姜黄素对高浓度葡萄糖诱导的RF/6A细胞损伤的抑制作用

目的:探讨姜黄素对高浓度葡萄糖培养的恒河猴脉络膜-视网膜内皮细胞(rhesus choroido-retinal endothelial cell,RF/6A)损伤的保护作用及机制。方法:RF/6A细胞分4组培养(n=6/组),对照组:DMEM培养基+100/L胎牛血清;高糖组:对照组培养基添加40mmol/L葡萄糖;姜黄素组:对照组培养基添加30μmol/L姜黄素;姜黄素-高糖组:对照组培养基添加40mmol/L葡萄糖及30μmol/L姜黄素。分组培养5d后,显微镜观察各组细胞生长状态,噻唑蓝比色法(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)检测各组细胞活力,琼脂糖凝胶电泳检测DNA ladder判断凋亡,Western-blot检测肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的表达。结果:与对照组相比,高糖组RF/6A细胞生长状态较差,活力明显降低(P<0.01),而姜黄素组及姜黄素-高糖组RF/6A活力无明显变化(P>0.05)。高糖组RF/6A出现明显的DNA ladder,对照组、姜黄素组以及姜黄素-高糖组未见明显DNA ladder。与对照组相比,高糖组TNF-α表达上调(P<0.01),姜黄素组及姜黄素-高糖组TNF-α表达无明显变化(P>0.05)。结论:姜黄素抑制高浓度葡萄糖诱导的RF/6A细胞凋亡、维持细胞活力,可能与姜黄素恢复高浓度葡萄糖诱导的TNF-α表达有关。     

pEGFP/Ang-1转染BMSCs对高糖环境中RF/6A细胞的保护作用

目的：观察血管生成素-1/重组质粒（ pEGFP/Ang-1）转染的大鼠骨髓间充质干细胞（ BMSCs）对高浓度葡萄糖损伤猴脉络膜-视网膜内皮细胞（RF/6A）的保护作用。方法：以pEGFP／Ang-1转染BMSCs,倒置荧光显微镜下观察增强型绿色荧光蛋白的表达,再利用Transwell模型,将转染的BMSCs与RF／6A共培养于高浓度葡萄糖培养基中。3d后MTr法检测RF／6A活力,Westernblot检测磷酸化蛋白激酶B（phosphorylatedproteinkinaseB,P—PKB）的表达,从而探讨转染pEGFP／Ang-1的BMSCs对高浓度葡萄糖培养中的RF／6A的保护作用。结果：成功转染pEGFP／Ang-1的BMSCs可见增强型绿色荧光蛋白表达,与转染pEGFP／Ang-1的BMSCs共培养的RF／6A细胞活力及P—PKB的表达均高于未转染组（均P〈0．01）,与对照组无明显差别（均P〉0．05）。结论：质粒pEGFP／Ang-1转染的BMSCs对高糖环境中的RF／6A具有保护作用,其机制可能与P—PKB表达上调有关。     

血管生成素1对高糖环境中猴脉络膜-视网膜内皮细胞的保护作用

目的 探讨高浓度葡萄糖对内皮细胞（endothelial cell,EC）单层通透性模型通透性的影响以及血管生成素1（angiopoietin-1,Ang-1）对此的保护作用。方法 将猴脉络膜-视网膜内皮细胞（RF/6A）接种于孔径0.8 μm聚碳酸酯微孔滤膜中,形成致密单层后分三组培养。正常对照组：DMEM高糖培养基,含葡萄糖25 mmol/L;高糖组：DMEM培养基,含葡萄糖40 mmol/L;Ang-高糖组：DMEM培养基,含葡萄糖40 mmol/L＋Ang-1 250 ng/ml。于第1天、第3天、第5天、第7天4个时间点建立EC单层通透性模型,检测蛋白质渗透压反射系数（δ）及滤过系数（Kf）,以监测EC单层通透性的变化;利用Western blot（NBT/BCIP显色法）检测第5天时survivin的表达。结果 第3天、第5天及第7天时,高糖组EC单层通透性增高（P〈0.01）,Ang-高糖组在第5天及第7天时,EC单层通透性升高（P〈0.01）,但仍低于高糖组;Western blot结果显示,Ang-高糖组survivin表达明显高于其他各组（P〈0.01）。结论 高糖能够增加EC单层通透性,Ang-1能对抗高糖的这种生物学作用。它可能是通过上调凋亡抑制基因survivin的表达,抑制RF/6A的凋亡而发挥生物学作用。     

