组显著增加（P＜0.01）,但NBM内BDNF含量变化无统计学意义.结论老龄大鼠NBM及大脑皮质内BDNF含量显著降低,给予人参皂甙可显著提高大脑皮质神经元BDNF的表达.     

慢性脑缺血对青年和老年大鼠海马NOS阳性神经元的影响

本文利用组织化学方法观察了慢性脑缺血对青、老年大鼠海马ＮＯＳ阳性神经元的影响。慢性脑缺血采用双侧颈总动脉永久性结扎模型。结果：青年缺血１ 月组大鼠海马ＣＡ１、ＣＡ２～３ 和ＤＧ 亚区ＮＯＳ阳性神经元面数密度分别为２９．１±２．３、２３．５±２．１ 和３９．３±２．８,小于对照组相应三个亚区（４９．６±１．３、４９．３±２．１ 和６４．７±２．１）,Ｐ＜ ０．０１;青年缺血３ 月组大鼠ＣＡ１、ＣＡ２～３ 和ＤＧ 亚区ＮＯＳ阳性神经元面数密度分别为４０．２±１．６、３９．３±２．５ 和４８．４±１．８,和对照组者相近,但大于缺血１ 月组（Ｐ＜ ０．０１）。老年缺血１ 月组大鼠海马各区ＮＯＳ阳性神经元面数密度分别为３９．６±１．５、３５．６±２．１ 和５４．７±２．５,小于老年对照组相应三个亚区（５５．８±１．７、５１．３±１．７ 和６４．９±１．９）,Ｐ＜ ０．０１;老年缺血３ 月组大鼠各亚区ＮＯＳ阳性神经元面数密度分别为４３．１±２．４、３８．７±３．４ 和５４．７±３．２,仍然小于对照组,Ｐ＜ ０．０１。结果提示：慢性脑缺血可以影响大鼠海马ＮＯＳ阳性神经元,但青年和老年大鼠海马ＮＯＳ神经元对慢性脑缺血损伤的易感性和反应性不同。     

P>四氯化碳对大鼠海马CA1区神经元低亲和力神经生长因子受体p75表达的影响/P>

目的 研究四氯化碳(CCl4)对大鼠脑海马CA1区神经元低亲和力神经生长因子受体p75的表达和凋亡的影响.方法 将24只健康雄性Wistar大鼠随机分为对照组和CCl4组.对照组每周一、四背部皮下注射橄榄油(0.12ml/100g),CCl4组分别在每周一或/和周四背部皮下注射60?l4-橄榄油溶液(0.3ml/100g)1次(1d组)、2次(1周组)和4次(2周组),实验结束时处死大鼠.取脑后沿正中矢状面切开,右侧半脑石蜡切片,行Nissl染色,观察海马CA1区神经元的形态学改变;行p75、Bax免疫组织化学染色和Western blotting分析,检测海马CA1区神经元p75、Bax的表达,行原位缺口末端标记法(TUNEL)观察海马CA1区神经元的凋亡.结果 Nissl染色显示对照组CA1区神经元染色较深,细胞数目较多,排列整齐,神经元内可见大量尼氏体;CCl4组CA1区神经元排列较对照组紊乱,部分锥体细胞体积缩小,核固缩,呈三角形,胞浆内尼氏体数目减少或消失.对照组海马CA1区可见少量表达p75和Bax的阳性细胞;CCl4组海马CA1区表达p75和Bax的阳性细胞数较对照组明显增多,以1周CCl4组增多最为明显;Western blotting结果与免疫组织化学染色结果一致.对照组海马CA1区未见TUNEL阳性细胞;CCl4组海马CA1区可见大量细胞核呈棕黄色着色的TUNEL阳性细胞,以1周CCl4组的阳性细胞数最多.结论 注射CCl4后,大鼠脑海马CA1区p75的表达明显增强,Bax的表达也相应增强,凋亡的神经元明显增多.     

