影响铜锌超氧化物歧化酶活性的几个因素

影响铜锌超氧化物歧化酶(简称Cu·Zn-SOD)活性的因素很多。溶液介电常数的增加减弱了酶分子活性中心附近ε-NH3_ 对O_2_-的静电吸引力,从而导致酶活的降低。CI_-浓度对Cu·Zn-SOD有明显的抑制作用是由于CI_-引起活性部位构象的变化。H_2o_2作用于Cu·Zn-SOD造成铜锌的脱落,从而影响酶结构的稳定性,造成酶结构损伤。H_2O_2是活性氧的一种,它的存在会引起酶二级结构的改变和导致SOD肽链的“随机”断裂,继而影响SOD的活性。     

一种分离纯化Cu、Zn-SOD的方法——兼介从血红细胞中分离Cu、Zn-SOD

<正> 过氧化氢酶、碳酸酐酶的过程本专利介绍了一种分离纯化Cu、Zn-SOD的方法,并给出了从血红细胞中分离Cu、Zn-SOD、过氧化氢酶、碳酸酐酶的实例。 SOD是催化超氧离子(O_2-)歧化反应的酶。1969年以来,SOD已从多种生物体中提取分离。SOD有两类。活性部位含有Cu和Zn的一类存在于真核生物的细胞质中,它们都是二聚体,一级结构具有高度的同源性,理化性质相似。活性部位含有Fe或Mn的另一类存在于原核生物、真核生物的线粒体中,它们的氨基酸组成和N-末端氨基酸顺序也很相似。然而,两     

超氧化物歧化酶的催化作用机理

<正> 在数以千种酶中仅超氧化物歧化酶(SOD)作用的底物为自由基,即超氧化物自由基(O_2~·)或其质子化产物HO_2~·(H~++O_2HO_2·)SOD属金属酶类,有Cu,Zn-SOD,Mn-S~(oD)和Fe-SOD三种。它们都能催化O_2~·歧化为H_2O_2与O_2。SOD催化作用机理涉及到底物,酶的结构与活性部位以及酶的催化反应。现简述这三方面的研究概况与展望。一、底物在非酶反应中0_2~·或HO_2可自动歧化为H_2O_2与O_2,但其反应速率(K)随反应物为     

超氧化物歧化酶的分离与鉴定

<正> 超氧化物歧化酶(SOD)已成为研究超氧阴离子自由基的重要工具。因此,本文介绍高纯度Cu,Zn-SOD的制备方法,同时也介绍锰(Mn)和铁(Fe)SOD的纯化,它们象Cu,Zn-SOD一样,作为金属酶类消除氧的毒性具有重要意义。Cu,Zn-SOD的分离可采用从有机溶剂开始的经典法或不用有机溶剂。有机溶剂不影响Cu,Zn-SOD的性质但可除去血红蛋白,是从红细胞中分离SOD的理想方法。本文介绍有机溶剂法分离红细胞SOD。对固体组织采用分机溶剂法,可同时获得Cu,Zn-SOD和Mn-SOD后者与Fe-SOD一样对有机溶剂敏感。     

固定化金属亲和层析胶与亲和层析膜纯化rhMn-SOD和rhCu,Zn-SOD的比较研究

为比较固定化金属亲和层析膜与亲和层析胶的纯化效果,分别用固定化金属亲和层析胶Cu2 柱、Ni2 柱、固定化金属亲和层析膜Cu2 柱、Ni2 柱分离纯化rhCu,Zn-SOD、rhMn-SOD/24a、rhMn-SOD/28.结果表明,亲和胶与亲和膜分离SOD获得相似的纯化效果,纯化倍数均在3到5之间,亲和膜分离所得SOD比活略高于亲和胶,rhCu,Zn-SOD与Cu2 的亲和能力高于rhMn-SOD.固定化金属亲和层析膜色谱为基因工程产物的快速分离鉴定提供了一个简便的方法.     

各种还原剂对Cu,Zn—SOD的失活和还原作用

研究了某些还原剂(K_4Fe(CN)_6,NaS_2O_4,NaBH_4,H_2O_2)对Cu,Zn-SOD的失活和还原作用。并用电子顺磁共振观察了SOD被还原前后的波谱变化。     

超氧化物歧化酶及其与癌症的关系

<正> 一、概述有氧代谢的细胞中都有超氧化物歧化酶(SOD),而大多数的厌氧菌则缺乏此酶,SOD的功能是保护细胞免遭有氧代谢反应中产生的超氧自由基(?)的损伤,能催化下列反应:(?)+(?)+2H~+SOD=H_2O_2+O_2Fridovich已证实凡有氧代谢细胞均需要这种酶,到目前为止,人们已经从细菌、原生动物、藻类、霉菌、高等植物、昆虫、鱼、鸟和哺乳动物等各种生物体内分离出SOD,这些SOD至少可以分为三种类型:1.Cu、Zn-SOD,由二个分子量相同的亚基组成,结构中含有Cu和原子Zn原子,呈蓝绿色,     

