白细胞去除术对内毒素血症犬肺损伤的影响及机制研究

急性肺损伤( acute lung injury,ALI)/ARDS发病率和病死率仍居高不下[1-5].多形核白细胞( polymorphonu-clear leucocyte,PMN)在肺内积聚、活化,相应产物增加在肺实质细胞损伤中的关键作用已获得公认[6-9].笔者利用连续血流白细胞分离机部分去除内毒素血症犬外周血白细胞,观察部分白细胞去除对内毒索血症犬ALV/ARDS发生的影响,并通过其对血清弹性蛋白酶(neu-trophil elastase,NE)及NF - KB的影响进一步探讨白细胞去除影响ALI发生的机制.     

白细胞去除对内毒素血症犬凝血功能及肺损伤的影响

目的 观察白细胞去除后凝血纤溶系统的变化,探讨这一变化对肺损伤的影响及其可能机制.方法 用内毒素(LPS)2 mg/kg建立内毒素血症犬模型.30只雄性杂种犬采用随机数字表法分为LPS组(L组)、伪白细胞去除对照组(S组)、白细胞去除治疗组(T组),每组10只.L组只给予LPS输注,不行白细胞去除(leukocytapheresis,LCAP);S组在LPS输注后12～14 h间行伪白细胞去除;T组在LPS输注后12～14 h间行LCAP.动态观察每组动物外周血活化蛋白C(activated protein C,APC)、可溶性血栓调节蛋白(soluble thrombomodulin,sTM)及纤溶酶原激活物抑制物-1(plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)在输注LIPS前及输注后2,6,12,14,16,24及36 h的变化.结果 (1)T组动物在14,16 h时血清APC水平[(50.805±4.422)μg/ml、(40.480±2.993)μg/,l]分别高于L组[(45.881 ±4.024)μg/,l、(35.935±4.057)μg/ml)(P<0.05);(2)T组在14,16 h时sTm水平[(9.688±0.914)μg/ml、(10.492±0.865)μg/ml]分别低于L组[(11.005±0.854)μg/ml、(12.04±O.954)μg/ml)(P<0.05);(3)T组在14,16 h时PAI-1水平显著低于L组(P<0.05);(4)T组急性肺损伤发生率显著低于L组(2/10:7/10,P<0.05).结论 LPS诱导的内毒素血症早期存在凝血纤溶功能异常,白细胞去除能改善凝血纤溶功能,可能是白细胞去除减少急性肺损伤发生率的作用机制之一.

Abstract：

Objective To observe the effect of leukocytapheresis(LCAP)on the coagulation,fibrinolysis system and lung injury in the endotoxemia dog and explore the mechanism in the endotoxin-induced lung injury dog. Methods Endotoxemia-induced model in dogs was established by administration of lipopolysaccharide(LPS,2 mg/kg).Separation of the leucocytes wag performed with the automated continuous flow blood cell separators.A total of 30 male mongrel dogs were randomly divided into LPS group(group L,only injected with LPS,with no LCAP),sham LCAP group(group S,received sham LCAP at 12-14 hours after administration of LPS)and LCAP treatment group(group T,received LCAP at 12-14 hours after administration of LPS),10 dogs per group.The dynamic changes of the activated protein C(APC),soluble thrombomodulin and plagminogen activator inhibitor-1 in the serum were measured at 0 hour before LPS administration,at 2,6,12,14,16,24 and 36 hours after administration of LPS.Results Through LCAP,there found the following four results:(1) the APC level in the serum of the group T wag(50.805±4.422)μg/ml and(40.480±2.993)μg/ml at 14 hours and 16 hours respectively,which were significantly higher than(45.881±4.024)μml and(35.935±4.057)μg/ml in the group L(P<0.05).(2)The expressions of soluble thrombomadulin in the group T was (9.688±O.914)μml and(10.492±O.865)μg/ml at 14 hours and 16 hours respectively,which was statistically lower than(11.005±0.854)μg/ml and(12.04±0.954)ug/ml in the group L(P<0.05).(3)Thelevel of plagminogen activatorinhibitor-1 in the group T was lower than that in the group the group T Wag statistically lower than that in the group L(ALI/ARDS occurred in 2 and 7 dogs of the groups T and L respectively within 36 hours after infusion of LPS.P<0.05). Conclusions At the decrease the incidence of acute lung injury partly due to its role in improving the function of coagulation and fibrinolysis.     

