B细胞淋巴瘤IgH基因重排的检测及临床应用

目的建立克隆性免疫球蛋白重链(IgH)基因重排检测技术,探讨B淋巴细胞IgH基因重排在恶性淋巴瘤诊断的临床价值。方法选取62例B细胞性非霍奇金淋巴瘤(B-NHL),其中,弥漫大B淋巴瘤(DL-BCL)42例、滤泡性B细胞淋巴瘤(FL)15例、套细胞淋巴瘤(MCL)5例;15例未定性的淋巴组织增生性病变;20例良性淋巴组织反应性增生病例。从组织蜡块切片提取基因组DNA,经PCR扩增,聚丙烯酰胺凝胶电泳后银染显示基因重排结果。结果62例B-NHL中53例IgH基因重排(85.5%),其中DLBCL37例、FL13例、MC14例,阳性率分别为88.1%、86.7%、80.0%,各组间阳性率差异无统计学意义(P>0.05);15例未确诊的疑难病例中10例IgH基因重排,其中7例经随访或会诊确认为B-NHL;20例良性淋巴组织反应性增生病例IgH基因重排均为阴性,IgH基因重排检出率在淋巴瘤组与良性组之间差异有统计学意义(P<0.001)。结论PCR法检测B淋巴细胞IgH基因重排可作为淋巴细胞来源的良、恶性病变的一种辅助诊断手段,适用于石蜡标本,进行回顾性研究。     

弥漫性大B细胞淋巴瘤克隆性基因重排检测研究

目的对弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)进行IgH基因重排研究。方法用免疫组化法标记筛选DLBCL,用针对IgH单轮扩增引物对DLBCL石蜡包埋组织进行多聚酶链反应(PCR)扩增检测克隆性基因重排。结果60例DLBCL IgH基因重排阳性率为51.7%(31/60),其中中心母细胞型阳性率54.5%(30/55),免疫母细胞型阳性率0.0%(0/3),间变性大细胞型阳性率50.0%(1/2)。结论DLBCL IgH基因重排检出率低于B细胞淋巴瘤总检出率,可能与DLBCL中存在IgH可变区体细胞超突变及背景细胞的数量有关。     

恶性淋巴瘤诊断中Ig/TCR基因重排的分子病理检测分析

目的 探讨B细胞性淋巴瘤中Ig基因重排和T细胞性淋巴瘤中TCR基因重排的特点.方法 回顾性分析213例恶性淋巴瘤和24例淋巴反应性增生组织样本,利用3730毛细血管电泳对提取的DNA进行PCR扩增,检测B细胞性淋巴瘤中Ig基因重排和T细胞性淋巴瘤中TCR基因重排.结果 B细胞性淋巴瘤中IgHA的总阳性率为43.21％,IgHB的总阳性率为29.63％,IgHC的总阳性率为30.25％,IgHD的总阳性率为16.67％,IgHE的总阳性率为3.09％,IgLκA的总阳性率为42.59％,IgLκB的总阳性率为23.46％,IgLλA的总阳性率为25.93％,IgH (A+ B+ C+ D+ E)+ IgLκ(A+ B)+ IgLλA的总阳性率为88.27％;T细胞性淋巴瘤中TCRB-A的总阳性率为31.37％,TCRB-B的总阳性率为58.82％,TCRB-C的总阳性率为23.53％,TCRG-A的总阳性率为60.78％,TCRG-B的总阳性率为21.57％,TCRD的总阳性率为29.41％,TCRβ+ TCRγ+ TCRδ的总阳性率为78.43％.结论 Ig基因重排和TCR基因重排分别对B细胞性和T细胞性淋巴瘤的诊断具有重要价值.     

