激素敏感型单纯性肾病综合征单个核细胞病毒基因表达的研究

目的 探讨外周血单个核细胞（PBMC）呼吸道病毒感染与激素敏感型单纯性肾病综合征（SRSNS）发病的相关性。方法 采用逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）、APAAP法和ELISA法，分别对42例SRSNS患儿（活动期24例、缓解期18例）、20例肾炎性肾病、25例毛细支气管炎和19例健康对照儿童单个核细胞（PBMC）呼吸道病毒基因、病毒抗原及血清病毒抗体进行检测。结果 （1）SRSNS患儿活动期组PBMC中呼吸道病毒基因、病毒抗原及血清病毒抗体检出率均高于RSNS患儿缓解期组、肾炎性肾病组及正常对照组，差异有显著意义（P＜0．05）。（2）SRSNS患儿活动期组PBMC中呼吸道合细胞病毒检出率最高，其次为流感病毒。（3）SRSNS患儿病毒基因、抗原的表达检出率与激素应用无关，血清病毒抗体的检出率降低与激素应用有关。（4）病毒基因与病毒抗原检查结果有较好一致性（x^2＝5．714，P＜0．05）。结论 激素敏感型单纯性肾病活动期患儿PBMC中存在呼吸道感毒。     

应用抗μ链酶标记物ELISA法检测CMV-IgM抗体

本文报告采用过氧化物酶标记的抗人μ链抗体(抗μ—E)ELISA技术检测疑似HCMV感染患儿血清特异性IgM抗体,并与病毒分离、IgG抗体检测进行比较,结果前者阳性率较高。对18例双份血清IgM抗体检测,诊断符合率94.4％。抗原吸收2-ME阻断试验所测抗体均为特异性CMV-IgM抗体,与其他病毒感染患者阳性血清无交叉反应。不受RF、IgG影响。故本法具特异性强,敏感性高,快速简便等优点,可用于临床诊断。     

肺炎支原体IgA对肺炎支原体肺炎感染期的诊断价值

目的　探讨肺炎支原体 (MP)特异性IgA在MP感染中的诊断价值。方法　 336份呼吸道感染血清标本用SerodiaMycoII试剂盒检测特异性IgM、ELISA方法检测特异性IgA ,同时检测正常对照 30例血清特异性IgM、IgA、IgG抗体 ;对不同病程的 96例MP肺炎住院患儿血清特异性IgM、IgA阳性结果进行比较。 结果　特异性IgM、IgA阳性率无明显差异 (P >0 0 5 ) ,两者存在一致性 ,与特异性IgG阳性率比较有显著差异。 结论　MP特异性抗体IgA与IgM阳性率类似 ,属于感染期抗体     

原发性肾病综合征患儿外周血单个核细胞膜P-糖蛋白170表达的意义

目的 探讨P-糖蛋白(P-gp)170在肾病综合征(NS)患儿糖皮质激素(GC)耐药中的作用及其介导耐药的可能机制.方法 选取24例初发未应用GC的NS患儿为病例组,根据随访结果将其分成GC敏感型NS组 (SSNS组)和GC耐药型NS组(SRNS组).10名健康体检儿童为健康对照组.将健康对照组和病例组的外周血单个核细胞(PBMC)均予地塞米松(Dex)处理,培养后分别在0 h、12 h、24 h、36 h不同时间点进行检测,同时以不加Dex作为空白对照,Western blot法检测SSNS组和SRNS组患儿PBMC膜P-gp170的表达量,并结合临床资料进行比较.结果 1.SSNS组空白对照各时间点PBMC膜表面P-gp170表达量比较差异无统计学意义(P>0.05),与健康对照组空白对照比较,该组各时间点P-gp170的表达量较高(P<0.05);Dex处理SSNS组患儿PBMC膜表面P-gp170表达随培养时间延长而渐降低(P<0.05),与Dex处理健康对照组比较,各时间点P-gp170的表达量较高(P<0.05);与SSNS组患儿空白对照比较,Dex处理SSNS组患儿PBMC膜表面各时间点P-gp170表达量较高(P<0.05).2.SRNS组患儿空白对照PBMC膜表面P-gp170表达随培养时间不同而无明显变化,不同时间点比较差异无统计学意义(P>0.05),与健康对照组空白对照比较,该组表达量升高(P<0.05),Dex处理SRNS组患儿PBMC膜表面P-gp170表达随培养时间的不同而无变化,各时间点P-gp170的表达量差异无统计学意义(P>0.05);与SRNS组患儿比较,SSNS组患儿空白对照各时间点P-gp170表达均较低(Pa<0.05),Dex处理SSNS组患儿各时间点P-gp170表达均较低(Pa<0.05);与SRNS组患儿空白对照比较,Dex处理SRNS组患儿各时间点PBMC膜表面P-gp170表达量比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 1.健康儿童和NS患儿PBMC均有P-gp170表达,NS状态下可有P-gp170表达增高.2.SRNS患儿 PBMC膜P-gp170表达增高可能与GC耐药有关,P-gp170表达增高可能介导了部分NS患儿GC耐药.3.NS患儿PBMC膜P-gp170表达增高与GC应用有关,GC可能参与诱导P-gp170表达变化.     