NgR介导的氧化应激反应在葡萄糖诱导RGC凋亡中的作用

目的:探讨NgR介导的氧化应激在葡萄糖诱导视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)凋亡中的作用.方法:RGC-5细胞株分3组培养:正常对照组(DMEM高糖培养基+ 100mL/L胎牛血清),高糖组(DMEM高糖培养基+100mL/L胎牛血清+30mmol/L葡萄糖)、NEP1-40组(DMEM高糖培养基+100mL/L胎牛血清+30mmol/L葡萄糖+1 μmol/L NEP1-40).各组RGC-5细胞培养3d后检测各指标:显微镜观察细胞生长状态,cell counting KIT-8(CCK-8)试剂盒检测细胞活力,Annexin V/PI双染流式细胞仪(flow cytometry,FCM)检测RGC细胞凋亡率,试剂盒检测线粒体内ROS含量的变化、胞内MDA水平及SOD活力,Western-blot检测凋亡蛋白Bcl-2和Bax的表达.结果:与正常对照组相比,高糖组细胞生长状态差、活力下降、凋亡率显著增加,ROS及MDA水平显著升高,SOD活力下降,抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低,促凋亡蛋白Bax表达上调,Bcl-2/Bax蛋白比值降低,差异有统计学意义(P＜0.05).与高糖组相比,NEP1-40组细胞抑制NgR表达后,氧化应激反应减弱,Bcl-2/Bax提高,细胞状态改善、细胞活力提高、凋亡率降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:高浓度葡萄糖能通过NgR介导氧化应激反应诱导RGC-5细胞凋亡.     

姜黄素对体外培养的硒性白内障形成的作用

目的观察姜黄素对亚硒酸钠诱导的体外培养兔晶状体混浊的影响,探讨姜黄素对抗晶状体氧化损伤的效果。方法将体外培养的40只正常家兔的晶状体分为5组：空白对照组、亚硒酸钠组（30μmol/L）、姜黄素A组（30mg/L）、姜黄素B组（50mg/L）及卡林-U组（质量分数1%）。分别于培养后24、48、72、96h观察各组晶状体的透明度,同等条件下用数码相机拍照记录各组晶状体的形态,用分光光度计测定晶状体组织中的谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）的变化。结果在48h时,不同质量分数姜黄素组与空白对照组比较,不同分级的晶状体混浊的眼数差异无统计学意义（H=1.464,P〉0.05）,姜黄素组与卡林-U组及亚硒酸钠组比较,不同分级的晶状体混浊眼数的差异有统计学意义（H=10.607,P〈0.01）;72h时,不同质量分数姜黄素组与空白对照组比较,不同分级的晶状体混浊的眼数差异无统计学意义（H=3.288,P〉0.05）;姜黄素组与卡林-U组及亚硒酸钠组比较,不同分级的晶状体混浊眼数的差异有统计学意义（H=8.258,P〈0.05）。晶状体培养后96h,不同质量分数姜黄素组与空白对照组比较,不同分级的晶状体混浊眼数的差异有统计学意义（U=7.102,P〈0.05）;不同质量分数姜黄素组与卡林-U组及亚硒酸钠组比较,不同分级的晶状体混浊眼数的差异有统计学意义（H=9.699,P〈0.05）。与空白对照组比较,亚硒酸钠组GSH-Px、SOD活性明显降低,MDA浓度明显升高。不同质量分数姜黄素组和卡林-U组的GSH-Px、SOD活性高于亚硒酸钠组,低于空白对照组,MDA浓度介于空白对照组与亚硒酸钠组之间,卡林-U组的GSH-Px、SOD活性低于姜黄素组,MDA浓度高于姜黄素组。结论姜黄素及卡林-U均具有抗氧化损伤作用,均可推迟亚硒酸钠诱导的体外培养兔晶状体混浊的发生时间,姜黄素的作用强于卡林-U,但姜黄素与卡林-U最终均不能抑制白内障的发生。     