27例黏膜相关淋巴组织结外边缘带B细胞淋巴瘤的病理研究

目的:观察并探讨黏膜相关淋巴组织结外边缘带B细胞淋巴瘤(简称MALT淋巴瘤)的组织学形态、免疫表型特征、鉴别诊断。方法:对27例发生在不同器官的MALT淋巴瘤进行光镜观察,免疫组织化学染色。结果:27例就诊时均精神状况良好,以发现器官占位或消化、呼吸系统不适为由就诊。MALT淋巴瘤呈弥漫的淋巴组织增生改变,常常出现弥漫的或模糊结节的生长方式,细胞的形态以中心细胞样细胞、单核细胞样细胞、小淋巴细胞样细胞为主,可以伴有浆样细胞和/或浆细胞。肿瘤细胞增殖指数范围5%~40%。19例滤泡树突细胞(FDC)网以萎缩变小为主,8例FDC网不同程度增生。结论:MALT淋巴瘤属于低度恶性淋巴瘤,肿瘤细胞生长方式独特,细胞形态多以生发中心细胞样细胞为主。需要与滤泡性淋巴瘤、小淋巴细胞性淋巴瘤、套细胞淋巴瘤,淋巴浆细胞淋巴瘤相鉴别,临床预后好。     

胃恶性淋巴瘤临床病理分析

目的：探讨胃恶性淋巴瘤的临床病理特征。方法：应用免疫组织化学SP法，检测21例胃恶性淋巴瘤的免疫表型并分析其临床病理表现。结果：21例胃恶性淋巴瘤临床表现非特异性消化道症状，均为B细胞淋巴瘤，黏膜相关淋巴组织结外边缘区B细胞淋巴瘤（MALT淋巴瘤）13例；弥漫大B细胞淋巴瘤伴MALT淋巴瘤6例，弥漫大B细胞淋巴瘤2例。结论：胃恶性淋巴瘤临床表现缺乏特异性，以MALT淋巴瘤多见，并可向弥漫大B细胞淋巴瘤转化。     

弥漫大B细胞淋巴瘤中CD10、BCL-6和MUM1的表达研究

目的探讨弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)中CD10、BCL-6和MUM1的表达及临床病理意义。方法对60例弥漫大B细胞淋巴瘤标本行HE和免疫组化染色观察,并复习文献。结果 60例DLBCL中CD10、BCL-6和MUM1的阳性表达率分别为16.67%(10/60)、46.67%(28/60)和70.17%(43/60)。其中生发中心型(GCB)9例(15%),非生发中心型(non-GCB)51例(85%)。CD10、BCL-6和MUM1在生发中心亚型和非生发中心亚型中的表达具有显著性差异(P<0.05)。结论 CD10、BCL-6和MUM1在DL-BCL亚型分类中具有重要意义,其表达对判断患者预后及指导临床治疗提供重要指标。     

原发性干燥综合征并发非霍奇金淋巴瘤患者唇腺组织BCL-6基因重排的检测及意义

目的 探讨原发性干燥综合征（pSS）并发非霍奇金淋巴瘤（NHL）患者唇腺组织BCL-6基因重排的临床病理意义.方法 将研究对象分为pSS并发NHL组（16例）,pSS未并发NHL组（20例）,NHL未并发pSS组（阳性对照组,20例）,健康人群组（阴性对照组,20例）,采用荧光原位杂交技术检测4组研究对象唇腺组织BCL-6基因的重排情况.结果 pSS并发NHL组的BCL-6基因重排发生率为56.2％（9/16）,pSS未并发NHL组的BCL-6基因重排发生率为20.0％（4/20）,NHL未并发pSS组的BCL-6基因重排发生率为50.0％（10/20）,正常人群组的BCL-6基因重排发生率为5.0％（1/20）.4组BCL-6基因重排发生率比较差异有统计学意义（χ2=-84.225,P=-0.000）.pSS并发NHL组与NHL未并发pSS组BCL-6基因重排发生率比较差异无统计学意义（χ2=2.251,P=0.139）.pSS并发NHL组BCL-6基因重排发生率显著高于pSS未并发NHL组（χ2=78.658,P=0.000）及健康人群组（χ2=88.391,P=0.000）.结论 BCL-6基因重排与pSS并发NHL相关,BCL-6基因重排可作为预测pSS并发NHL的生物学参考指标.     