聚合酶链反应和酶联免疫法检测小儿呼吸道常见病毒的研究

目的：探讨小儿急性呼吸道病毒感染快速、特异、准确的检测方法,以了解小儿急性呼吸道病毒感染发病情况。方法：采用聚合酶链反应(PCR)技术及酶联免疫(ELISA)技术分别对201例急性呼吸道感染患儿及20例正常对照组呼吸道分泌物中病毒DNA或RNA抗原及血清中特异性IgM抗体进行了检测。结果：以两种方法同时检出同一病毒者为感染患儿,有79例阳性,阳性率为 39.30%;呼吸道合胞病毒(RSV)及腺病毒(AdV)检出率分别为 14.92%及 17.41%。结论：PCR方法与ELISA方法联合检测可提高呼吸道病毒检出的准确性。RSV及AdV是引起该地区小儿急性呼吸道感染特别是肺炎的主要病毒。     

抗原特异性IgG亚类抗体缺陷病

抗原特异性IgG亚类抗体缺陷是引起多种疾病,尤其是儿童反复呼吸道感染的重要原因之一。已证实细菌多糖特异性IgG_2抗体缺陷,易发生肺炎球菌、流感杆菌等感染;而细菌外毒素及类毒素、病毒外壳蛋白等蛋白质抗原特异性IgG_1和/或IgG_3抗体缺陷,易发生相应细菌或病毒感染。抗原特异性IgG亚类抗体的检测,有助于某些临床疾病的诊断和治疗。本文试就抗原特异性IgG亚类抗体缺陷的产生机理、诊断及治疗等进行探讨。     

婴幼儿喘息与呼吸道病毒感染及过敏的关系

目的探讨婴幼儿喘息与呼吸道病毒感染及过敏的关系。方法选择反复喘息(哮喘和喘息性支气管炎)患儿152例、毛细支气管炎(毛支)患儿191例、肺炎患儿101例,取鼻咽分泌物进行7种常见呼吸道病毒检测,同时取血筛查过敏原。结果3组患儿病毒检测总阳性率为60.4%,各组患儿病毒检测阳性率差异有显著性(P<0.01),但均以呼吸道合胞病毒(RSV)为主,其他病毒阳性率很低。所有患儿食物过敏阳性率为25.5%,吸入过敏原阳性率仅5.6%。3组患儿的过敏原阳性率差异有显著性(P<0.05或0.01),反复喘息组显著高于毛支组和肺炎组(P均<0.05),而后两组间差异无显著性。结论RSV是诱发婴幼儿喘息和喘息反复发作的主要病原;过敏是婴幼儿反复喘息发生的重要危险因素,而呼吸道合胞病毒感染的发生与患儿是否存在过敏无关。     

2003-2007年重庆地区急性下呼吸道感染患儿病毒监测情况

目的 分析重庆地区急性下呼吸道感染(ALRI)患儿2003-2007年病毒病原学构成及变化情况,探讨鼻咽分泌物(NPS)病毒抗原检测与血清病毒抗体检测对ALRI患儿病原学诊断的价值.方法 2003年4月-2007年10月从2 529例ALRI住院患儿吸取了 NPS标本,采刚免疫荧光法检测7种常见的呼吸道病毒抗原:呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV)、A型流感病毒(IA)、B型流感病毒(IB)、副流感病毒1、2、3型(PIV1、PIV2、PIV3),采用EIJSA方法检测55 887例ADV病毒血清IgM抗体,其中45 159例采用同样方法检测了 RSV病毒血清IgM抗体.结果 2 529例呼吸道病毒抗原检测阳性778份(30.76%).其中RSV阳性668份(85.86%),PIV3阳性75份(9.64%),IA阳性20份(2.57%).ADV阳性15份(1.93%),PIV1阳性仪1份(0.13%),且与RSV协同阳性.病毒血清RSV-IgM检测各年阳性率为0.9%～15.2%,ADV-IgM检测各年阳性率为0.6%～10.6%.RSV感染主要在冬春季节好发.结论 重庆地区ALRI中病毒感染仍然是小儿ALBI的最常见病原,且仍以BSV感染居首,有明显季节性,以冬春季节为著.2007年1-10月均能检测到RSV病原,阳性率在2月可达50%,提示2007年可能是RSV流行的高峰年.而PIV3、IA、ADV及PIV1感染率较低,IB及PIV2近5 a来均未发现.ILSV病毒抗原免疫荧光检测既快速又准确,与临床诊断较符合,优于抗体检测.实用儿科临床杂志,2009,24(10):768-770     