高压氧干预对急性呼吸窘迫综合征大鼠肺损伤模型的保护作用及其机制

目的比较高压氧和常压氧处理对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)大鼠肺损伤的保护作用及其机制。方法选取体重(200±20)g Wistar大鼠32只, 按照随机数字表法分为4组, 对照组(n=8)予以生理盐水注射, 另外24只大鼠采用脂多糖(LPS)二次打击造模成功后分为模型组、常压氧组和高压氧组, 每组8只。模型组建模成功后不进行其他处理, 常压氧组给予2 h氧吸入, 高压氧组予以0.25 MPa高压氧干预。分别于建模后和干预3 d后测定动脉血氧分压(PaO2)和吸入氧气浓度百分比(FiO2);检测血D-乳酸、内毒素和血浆二胺氧化酶(DAO)水平;测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-10和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;检测大鼠肺组织中丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽GSH)水平及超氧化物歧化酶(SOD)活性、髓过氧化物酶(MPO)活性;并进行大鼠肺组织病理评分, 计算湿/干肺重量比(W/D)。结果高压氧组大鼠D-乳酸、内毒素、DAO水平、肺W/D比、肺组织病理评分、肺组织的MPO、MDA、GSH及灌洗液中IL-1β、IL-6和T...     

肺挫伤复合内毒素血症肺损伤模型的建立及其早期肺炎症反应变化

目的 建立一种可用于实验研究的急性肺损伤（ALI）模型,观察其早期肺炎症反应特点,并探讨此模型下肺炎症反应与肺损伤伤情的关系。方法 首先以生物撞击机复制肺挫伤模型。经尾静脉注射内毒素（LPS）,复制内毒素血症肺损伤模型;用同样的方法实施胸部撞击伤,然后注射LPS,建立肺挫伤复合内毒素血症肺损伤模型;观察三个模型下的死亡率、动脉血氧分压（PaO2）、肺含水率（RLW）及肺泡灌洗液（BALF）内多形核白细胞（PMN）和炎性介质变化。结果 肺挫伤复合内毒素血症肺损伤模型的48小时死亡率为57.5%,显著高于肺挫伤和内毒素血症肺损伤模型的死亡率;本模型致伤后早期PaO2降低和RLW升高程度均较其它两种模型明显,BALF内PMN计数和炎性介质水平出现显著变化,变化程度较其它两组明显。结论 肺挫伤复合内毒素血症肺损伤模型是一种严重的ALI模型,此模型的肺组织发生了明显的炎症反应;BALF中炎性介质于致伤后早期出现明显变化,创伤后早期肺炎症反应水平影响肺损伤程度及预后的重要因素。     

全氟化碳乳剂对急性肺损伤大鼠IL-1β水平的影响

 目的 探讨全氟化碳乳剂(PFCE)静脉注射对急性肺损伤大鼠血清和肺泡灌洗液白介素-1β(IL-1β)水平的影响.方法 56只雄性健康Wistar大鼠腹腔麻醉后分为对照组(NC组)、内毒素组(Lipopolysaccharide,LPS组)、PFCE预防组(预防组).NC组静脉注射生理盐水10 ml/kg后2 h处死,LPS组和预防组分别静脉注射生理盐水/PFCE 10 ml/kg后10 min静脉注射LPS 8mg/kg,于2h、4h、6h分批处死.比较三组肺脏病理损伤程度、血清和肺泡灌洗液IL-1β浓度.结果 LPS组肺病理主要表现为肺泡隔明显增宽,大量白细胞渗出、聚集,部分肺泡腔中可见渗出液、出血、萎陷不张,预防组较LPS组明显减轻,病理损伤评分显著下降.与LPS组相比,预防组4 h、6 h肺泡灌洗液IL-1β浓度[(0.08±0.01) ng/ml、(0.07±0.02) ng/ml]显著降低(P＜0.05),而血清IL-1β浓度无明显变化.结论 PFCE通过减轻肺脏炎性细胞浸润、降低肺内IL-1β释放可能是其预防急性肺损伤发生的重要机制之一.     

丹参对大鼠急性肺损伤保护作用的实验探讨

目的探讨丹参对创伤性急性肺损伤（ALI）的治疗效应及可能机制。方法SD大鼠60只，随机分为正常组、急性肺损伤模型组及丹参注射液治疗组，每组各20只。分别于1周后电镜HE染色观察各组大鼠肺组织病理改变，肺湿／干重比（W／D）观察肺脏水通透性的变化，并且测定支气管肺泡灌洗液中中性粒细胞百分比及支气管肺泡灌洗液（BALF）总蛋白和乳酸脱氢酶（LDH）等肺损伤指标。结果丹参注射液治疗组的大鼠肺组织病理改变及肺湿／干重比均优于急性肺损伤模型组，且不同程度降低BALF中中性粒细胞含量及总蛋白和乳酸脱氢酶。结论丹参对急性肺损伤具有保护作用。     

