Th17细胞、IL-17和MMP-13在过敏性紫癜发病机制中的作用

目的:通过测定过敏性紫癜(Henoch-Schonlein purpura,HSP)患者急性期外周血中Th17细胞、IL-17、基质金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase-13,MMP-13)的水平以及患者皮损处IL-17的表达,探讨HSP的免疫学发病机制。方法:应用流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)检测HSP组和健康对照组外周血中Th17细胞比例;双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法检测上述研究对象血浆中IL-17和MMP-13的浓度;免疫组织化学法检测HSP组皮损组织和健康对照组皮肤组织IL-17的表达情况。结果:HSP组急性期外周血中Th17细胞比例为(1.21±0.59)%,明显高于对照组的(0.71±0.26)%(t=4.907,P 0.01);HSP组急性期血浆中IL-17和MMP-13浓度分别为(64.58±36.21)pg/ml和(17.57±5.40)ng/ml,均明显高于对照组的(26.16±14.90)pg/ml和(11.55±4.40)ng/ml(t=6.183,P 0.01和t=5.022,P 0.01);HSP组皮损组织中IL-17的免疫组织化学积分光密度值为(7.26±2.34),非常显著高于对照组的(4.61±1.82)(t=2.877,P 0.01)。结论:Th17细胞、IL-17以及MMP-13有可能参与过敏性紫癜的发病过程。     

Th17细胞/Treg细胞失衡在儿童过敏性紫癜发病机制中的作用

目的:探讨Th17细胞、CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)及其特异性转录因子RORγt和FoxP3在儿童过敏性紫癜(Henoch-Schonlein purpura,HSP)发病机制中的作用,为儿童HSP的治疗从调控Th17/Treg失衡作为切入点提供一条新思路。方法:以2012年2月——2013年3月我院(四川省人民医院)儿科诊治的初次发病的HSP急性期患儿40例作为研究对象,以及同期来我院体检的健康儿童40例作为对照,采用SYBR Green I实时荧光定量PCR技术测定外周血单个核细胞中RORγt mRNA和FoxP3 mRNA的表达水平;用流式细胞术测定外周血T淋巴细胞中Th17细胞和Treg细胞的表达水平;用双抗夹心ABC-ELISA技术测定血清IL-17A、TGF-β1、IL-2和IL-6浓度。结果:HSP组Th17细胞(2.75±0.60%)及RORγt mRNA(1.11±0.51)明显高于对照组Th17细胞(1.41±0.29%)及RORγt mRNA(0.65±0.24)(P0.01),而Treg细胞(4.56±1.26%)及FoxP3 mRNA(1.15±0.45)明显低于对照组Treg细胞(7.85±1.97%)及FoxP3 mRNA(2.32±1.13)(P0.01);HSP组血清IL-17A(40.40±11.81 pg/ml)、IL-6(75.38±27.19 pg/ml)、TGF-β1(309.41±81.03 pg/ml)与对照组IL-17A(20.32±10.70 pg/ml)、IL-6(25.16±8.31 pg/ml)、TGF-β1(236.34±66.01 pg/ml)相比明显升高(P0.01),而血清IL-2(25.60±13.19 pg/ml)水平与对照组(34.42±11.69 pg/ml)比较则降低(P0.01);在HSP组Th17细胞表达与RORγt mRNA、IL-17A、IL-6表达呈正相关,相关系数分别为0.887,0.938,0.934(P0.01);Treg细胞表达与FoxP3 mRNA,IL-2表达呈正相关,相关系数分别为0.834,0.932(P0.01)。结论:急性期HSP患儿存在Th17细胞、RORγt mRNA及IL-17A表达水平升高,Treg细胞和FoxP3 mRNA表达水平降低,Th17/Treg细胞的失衡;急性期HSP患儿存在血清TGF-β1、IL-6水平增高,IL-2水平降低,且Th17细胞表达水平与IL-6表达呈正相关,Treg细胞表达水平与IL-2表达呈正相关。     

白介素6对人Th17细胞的免疫调节作用

本研究旨在探讨白介素6(IL-6)对人Th17细胞的调节作用.应用免疫磁珠分离正常人CD4+ T细胞并培养.实验分为2组,实验组(IL-6+):CD4+ T细胞(1×106/ml)经重组人IL-6(20ng/ml)刺激4天;对照组(IL-6-):不经IL-6刺激.应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上清中IL-17蛋白水平,流式细胞术(FCM)检测Th17细胞数量.结果发现,与对照组相比,经IL-6刺激后的CD4+ T细胞上清中IL-17蛋白水平明显升高(337.05±189.09pg/ml vs 15.07±12.70 pg/ml)(p<0.05);进一步FCM发现,IL-6剌激组Th17细胞数量明显高于对照组[(4.05± 0.30)% vs(2.81±0.44)]%,(p<0.01).结论:IL-6促进人Th17细胞的增殖.     