肿瘤

053765儿童ALL的HLA-1类抗原表达及机体免疫功能探讨／李春…∥实用全科医学．-2005,3(5)．-381-382 采用流式细胞术检测儿童急性淋巴细胞性白血病初发病人 42例、完全缓解期病人36例,对照组34例儿童HLA-Az、HLA-B 抗原表达。结果:1．3组儿童HLA-Az抗原均为高表达,阳性率均数均在90％以上,组间比较无显著性差异(P>0．05)。2．初发组白血病细胞表达HLA-B抗原表达明显下调,完全缓解组外周血     

衣原体IgM及IgG抗体在小儿呼吸道感染病因学诊断中的意义

为阐明4岁内小儿衣原体感染的病因及发病率，检测151例下呼吸道感染小儿血清衣原体特异性抗体，结果有24．7％确诊为呼吸道衣原体感染，且22．7％为肺炎衣原体引起，沙眼衣原体仅占2％。衣原体是引起继发性免疫缺陷的危险因子，研究100例7个月－15岁反复呼吸道感染小儿的血清沙眼衣原体特异性抗体，其中55例IgM和IgG抗体阳性，8例（14．5％）有两种抗体。患儿之母亲血清抗体阳性率亦高（75％），并发现沙眼衣原体抗体平均滴度值与患儿年龄呈线性关系，在6岁以内反复呼吸道感染最多的组内特异性IgG抗体平均滴度明显高于7－15岁小儿（P＜0．05）。所以宫内感染是主要传播途径，其次是日常生活接触传染（家庭性衣原体病）。     

激素敏感型肾病综合征患儿血清、外周血单个核细胞白细胞介素-18表达的意义

目的探讨小儿激素敏感型肾病综合征(SSNS)与白细胞介素-18(IL-18)的关系及地塞米松(DEX)对外周血单个核细胞(PBMC)体外培养表达IL-18的抑制作用。方法单纯型SSNS23例。采用ELISA测定患儿治疗前后血清、尿液IL-18水平和PBMC体外培养上清液中IL-18表达。对照组为相应年龄健康儿童15例;另18例年龄相似的呼吸道感染病例作为感染对照组。结果治疗前后血清、尿液IL-18水平有显著性差异(t=15.072,16.149Pa<0.001)。治疗前PBMC在植物血凝素(PHA)刺激下体外培养上清液中IL-18表达明显高于治疗后和正常对照组(t=6.526,5.585Pa<0.001)。培养液中加入DEX后PBMC表达IL-18水平明显低于未加DEX组(t=4.217P<0.001)。血、尿IL-18与24h尿蛋白定量呈显著正相关(r=0.768,0.638P<0.05)。血清IL-18与PBMC体外培养上清液中IL-18水平呈正相关(r=0.574P<0.05)。结论SSNS的发病与IL-18密切相关;PBMC高表达IL-18可能是其血清IL-18增高原因之一。     

测定病毒性心肌炎患儿柯萨奇病毒B特异性IgM的病原学意义

为探讨柯萨奇病毒B特异性IgM（CVB－IgM）的病原学意义，应用免疫印迹试验测定112例病毒性心肌炎患儿的CVB－IgM，结果是阳性33例，总阳性率为29．5％；27例正常儿童中阳性者1例，占3．7％，两者比较差异有显著意义（X2=7．813，P＜0．01）。病程小于2个月者阳性率为40％，与病程2～6个月和大于6个月者（阳性率分别为4．55％和13．33％）比较均有显著差异（X2=9．832，P＜0．01和X2=4．921，P＜0．05）。提示在临床上存在心肌炎症或心肌损伤时，测定CVB－IgM具有早期病原学诊断意义。     