老年学习记忆减退大鼠的海马GABA能神经元数量变化

为探讨γ-氨基丁酸 (GABA)能神经元在老年脑的改变及其与老年性学习记忆减退间的关系。本研究通过 Morris水迷宫测试将老年大鼠分为学习记忆正常和损害组 ,用免疫细胞化学和体现视学方法定量描述 GABA能神经元的改变。结果显示 ,老年记忆正常和损害组海马本部各区的 GABA能神经元均较年轻组明显减少 ,但正常组和损害组海马之间无显著性差异。齿状回分子层的 GABA阳性神经元的数量仅在老年学习记忆损害组明显减少 ,且 GABA神经元数量与搜寻平台的游泳时间呈负相关 (r=- 0 .91,P<0 .0 1)。提示老年学习记忆能力减退可能与齿状回分子层的 GABA能神经元丢失有关     

海马CA_1区锥体细胞的衰老性变化——超微结构定量分析

本文应用光镜和电镜观察结合形态计量学及体视学的研究方法对青年组(3个月).老年组(34个月).SD大白鼠海马CA;区锥体细胞进行研究.结果显示老年组CA;区25μm区段锥体细胞数、核仁体积、粗面内质网面密度(SV)均比青年组减少,脂褐素体密度(VV)比青年组增加.电镜下见老年组海马CA_1区锥体细胞内的粗面内质网出现脱颗粒、双层膜之间间隔增宽、线粒体肿胀等细胞器的变化,表明海马CA_1区锥体细胞迟变比其它脑区更严重.本文并对锥体细胞丢失及退变的意义进行讨论.     

养血清脑颗粒对蒙古沙鼠全脑缺血再灌注后海马CA1区神经元的治疗作用

目的 探讨蒙古沙鼠全脑缺血再灌注后养血清脑颗粒(Yangxueqingnaokeli,YXQNKL)的治疗作用.方法 采用蒙古沙鼠两侧颈总动脉结扎法,缺血30min再灌注5d模型(分为假手术组、缺血再灌注组、养血清脑颗粒治疗组).用Nissl染色法观察海马CA1区神经元的形态和数量,用免疫组织化学方法观察海马CA1区神经元神经钙离子感应蛋白1(NCS-1)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)和谷氨酸盐合成酶(Glusyn)的表达情况.结果 与缺血再灌注组比较,缺血再灌注 0.4g/kg养血清脑颗粒治疗组和缺血再灌注 0.8g/kg养血清脑颗粒治疗组Nissl染色显示海马CA1区神经元数量明显增加(P＜0.05);免疫组织化学法显示海马CA1区神经元细胞NCS-1、caspase-3和Glusyn的阳性细胞数明显减少(P＜0.05).结论 全脑缺血再灌注后,给予养血清脑颗粒能显著增加海马CA1区神经元数量,这与其减少海马CA1区神经元NCS-1、caspase-3和Glusyn的表达有密切的联系.     

补肾益气化瘀方对衰老大鼠海马神经元的影响

目的观察补肾益气化瘀方对衰老大鼠海马神经元结构的影响，并探讨其作用机制。方法选用青年Wistar大鼠36只，随机分成三组：空白对照组、模型对照组、药物组。使用D-半乳糖腹腔注射建立亚急性衰老大鼠模型。模型建立后，药物组每天用补肾益气化瘀方提取液灌胃，空白对照组、模型对照组用生理盐水灌胃，连续四周。然后用光学显微镜观察海马神经元结构，用紫外分光光度计检测大鼠海马超氧化物歧化酶（SOD）活性及丙二醛（MDA）含量。结果空白对照组：海马轮廓清晰，CA3区神经元细胞密集，胞浆丰富，核大深染，细胞间排列整齐，界限清楚；模型对照组：海马轮廓模糊，神经元细胞明显减少，细胞间排列松散，界限不清；药物组：海马轮廓清晰，神经元细胞明显多于模型对照组，神经元胞浆较丰富，核大深染，细胞间排列较整齐，界限清楚。模型对照组海马MDA含量增加，SOD活性减少；与模型对照组比较，药物组海马超氧化物歧化酶（MDA）含量减少，SOD活性增加（P〈0、01）。结论补肾益气化瘀方对衰老大鼠海马神经元具有保护和修复作用，其机理可能与抗自由基损伤有关。     

Functional elongation of CA1 hippocampal neurons with aging in Fischer 344 rats

Dendritic function of CA1 pyramidal cells was measured during intracellular recording in vitro and correlated with in vivo behavior in Fischer 344 rats. The aged rats (greater than 26 months) were significantly impaired on a water maze test of hippocampal behavioral function. CA1 neurons from these aged rats demonstrated an elevated action potential threshold compared to the young rats. Electrotonic length (L, in lambda), calculated independently from physiological transients and electrotonic cell reconstructions, was significantly longer in neurons from aged rats (L = 0.73 +/- 0.02 lambda; mean +/- SEM) than in neurons from young rats (L = 0.66 +/- 0.02 lambda). Analysis of proximal and distal synaptic potentials pointed to a more distal electrotonic siting of all dendritic synapses in the aged neurons. Thus, electrical lengthening of dendrites, alterations in synaptic location and decreased excitability in neurons from aged rats with behavioral impairment may represent an endpoint of neuronal reactive mechanisms in response to the aging process.     