BCL-10和PCNA在胃粘膜相关淋巴瘤中的表达及其临床病理意义

目的 探讨BCL-10、PCNA在胃MALT淋巴瘤中的表达及其在肿瘤发生、发展及预后判断中的意义.方法 采用EnVision二步法进行免疫组化检测,分析60例胃MALT型淋巴瘤临床病理特点和免疫组化BCL-10、PCNA的表达情况.结果 BCL-10核阳性率在淋巴结被累及与未被累及两组间差异非常显著(P＜0.01);BCL-10核阳性率在肿瘤局限于黏膜和黏膜下层与浸润肌层至浆膜层两组间差异非常显著(P＜0.01);BCL-10核阳性率在不同的临床分期各组间差异显著(P＜0.05);PCNA的表达强度随着肿瘤恶性程度的增强而增强,PCNA的表达程度与肿瘤的恶性程度有关.结论 BCL-10核表达提示肿瘤的侵袭性增强,可能单纯抗HP治疗无效.PCNA可能是诊断恶性淋巴瘤,评价其生物学行为的可靠指标,并对肿瘤的预后有较好的判断价值.     

The clinicopathologic features and immunophenotypes of T-cell non-Hodgkin's lymphoma: an analysis of 77 cases

目的 探讨T细胞非霍奇金淋巴瘤的临床病理特点和免疫表型.方法 对77例T细胞非霍奇金淋巴瘤进行苏木素和伊红染色(HE)和免疫组织化学检查,按WHO 2008年《造血和淋巴 组织肿瘤的病理学和遗传学》标准进行分类.结果 77例T细胞非霍奇金淋巴瘤中,鼻型结外NK/T细胞淋巴瘤32例(41.6％),非特异性外周T细胞淋巴瘤20例(26.0％),间变性大细胞淋巴瘤11例(14.3％),前驱T淋巴细胞淋巴瘤9例(11.7％).结论 T细胞非霍奇金淋巴瘤中,最常发生的亚型是鼻型结外NK/T细胞淋巴瘤,其次为非特异性外周T细胞淋巴瘤、间变性大细胞淋巴瘤和前驱T淋巴细胞淋巴瘤.其中,鼻型结外NK/T细胞淋巴瘤预后较差,而间变性大细胞淋巴瘤预后相对 较好.     

探讨恶性淋巴瘤诊断中Ig/TCR基因重排的分子病理检测

目的总结恶性淋巴瘤诊断中Ig/TCR基因重排的分子病理特点,为该病的基因检测提供依据。方法研究时间在2016年1月至2018年6月,研究对象为180例恶性淋巴瘤患者以及30例淋巴反应性增生患者,提取不同样本的DNA,借助于PCR扩增方法分析Ig基因重排和TCR基因重排情况。结果 B细胞淋巴瘤对应的IgHA、IgHB、IgHC、IgHD、IgHE、IgLA、IgLB、IgLA、IgH(A+B+C+D+E)+IgL(A+B)+IgLA阳性率分别为47.69%、33.07%、35.38%、19.23%、6.92%、45.38%、22.30%、30.00%、96.15%。TCR基因重排中TCRB-A、TCRB-B、TCRB-C、TCRG-A、TCRG-B、TCRTCRD、TCRβ+TCR+TCRδ对应的阳性率分别为32.00%、56.00%、22.00%、60.00%、22.00%、34.00%、78.00%。结论恶性淋巴瘤诊断中Ig/TCR基因重排的分子病理特点可作为B细胞淋巴瘤、T细胞淋巴瘤诊断的重要参考。     