动物肝脏中超氧化物歧化酶分离纯化方法

<正> 超氧化物歧化酶(SOD)是生物体内一类通过清除O_2,保护机体免受活性氧损害的酶类。不同动物,其SOD的含量不同,即使同一种动物,凡不同组织的SOD含量也各不相同。通常,以肝脏中SOD的含量最为丰富。所以,动物的肝脏很适于作为分离纯化SOD的原材料。早在1973年,Weisiger等就发现鸡肝中含有二种SOD。一种存在于细胞质中,为Cu,Zn-SOD,另一种存在于线粒体基质中,为Mn-SOD。同年,Marklund在牛肝中也同样发现这二种SOD的存在。从那以后,人们已经采用     

SOD基因的组织结构、表达与分子克隆

超氧化物歧化酶（SOD）是一种天然的含金属抗氧化酶，它具有抗衰老、抗辐射和消炎等多种疗效。SOD包括Cu/Zn-SOD、Mn-SOD和Fe-SOD三类，其中以Cu/Zn-SOD为最重要。SOD均由核内染色体上的基因编码，这类基因既有单拷贝序列，也有多基因家庭。线粒体和叶绿体内的SOD在核内合成后，再分泌到细胞器中。多数SOD基因的表达都具有组织特异性，并受许多环境因素的诱导，有关的分子机理正在研究中，并且正在尝试SOD基因的分子克隆以及重组SOD基因在培养细胞和转基因植物中的表达。     

超氧化物歧化酶的研究进展

<正> 超氧化物歧化酶(Superoxide Dismu-tase简称SOD)是一种重要的氧自基清除剂,作为药用酶,在美国、西德、澳大利亚等国已有产品,商品名有Orgotein、Ormetein、Outo-sein、Palasein、Paroxinorn、HM-81、Cu.Zn-SOD等。此酶属金属酶,它在生物界分布极广,它催化的化学反应是: 由于SOD能专一清除超氧阴离子(O_2~·),故引起国内外医药界和生化界的极大关注。目前,SOD的临床应用主要集中在炎症病人上,     

甘糖酯抗氧化作用的分子机制

目的探讨甘糖酯(PGMS)清除自由基抗氧化作用的分子机制。方法给大鼠ig高脂乳剂建立高脂血症模型,分成对照组、甘糖酯治疗组、甘糖酯+DDC组,治疗3周。检测血清、肝脏、脾脏和主动脉中丙二醛(MDA)的含量,超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)的活性,以及Cu,Zn-SOD mRNA的表达水平。结果甘糖酯治疗组大鼠,丙二醛(MDA)含量降低,SOD,GSH-Px和CAT的活性显著升高,Cu,Zn-SOD mRNA的表达水平增加;而甘糖酯和DDC联合用药治疗组,DDC抑制了甘糖酯诱导的Cu,Zn-SOD mRNA表达水平和SOD活性的升高,造成MDA含量的相应升高。结论甘糖酯通过诱导抗氧化酶SOD,GSH-Px和CAT的活性,增加Cu,Zn-SOD mRNA的表达水平,清除体内过多的氧自由基,达到抗氧化的目的。     

肾上腺皮质疾病患者超氧化物歧化酶和丙二醛的表达及意义

目的 探讨超氧化物歧化酶活性（SOD）和丙二醛水平（MDA）在肾上腺皮质疾病患者外周血血清和组织中的表达及与意义. 方法 选择肾上腺皮质增生患者12例、肾上腺皮质腺瘤患者10例,健康对照者11例,分别比较对照组和病例组患者术前血清学铜/锌超氧化物歧化酶（Cu/Zn-SOD）、锰超氧化物歧化酶（Mn-SOD）活性和MDA含量、肾上腺组织免疫组化染色Cu/Zn-SOD、Mn-SOD阳性细胞占细胞总数百分比之间的差异. 结果 病例组各组患者术前血清中Cu/Zn-SOD、Mn-SOD活性显著低于健康对照组（P＜0.05）,MDA含量显著高于健康对照组（P＜0.05）;Cu/Zn-SOD染色面积在肾上腺皮质腺瘤组中表达显著降低（P＜0.05）,Mn-SOD染色面积在肾上腺皮质增生和肾上腺皮质腺瘤组中表达显著降低;SOD的血清学与组织学之间表达呈正相关（P＜0.05）. 结论 SOD和MDA在肾上腺皮质疾病患者血清和组织中表达异常,联合检测SOD、MDA可能为肾上腺皮质疾病的鉴别诊断提供新的方法.     

以硅胶和Agarose 6B为载体金属螯合亲和层析分离纯化重组人Cu,Zn—SOD

以层析硅胶Agarose 6B,制备了Cu2+螯合亲和载体,利用合成的Cu2+-IDA-硅胶亲和柱和Cu2+-IDAAgarose 6B亲和柱分离纯化了重组人Cu,Zn-SOD,并比较了这两2亲和载体的纯化效果和性能.硅胶纯化SOD的比活、纯化倍数和回收率分别为7586U/mg@protein、6.5倍和86.7%;而Agarose 6B纯化SOD的比活、纯化倍数和回收率则分别为6223/mg@protein、5.8倍和93.0%.2种亲和载体5次使用后,对SOD的纯化效果不变.     

