反相高效液相色谱法测定人血浆中盐酸二甲双胍浓度

目的:建立测定人血浆样品中盐酸二甲双胍浓度的定量分析方法.方法:反相高效液相色谱法(RP-HPLC法).色谱柱为Nucleosil 100-5硅胶柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为0.03 mol/L的磷酸二氢铵溶液(pH=7.00)-乙腈(75:25,V/V),检测波长240 nm,柱温30℃,进样量40μL.结果:血浆中盐酸二甲双胍浓度线性范围是25～4 000 ng/mL(r=0.999 9),回收率在94.59%～100.84%之间,日内RSD(n=5)在0.67%～2.35%之间,日间RSD(n=5)在2.77%～4.09%之间,最低检测限是12.5 ng/mL.结论:HPLC法简便、快捷、灵敏、准确,适用于临床药代动力学及药效学的研究.     

高效液相色谱荧光法测定人血浆中顺式阿曲库铵浓度

目的 建立测定人血浆中顺式阿曲库铵质量浓度的高效液相色谱荧光法.方法 采用乙腈沉淀蛋白进行血样处理,色谱柱为Diamonsil C18柱(150 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为0.04 mol/L磷酸二氢钾(pH 3.0)-乙腈(60:40),流速为0.5 mL/min,荧光激发波长为230 nm,发射波长为324 nm.结果 顺式阿曲库铵进样质量浓度在10.0～2 500 ng/mL范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999 0.n=7),检测限和定量限分剐为2.5 ng/mL和10 ng/mL,日内RSD小于3.6%,日间RSD小于4.0%,提取回收率为88.91%～91.09%,方法回收率为97.95%～98.70%.结论 该方法简便、灵敏、准确、重现性好,适用于人体内顺式阿曲库铵药物代射动力学的研究.     

吲哒帕胺血药浓度测定及药动学研究

目的:建立一种测定人体血浆中吲哒帕胺血药浓度的高效液相色谱法。方法:采用 ULTRON VX-ODS 色谱柱(5μm,4.6 mm×250 mm),以甲醇-乙腈-水(50∶5∶45)为流动相,流速1 mL·min~(-1),柱温:室温,检测波长242 nm。结果:本方法线性范围为0.54～172.8ng·mL~(-1),r=0.9940,方法定量限为(0.54±0.04)ng·mL~(-1)(S/N>10),方法回收率为97.8%～108.1%(n=15),日内 RSD 为3.0%～13.4%(n:5),日间 RSD 为2.5%～14.4%(n=5).结论:本方法灵敏度高,操作简便准确,可用于人体血浆中吲哒帕胺浓度的测定及药动学研究.     

非那西丁及其代谢产物对乙酰氨基酚的高效液相色谱测定

目的建立非那西丁及其代谢产物对乙酰氨基酚的高效液相色谱测定方法.方法色谱柱:Nova-PakR C18(3.9 mm×150 mm,5μm);流动相为甲醇水溶液,其梯度洗脱程序为:17%(体积分数,下同)甲醇(保持5 min)→80%甲醇(10 min)→17%甲醇(12 min);检测波长254 nm.结果非那西丁、对乙酰氨基酚线性范围分别为0.687～87.920 μg/mL(r=0.9999,n=5),0.423～54.200μg/mL(r=0.9997,n=5).低、中、高三种浓度的平均方法回收率非那西丁为96.9%(n=5),对乙酰氨基酚为95.1%(n=5); 日内,日间精密度(RSD)均小于6%(n=5).结论本研究为非那西丁的药物代谢研究提供了一种测定方法.     

RP-HPLC法同时测定人体血清及脑脊液中万古霉素的含量

目的:建立人体血清及脑脊液样品中万古霉素浓度的高效液相色谱测定法。方法:以外标法定量,采用AglientZORBAXSB-C18色谱柱(4.6×250mm,5μm),流动相为30 mM磷酸二氢钾缓冲溶液-乙腈(91:9,pH3.2),流速1.1ml/min,检测波长236nm,柱温20℃。结果:万古霉素在5～200μg/mL血清浓度范围内线性关系良好(r=0.9981),最低定量限为5μg/mL,提取回收率在23.40～47.36%;日内RSD为3.57%、0.97%、0.46%(n=5),日间RSD为4.49%、0.90%、4.10%(n=5);在10～2000μg/mL脑脊液浓度范围内线性关系良好(r=0.9997),最低定量限为10μg/mL,提取回收率在48.61～53.20%;日内RSD为3.10%、6.34%、4.06%(n=5),日间RSD为19.47%、0.87%、2.53%(n=5)。结论:本方法快速,准确,具有创新性。     

高效液相色谱法测定薇依霜中维生素E和羟苯乙酯含量

目的 建立测定薇依霜中维生素E和羟苯乙酯含量的高效液相色谱法.方法 色谱柱为Diamonsil C18柱(250mm×4.6mm,5μm),维生素E测定以甲醇为流动相,流速为2.0 mL/min,紫外检测波长为285 nm;羟苯乙酯测定以甲醇:水(45:55)为流动相,流速为1.0 mL/min,检测波长为258 nm.结果 维生素E质量浓度在0.099 6～0.498 g/L范围内与峰面积线性关系良好,r=0.999 5(n:5).平均回收率为99.25%,RSD为1.21%(n=9);羟苯乙酯质量浓度在2.16～10.80μg/mL进样范围内与峰面积线性关系良好,r=0.999 7[n=5),平均回收率为100.31%,RSD为1.02%(n=9).结论 所建立的方法简便、专属性强,重现性好,可有效控制薇依霜的质量.     

