邻苯二甲酸(2-乙基己基)酯致畸致突变实验研究

目的:本文报道了邻苯二甲酸(2-乙基己基)酯(DEHP)小鼠致畸试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠骨髓细胞染色体畸变试验和Ames试验的研究结果.结果与结论:DEHP大剂量(1 000 mg/kg、2 000 mg/kg)时对小鼠有明显的胚胎毒性和致畸性.DEHP对Ames试验的4个标准菌株无明显诱变作用,但可致小鼠骨髓嗜多染红细胞微核形成,并具染色体畸变效应.     

己二酸二(2-乙基己基)酯灌胃染毒对大鼠的一般生殖毒性研究

目的： 观察己二酸二（2-乙基己基）酯（DEHA）灌胃染毒对亲代大鼠的一般毒性、交配行为和对胎仔生长发育的影响。方法： 将120只成年SPF级SD大鼠按体质量随机分为4组，分别为对照组（玉米油）和低、中、高剂量[分别为28、170、1 080 mg/（kg·d）]DEHA染毒组，每组30只，雌：雄比例2：1，采用灌胃方式给予受试物，每天灌胃1次，雄鼠染毒10周、雌鼠染毒2周后同组动物合笼。各组雄鼠结束染毒后，雌鼠在交配期、妊娠期持续染毒至实验结束，测定亲代大鼠体质量、相关脏器质量及其脏器系数并进行组织病理检查，测定亲代大鼠血清生化指标。记录交配成功天数、怀孕动物数、每窝胎仔数和胎仔体质量。结果： 与对照组比较，在亲代大鼠中，高剂量DEHA染毒组亲代雄性大鼠终体质量减少（P < 0.01）、睾丸脏器系数增加（P < 0.05），谷草转氨酶（AST）水平、肌酐（CREA）水平均升高（P < 0.05）；与对照组比较，高剂量组亲代雌性大鼠肝脏和肾脏质量及肝、肾脏器系数均增加（P < 0.01或P < 0.05），低剂量组亲代雌性大鼠AST水平降低（P < 0.05）；高剂量组亲代雌性大鼠血清球蛋白（GLO）、总胆固醇（TC）水平均升高（P < 0.05）；高剂量组的胎仔体质量降低（P < 0.01）。组织病理学检查结果未见明显异常。结论： DEHA灌胃染毒可影响亲代大鼠体质量增长，对亲代大鼠肝、肾有毒性作用，引起胎仔生长发育障碍。     

己二酸二(2-乙基己基)酯灌胃染毒对大鼠的一般生殖毒性研究

目的： 观察己二酸二（2-乙基己基）酯（DEHA）灌胃染毒对亲代大鼠的一般毒性、交配行为和对胎仔生长发育的影响。方法： 将120只成年SPF级SD大鼠按体质量随机分为4组,分别为对照组（玉米油）和低、中、高剂量[分别为28、170、1 080 mg/（kg·d）]DEHA染毒组,每组30只,雌：雄比例2：1,采用灌胃方式给予受试物,每天灌胃1次,雄鼠染毒10周、雌鼠染毒2周后同组动物合笼。各组雄鼠结束染毒后,雌鼠在交配期、妊娠期持续染毒至实验结束,测定亲代大鼠体质量、相关脏器质量及其脏器系数并进行组织病理检查,测定亲代大鼠血清生化指标。记录交配成功天数、怀孕动物数、每窝胎仔数和胎仔体质量。结果： 与对照组比较,在亲代大鼠中,高剂量DEHA染毒组亲代雄性大鼠终体质量减少（P < 0.01）、睾丸脏器系数增加（P < 0.05）,谷草转氨酶（AST）水平、肌酐（CREA）水平均升高（P < 0.05）;与对照组比较,高剂量组亲代雌性大鼠肝脏和肾脏质量及肝、肾脏器系数均增加（P < 0.01或P < 0.05）,低剂量组亲代雌性大鼠AST水平降低（P < 0.05）;高剂量组亲代雌性大鼠血清球蛋白（GLO）、总胆固醇（TC）水平均升高（P < 0.05）;高剂量组的胎仔体质量降低（P < 0.01）。组织病理学检查结果未见明显异常。结论： DEHA灌胃染毒可影响亲代大鼠体质量增长,对亲代大鼠肝、肾有毒性作用,引起胎仔生长发育障碍。     