肾嗜酸细胞腺瘤和肾嫌色细胞癌COX-2和BCL-2表达的比较分析

目的探讨COX-2和BCL-2在肾嗜酸细胞腺瘤和肾嫌色细胞癌中表达的意义。方法用免疫组织化学方法检测21例肾嗜酸细胞腺瘤和18例肾嫌色细胞癌中COX-2和BCL-2的表达,并分析两者的不同。结果COX-2和BCL-2在肾嗜酸细胞腺瘤的阳性表达率为52．3％和42．8％;在肾嫌色细胞癌中的阳性表达率为83．3％和72．2％,两项指标分别比较的差异无统计学意义（P〉0．05）。但COX-2和BCL-2在肾嗜酸细胞腺瘤中的高表达阳性率为9．5％和4．8％;在肾嫌色细胞癌中的高表达阳性率为50．0％和33．3％,两项指标分别比较的差异有统计学意义（P〈0．05）。结论COX-2和BCL-2高表达可作为肾嗜酸细胞腺瘤和肾嫌色细胞癌鉴别的参考指标之一。     

P53、BCL-2蛋白在肺癌中的表达及临床病理研究

目的探讨P53、BCL-2基因在肺癌发生、分化中的作用机制及意义。方法采用免疫组织化学S-P法检测P53、BCL-2蛋白在55例肺癌的不同病理类型中的表达情况。结果P53在肺鳞状细胞癌中的表达率为51.7%,在肺小细胞癌中的表达率为60.0%,在腺癌中的表达率为61.5%,经统计学分析,无明显相关性(P>0.05):BCL-2在肺小细胞癌(SCLC)中的表达率为80.0%,在肺非小细胞癌(NSCLC)中的表达率为36.0%,经统计学分析,有相关性(P<0.05)。结论P53蛋白与肺癌有密切关系,但与组织学类型无关:BCL-2蛋白与肺癌的组织学类型有密切关系(P<0.05)。     

Na~+/H~+交换泵在人肺癌组织中的表达

目的 为了探讨肺癌细胞NHE-1基因的表达情况。方法 采用了mRNA原位杂交和图像分析技术对27例人肺癌手术切除的新鲜标本进行有关NHE-1基因表达水平方面的研究,并对其pH调节的分子机制和特点进行了初步探讨。结果 肺癌组织细胞的NHE-1 mRNA表达水平显著的高于正常肺组织(P<0.001)。结论 人肺癌组织细胞通过上调NHE-1基因表达以增加其细胞膜NHE-1的数量分布,这可能是在整体条件下pH调节的主要分子机制和特点。NHE-1基因的超表达对维持人肺癌细胞在机体内的抗凋亡生长起着重要作用,因此在以pH调节机制为靶点的肿瘤治疗研究领域中此项研究具有积极意义。     

RT-PCR检测胃癌NY-ESO-1抗原的表达及其基因克隆

目的 研究NY-ESO-1基因在胃癌中的表达,以便了解胃癌患者是否可以使用NY-ESO-1抗原为基础的疫苗治疗。方法 采用RT-PCR方法检测NY-ESO-1基因在60例胃癌组织和相应的癌旁正常组织中的表达,采用分子克隆的方法从胃癌组织中克隆了NY-ESO-1 cDNA。结果 NY-ESO-1基因在胃癌组织中的表达率为55％(33／60),在相应的癌旁正常组织中未见表达,克隆的NY-ESO-1 cDNA序列与GenBank报道一致。结论 NY-ESO-1基因在胃癌中呈高表达率,NY-ESO-1抗原可以被具有HLA-1类分子限制性CIL识别。     