Nimodipine increases excitability of rabbit CA1 pyramidal neurons in an age- and concentration-dependent manner.

1. Cellular properties were studied before and after bath application of the dihydropyridine L-type calcium channel antagonist nimodipine in aging and young rabbit hippocampal CA1 pyramidal cells in vitro. Various concentrations of nimodipine, ranging from 10 nM to 10 microM, were tested to investigate age- and concentration-dependent effects on cellular excitability. Drug studies were performed on a population of neurons at similar holding potentials to equate voltage-dependent effects. The properties studied under current-clamp conditions included steady-state current-voltage relations (I-V), the amplitude and integrated area of the postburst afterhyperpolarization (AHP), accommodation to a prolonged depolarizing current pulse (spike frequency adaptation), and single action-potential waveform characteristics following synaptic activation. 2. Numerous aging-related differences in cellular properties were noted. Aging hippocampal CA1 neurons exhibited significantly larger postburst AHPs (both the amplitude and the integrated area were enhanced). Aging CA1 neurons also exhibited more hyperpolarized resting membrane potentials with a concomitant decrease in input resistance. When cells were grouped to equate resting potentials, no differences in input resistance were noted, but the AHPs were still significantly larger in aging neurons. Aging CA1 neurons also fired fewer action potentials during a prolonged depolarizing current injection than young CA1 neurons. 3. Nimodipine decreased both the peak amplitude and the integrated area of the AHP in an age- and concentration-dependent manner. At concentrations as low as 100 nM, nimodipine significantly reduced the AHP in aging CA1 neurons. In young CA1 neurons, nimodipine decreased the AHP only at 10 microM. No effects on input resistance or action-potential characteristics were seen. 4. Nimodipine increased excitability in an age- and concentration-dependent manner by decreasing spike frequency accommodation (increasing the number of action potentials during prolonged depolarizing current injection). In aging CA1 neurons, this effect was significant at concentrations as low as 10 nM. In young CA1 neurons, nimodipine decreased accommodation only at higher concentrations (> or = 1.0 microM). 5. We conclude that aging CA1 neurons were less excitable than young neurons. In aging hippocampus, nimodipine restores excitability, as measured by size of the AHP and degree of accommodation, to levels closely resembling those of young adult CA1 neurons. These actions of nimodipine on aging CA1 hippocampal neurons may partly underlie the drug's notable ability to improve associative learning in aging rabbits and other mammals. Reversal of inhibitory postsynaptic potentials (IPSPs) by chloride ion and/or current injections into six motoneurons revealed the presence of inhibition during the period between phrenic bursts during fictive vomiting and also during the final phase of expulsion when phrenic discharge ceased by abdominal discharge continued. 3. Fictive coughing, evoked by repetitive electrical stimulation of superior laryngeal nerve afferents, was characterized by a large phrenic discharge followed immediately by a large abdominal nerve discharge. During fictive coughing, phrenic motoneurons retained their ramplike depolarizations throughout phrenic discharge; however, the amplitude of depolarization was greater than during inspiration. During the subsequent abdominal nerve discharge, the phrenic membrane potential usually underwent an initial rapid, transient hyperpolarization followed by a gradual repolarization associated with increased synaptic noise.(ABSTRACT TRUNCATED AT 400 WORDS)     

老龄大鼠海马结构脑源性神经营养因子表达的改变

目的：探讨大鼠海马结构脑源性神经营养因子（BDNF）表达的老龄性改变，为脑衰老提供可靠的免疫组织化学资料。方法：选用雌性Wistar大鼠24只，分为青年组和老龄组。应用免疫组化方法结合图像分析技术对2组大鼠海马结构BDNF阳性产物进行定性、定量分析。结果：老龄组海马CA3和CA1区神经元BDNF含量比青年组分别下降了13．3％、10．4％，然而，齿状回从青年到老年变化不显著。结论：老龄时海马CA3和CA1区神经元的BDNF表达发生了明显的变化，其含量明显降低。提示老龄大鼠海马CA3和CA1区神经元BDNF表达的改变，可能是老龄动物海马结构营养及学习记忆障碍的形态学基础。