儿童急性淋巴细胞白血病nm23-H_1基因表达及其与免疫分型的关系

目的探讨儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)nm23-H1基因的表达水平及其与免疫分型的关系。方法应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)的方法检测儿童ALL初治、缓解、难治、复发患儿及正常对照儿童nm23-H1基因的表达水平,观察nm23-H1基因与免疫表型的关系。结果①初治患儿nm23-H1表达水平明显高于正常对照组(P<0.01)和完全缓解组(P<0.01);完全缓解组nm23-H1表达水平与对照组差异无显著性(P>0.05),复发组nm23-H1表达水平高于正常对照组(P<0.01)和完全缓解组(P<0.01),与初治差异无显著性(P>0.05);难治组均为高表达。②T-ALL的nm23-H1阳性率高于B-ALL(P<0.05),且T-ALL的nm23-H1表达水平高于B-ALL(P<0.05)。结论nm23-H1的表达水平随儿童ALL的病情发展而变化,在初治、复发及难治ALL具有高表达,nm23-H1高表达者预后差,易复发;nm23-H1在T-ALL具有高表达,可能是T-ALL的缓解率低、预后差的原因之一。     

小儿病毒性心肌炎与柯萨奇B组病毒抗体的关系探讨

目的 探讨柯萨奇B组病毒抗体IgM测定在心肌炎病原学诊断和临床诊断中的意义。方法 1996～1998年儿科住院病人70例,分为心肌炎组20例,疑似心肌炎组25例,对照组25例。用间接酶联免疫吸附法(ELISA)测定柯萨奇B组病毒抗体IgM和IgG。 结果柯萨奇B组病毒抗体IgM阳性心肌炎组11例(55%),疑似心肌炎组11例(44%),对照组11例(44%),经统计学处理,其差别无显著性意义。结论 用ELISA法测定柯萨奇B组病毒抗体IgM,阳性提示有柯萨奇B组病毒感染,对心肌炎患儿可以作出病因和病原学诊断,但不能以此作为临床诊断心肌炎的依据。     

小儿病毒性心肌炎与柯萨奇B组病毒抗体的关系探讨

目的探讨柯萨奇 Ｂ组病毒抗体ＩｇＭ测定在心肌炎病原学诊断和临床诊断中的意义。方法１９９６～１９９８年儿科住院病人７０例,分为心肌炎组２０例,疑似心肌炎组２５例,对照组２５例。用间接酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）测定柯萨奇Ｂ组病毒抗体ＩｇＭ和ＩｇＧ。结果柯萨奇Ｂ组病毒抗体ＩｇＭ阳性心肌炎组１１例（５５％）,疑似心肌炎组１１例（４４％）,对照组１１例（４４％）,经统计学处理,其差别无显著性意义。结论用ＥＬＩＳＡ法测定柯萨奇Ｂ组病毒抗体ＩｇＭ,阳性提示有柯萨奇Ｂ组病毒感染,对心肌炎患儿可以作出病因和病原学诊断,但不能以此作为临床诊断心肌炎的依据。     

激素敏感型单纯性肾病综合征患儿尿液呼吸道病毒表达及其与发病的相关性

目的探讨呼吸道病毒感染与激素敏感型单纯性肾病综合征（SRSNS）发病的关系。方法采用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）、桥联酶标（APAAP）法,分别对38例SRSNS患儿（急性期28例,缓解期10例）、18例肾炎性肾病、15例继发性肾病、16例毛细支气管炎和15例健康对照儿童尿液呼吸道病毒基因、抗原进行检测。结果SRSNS急性期组尿液呼吸道病毒基因、抗原检出率均明显高于其他各组,差异有统计学意义（Pa〈0.05）,其中呼吸道合胞病毒（RSV）检出率最高。病毒检出率在是否应用激素间差异无统计学意义。病毒基因与抗原检测结果有较好一致性。结论呼吸道病毒可能是SRSNS重要的触发因素。     