过敏性紫癜患儿外周血单个核细胞TLR6表达及其与Th1、Th2和Th17细胞免疫应答相关性研究

目的探讨TLR6在过敏性紫癜(HSP)患儿外周血单个核细胞(PBMC)的表达及其与Th1、Th2和Th17细胞免疫应答的相关性,探讨TLR6与HSP发病机制的关系。方法选取我院住院的急性期HSP患儿42例为研究对象,另选取健康儿童30例作为正常对照组。采用流式细胞术检测外周血单个核细胞TLR6蛋白表达,实时荧光定量PCR技术检测外周血单个核细胞MyD88mRNA的基因相对表达量,ELISA法检测血浆IFN-γ、IL-4、IL-17水平。结果 (1)HSP患儿外周血单个核细胞TLR6蛋白表达(TLR6阳性细胞百分率及平均荧光强度)显著高于正常对照组(t'=9.40,P<0.01;t'=10.49,P<0.01),HSP组外周血单个核细胞MyD88 mRNA相对表达量显著明显高于正常对照组(t'=2.46,P<0.01)。(2)HSP组血浆IL-4水平显著高于对照组(t'=3.44,P<0.01),IFN-γ水平高于对照组(t'=2.44,P<0.05),IFN-γ/IL-4比值低于对照组(t'=2.27,P<0.05),IL-17水平显著高于对照组(t'=2.64,P<0.01)。(3)HSP组单个核细胞TLR6蛋白表达与MyD88 mRNA呈显著正相关(r=0.79;P<0.01);与血浆IL-4水平呈显著正相关(r=0.69,P<0.01);与IFN-γ/IL-4比值呈负相关(r=-0.38,P<0.05);与IL-17水平呈正相关(r=0.36,P<0.05);与血浆IFN-γ水平不存在相关性(P>0.05)。结论 TLR6活化可能参与了HSP的免疫发病机制;HSP患儿体内存在Th1/Th2失衡,Th17异常活化,活化的TLR6可能通过上调Th2、Th17免疫应答介导HSP的免疫发病机制。     

原发免疫性血小板减少症患者Th17细胞和调节性T细胞检测的意义

目的探讨Th17细胞和调节性T细胞(Treg)在原发免疫性血小板减少症(ITP)患者中的意义。方法选取32例初诊ITP患者,其中位年龄49(18~70)岁;30例健康对照,中位年龄42岁(20~65岁)。用流式细胞术检测外周血Th17细胞及Treg细胞分别占淋巴细胞的比例;用ELISA法检测血浆中IL-6和IL-17的水平。并分析ITP患者Th17细胞、Treg细胞、IL-6和IL-17的水平与PLT的相关性。结果 (1)ITP患者Th17细胞比例明显高于健康对照(2.81%±1.33%vs.0.35%±0.75%,P<0.05);Treg细胞比例明显低于健康对照(0.70%±0.39%vs.1.26%±0.24%,P<0.05);Treg/Th17比值明显低于健康对照(0.27±0.17 vs.3.76±0.87,P<0.05);ITP患者血浆中IL-17和IL-6水平均明显高于健康对照,分别为(24.07±2.22 pg/ml vs.15.89±2.23 pg/ml,P<0.05)和(75.12±4.06 pg/ml vs.49.75±4.19 pg/ml,P<0.05)。(2)ITP患者外周血Treg细胞比例与IL-6、IL-17水平均呈显著负相关(r=-0.423,P<0.05;r=-0.456,P<0.05);IL-6与IL-17水平呈显著正相关(r=0.368,P<0.05);Th17细胞及Treg细胞呈显著负相关(r=-0.417、P<0.05)。Th17细胞比例与IL-6、IL-17水平不具相关性(r=-0.272,r=-0.104,P>0.05)。(3)ITP患者Th17细胞比例、IL-6水平和IL-17水平与血小板计数呈显著负相关(r=-0.365,P<0.05;r=-0.353,P<0.05;r=-0.464,P<0.01);Treg细胞比例与血小板计数不具相关性(r=-0.101,P>0.05)。ITP患者Th17细胞比例、IL-6水平与骨髓颗粒型巨核细胞比例呈显著正相关(r=0.371,P<0.05;r=0.359,P<0.05);Treg细胞比例、IL-17水平与骨髓颗粒型巨核细胞比例不具相关性(r=-0.230,P>0.05;r=-0.043,P>0.05)。结论 ITP患者Treg/Th17细胞平衡失调可能是影响其发生发展的一个重要因素,Th17细胞与疾病的严重程度相关。     

