肝细胞核因子-1α和肝细胞核因子-4α在人肝细胞癌中的表达及意义

目的 检测肝细胞癌（HCC）标本中肝细胞核因子-1α(HNF-1α)和肝细胞核因子-4α(HNF-4α)的表达,探讨其在肝癌发生、发展中的作用。 方法 采用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）和免疫组织化学方法检测HNF-1α、HNF-4α mRNA和蛋白质在肝癌组织和癌旁肝组织中的表达。 结果 HNF-1α mRNA在癌旁肝组织中的相对表达量0.818±0.371明显高于肝细胞癌组织0.383±0.102,差异有显著性（P＜0.05）。HNF-4α mRNA在癌旁肝组织中的相对表达量0.846±0.384明显高于肝细胞癌组织0.397±0.105,差异有显著性（P＜0.05）。HNF-1α和HNF-4α mRNA 的表达与肿瘤分化程度有关（P＜0.05）。HNF-1α 蛋白在癌旁肝组织中的阳性率（92.3%）明显高于肝细胞癌组织（42.3%）,差异有显著性（P＜0.05）。HNF-4α 蛋白在癌旁肝组织中的阳性率（96.2%）明显高于肝细胞癌组织（50.0%）,差异有显著性（P＜0.05）。HNF-1α和HNF-4α 蛋白的表达与肿瘤分化程度有关（P＜0.05）。在肝细胞癌组织中HNF-1α与HNF-4α mRNA表达水平呈负相关关系。 结论 HNF-1α和HNF-4α在肝细胞癌中表达下调,这可能与肝癌的发生、发展相关。     

喉癌组织中LKB1与VEGF -C表达的相关性研究

目的:检测喉癌组织中抑癌基因LKB1和血管内皮生长因子VEGF-C的表达情况,探讨VEGF-C在喉鳞状细胞癌、正常组织中的表达关系.方法:选取喉癌患者40例喉癌组织为实验组,40例癌旁正常组织(距肿瘤边缘＞5mm,且病理证实为正常组织)为对照组.采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术分析两组之间LKB1mRNA和VEGF-CmRNA的表达情况.结果:LKB1在癌组织中阳性表达率低于癌旁组织(P＜0.05),VEGF-C在癌组织中阳性表达率高于癌旁组织(P＜0.05),均与组织分化程度有相关性(P＜0.05).LKB1与VEGF-C呈直线负相关.结论:在喉鳞状细胞癌发生的过程中,LKB1和VEGF -C发生异常表达,且与喉鳞状细胞癌的进展有关.     

喉癌中STK15基因扩增及表达的研究

目的研究喉癌中5TK15基因扩增、mRNA和蛋白表达增高在喉癌发生、发展中的作用。方法应用差异PCR方法检测40例喉鳞状细胞癌及癌旁正常对照组织5TK15基因扩增的情况；应用逆转录-PCR方法检测同批标本STK15mRNA表达情况；用免疫组织化学方法分析STK15蛋白表达。结果肿瘤组织中5TK15基因扩增率为35％（14／40）；STK15 mRNA表达增高占67．5％（27／40）；STK15蛋白表达的阳性率为72．5％（29／40）；将扩增与表达的结果与喉癌患者的临床各项指标进行统计学分析，5TK15基因扩增、STK15mRNA表达增高与肿瘤的分化程度显著相关（P〈0．05）；STK15蛋白表达与肿瘤的分化程度和病理分级显著相关（P〈0．05）。结论喉癌中5TK15基因扩增、mRNA和蛋白表达水平增高，导致中心体复制异常、染色体不稳定。可能在喉癌的发生及恶性进展中起一定作用。     