Ang-1对高糖环境中RF/6A单层的保护作用

目的探讨高浓度葡萄糖及血管生成素-1（Ang-1）对内皮细胞（EC）单层通透性的影响。方法将猴脉络膜-视网膜内皮细胞（RF/6A）接种于0.8μm聚碳酸酯微孔滤膜,形成致密单层后分3个组培养。正常对照组：含葡萄糖25mmol/L;高糖组：含葡萄糖40mmol/L;Ang-高糖组：含葡萄糖40mmol/L＋Ang-1（250ng/mL）。于1、3、5、7d,4个时间点建立EC单层通透性模型,检测蛋白质渗透压反射系数（δ）及滤过系数（Kf）,以监测EC单层通透性的变化;利用Westernblot（NBT/BCIP显色法）检测5d时survivin的表达。结果3、5、7d时,高糖组EC单层通透性增高（P〈0.01）,Ang-高糖组在5d及7d时,EC单层通透性升高（P〈0.01）,但仍低于高糖组;Westernblot结果显示,Ang-高糖组survivin表达明显高于其他各组（P〈0.01）。结论高糖能够增加EC单层通透性,Ang-1能对抗高糖的这种生物学作用。可能是通过上调凋亡抑制基因survivin的表达,抑制RF/6A的凋亡而发挥生物学作用的。     

ILK siRNA对高浓度葡萄糖诱导的人LECs增生和上皮向间质转化的抑制作用

目的探讨整合素连接激酶（ILK）对高浓度葡萄糖诱导的人晶状体上皮细胞（LECs）增生和转化的作用。方法将体外培养的人LECs系SRA01/04细胞分别培养在含葡萄糖5.5mmol/L（正常对照组）和30.5mmol/L（高糖组）的培养液中,用RT-PCR检测培养0、6、24h后ILK mRNA的表达;用ILK siRNA脂质体转染细胞,转染6h后,加入2组培养液处理24h,检测ILK、细胞增生核抗原（PCNA）、LECs转化指标α-SMA和FN在mRNA水平的表达。结果高糖组培养6h和24h,SRA01/04细胞ILK mRNA是正常对照组的2.48倍和2.32倍（P〈0.01）,刺激后24h,SRA01/04细胞PCNA、α-SMA、FN的mRNA表达分别是正常对照组的1.75、1.96和1.75倍（P〈0.01）。ILK siRNA干扰后,正常对照组ILK的表达是非转染细胞的30%,高糖组转染细胞ILK mRNA水平（P〈0.01）是非转染细胞的21%（P〈0.01）,转染细胞PCNA、α-SMA和FN的表达分别是非转染细胞的29%、33%和39%（P〈0.01）。结论高浓度葡萄糖可诱导LECs增生、上皮向间质转化及ILK表达上调,抑制ILK的高表达能阻止这些过程。     

枸杞多糖对高糖所致RF/6As通透性和Rho激酶的影响

目的探讨高糖条件下猴脉络膜-视网膜内皮细胞（RF/6As）损伤时的单层通透性、Rho激酶1（ROCK1）的变化及它们之间的关系,和枸杞多糖（LBP）对上述变化的影响。方法体外培养RF/6As,分为等渗葡萄糖处理组（对照组）、40mmol/L葡萄糖处理组（高糖组）及LBP＋40mmol/L葡萄糖处理组（LBP＋高糖组）。各组分别培养1、3、5、7d,应用倒置显微镜观察培养的RF/6As形态,以辣根过氧化物酶（HRP）作为示踪剂用二室弥散系统检测RF/6As单层通透性的变化,应用免疫荧光法观察各组不同时间点细胞骨架的变化,采用Westernblot法检测ROCK1在5d、7d各组细胞中的表达量。结果第3、5、7天,高糖组RF/6As随时间延长逐渐变形,正常细胞数量明显减少,单层通透性逐渐增加;3个时间点HRP的A值分别为0.074±0.011、0.135±0.022、0.253±0.047,明显高于对照组,差异均有统计学意义（P〈0.01）。LBP＋高糖组仅于7d时细胞形态略有改变,5d及7d时HRP的A值分别为0.069±0.004和0.114±0.009,较对照组明显增加,差异均有统计学意义（P〈0.01）;但明显低于高糖组,差异均有统计学意义（P〈0.01）。Westernblot检测显示,7d时LBP＋高糖组ROCK1灰度值为35849.47±1032.36,高糖组为21356.10±1566.66,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论高糖可引起RF/6As单层通透性增加和细胞骨架的重排以及ROCK1的高表达,而LBP可通过下调ROCK1的表达减轻高糖对RF/6As的损伤。     

