体内外成熟过程中小鼠卵母细胞纺锤体形态和皮质颗粒分布的比较

目的:了解体内外成熟过程中小鼠卵母细胞减数分裂进程、纺锤体形态、皮质颗粒分布的差异。方法:分别收集体内和体外成熟2h、4h、8h、16h的卵母细胞,用免疫荧光法标记微管,Hochest33258标记染色体,FITC-LCA标记皮质颗粒,分别观察卵母细胞减数分裂进程、纺锤体形态和皮质颗粒分布,并进行比较。结果:与体外成熟卵母细胞相比,体内成熟的卵母细胞减数分裂进程高度一致。体内成熟的卵母细胞减数分裂中期的纺锤体呈两端逐渐变细的"纺锤状",且靠近卵膜(100%);而大多数体外成熟的卵母细胞的纺锤体两端宽大,呈"桶状",在第一次减数分裂中期和第二次减数分裂中期各有34.29%和43.24%靠近卵膜。体外成熟卵母细胞在第一次减数分裂中期和第二次减数分裂中期出现无皮质颗粒区的比例(分别为12.5%和75%)明显低于体内成熟卵(均为100%)。结论:体内和体外成熟的卵母细胞在减数分裂进程、纺锤体的形态和运动、皮质颗粒分布等方面均存在巨大的差异。体外成熟的卵母细胞在这些方面的变化可能与其发育能力下降有关。     

卵子成熟障碍综合征的特征及分子机制

卵子成熟障碍发生于体外受精技术的促排卵过程中,如果反复发生且不能通过卵子体外成熟培养来解决时,即称为卵子成熟障碍综合症。根据卵子减数分裂阻滞在不同的时期将卵子成熟障碍综合症分为GV期阻滞、MI期阻滞、MII期阻滞和混合型阻滞。目前认为,卵子体内成熟过程中的不同时期的主要信号传导通路障碍,将导致不同类型的卵子成熟障碍的发生。     

Src家族激酶在卵母细胞减数分裂成熟和受精中的作用

Src家族激酶是一类非受体酪氨酸激酶。在卵母细胞成熟过程中,Src家族激酶能够促进卵母细胞恢复减数分裂。对海洋无脊椎动物和低等脊椎动物卵子受精过程的研究证明,Src 家族激酶与卵子活化过程中的Ca~(2+)释放有关；而在哺乳动物卵子中,对Src家族激酶的作用尚未形成一致结论。本文结合作者自己的工作,对目前Src家族激酶在减数分裂成熟和受精中的作用进行了总结和展望。     

人类不同时期未成熟卵母细胞玻璃化冷冻后发育潜能的比较

目的:探索未成熟卵子的最佳冷冻时期。方法:收集卵胞质内单精子显微注射-胚胎移植(ICSI-ET)周期中未成熟的卵母细胞,按其成熟度分为生发泡期(GV组)卵子179枚和第一次减数分裂中期(MI组)卵子323枚,所有卵子均经玻璃化冷冻,解冻后行体外成熟(IVM)培养,ICSI受精,观察比较GV组和MI组解冻后存活、体外成熟、受精及胚胎发育情况。结果:GV组复苏存活率显著高于MI组(83.24%vs 75.54%,P=0.045),MI组体外成熟率、受精率、卵裂率、优质胚胎率均略均高于GV组,但无统计学差异(P0.05),MI组可利用胚胎率显著高于GV组(78.67%vs 60.53%,P=0.041)。结论:超促排卵周期中未成熟卵母细胞先玻璃化冷冻保存,再行体外培养是可行的。GV期卵母细胞复苏存活率高于MI期卵母细胞,但MI期卵母细胞冻融后发育潜能优于GV组卵母细胞。     

体外受精联合未成熟卵母细胞体外培养技术在卵巢低反应者中的初步应用研究

目的:探讨体外受精(IVF)联合未成熟卵母细胞体外培养(IVM)对卵巢低反应者的治疗效果.方法:6例在控制性超促排卵中表现为低反应者,注射绒毛膜促性腺激素(hCG)后36h取卵,对不同期未成熟卵母细胞行体外培养及受精;对成熟卵母细胞进行常规体外受精,胚胎形成后行移植术,术后21d明确有无临床妊娠。结果:6例病人共获取卵子74只,其中未成熟卵母细胞58枚(GV期24枚,MI期34枚),经体外成熟培养后47枚成熟,受精后19枚继续发育成胚胎。同时获取的16枚成熟卵母细胞(MⅡ期),受精后12枚继续发育成胚胎形成。病人全部行胚胎移植术,临床妊娠2例。结论:IVF联合IVM技术为卵巢低反应性患者提供了一种有效的补救治疗措施,提高了妊娠机会。     