Dact1基因在结直肠癌组织中的表达及其相关性研究

目的：观测Dact1基因在结直肠癌组织的表达及其启动子甲基化状态,并探讨它们之间的关系及在结直肠癌发生中的作用.方法：采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测结直肠癌组织、癌旁组织各50例及正常对照组织20例Dact1基因mRNA的表达情况,甲基化特异性PCR（MSP）检测Dact1基因启动子甲基化状态.结果：结直肠癌组中,9例Dact1基因mRNA失表达（18%）,20例表达低于正常对照组（40%）;癌旁组织组中,1例Dact1基因mRNA失表达（2%）,3例表达低于正常对照组（6%）;正常对照组中,1例Dact1基因mRNA低表达（5%）.Dact1基因在癌组织、癌旁组织、正常对照组织中的甲基化阳性率分别为46%、12%、5%,癌组织组与癌旁组织组及正常对照组阳性率比较,差异均有统计学意义（P＜0.01）,而癌旁组织组和正常对照组阳性率比较,差异无统计学意义（P＞0.05）.Dact1基因mRNA的失表达（低表达）与其启动子甲基化状态的相关性分析有统计学意义（P＜0.05）.结论：Dact1基因mRNA的失表达（低表达）可能参与了结直肠癌的发生发展,其失表达可能与Dact1启动子区甲基化相关.     

nm23-H1基因表达及突变与肝癌转移的关系

[摘要] 目的　研究nm23-H1基因的表达及突变和原发性肝细胞癌（hepatocellular carcinoma ,HCC）发展和转移的关系。方法 应用逆转录 PCR（RT-PCR）和逆转录PCR-单链构象多态法（RT-PCR SSCP）对30例肝癌组织、30例癌旁组织和4例正常肝组织中nm23-H1基因 mRNA表达和基因突变情况进行检测。 结果 nm23-H1基因在肝癌组织、癌旁组织、正常组织中的表达水平分别为1.62±0.41、1.30±0.30和1.23±0.39。肝癌组织中nm23-H1基因的表达水平明显高于癌旁组织（P<0.05）和正常组织（P<0.01）； 低分化肝癌组织中nm23-H1基因表达水平低于高、中分化肝癌组织中nm23-H1基因表达水平（P<0.05）；有卫星转移灶和无卫星灶的肝癌组织中nm23-H1基因表达水平无显著差异（P>0.05）；30例肝癌组织及相应的癌旁组织中未发现nm23-H1 cDNA基因突变。 结论 nm23-H1基因表达水平增高与肝癌的转移有密切关系，nm23-H1基因的异常表达是HCC转移中的频发事件而与基因突变无关。     

喉癌中EGFR基因扩增、表达及临床意义

目的研究喉癌中表皮生长因子受体(EGFR)基因的扩增、表达,探讨其在喉癌发生、发展中的作用及临床意义。方法采用差异PCR(differential PCR)方法检测40例喉鳞状细胞癌及配对癌旁正常组织中EGFR基因的扩增(即基因拷贝数增加);应用RT-PCR方法检测EGFR mRNA水平;应用SPSS13.0软件对数据进行统计学分析。结果喉癌组织中有13例(占32.5%)EGFR基因拷贝数增加,癌旁对照组中则未检测到(χ2=15.537,P<0.005);喉癌组织中EGFR mRNA平均积分光密度为872.356±62.340,癌旁对照组为346.425±57.380(t=5.959,P<0.001);喉癌组织分化程度越低,病理分期越晚,EGFR基因扩增和mRNA表达水平越高(P<0.05)。结论喉癌中EGFR基因在DNA水平上的扩增是EGFR mRNA过表达的原因之一,EGFR的扩增和过表达在喉癌的发生、进展中发挥一定作用。     