P-糖蛋白170在原发性肾病综合征患儿糖皮质激素耐药中的作用

目的探讨原发性肾病综合征(PNS)患儿治疗前外周血单个核细胞(PBMC)P-糖蛋白170(P-gp170)与糖皮质激素(GC)耐药的关系。方法采用流式细胞仪(FCM)检测30例PNS患儿PBMCP-gp170的表达,并分析其与复发次数、24h尿蛋白定量(24hUTP)及肾脏病理积分的关系。根据随访结果分成激素耐药型肾病综合征(SRNS)和激素敏感型肾病综合征(SSNS)2组,各15例。10例健康体检儿童作为正常对照组。结果SRNS组患儿PBMCP-gp170的表达量显著高于SSNS组患儿(P均<0.05)。PNS患儿激素治疗前PBMCP-gp170的表达量与复发的次数呈正相关(r=0.399,P<0.05);SRNS患儿激素治疗前PBMCP-gp170的表达量与24h尿蛋白定量(24hUTP)及肾脏病理积分均呈正相关(r=0.576、0.529,P均<0.05)。结论PBMCP-gp170表达增高可能与PNS患儿GC耐药有关,可作为PNS患儿GC耐药的标志之一。PBMCP-gp170表达增高与PNS活动、复发及病理有关,可做为临床判断预后的指标。     

Multiple drug-resistant gene 1 in children with steroid-sensitive nephrotic syndrome

Background: A full dose of corticosteroid is required to induce complete remission (CR) in steroid‐sensitive nephrotic syndrome (SSNS), unless it is possible to taper and discontinue along with the course after CR. But the mechanism of this change in steroid sensitivity remains unknown. P‐glycoprotein (PGP) can eliminate given corticosteroids from cytoplasm, which results in corticosteroid resistance. Therefore, drug delivery was analyzed using real‐time polymerase chain reaction (PCR) of multiple drug‐resistant gene 1 (MDR1; encoding PGP) mRNA expression. Methods: Fourteen patients with SSNS (male/female: 14/0; age: 1–23 years; mean 10.4 years) were enrolled in the study. MDR1 mRNA gene expression of peripheral blood nucleated cells (PBNC), before and after CR (19 sets of blood samples), was quantified using real‐time PCR. Results: The MDR1 mRNA levels before CR were variable in each patient, but there was an apparent decrease in the MDR1 gene expression of PBNC after CR (P < 0.003). Conclusion: PGP may play a role in the tapering of corticosteroids after CR in SSNS.     

E2A-PBX1融合基因的实时定量检测在小儿急性淋巴细胞白血病微小残留病监测中的应用

目的：实时荧光定量PCR方法检测E2A-PBX1融合基因的表达水平,探讨其在监测急性淋巴细胞白血病（ALL）患儿微小残留病（MRD）及判断预后中的临床价值。方法：采用实时荧光定量RT-PCR方法,动态检测11例E2A-PBX1融合基因阳性的ALL患儿在初治期（11例）、完全缓解期（11例）、复发期（3例）和10例同期骨髓细胞形态学正常的非血液及肿瘤疾病对照组患儿的E2A-PBX1融合基因表达水平。结果：11例ALL患儿初治期和复发期的E2A-PBX1基因表达水平均显著高于缓解期及对照组（P<0.01）。与诱导缓解治疗第33天E2A-PBX1水平表达阴性的患儿比较,表达阳性的患儿3年的复发率增高,无病生存率降低（均P<0.05）。结论：实时荧光定量RT-PCR检测E2A-PBX1融合基因的表达水平是监测MRD、预测复发、指导个体化治疗的良好指标,诱导缓解第33天E2A-PBX1融合基因水平可用于判断预后。     

Role of sodium during formation of edema in children with nephrotic syndrome

Background: The pathogenesis of edema in nephrotic syndrome is not entirely understood. The aim of this study was to contribute to the discussion on edema pathogenesis in nephrotic syndrome by following changes in volume and sodium retention for the course of the disease in children with steroid‐sensitive nephrotic syndrome (SSNS). Methods: Forty‐one children with SSNS were included in the study. The patients were divided into three groups (group I: relapse‐edematous; group II: relapse‐edema free; group III: remission). We investigated the value of the significance and area of sodium retention and vasoactive hormones. In addition, we measured parameters such as inferior vena cava collapsibility index, left atrium diameter, and total body water (TBW) to determine the volume load and cause of edema in children with SSNS. Results: TBW increased in the relapse‐nephrotic syndrome group and the difference was statistically significant among groups (P < 0.001). However, inferior vena cava collapsibility index and left atrium diameter were not different among groups. Fractional sodium excretion was lower in children with relapse nephrotic syndrome (P < 0.05). Conclusion: Although TBW increases in children with SSNS, intravascular volume is normal. In addition, hypoalbuminemia and sodium retention of the proximal tubule cause edema in children with SSNS.