葡萄糖浓度对培养的兔晶状体上皮细胞的影响

目的：观察不同浓度葡萄糖培养基对培养的兔晶状体上皮细胞形态、生长状态、细胞分化及TGF-β 2表达的影响.方法：以4.5,9,18和36g/L葡萄糖培养基处理原代培养的第2代兔晶状体上皮细胞,MTT法检测细胞生长状态,免疫组化法检测TGF-β2,α-SMA及PCNA.结果：相对于4.5g/L葡萄糖培养基,高浓度葡萄糖培养基可增强晶状体上皮细胞α-SMA与TGF-β 2的表达,而PCNA的表达无明显差异;MTT所反映的细胞生长状态呈下降趋势.结论：高浓度葡萄糖培养基可促进晶状体上皮细胞分化,对细胞的增殖有抑制作用,在此过程中TGF-β 2可能发挥着重要的作用.     

重组腺病毒-p21抑制猴视网膜微血管内皮细胞增生的作用研究

目的 观察重组腺病毒-p21 (rAd-p21)对体外培养的猴视网膜微血管内皮细胞(RF/6A)增生的作用。方法 体外培养RF/6A细胞系,分为磷酸盐缓冲液(PBS)组、rAd-p21转染组及阴性对照组,并转入相应的质粒表达载体。应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法及蛋白免疫印迹(Western blot)检测p21mRNA及蛋白在RF/6A细胞中的表达;应用流式细胞仪检测p21基因对RF/6A细胞周期的影响;行内皮细胞体外成管实验观察p21基因对RF/6A细胞成管的抑制作用。结果 rAd-p21转染组p21 mRNA及蛋白表达显著增高。细胞周期检测结果显示,PBS组、rAd-p21转染组、阴性对照组G0/G1期细胞百分比分别为（40.76±6.66）％、（67.45±11.61）％、(41.55±8.99)％;rAd-p21转染组RF/6A细胞出现G0/G1期阻滞,G0/G1期细胞比例增多。rAd-p21转染组与PBS组和阴性对照组比较,差异有统计学意义(F=21.284,P=0.000)。体外成管实验显示,PBS组、rAd-p21转染组、阴性对照组每一视野下内皮细胞成管数分别为（8.25±3.19）、（3.86±1.21）、(7.62±2.69)个;rAd-p21转染组与PBS组和阴性对照组比较,差异有统计学意义(F=7.138,P=0.004)。结论 rAd-p21可成功转染RF/6A细胞并稳定表达p21 mRNA及蛋白,并可显著抑制其增生。     

17-β雌二醇对高糖诱导RPE细胞保护作用的研究

目的:探讨17-β雌二醇对高糖诱导人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial,RPE)细胞的保护作用和可能机制.方法:RPE细胞传代培养,随机对照法分为四组:空白对照组:5.5 mmol/L葡萄糖常规培养基进行处理;高糖组:100 mmol/L葡萄糖作用12 h;17-β 雌二醇低浓度组:10μmol/L 17-β雌二醇孵育24 h后,加入100 mmol/L葡萄糖作用12 h;17-β雌二醇高浓度组:100μmol/L 17-β雌二醇孵育24 h后,加入100 mmol/L葡萄糖作用12 h.MTT比色法检测细胞活力,Hochest33258染色观察细胞凋亡,H2 DCFDA染色检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,比色法检测过氧化氢酶(catalase,CAT)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的表达.结果:随着葡萄糖浓度的增加,RPE细胞活性逐渐下降,17-β雌二醇能明显抑制高糖诱导的RPE细胞活力的下降,降低RPE细胞凋亡率,抑制细胞内ROS生成.此外,17-β雌二醇能明显增加RPE细胞内CAT、SOD表达,降低MDA的表达.结论:17-β雌二醇能有效抑制高糖对RPE细胞的损伤,从而为用于治疗视网膜相关疾病提供可靠的实验依据.     