多遗传学终点的遗传毒性试验组合的建立

目的：建立Ames波动试验、中国仓鼠肺成纤维（CHL）细胞体外微核试验和小鼠淋巴瘤细胞基因突变试验（MLA）方法,探讨其作为一套新的遗传毒性试验组合检测化合物诱变性的可能性。方法：在Ames波动试验中,用TA100沙门氏菌进行96孔板的Ames波动试验,非活化条件下以叠氮钠（SA）、活化条件下以环磷酰胺（CP）染毒处理,计数阳性孔数并进行卡方检验。在CHL细胞体外微核试验中,非活化条件下用丝裂霉素C （MMC）分别染毒处理4和24 h,活化条件下用CP染毒4 h,计数2000个细胞中含微核的细胞数,并进行卡方检验。在MLA中,小鼠淋巴瘤细胞经清除自发突变后,非活化条件下用MMC、活化条件下用CP分别染毒处理3 h,计算相对存活率（RS）、相对悬浮增长率（RSG）、相对总增长率（RTG）、平板效率PE0、PE2、突变率（MF）、小集落比例（SC）。2结果：Ames波动试验中SA和CP在各自试验条件下阳性孔数均较对照组显著增加（χ^2＞6.63,P＜0.01）,量效关系明显。CHL细胞体2外微核试验中,MMC和CP在各自试验条件下均引起微核率显著升高（χ^2＞6.63,P＜0.01）,量效关系明显。MLA中MMC和CP在各自＋/-试验条件下均引起L5178Y 3.7.2C-tk^＋/- 细胞的PE、RS、RSG和RTG呈剂量依赖性下降,MF呈剂量依赖性升高,高出溶剂对照的2倍以上。结论：此3种短期遗传毒性试验方法可互为补充、相互验证,其组合应用可提高检出化合物遗传毒性的准确性,有望得到进一步推广应用。     

甘泰康的遗传毒性研究

目的与方法:采用Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验及小鼠精子畸形试验检测甘泰康的遗传毒性,为其食用安全性提供依据.结果与结论:3项遗传毒性试验均为阴性,甘泰康对所试菌株、小鼠体细胞及雄性生殖细胞无诱变性.     

邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯对小鼠肺细胞DNA的损伤作用

目的： 探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯(DEHP)对小鼠肺细胞DNA的损伤作用。方法：以生理盐水作为阴性对照组,用不同浓度DEHP(5、25、125、625 μmol/L)对小鼠肺细胞进行体外染毒,应用单细胞凝胶电泳技术检测肺细胞DNA的断裂程度。结果：当DEHP的浓度为125和625 μmol/L时,肺细胞尾部DNA百分含量、尾矩和Olive 尾矩与阴性对照组相比均升高,差异具有统计学意义(P＜0.05)。结论：DEHP在体外可造成小鼠肺细胞的DNA断裂损伤。     

长期暴露的邻苯二甲酸二 (2-乙基己基)酯在雌性大鼠体内的代谢及对肝脏的影响

目的：研究邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯（DEHP）长期暴露后,雌性大鼠体内的代谢情况及对肝脏的影响。方法：将Wistar雌性大鼠64只按体质量随机分为4组,分别为对照（玉米油）组和150、300、600 mg/mL DEHP染毒组,每组16只。采用灌胃方式进行染毒,每天灌胃1次,每次按2.5 μL/g给予,连续灌胃6个月。期间观察大鼠一般生长状况,分别在染毒后3个月和6个月两个时间点采集大鼠尿液。6个月后处死各组大鼠,摘取大鼠的肝、脾和肾称取质量,计算脏体比值;并制备肝组织切片,采用HE染色法观察肝组织形态变化。对采集的2个时间点大鼠尿液,采用高效液相色谱的方法检测尿中DEHP及其代谢物邻苯二甲酸单（乙基己基）酯（MEHP）的含量。结果：与对照组相比,各剂量染毒组大鼠一般生长情况无明显差异,但肝脏的脏体比值增加,HE染色显示300和600 mg/mL DEHP染毒组大鼠肝脏组织轻微病理改变。与对照组相比,3个月时,300和600 mg/mL DEHP组随着染毒剂量的增加,大鼠尿液中DEHP和MEHP含量均明显增加,差异均有统计学意义（P均 < 0.05）。6个月时,600 mg/mL DEHP染毒组大鼠尿液中DEHP和MEHP含量高于其他3组,差异有统计学意义（P < 0.05）。结论：雌性大鼠长期暴露DEHP,体内DEHP和MEHP的残留和蓄积会增加,超过正常的代谢能力,可能会对肝脏造成一定程度的损伤。     

邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯对大鼠卵巢病理和超微结构的影响

目的： 探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯(DEHP)对大鼠卵巢病理和超微结构的影响,评价DEHP对雌性大鼠的生殖毒性作用。方法：SPF级5周龄雌性SD大鼠40只,随机分为对照组(玉米油)、DEHP低剂量组(100 mg/kg)、DEHP中剂量组(500 mg/kg)和DEHP高剂量组(1 500 mg/kg),每组10只,每天灌胃1次,每周5次,连续染毒6周。染毒结束后称量大鼠体质量及卵巢质量,计算卵巢脏器系数;光镜下观察大鼠卵巢病理改变;电镜观察卵巢颗粒细胞超微结构的变化。结果：各染毒组大鼠体质量与对照组比较差异均无统计学意义(P均>0.05),高剂量组卵巢质量和脏器系数较对照组明显增加(P<0.01);普通光学显微镜检查发现DEHP处理后卵巢组织卵泡结构受损,电镜观察发现DEHP处理后颗粒细胞线粒体肿胀、线粒体嵴减少、胞浆空泡化、核染色质完全凝聚、出现凋亡小体、细胞变性坏死。结论：DEHP对大鼠卵巢毒性明显,影响卵泡发育,引起颗粒细胞凋亡。     

邻苯二甲酸单(2-乙基)己酯对MCF-7细胞DNA的氧化损伤

目的:研究邻苯二甲酸单(2-乙基)己酯(mono-2-ethylexyl phthalate,MEHP)对人乳腺癌MCF-7细胞DNA氧化损伤的作用。方法:分别用不同浓度的MEHP(6.25、12.5、25、50和100μmol/L)和二甲基亚砜(溶剂对照,0.1%)处理MCF-7细胞12和24 h后用MTT比色法检测细胞的存活率。再分别于染毒后1.5、3、6、12和24 h,测定丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)和细胞8-羟基脱氧鸟苷(8-hydroxy-2′-deoxyguanosine,8-OHdG)水平。结果:与对照组比较,MEHP染毒12 h,6.25和12.5μmol/L组细胞的存活率显著增加(P0.05)。MEHP染毒24 h,在较高浓度处理组(≥25μmol/L)的细胞存活率显著降低(P0.05);各处理组细胞的SOD活性有所增加,细胞MDA水平、GSH-Px活性以及8-OHdG生成量无显著变化(P0.05)。当MEHP染毒MCF-7细胞较短时间(1.5、3和6 h)时,各处理组MDA水平和8-OHdG生成量均显著升高(P0.05),而SOD和GSH-Px活性则显著性降低(P0.05)。结论:一定浓度MEHP作用在短时间内(1.5、3和6 h)可引起MCF-7细胞的氧化应激反应,并触发细胞DNA的氧化性损伤,具体调控机制有待深入研究。     

大黄素和大黄酸的体外遗传毒性评价

目的：评价大黄素和大黄酸的体外遗传毒性。方法：使用不同浓度的大黄素和大黄酸（均分别为20、40、80、120μg/ml）处理人的类淋巴母细胞WTK1后,进行彗星实验、体外微核试验和TK基因突变试验。并设溶剂对照组和甲基甲烷磺酸（mthylmethane sulfonate,MMS）阳性对照组。结果：大黄素80和120μg/ml剂量组TK基因突变频率、细胞拖尾率及平均尾长均增高（P〈0.05）;大黄酸120μg/ml剂量组TK位点总突变频率增高（P〈0.05）。结论：在本实验条件下,大黄素和大黄酸均表现出弱致突变作用。     