Src家族激酶在卯母细胞减数分裂成熟和受精中的作用

Src家族激酶是一类非受体酪氨酸激酶。在卵母细胞成熟过程中，Src家族激酶能够促进卵母细胞恢复减数分裂。对海洋无脊椎动物和低等脊椎动物卵子受精过程的研究证明，Src家族激酶与卵子活化过程中的Ca^2＋释放有关；而在哺乳动物卵子中，对src家族激酶的作用尚未形成一致结论。本文结合作者自己的工作，对目Src家族激酶在减数分裂成熟和受精中的作用进行了总结和展望。     

女性霍奇金淋巴瘤患者分别应用卵巢组织冷冻和体外成熟卵子进行卵子冷冻——1例报告

目的探讨女性血液肿瘤患者生育力保存的方法。方法分析1例未婚霍奇金淋巴瘤患者通过卵巢组织冷冻并在体外获得成熟卵母细胞后行卵子冷冻的病例并进行文献复习。结果未婚霍奇金淋巴瘤患者可通过卵母细胞体外成熟(IVM)技术行卵母细胞冷冻,同时结合卵巢组织冷冻技术来尽快完成生育力保存。结论对于急切需要接受抗肿瘤治疗的肿瘤患者,可通过卵母细胞IVM技术在最短的时间内进行卵母细胞或胚胎冷冻,同时结合卵巢组织冷冻技术在最大程度上达到生育力保存的目的。     

人未成熟卵母细胞体外培养成熟、受精及胚胎移植

目的 应用卵母细胞体外成熟(IVM)技术帮助卵泡成熟障碍的不孕症患者获得妊娠及分娩。方法 接受未成熟卵IVM技术治疗者30例35个周期,其中多囊卵巢综合征14例,有卵巢过度刺激综合征病史6例,体外受精和胚胎移植(IVF-ET)周期中卵巢反应不良患者10例。设计卵巢刺激方案,采用含人成熟卵泡液的IVM培养液,建立未成熟卵母细胞的体外培养方法。结果 35个周期共取得未成熟卵母细胞203个,平均每个周期5．8个。培养后有156个卵母细胞排出第一极体,IVM率76．8％(156／203);在卵胞浆单精子显微注射(ICSI)12～18h后观察原核,正常受精率为76．9％(120／156);共有移植周期33个,获8例临床妊娠,妊娠率24％(8／33);有5例共7个婴儿出生。结论 IVM对一些卵泡发育和成熟障碍,特别是顽固性多囊卵巢综合征患者,是一种有效的辅助生育措施。人成熟卵泡液含有理想的自然促卵母细胞成熟的成分。     

无刺激周期未成熟卵母细胞体外培养用于多囊卵巢综合征不孕患者治疗的临床观察

目的探讨无刺激周期未成熟卵母细胞体外培养在治疗多囊卵巢综合征(PCOS)不孕患者的应用价值。方法对70例PCOS患者,在人工周期或自然周期第10～12天行阴道B超监测,如双侧卵巢中无直径>8mm的卵泡,即肌内注射人绒毛膜促性腺激素10000IU,36h后经阴道穿刺取卵,将取出的未成熟卵母细胞进行体外成熟及体外受精胚胎移植。结果共进行体外成熟周期94个,移植周期75个。共获得卵母细胞1283个,获得成熟838个(65.3%,838/1283),其中受精553个(66.0%,553/838),获得胚胎402个(48.0%,402/838),获得优质胚胎199个(23.7%,199/838)。生发泡期卵母细胞的成熟率、受精率、获得胚胎率及优质胚胎率,分别为67.7%、66.4%、47.6%及24.1%;第1次减数分裂中期的卵母细胞,分别为69.7%、71.7%、52.2%及26.1%,生发泡期与第1次减数分裂中期比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。无法评价的卵母细胞的成熟率、受精率、获得胚胎率及优质胚胎率,分别为44.8%、53.8%、46.2%及16.9%,与生发泡期及第1次减数分裂中期比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。75个移植周期中,18例获得临床妊娠,妊娠率为24%(18/75)。结论无刺激周期未成熟卵母细胞体外成熟及体外受精胚胎移植可用于PCOS不孕患者的治疗,并能取得一定的妊娠成功率。     

优化的助孕策略——人未成熟卵的体外成熟

卵母细胞体外成熟(IVM)是指从窦卵泡中获得的不同阶段的未成熟卵经过体外培养成为成熟MII卵的技术。与传统的体外受精(IVF)技术相比,IVM因使用激素量低,更加方便、经济、快速,可减少多囊卵巢(PCO)和多囊卵巢综合征(PCOS)患者因激素刺激引起的过激反应的发生。此外,对于女性癌症患者,IVM技术亦是一项非常重要的生育力保存方法。然而,受制于IVM技术卵子成熟率不够高,体外成熟时间难以把握等,IVM的临床应用远低于IVF。随着大量动物实验模型和向人未成熟卵母细胞的转化研究,体外成熟培养系统不断得到优化,IVM作为一种更加经济有效的助孕方案在临床中的应用将会越来越多。