高糖体外对视网膜色素上皮增生以及活性氧表达的影响

目的:研究高浓度葡萄糖对体外培养的视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞增生以及活性氧(reactive oxygen species,ROS)生成的影响。方法:体外培养人RPE(ARPE-19),随机分成4组,即正常对照组用含5.6mmol/L葡萄糖的DMEM/F12培养液,高糖组用30mmol/L葡萄糖的DMEM/F12培养液,高糖+SB203580组用p38-MAPK特异性阻断剂SB20358010μmol/L预处理30min后,再用含30mmol/L葡萄糖的DMEM/F12培养液,甘露醇组(渗透压对照组)用含5.6mmol/L葡萄糖和24.4mmol/L甘露醇的DMEM/F12培养液。各组培养48h用MTT法检测各组视网膜色素上皮细胞的增生活力,用CM-H2DCFDA荧光染色检测RPE细胞中ROS的产生量。结果:与对照组相比,高糖培养人视网膜色素上皮细胞48h可以导致RPE细胞的损伤,抑制RPE细胞增殖,并使ROS生成增加,在一定程度上,与p38-MAPK途径的激活有关。结论:高糖培养ARPE-19可致细胞损伤,抑制增殖,并使ROS生成增加。     

葛花总黄酮对糖尿病小鼠视网膜MDA、SOD的影响

目的探讨葛花总黄酮（TFF）对糖尿病小鼠视网膜抗氧化损伤的作用。方法加只C57BL／6J小鼠随机分为5组：正常对照组、糖尿病（DM）模型组、TFF小剂量组（TFFⅠ）、中剂量组（TFFⅡ）和大剂量组（TFFⅢ）。DM、TFFⅠ、TFFⅡ和TFFⅢ组造模成功后第5周开始给药,给药10周,于第15周测定小鼠血糖和体重,处死小鼠取眼球,测定各组小鼠视网膜过氧化终产物丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性。结果与模型组（血糖120．98±5．57mmol／L,体重21．55±1．67g）比较,给予TFF中剂量组血糖（13．51±6．09mmol／L）和大剂量组血糖（9．66±2．86mmol／L）显著下降（P〈0．01）,大剂量组（体重24．50±1．58g）可明显改善体重的下降（P〈0．01）。与模型组（MDA含量：12．10±1．06nmol／mgprot,SOD活性：8．45±0．95U／mgprot）相比,TFF小、中、大剂量组MDA含量均明显降低（MDA含量分别为：7．98±0．40、5．75±0．63、5．24±0．48nmol／mgprot,P〈0．01）,SOD活性均明显升高（SOD活性分别为：13．10±0．90、17．28±0．94、17．79±1．21U／mgprot,P〈0．01）。结论TFF能增强糖尿病小鼠视网膜抗氧化能力,减轻视网膜的氧化损伤,从而对糖尿病视网膜病变起一定保护作用。     