烯啶虫胺的致突变性试验

目的：研究烯啶虫胺的致突变性,为其安全生产和使用提供参考依据。方法：采用小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、Ames试验、中国地鼠肺细胞（CHL）染色体畸变试验和小鼠淋巴瘤细胞L5178YTK基因突变试验检测烯啶虫胺的致突变性。结果：烯啶虫胺未引起骨髓嗜多染红细胞微核率的异常增高（P〉0.05）;在直接作用或代谢活化条件下,鼠伤寒沙门氏菌TA97、TA98、TA100、TA102各剂量组回复突变菌落数均未超过自发回变菌落数的2倍;烯啶虫胺各剂量组的CHL细胞染色体畸变率和L5178Y细胞TK基因突变频率,与阴性对照组比较,其差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论：在本试验条件下,未发现烯啶虫胺有致突变性。     

多溴联苯醚BDE-3、BDE-47和BDE-209的体外遗传毒性评价

目的：对3种代表性多溴联苯醚（PBDEs）BDE-3、BDE-47和BDE-209进行体外遗传毒性评价。方法：采用TK6人淋巴母细胞进行彗星试验、微核试验和TK基因突变试验,同时检测DNA损伤、染色体改变和基因突变3个遗传学终点。每种PBDEs均设定5个剂量组：BDE-3为60、90、120、180和240 μmol/L;BDE-47为60、120、180、200和240 μmol/L;BDE-209为24、40、120、180和240 μmol/L;同时设定溶媒DMSO为阴性对照组。结果：与阴性对照组比较,3种PBDEs在各个剂量下均未能引起TK6细胞彗星的尾长、尾部DNA百分数和尾矩的增加（P > 0.05）,也均未引起TK6细胞微核率升高（P > 0.05）。TK基因突变试验显示,3种PBDEs均能引起TK基因突变频率升高,差异具有统计学意义（P < 0.05）,并呈剂量依赖性升高趋势（相关系数[R_BDE-3²]=0.85,[R_BDE-47²]=0.85,[R_BDE-209²]=0.90;P < 0.05）,但致突变作用BDE-47强于BDE-3和BDE-209。结论：多溴联苯醚BDE-3、BDE-47和BDE-209对TK6细胞具有致突变作用。     

2，4-二氯苯氧乙酸的致突变性研究

目的： 研究2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)是否具有潜在的遗传毒性。方法：利用Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠睾丸初级精母细胞染色体畸变试验对2,4-D原药的致突变性进行研究。结果：与对照组比较,2,4-D原药各剂量组对TA97、TA98、TA100和TA102菌株均无诱发回复突变菌落数增加的作用(P>0.05),对小鼠骨髓嗜多染红细胞的微核细胞率亦无明显影响(P>0.05),也未引起小鼠睾丸初级精母细胞染色体畸变率明显改变(P>0.05)。结论：在本实验条件下,未发现2,4-D原药的致突变性。     

三七的急性毒性及致突变性试验研究

目的: 探讨三七的急性毒性和致突变性,为评价其安全性提供毒理学依据。方法: 采用小鼠急性经口毒性试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验和Ames试验,参考《食品安全性毒理学评价程序》进行。小鼠急性经口毒性试验采用最大耐受剂量法,折合剂量为15 g/kg。小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验及小鼠精子畸形试验均设10.00、5.00、2.50 g/kg剂量组,另设溶剂和阳性对照组。Ames试验设2、8、40、200、1 000、5 000 μg/皿剂量组,另设自发回变组、溶剂及阳性对照组。结果: 急性毒性试验显示小鼠对三七经口灌胃的最大耐受剂量>15 g/kg。小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验和精子畸形试验中,各剂量组的微核率和精子畸形率与溶剂对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。Ames试验中,在加与不加S9时各剂量组回变菌落数均未超过自发回变菌落数的2倍,亦无剂量-反应关系,结果为阴性。结论: 在本实验条件下,三七对小鼠的经口急性毒性属于无毒级,对小鼠体细胞、雄性生殖细胞和鼠伤寒沙门氏菌组氨酸缺陷型菌株均未见潜在的致突变性。     