Th17细胞和白细胞介素-17在儿童过敏性紫癜发病中作用

目的:探讨Th17细胞和白细胞介素(interleukin,IL)-17在儿童过敏性紫癜发病杌制中的作用.方法:采用流式细胞术检测40例过敏性紫癜急性期患儿和30例健康体检儿童(对照组)外周血Th17细胞的表达,双抗夹心酶联免疫吸附法检测上述研究对象外周血血清IL-17浓度,并分析二者相关性.结果:过敏性紫癜急性期患儿Th17细胞阳性率和IL-17表达水平均高于对照组(P<0.05);TH17细胞与血清IL-17浓度呈正相关(r=0.895,P<0.05).结论:Th17细胞和IL-17共同参与了儿童过敏性紫癜的发病过程.     

初诊活动性肺结核患者血浆IL-6，IL-17，IL-37及TIM-3水平表达及其临床意义

目的　探讨初诊肺结核患者血浆白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-17（IL-17）、白细胞介素-37（IL-37）及T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3(TIM-3)水平变化及其临床意义。方法　收集2018年1月～2020年10月百色市人民医院收治的活动性肺结核患者57例、肺炎患者50例和健康对照40例。57例肺结核患者中菌阳肺结核31例,菌阴肺结核26例。57例肺结核按病情轻重、病程长短及病变范围分为轻症组32例和重症组25例。采用酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测各组血浆IL-6,IL-17,IL-37及TIM-3水平,并进行比较。结果　肺结核组血浆IL-6（41.37±13.50 pg/ml vs 26.28±9.16pg/ml,3.05±1.08 pg/ml）,IL-17（62.50±10.73pg/ml vs 30.47±7.18pg/ml,16.13±5.86pg/ml）,IL-37（14.63±4.18pg/ml vs 9.85±2.74pg/ml,4.10±1.02 pg/ml）及TIM-3（18.17±5.16ng/ml vs 11.80±3.52ng/ml,6.24±2.15 ng/ml）水平均明显高于肺炎组和对照组,差异均有统计学意义（t=7.338~13.273,均P＜0.001）。菌阳肺结核组血浆IL-6（52.60±15.71pg/ml vs 30.16±8.95 pg/ml）,IL-17（72.35±15.20 pg/ml vs 46.52±9.13 pg/ml）,IL-37（16.50±6.14 pg/ml vs 12.48±3.17 pg/ml）及TIM-3（21.70±7.93ng/ml vs 15.21±4.92 ng/ml）水平均明显高于菌阴肺结核组,差异具有统计学意义（t=8.472,10.161,6.925,9.106,均P＜0.001）。重症组血浆IL-6（56.38±17.26pg/ml vs 25.84±9.27pg/ml）,IL-17（79.50±16.38 pg/ml vs 48.20±8.74 pg/ml）,IL-37（18.48±6.20 pg/ml vs 10.82±3.26pg/ml）及TIM-3（23.26±8.15ng/ml vs 13.90±4.71ng/ml）水平明显高于轻症组,差异具有统计学意义（t=12.642,14.513,10.205,13.172,均P＜0.001）。结论　血浆IL-6,IL-17,IL-37及TIM-3水平在肺结核患者中明显升高,对判断肺结核严重程度有一定的价值。     