褪黑素对体外培养的人视网膜色素上皮细胞氧化损伤的保护作用

目的 探讨褪黑素(Mel)对过氧化氢(H202)氧化损伤的人视网膜色素上皮(hRPE)细胞的保护作用及其作用机制.方法 实验研究.采用600μmoL/L H2O2建立体外培养的hRPE细胞氧化损伤模型.实验分为6组:溶剂对照组、600μmoL/L H2O2+溶剂组(H2O2损伤模型组)、600μmoL/L H2O2+10-7mol/L Mel组、600μmoL/L H2O2+10-6moL/L Mel组、600 μmol/L H2O2+10-5mol/L Mel组、600μmol/L H2O2+10-4moL/L Mel组.通过四甲基偶氮唑盐(MTT))法检测细胞活性;测定细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量以反映细胞氧化损伤程度;分别用DNA Ladders电泳法和流式细胞仪检测细胞的凋亡情况.溶剂对照组与600μmol/L H2O2组间均数比较采用随机区组设计的t检验;600μmol/L H2O2组以及600μmol/L H2O2+不同浓度Mel组间均数比较采用单因素5水平设计的方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验.结果 H2O2模型组较对照组细胞活性明显降低、SOD活件降低、MDA含量增加、凋亡率升高,差异均有统计学意义(t=2.25,39.50,68.42;P<0.05);Mel干预组较模型组细胞活性升高、SOD活性升高、MDA含最减少、凋亡率降低,差异有统计学意义(P<0.05),并与药物浓度的变化呈正相关趋势.结论 Mel对H2O2诱导的RPE的氧化损伤具有保护作用,其机制可能与影响细胞活性、增强抗氧化酶活性、减少细胞凋亡有关.     

生长激素释放多肽对高糖诱导视网膜色素上皮细胞的保护作用

目的：探讨生长激素释放多肽(Ghrelin)对高糖环境下人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞氧化应激的影响。

方法：将体外培养的RPE细胞分为阴性对照组、高糖组、Ghrelin低浓度组、Ghrelin高浓度组。通过CCK-8法检测细胞存活率,氧敏感荧光探针H₂DCFDA染色法观察细胞氧化损伤程度,流式细胞技术检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的变化,分光光度计比色法检测细胞内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量。

结果：CCK-8结果显示,分别用10^-9mol/L、10^-6mol/L Ghrelin预处理后,RPE细胞存活率分别为54.79%±3.43%和79.16%±3.29%,与高糖组(41.65%±3.42%)比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。H₂DCFDA荧光探针染色结果显示,Ghrelin预处理后RPE细胞内ROS生成量下降,氧化损伤细胞减少。分光光度计比色法结果显示,与高糖组相比,Ghrelin组细胞SOD活力增加,MDA含量下降。

结论：Ghrelin可以抑制高糖诱导的人RPE细胞氧化损伤,其在糖尿病视网膜病变的发生发展过程中可能具有一定的细胞保护作用。     

表没食子酸酯对高糖诱导的人晶状体上皮细胞氧化应激的影响

目的：：探讨表没食子酸酯( EGCG)对高糖诱导的人晶状体上皮细胞( human lens epithelial cells, HLEC )氧化应激的影响。方法：建立高糖诱导的HLEC氧化损伤模型,用不同浓度的EGCG干预,MTT检测细胞活力,倒置显微镜观察细胞形态,Hoechst-PI染色观察细胞凋亡,分光光度计检测上清液中超氧化物歧化酶( SOD )、谷胱甘肽过氧化物酶( GSH-Px)及丙二醛( MDA)的含量。结果：MTT 结果显示用10μmol/L EGCG 和100μmol/L EGCG处理后,HLEC活性分别提高到50.33%±3.52%和63.33%±4.63%,与氧化损伤组(32.67%±3.10%)比较差异具有统计学意义( P<0.05);EGCG干预的高糖条件下的HLEC较好地保持了细胞的形态,凋亡细胞数量减少,细胞内SOD、GSH-Px水平升高,MDA水平下降。结论：EGCG可能通过提高细胞内SOD、GSH-Px含量,降低MDA含量发挥其较强的抗氧化作用,从而为寻求有效的防治白内障药物提供可靠的实验依据。     