1 例儿童 Wolfram 综合征并新发现的 WFS1 基因突变位点分析

目的:分析儿童 Wolfram 综合征(WS)的基因型和临床特点。 方法:回顾性总结分析 1 例 WS 患儿的临床资料及基因检测结果。 结果:患儿,男,16 岁,2 岁时在当地医院诊断“1 型糖尿病”;8 岁时因“视力进行性下降”行双眼白内障针吸+人工晶体植入术;11 岁时诊断“尿崩症、神经源性膀胱、双侧输尿管扩张、肾积水”,予去氨加压片口服及间断导尿治疗,肾功能进行性恶 化;15 岁时进入终末期肾病,接受血液透析治疗;16 岁时行异体肾移植,腹部输尿管造口排尿。 现患儿经胰岛素泵给予门冬胰岛素控制血糖,醋酸去氨加压素片缓解多尿症状,他克莫司抗排斥治疗。 基因检测显示,患儿 WFS1 基因纯合移码突变(c. 14delC),导致氨基酸移码 138 位后提前终止(p. T5Mfs∗138);父母验证为杂合突变。 依据美国医学遗传学与基因组学学会 (ACMG)指南,该突变为致病性突变,人类基因突变数据库(HGMD)未见报道,为新发现的突变位点。 结论:WS 为多系统受损疾病,进展快,预后差,极易误诊、漏诊。 基因检测是确诊 WS 的重要依据。 对于<10 岁儿童发现有血糖异常伴视力或听力下降者应考虑此病并积极行基因筛查。 本研究新发现 1 个 WFS1 基因纯合的移码突变位点,丰富了 WFS1 基因的突变谱。     

人PD-1基因克隆及其在L929基因转染细胞上的表达

目的 克隆人PD-1基因，构建含有该目的基因的重组逆转录病毒载体，并转染入L929细胞，获得稳定高表达PD-1分子的L929细胞。方法 用PCR法从pGEX-5X-3-PD-1扩增出PD-1基因，通过双酶切（PstI BamHI）装入逆转录病毒载体pGEZ Term中，脂质体法共转染包装细胞293T，用含有完整病毒颗粒的293T细胞的培养上清感染L929细胞，72h后，加入Zeocin进行筛选，挑选出能稳定表达PD-1分子的L929细胞株。结果 成功克隆了人PD-1基因，构建了含PD-1基因的重组逆转录病毒载体，包装出具有感染能力的重组PD-1逆转录病毒，筛选出具有稳定表达人PD-1分子的L929基因转染细胞。经流式细胞仪检测：PD-1分子在L929基因转染细胞中具有高表达，达到97．6％。结论 构建了含人PD-1基因重组逆转录病毒的载体，筛选出稳定表达人PD-1分子的L929细胞株。     

血腑逐瘀汤对子宫肌瘤雌激素受体和BCL-2 表达的影响

目的探讨血腑逐瘀汤对子宫肌瘤雌激素受体、BCL-2表达的影响及其作用机制。方法采用肌注雌激素法造模,把SD大鼠随机分成对照组、模型对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组,用免疫组化法测定大鼠子宫内膜中ER含量以及凋亡基因Bcl-2蛋白的表达。结果随着血腑逐瘀汤剂量的增大,大鼠子宫重量和大鼠子宫内膜ER含量明显降低;平滑肌Bcl-2蛋白表达明显增多(P<0.01)。结论血腑逐瘀汤可显著抑制子宫肌瘤雌激素受体的表达,同时可降低子宫肌瘤模型大鼠细胞凋亡蛋白Bcl-2阳性表达。     

结肠癌组织中Shh和Gli1基因的表达及临床意义

目的探讨Shh和Gli1基因在结肠癌组织中的表达及意义。方法应用RT-PCR方法和免疫组织化学对38例结肠癌手术切除的标本进行Shh和Gli1基因表达检测,评估Shh和Gli1基因表达与结肠癌临床病理的关系。结果癌组织的Shh和Gli1基因呈高表达,与癌旁组织比较,两者有显著性差异;Shh和Gli1基因表达强度与癌的分期密切相关,早期结肠癌的表达强度明显高于进展期癌。结论 Shh信号通路异常的活性状态有可能参与结肠癌的发生过程。Shh和Gli1基因检测对评估结肠癌的分期和预后具有重要意义。