人参皂苷Rg1对大鼠海水淹溺性肺损伤的保护作用及其机制

 目的 探讨人参皂苷Rg1对海水淹溺性肺损伤的保护作用及其机制。方法 128只雄性SD大鼠随机均分为4组:空白对照组(C组)、生理盐水组(S 组)、20 mg/kg低剂量人参皂甙Rg1组(L组)、100 mg/kg高剂量人参皂苷Rg1组(H组)。L组和H组分别经尾静脉注射人参皂苷20或100 mg/kg, S组尾静脉注射等容的生理盐水,给药2 h后建立海水淹溺性肺损伤模型。分别于吸入海水前(基础值T0)、吸入海水后30 min(T₁)、1 h(T₂)、2 h(T₃)和4 h(T₄)各时间点检测动脉血PaO₂和PaCO₂的动态变化;于建模后2 h和4 h取出肺组织和外周血标本,检测肺湿干重比(W/D)、肺泡灌洗液蛋白定量(BALF)、超氧化物歧化酶(SOD)和髓过氧化物酶(MPO)活性、丙二醛(MDA)和细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6的浓度,取建模后4 h的右肺下叶组织行HE病理检查。结果 T₀时4组的动脉血 PaO₂、PaCO₂差异均无统计学意义。T₁~T₄时S和L组PaO₂明显低于 H组(P<0.05),S和L组PaCO₂明显高于H组(P<0.05)。T₃和T₄时,S、L和H组肺组织 W/D比值均明显高于C组(P<0.05),H 组肺组织 W/D明显低于S组和L组(P<0.05)。H 组 MDA浓度和MPO活性明显低于S组和 L组(P<0.05), H 组SOD活性明显高于S组和 L组(P<0.05)。H 组血清中炎性因子TNF-α、IL-1β和IL-6水平明显低于S组和L组。HE病理染色显示H 组肺泡塌陷、水肿及炎性细胞浸润较S组明显减轻。结论 预防性使用人参皂苷Rg1(100 mg/kg)能显著减轻海水淹溺导致的早期(4 h内)肺损伤,其保护机制与减轻肺内的炎性反应和氧化应激相关。     

赤芍对大鼠内毒素急性肺损伤丝裂原活化蛋白激酶p38/NF-κB/iNOS的影响

目的 观察赤芍对大鼠内毒素性急性肺损伤(acute lung injury,ALI)丝裂原活化蛋白激酶p38(p38MAPK)/NF-κB/诱导型-氧化氮合酶(iNOS)信号通路的影响,探讨其防治作用的分子机制. 方法采用大鼠内毒素ALI模型,40只Wistar大鼠完全随机分为假手术对照组(A组)、内毒素组(B组)、赤芍治疗组(C组)、赤芍预防组(D组)和SB203580组(E组),每组8只大鼠.观察赤芍对肺组织中p38MAPK、NF-κB和iNOS表达的影响,肺泡灌洗液中性粒细胞比和蛋白含量、肺组织丙二醛(MDA)含量及血清NO含量的变化,于LPS滴注后6 h行血气分析,并进行病理学观察. 结果与A组比较,B、C、D和E组p38MAPK、NF-κB和iNOS表达显著增强,肺泡灌洗液中性粒细胞比和蛋白含量、肺组织MDA含量和血清NO含量显著增加,PaO2和HCO3-明显降低(P<0.05或0.01);与B组比较,C、D组和E组p38MAPK、NF-κB和iNOS表达明显降低(P<0.05);肺泡灌洗液中性粒细胞比和蛋白含量、肺组织MDA显著减少,PaO2和HCO3-明显升高(P<0.05或<0.01).病理学显示C、D组和E组肺组织损伤程度较B组明显减轻;c、D、E组之间各项指标差异无统计学意义.结论 赤芍对内毒素性ALI的防治作用可能与抑制p38MAPK/NF-κB/iNOS信号通路密切相关.     

肺TGF-β1水平及血流分布变化与放射性肺损伤的关系

目的观察放射性肺损伤过程中肺血流分布改变和肺泡灌洗液及血清中TGF-β1水平变化.方法将纯种新西兰白兔55只分为对照组、20和30 Gy照射组（照射组再各分5个亚组）,5只/组.照射后不同时间进行肺灌注扫描观察肺血流分布及使用酶联免疫吸附分析法检测肺泡灌洗液和血清中TGF-β1水平,并观察照射后肺组织病理形态学改变.结果照射后左肺血流量占全肺血流量百分率不断下降,肺泡灌洗液和血清中TGF-β1水平逐渐升高,以3～6个月最显著.与放射性肺损伤病理形态学变化趋势相一致.结论肺泡灌洗液及血清中TGF-β1水平可预测放射性肺损伤发展趋势,肺血流量分布变化可间接反映放射性肺损伤病理形态学改变程度.     