端粒调控因子tankyrase在胃腺癌中的表达

目的:研究端粒调控因子tankyrase在胃腺癌组织中的表达及其在胃腺癌发生和发展过程中的作用。 方法:应用荧光实时定量PCR（Real-time PCR）技术检测16例胃腺癌组织及离肿瘤边缘5 cm处的正常癌旁组织中tankyrase mRNA表达水平。应用Envision免疫组化法检测37例胃腺癌和13例正常对照组织中tankyrase蛋白质表达水平。分析tankyrase表达水平在胃腺癌临床分期和组织分化程度各组间的关系。 结果:胃腺癌中tankyrase mRNA的表达［1.44×10-2，（3.88×10-5）-0.4847］高于正常对照［1.0134×10-2，0-（4.933×10-2）］（P<0.05）。胃腺癌中tankyrase蛋白质表达高于正常对照（P＜0.05）。但在不同胃腺癌临床分期、组织分化程度各组之间均未见统计学差异。 〖JP+2〗结论:Tankyrase mRNA和蛋白水平在胃腺癌中的表达明显增高，可能是胃腺癌发生过程中的重要因素。     

转移抑制基因KAI1与骨肉瘤侵袭转移特性的关系

目的：探讨骨肉瘤组织和骨肉瘤细胞系中转移抑制基因KAI1 mRNA的表达与骨肉瘤侵袭转移特性的关系。方法:采用RT-PCR法研究18例手术切除新鲜骨肉瘤组织和3株培养骨肉瘤细胞系中KAI1 mRNA的表达，并同时研究3株培养骨肉瘤细胞系的增殖、侵袭和转移等生物学特性，利用全自动图像分析系统进行半定量分析。结果:KAI1 mRNA的表达量在伴有肺转移的骨肉瘤组织中为0.80±0.50，显著低于在不伴有肺转移的骨肉瘤组织中的1.48±0.64，前者显著低于后者（P＜0.05），KAI1 mRNA的表达与骨肉瘤的肺转移显著相关；3株骨肉瘤细胞系中U2-OS的增殖、粘附和侵袭力最低（均P＜0.01），而KAI 1 mRNA在骨肉瘤细胞系U2-OS中显著高表达（P＜0.05） 。结论：转移抑制基因KAI1可能通过抑制骨肉瘤细胞的增殖、粘附和侵袭而参与抑制骨肉瘤的肺转移。     

热休克蛋白在子宫内膜异位症中的表达及意义

目的 探讨热休克蛋白27（HSP27）和HSP70在子宫内膜异位症发病中的作用。方法 采用免疫组化链霉菌抗生素蛋白－过氧化物酶染色法（SP法），检测子宫内膜异位症中56例异位内膜与在位内膜（30例）中HSP27和HSP70的表达。采用原位杂交，检测HSP70mRNA的水平，并与正常子宫内膜相比较。结果 免疫组化结果显示，异位内膜组织中HSP27与HSP70均呈高表达，与正常内膜组的表达差异显著（P＜0．01），而且失去其在正常内膜组织中表达的周期性变化。卵巢子宫内膜异位症组（OEM）与子宫腺肌症组（AM）组中，HSP27和HSP70的表达无显著差异（P＞0．05）。原位杂交结果显示，HSP70 mRNA（分别为P＜0．01和P＜0．05）。HSP27与HSP70的表达水平，同OEM的严重性无关。结论 异位内膜组织中的HSP70基因被激活，转录增加。HSP27和HSP70呈高表达，可能在EM的发病中起重要作用。     

实时荧光定量PCR检测腮腺沃辛瘤中Gadd45β表达

目的：从分子学水平检测腮腺沃辛瘤相对于瘤旁腮腺组织中生长抑制和DNA损伤修复基因45β（ Gadd45β） mRNA表达情况并探讨其在沃辛瘤的形成及发展中的意义。方法搜集30例腮腺沃辛瘤组织及瘤旁正常腮腺组织。提取总RNA，然后进行逆转录得到cDNA，再进行实时荧光定量PCR检测，测出CT值，通过2－△△CT的相对定量的方法对荧光定量PCR检测的CT值进行标准化，从而比较肿瘤组织及瘤旁正常腮腺组织中Gadd45βmRNA表达情况。结果 Gadd45β在正常腮腺组织及肿瘤组织中均有表达，分别为1．516±0．104和1．177±0．089， Gadd45β在沃辛瘤中表达明显下调（P＜0．05）。结论 Gadd45β表达下调可作为沃辛瘤发病机理一部分。