用TK基因和HGPRT基因突变试验检测人参皂甙Re的抗诱变性

背景与目的： 用TK基因和HGPRT基因突变试验评价人参皂甙Re的抗诱变性,为其进一步的开发利用提供资料。 材料与方法： 设人参皂甙Re 12.5、25、50、100 μg/ml分别与致突变物甲基磺酸甲酯(MMS)5 μg/ml 同时处理TK6细胞的实验组,同时设溶剂对照组(1％ DMSO),阳性诱变对照组(MMS 5 μg/ml)和抗诱变阳性对照组(VitC＋MMS),各组处理TK细胞4 h后,采用微孔板法检测TK和HGPRT两个位点的突变频率。 结果： 随着剂量的增加,人参皂甙Re拮抗MMS诱变性的作用增大,表现在TK和HGPRT两个位点突变频率均较阳性诱变对照组降低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。 结论： 人参皂甙Re具有拮抗MMS诱导的TK基因和HGPRT基因突变的作用;TK基因突变试验比HGPRT基因突变试验更为敏感。     

STUDY OF MUTAGENICITY OF VIRAL VECTOR IN TUMOR GENETHERAPY

With recent progress in tumor genetherapy, it抯 safety has been become a focus. The mutagenicity of DNA and supernatant of transgenic cells with retrovirus and adenovirus vectors was studied in this paper, which would supply clinic safety data for transgenic cells as tumor vaccines.[1] MATERIALS AND METHODS Cells Culture Recombination and packaging of human IL-2 cDNA with retrovirus vector pLXSN were completed by Shanghai Tumor Institute. Recombinant adenovirus (rAd-LacZ…     

特丁净致突变性与蓄积毒性实验研究

【摘要】 背景与目的: 研究特丁净的致突变性与蓄积毒性。 材料与方法: 采用小鼠睾丸精母细胞染色体畸变试验,鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验(Ames试验),小鼠骨髓多染红细胞微核试验,固定剂量蓄积毒性系数法。 结果: 小鼠睾丸M1期精母细胞染色体畸变数阴性对照组与特丁净各剂量组间差异无统计学意义(P>0.05), 而阴性对照组和特丁净各剂量组均低于环磷酰胺组(P<0.05);小鼠骨髓多染红细胞微核率阴性对照组与特丁净原药各剂量组间差异均无统计学意义(P>0.05),而阴性对照组和特丁净各剂量组均明显低于环磷酰胺组(P<0.01);四株试验菌在各试验剂量下(活化或非活化)均没有引起自发回变数呈2倍的增加,5.0 mg/皿剂量组对四个菌株均有抑菌作用,而0.5、1.0、2.0 mg/皿组无剂量反应关系。特丁净原药蓄积系数为1.4。 结论: 特丁净原药根据《农药登记毒理学试验方法》评定标准,未呈现致突变性,小鼠骨髓多染红细胞微核试验在所选剂量范围内结果为阴性,小鼠睾丸精母细胞染色体畸变试验在所选剂量范围内结果为阴性,但蓄积毒性明显。     

用TK基因突变试验评价葛根素的抗诱变性

背景与目的:用TK6人类淋巴母细胞TK基因突变试验评价葛根素的抗诱变性.材料与方法:设溶剂对照组、5 μg/ml甲基磺酸甲酯(MMS)组、5 μg/ml MMS分别加葛根素25 μg/ml、50 μg/ml、100 μg/ml的各试验组、5 μg/ml MMS+100 μg/ml VitC对照组,共6组.按上述分组加入葛根素与MMS处理4 h后测定第0 d的平板接种效率(PE0)、第3 d的平板接种效率(PE3)、细胞悬浮生长率(RSG)和总突变频率(TMF). 结果:100 μg/ml葛根素剂量组能显著降低MMS诱导的TK基因突变频率.结论:在本实验条件下,葛根素在较高剂量范围可抑制MMS诱导的TK6细胞TK基因突变,有潜在的开发应用前景.