水飞蓟宾对小鼠肺纤维化及氧化应激的作用及其机制

目的 探讨水飞蓟宾对小鼠肺纤维化和氧化应激的缓解作用及其可能机制。方法 120只小鼠随机分为假手术组、肺损伤模型组、地塞米松组,以及水飞蓟宾低、中、高剂量组,每组20只。采用博来霉素诱导小鼠肺损伤模型,地塞米松组及水飞蓟宾低、中、高剂量组分别灌胃给予地塞米松(3 mg/kg)和水飞蓟宾(120、240、480 mg/kg),假手术组和肺损伤模型组灌胃给予等量生理盐水,连续28 d。收集各组支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织,镜检计数BALF中炎性细胞数,HE染色观察肺组织病理变化,干湿重法测定肺湿/干重比(W/D),ELISA法检测肺组织中羟脯氨酸(HYP)含量以及BALF中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、IL-1β水平,Western blotting检测肺组织中骨形态发生蛋白9/骨成型蛋白受体2(BMP9/BMPR2)/SMAD信号通路相关蛋白的表达。结果 与假手术组比较,肺损伤模型组小鼠BALF炎性细胞数、肺损伤评分、肺纤维化评分、肺W/D、H...     

我院2006年肿瘤病区抗肿瘤药应用分析

目的:了解2006年我院肿瘤病区抗肿瘤药物应用情况,预测其发展趋势,为临床合理用药提供理论依据。方法:对我院肿瘤病区应用抗肿瘤药物的销售金额、DDD费用、DDDs、进行统计分析。结果:2006年我院肿瘤病区抗肿瘤药物销售金额列前三位的品类为多西他赛(15.6%)、易瑞沙(11.64%)和奥沙利铂(8.6%)。DDDs列前三位的品种是赛格恩(12.53%)、顺铂(10.34%)和艾恒(9.37%)。结论:进口化疗药物昂贵,应加快国产化疗药物及化疗辅助药物的研制。我院在抗肿瘤治疗中较多使用疗效确切、副作用小、价格便宜的国产抗肿瘤药物,在合理用药和保证疗效的前提下降低了治疗费用。     

游离NgR促进新生大鼠背根神经节突起体外生长

目的 观察生物合成的游离NgR对新生大鼠原代背根神经节(DRG)神经元突起生长的影响.方法 以ViraPowerTM慢病毒将NgR(310)ecto基因转染人培养的骨髓基质细胞,收集培养上清获得游离NgR.分离新生大鼠DRG神经元并分为两组,对照组直接将神经元种植到经含中枢神经系统(CNS)髓鞘蛋白包被的培养皿中培养;实验组先将骨髓基质细胞培养上清加入含CNS髓鞘蛋白的培养皿中,孵育4 h后再植入DRG神经元.两组细胞均在培养24 h后固定,进行βⅢ-tubulin免疫组织化学染色,图像观察神经元及其突起生长情况.结果 基因修饰的骨髓基质细胞,转染后48 h间接免疫荧光的方法检测可见胞浆内荧光表达.种植24 h后对照组DRG细胞很少有突起长出;而实验组DRG细胞中60%的神经元长出突起,且突起较长.结论 游离NgR能够竞争性结合脊髓损伤后局部分泌的轴突生长抑制因子,从而保护生理性NgR,可能是促轴突再生和脊髓功能恢复的一种新策略.     

经济管理科在医院微机联网中的作用

根据全军卫生工作安排,军队医院在近3年内陆续实施微机联网工作。我院是军区首家试点并正式开通的单位,经管科在全院微机联网过程中发挥了参与、协调和推动作用,保证了网络数字、信息的准确性、可行性。经过近1年的运行观察,发挥了良好的作用。我们的具体作法是:     

Variations in Angles of Gait in Running

Variations in angles of gait are common and can cause injuries such as shinsplints. Stretching exercises and physical therapy can be used for tight or weak muscles.     

Characterization of in vivo chemistry of cations in the heart

A variety of laboratory procedures can be used to define the chemistry and pharmacokinetics of myocardial cationic imaging agents. These methods are utilized to define the in vivo chemistry of cationic heart agents, in order to understand the kinetics and mechanisms of: tissue and cellular transport, subcellular distribution, and intracellular localization. Transport across cell membranes can be active, passive or facilitated. Studies performed in erythrocytes, heart cells, slices and isolated perfused hearts using methods for separation of metabolites have shown a high degree of myocardial specificity for [99mTc]hexakis alkyl isonitrile by an uptake mechanism different from 201Tl. These studies demonstrate the importance of in vivo chemistry and pharmacokinetics in the development of new radiopharmaceuticals.