过敏性紫癜患者外周血血清IL-33、IL-38的表达及意义

目的：通过检测IL-33、IL-38在不同病期过敏性紫癜（Henoch-Schonlein purpura,HSP）患者外周血血清中的表达,探讨两者在过敏性紫癜发病机制中的作用。方法分别采集过敏性紫癜急性期（29例）、恢复期（27例）患者及30例健康对照者外周血,采用竞争性免疫抑制ELISA法检测过敏性紫癜患者不同病期及健康对照组外周血血清IL-33、IL-38表达水平。结果急性期、恢复期HSP患者及健康对照组血清IL-33水平分别为（90.78±18.45）pg/ml、（74.54±11.78）pg/ml及（58.14±16.22）pg/ml,且急性期高于恢复期（t＝3.891,P＝0.000）,恢复期高于健康对照组（t＝4.326,P＝0.000）,差异均具有统计学意义;急性期、恢复期HSP患者及健康对照组血清IL-38水平分别为（34.02±12.07）pg/ml、（83.49±14.98） pg/ml 及（130.58±27.08）pg/ml,且急性期低于恢复期（t＝13.654,P＝0.000）,恢复期低于健康对照组（t＝7.995,P＝0.000）,差异亦均具有统计学意义。并且,HSP患者血清IL-33与IL-38水平之间呈明显正相关（r＝0.522,P＝0.005）。结论 IL-33、IL-38可能参与过敏性紫癜的发病,并可作为病情活动的预测指标。     

慢性乙型肝炎患者外周血Th17细胞和IL-17检测及其临床意义

目的观察慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血Th17细胞表达频率和白细胞介素(IL)17浓度并探讨其临床意义。方法细胞内因子染色法结合流式细胞术检测20例CHB患者、6例慢加急性肝衰竭(ACLF)患者和19例健康对照(HC)组外周血Th17细胞表达频率,酶联免疫吸附法检测血浆IL-17浓度,分析Th17细胞表达频率和IL-17浓度与HBV DNA载量以及谷丙转氨酶(ALT)、凝血酶原活动度(PTA)、总胆红素(TB)水平之间的相关性。结果 CHB和ACLF患者Th17细胞表达频率为(3.34±1.79)%和(3.89±1.67)%,均高于健康对照组(2.01±0.78)%,CHB患者Th17细胞表达频率与ALT呈正相关(r=0.6188,P=0.0062)。CHB和ACLF患者血浆IL-17浓度[(168.8±53.86)pg/ml和(185.5±63.66)pg/ml]均低于健康对照[(260.8±100.30)pg/ml],CHB患者IL-17浓度与PTA负相关(r=-0.5803,P=0.0073),ACLF患者IL-17浓度与HBV DNA水平负相关(r=-0.8605,P=0.0278)。结论 CHB患...     

1型糖尿病合并自身免疫性甲状腺疾病患者临床特征和外周血相关血细胞因子表达水平的研究

目的：检测1型糖尿病合并自身免疫性甲状腺疾病（AITD）胰岛相关抗体及甲状腺相关抗体阳性率及其外周血Th1、Th2、Th17、Treg相关细胞因子表达水平,分析1型糖尿病合并AITD临床特点,探讨各细胞因子在1型糖尿病发生发展中的作用。方法收集1型糖尿病患者63例,对照组为来我院健康体检者57例,采集静脉血,检测胰岛相关抗体、甲状腺相关抗体及IFN-γ、IL-4、IL-10、IL-17细胞因子表达水平。结果1型糖尿病组 IFN-γ及 IL-17表达水明显高于正常对照组[（400.95±51.44）pg/ml vs.（340.99±39.47）pg/ml,P＜0.01;（26.87±±2.47）pg/ml vs.（19.41±2.80）pg/ml,P＜0.01],IL-4及IL-10表达水平均低于正常组[（21.63±4.22）pg/ml vs.（31.49±2.42）pg/ml,P＜0.01;（15.69±3.22）pg/ml vs.（24.13±2.17）pg/ml,P＜0.01],差异均有统计学意义。1型糖尿病任一胰岛相关抗体阳性组,TPO-Ab、TG-Ab、TR-Ab阳性率均高于胰岛相关抗体阴性组,差异有统计学意义（P＜0.05）,但各细胞因子表达无明显差异。1型糖尿病患者血清IL-17水平与HbA1c水平正相关（r＝0.59,P＜0.05）。结论1型糖尿病患者CD4＋T细胞各亚群间平衡失调,Th1/Th2及Th17/Treg平衡失调,向Th1及Th17方向漂移,细胞免疫及IL-17介导的前炎症反应在1型糖尿病起病中发挥主要作用,1型糖尿病胰岛相关抗体阳性患者,具有更高的甲状腺相关抗体阳性率,可能具有更高的自身免疫性甲状腺疾病风险。