UPLC-MS/MS法同时测定苦黄注射液中7种成分的含量

目的:建立同时测定苦黄注射液中苦参碱、槐果碱、大黄素、大黄酸、绿原酸、柴胡皂苷a、芦荟大黄素含量的方法。方法:采用超高效液相色谱-串联质谱法。色谱柱为Phenomenex Kinetex C_(18),流动相为甲醇-0.1%甲酸(梯度洗脱),流速为0.5 mL/min,柱温为20℃,进样器温度为10℃,平衡时间为4 min,进样量为5μL。离子化模式为电喷雾电离,源喷射电压分别为5 500、-4 500 V,雾化气压力为4.14×10~5Pa,加热气压力为4.48×10~5Pa,帘气压力为1.72×10~5Pa,离子源温度为600℃,工作模式为多反应监测模式。结果:苦参碱、槐果碱、大黄素、大黄酸、绿原酸、柴胡皂苷a、芦荟大黄素检测质量浓度线性范围分别为1.25~80.0 ng/mL(r=0.999 3)、1.10~70.0 ng/mL(r=0.999 5)、0.16~10.5 ng/mL(r=0.999 3)、2.61~168 ng/mL(r=0.999 3)、1.50~96.0 ng/mL(r=0.999 3)、1.48~94.5 ng/mL(r=0.999 6)、6.11~391 ng/mL(r=0.999 1);定量限分别为0.061、0.109、0.041、1.313、0.500、0.492、3.055 ng/mL,检测限分别为0.025、0.054、0.016、0.656、0.150、0.148、1.528 ng/mL;精密度、稳定性、重复性试验的RSD≤3%;加样回收率分别为95.45%~99.45%(RSD=1.43%,n=6)、97.50%~101.00%(RSD=1.50%,n=6)、95.67%~101.73%(RSD=2.85%,n=6)、97.17%~100.57%(RSD=1.16%,n=6)、95.19%~98.90%(RSD=1.71%,n=6)、95.38%~103.85%(RSD=3.39%,n=6)、95.50%~101.17%(RSD=1.20%,n=6)。结论:该方法简便、高效、准确、可靠,适用于同时测定苦黄注射液中7种有效成分的含量。     

HPLC测定人肝转基因细胞中的盐酸维拉帕米

目的为了研究盐酸维拉帕米经人肝CYP450转基因细胞的代谢,建立了反相高效液相色谱的测定方法.方法与人肝转基因细胞提取的S9上清液孵育之后的样品用二氯甲烷-异丙醇(9∶1,V/V)提取,采用地西泮作为内标,以Shim-packCLC-ODSC18为色谱柱,甲醇-水-三乙胺(60∶40∶0.4,V/V),pH6.4为流动相,紫外检测波长为235nm,流速0.5ml*min-1.结果维拉帕米浓度在5～320μg*ml-1范围内线性关系良好,r=0.9999,n=6.检测限为6.25ng(S/N≥3),定量限为9.4ng±1.06ng,相对标准偏差(RSD)＜12%(n=5).方法回收率达94.4～99.6%,日内、日间RSD分别为5.9～2.9%,5.2～3.8%(n=5).结论此方法简便、准确,可用于研究盐酸维拉帕米在人肝转基因细胞中的代谢.     

高效液相色谱法同时测定复方亚油酸乙酯胶丸中维生素C和烟酸含量

目的 建立测定复方亚油酸乙酯胶丸中维生素C和烟酸含量的高效液相色谱法.方法 色谱柱为Waters Fire C18柱(250mm ×4.6mm,5μm);流动相为甲醇-0.004 mol/L庚烷磺酸钠溶液-冰醋酸(10:90:0.05),流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,检测波长254 nm.结果 维生素C质量浓度在12.09～241.8 μg/mL范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999 8,n=6),平均加样回收率为98.89%,RSD为1.09%(n=9);烟酸质量浓度在12.57～251.4 μg/mL范围内与峰面积线性关系良好(r=1.000 0,n=6),平均加样回收率为98.17%,RSD为1.06%(n=9).结论 该方法简便快速,结果准确,可作为该产品质量控制方法.     

用液相色谱-质谱-质谱法测定人血清中非洛地平浓度

目的:建立液相色谱-质谱-质谱(LC-MS-MS)法测定人血清中非洛地平的浓度。方法:血清样品经液-液萃取预处理。色谱柱为Xterra柱(50 mm×2.1 mm,3.5μm),流动相为乙腈-0.02%氨水,采用梯度洗脱,流速为0.3 mL/min。非洛地平和尼莫地平(内标)的多反应监测(MRM)扫描离子对分别为m/z382.1→145和m/z417.2→92,两者的保留时间分别为1.24 min和1.06 min。结果:非洛地平在0.04～20 ng/mL范围内线性关系良好(r=0.999 7),低、中、高浓度(0.08、8.0、16.0 ng/mL)的日内RSD分别为6.60%、7.22%和5.01%(n=6),日间RSD分别为9.42%、8.46%和5.12%(n=14),准确度为98.21%～106.20%(n=6)。结论:本法操作简便,检测准确、灵敏、专一,重复性好,适用于非洛地平血药浓度监测和药动学及生物利用度研究。