小儿肾小球疾病超氧化物歧化酶检测分析

超氧化物歧化酶(Cu、Zn—SOD)广泛存在于生物体,是人体内最重要的自由基——超氧阴离子自由基(O_2~-)的天然清除剂,它可催化超氧阴离子自由基O_2发生歧化反应,对机体起保护作用。SOD与肾脏的关系逐步受到人们的重视。本文对28例肾小球疾病患儿作了血清SOD含量测定,同时作了头发微量元素测     

转hCu,Zn-SOD突变基因聚球藻抗氧化作用的研究

目的研究转人铜锌超氧化物歧化酶(hCu,Zn-SOD)突变基因聚球藻口服后的生物活性。方法给小鼠灌服转hCu,Zn-SOD突变基因聚球藻20d,然后测定小鼠谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)活力以及丙二醛(MDA)含量。结果转hCu,Zn-SOD突变基因聚球藻可明显提高小鼠血清GSH-Px活力和全血血红蛋白CAT活性,显著提高小鼠血清和肝脏中Cu,Zn-SOD和总SOD(T-SOD)的活力,显著降低小鼠血清和肝脏的MDA含量。结论转hCu,Zn-SOD突变基因聚球藻有较强的抗氧化作用。     

若干大环双核铜配合物的合成及其SOD活性

<正> 超氧离子是人体内氧代谢的产物,它在体内过量积累会引起炎症、肿瘤等疾病,体内存在的超氧化物歧化酶(SOD)对O_2的歧化起催化作用。将O_2的浓度控制在一定水平。目前,SOD已试用于炎症、辐射病、癌症等的治疗。但是,由于SOD不稳定,且不易透过细胞膜,使其应用受到限制。近来研究表明,大环的过渡金属配合物可用作SOD的模拟物来研究酶的各种物理化学性质及歧化O_2~-的反应机理。大环配合物稳定性高,用作酶的模拟物有其独特的优点。     

亚硝酸盐法测定超氧化物歧化酶活性

用亚硝酸盐、氰化钾抑制区别法测定样品中的 Cu,Zn-SOD 和 Mn-SOD,灵敏度高,重现性好,操作简便。实验表明,抑制率达50%时所需 SOD 的浓度为0.07 μg/ml,其批内和批间的变异系数分别为6.0%和5.5%,鸡肝 Cu,Zn-SOD 与 KCN 的抑制复合物的表观解离常数 K′为288.6±45.5 μmol。     

重组人铜锌SOD的部分理化性质研究

对rhCu，Zn-SOD进行SDS-PAGE测定该SOD的亚基分子质量为19ku，该酶对热稳定，在pH5左右的活力最高，对乙腈、EDTA等抑制剂敏感，但是对SDS、尿素等变性剂表现出很好的稳定性。对该酶进行光谱分析表明，在265nm和673nm具有吸收峰，原子吸收光谱分析表明每分子SOD含有2个铜原子和2个锌原子，ESR表明铜原子价态为2价。可认为该重组酶与天然Cu，Zn-SOD在理化性质和结构上基本相同。     

应用TL PAG—IEF方法测定人红细胞超氧化物歧化酶（SOD）同工酶

本文应用T%=7% C%=3.7%簿层聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦（Thin-Layer polyacrylamide Gel-Isoelectric Focusing,TL PAG-IEF)技术电泳分离人红细胞溶血液和/或人红细胞SOD抽提液，使用了一种自行设计的SOD同工酶染色装置行特异性的SOD同工酶染色。可将人红细胞SOD分为11条同工酶带。又根据酶带的pI、酶带理化性质、酶带特征和失活情况，分为三组同工酶。其中A组SOD同工酶为Cu、Zn-SOD,有三条（pI为4.50、4.65、4.77)，B组SOD同工酶有三条（pI为4.87、4.95、5.10），C组SOD同工酶有五条（pI为5.48、5.75、5.83、6.52、8.45)，B、C两组SOD同工酶既非Cu、Zn-SOD，又非Mn-SOD。其中C组SOD同工酶特别容易失活。B、C两组SOD同工酶的生理功用及临床意义尚不清楚。     

大鼠白内障晶状体中超氧化物歧化酶的研究

<正> 超氧化物歧化酶(SOD)广泛存在生物体的各种组织中,它能催化自由基O_2~-生成H_2O_2和O_2;而H_2O_2极易被体内过氧化氢酶分解掉。自由基是体内氧化尚未彻底完成的中间产物,也可由受射线照射或服用各种药物而产生。自由基可破坏机体细胞,活化致癌物而导致肿瘤发生,引起炎症和自身免疫性疾病,并可促使机体衰老。 Bhuyan报导兔眼组织中SOD存在于角