姜黄素对大鼠硒性白内障的影响

背景姜黄素能清除机体中产生的自由基和超氧负离子,从而抑制脂质过氧化反应。研究证实姜黄素具有抗晶状体氧化损伤的作用,但其对年龄相关性白内障的作用尚不清楚。目的观察姜黄素对实验性大鼠硒性白内障的影响。方法选用12日龄健康SD大鼠30只,按随机数字表法将其随机分为空白对照组、模型对照组、姜黄素组,每组10只。除空白对照组外,模型对照组和姜黄素组大鼠均采用皮下注射亚硒酸钠的方法建立硒性白内障模型,并于造模的同时,给予姜黄素组大鼠质量分数0．005％姜黄素灌胃,每131次,共2周。于实验开始后第4、7、10、14天在裂隙灯显微镜下观察各组大鼠晶状体的混浊程度并进行评分。在实验结束后摘出大鼠晶状体,用生化测定法测定晶状体中丙二醛（MDA）及超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—Px）的活性。结果空白对照组大鼠晶状体在整个实验过程中保持透明。与模型对照组大鼠比较,姜黄素组大鼠Ⅲ、Ⅳ、V级晶状体混浊的时间明显延迟,差异均有统计学意义（P〈0．05）。实验结束时,3个组MDA含量及SOD、GSH—Px活性的总体比较差异均有统计学意义（MDA：F=215．42,P〈0．01;SOD：F=46．83,P〈0．01;GSH—Px：F=44．29,P〈0．01）。模型对照组、姜黄素组晶状体中SOD的活性明显低于空白对照组,差异均有统计学意义（P〈0．05）,但姜黄素组SOD活性明显高于模型对照组（P〈0．05）;模型对照组和姜黄素组晶状体中MDA含量均高于空白对照组（P〈0．01）,姜黄素组中MDA含量较模型对照组低（P〈0．01）;模型对照组GSH—Px活性较空白对照组显著下降（P〈0．01）,姜黄素组GSH—Px活性较模型对照组高（P〈0．01）。结论姜黄素能显著延缓大鼠硒性白内障的形成过程,但不能抑制硒性白内障的发生发展。姜黄素延缓大鼠硒性白内障形成的机制可能为提高大鼠晶状体的抗氧化能力。     

Protective effects of curcumin on retinal Müller cell in early diabetic rats

AIM: To explore the effects and potential mechanisms of curcumin on retinal Müller cell in early diabetic rats.METHODS: Diabetic rats were induced by a single intraperitoneal injection of streptozotocin (STZ). Male Sprague-Dawley (SD) rats were randomly assigned into 4 groups:control group (naïve SD rats administered with a single intraperitoneal injection of citric buffer), diabetic group (STZ-diabetic rats), dimethyl sulfoxide (DMSO) group (diabetic rats intraperitoneally administered with mixture of DMSO and normal saline, once a day) and curcumin group (diabetic rats intraperitoneally administered with curcumin, 80mg/kg, once a day). Three months after diabetes onset, malondialdehyde (MDA, indication of oxidative stress level) and reduced glutathione (GSH) in retina were detected with kits, glial fibrillary acidic protein (GFAP) in retina was revealed by immunohistochemistry and Western blot, and retinal glutamine synthetase (GS) were observed by Western blot.RESULTS: Compared with control group, retinal MDA was increased, and GSH was decreased in diabetic and DMSO groups (P<0.05, respectively). While, retinal MDA and GSH in curcumin group showed no difference compared with control group (P>0.05). Furthermore, up-regulation of retinal GFAP and down-regulation of retinal GS were detected in diabetic and DMSO groups, and no alteration could be observed in curcumin group revealed with Western blot. Compared with control group, retinal Müller cells showed significant increase in GFAP immunochemistry staining in diabetic and DMSO groups. Moreover, GFAP-positive staining was decreased in curcumin group compared with diabetic group.CONCLUSION: Curcumin inhibits diabetic retinal oxidative stress, protects Müller cell, and prevents the down-regulation of GS in diabetic retina. Therefore, curcumin has a therapeutic potential in the treatment of diabetic retinopathy (DR).     

达格列净对高糖诱导人视网膜血管内皮细胞凋亡及氧化应激的影响

目的:探讨达格列净对高糖诱导人视网膜血管内皮细胞(HRVECs)凋亡、氧化应激的影响及其对FOXO4的调控作用.方法:采用高糖诱导HRVECs建立细胞损伤模型(高糖组),实验分组:高糖+达格列净低剂量组(1ng/L)、高糖+达格列净中剂量组(5ng/L)、高糖+达格列净高剂量组(10ng/L)、高糖+达格列净高剂量+p...