三味活血化瘀中药对小鼠NK，LAK细胞活性影响

三味活血化瘀中药对小鼠ＮＫ，ＬＡＫ细胞活性影响徐庆乐（浙江省卫生学校杭州３１０００９）杨锋，沈翔（浙江省中医药研究院）本文从细胞毒角度观察了三味活血化瘀中药（鸡血藤、益母草和莪术），对小鼠ＮＫ（自然杀伤细胞）和ＬＡＫ（淋巴因子活化杀伤细胞）活性的影响...     

接种CEA重组痘苗病毒对小鼠CEA^＋肿瘤抑制作用的机制探讨

目的 探讨CEA重组痘苗病毒（rV-CEA)治疗CEA^ 肿瘤的机制。方法 以我室构建的rV_CEA,腹腔接种供体C57/BL小鼠,取其脾细胞及腹腔巨噬细胞（Mφ）,分别过继转移给荷CEA^ -HePa肝癌细胞的C57/BL小鼠,检测该公共体小鼠脾细胞、腹腔Mφ及相应受体的脾细胞体外杀瘤细胞的效应,结果 接种rV-CEA的供体小鼠的脾细胞及腹腔Mφ过继免疫给受体小鼠,具有明显抑制受体CEA阳性肿瘤生长的作用,体外实验表明,该供体脾细胞及接种了供体Mφ的受体脾细胞对同一靶细胞的杀伤活性明显增强,但供体Mφ体外的细胞毒活性无明显增加,结论 rX-CEA对CEA^ 肿瘤的抑制作用,可能主要通过CEA特异性免疫反应激活T细胞而实现。Mφ作为抗原提呈细胞可通过激活T细胞而杀伤肿瘤细胞,具体机制值得进一步研究。     

肿瘤免疫活化剂沙培林的研究

本文应用沙培林诱导人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）对胃癌（ＳＧＣ－７９０）、肺癌（ＳＰＣＡ－１）以及白血病细胞（ＨＬ－６０）能进行有效的杀伤。个体不同，ＰＢＭＣ对沙培林的应答不同，如对胃癌有的Ｓ．Ｉ、值达４．８６，有的无应答。在实验浓度下，对肝癌（７７２１）的杀伤作用较差。将小鼠肝癌（ＨＡＣ）细胞接种于小鼠腹腔，经腹腔连续给药后于不同时间测定小鼠脾及腹水单个核细胞的杀伤活性。结果表明治疗组的杀伤活性明显升高，并能非特异地提高对Ｌ９２９细胞的杀伤。腹腔接种ＨＡＣ经腹腔给药，单个核细胞杀伤ＨＡＣ的效应更强。上述结果表明，国产沙培林在体内能有效地激活单个核细胞。     

NK细胞亚群及其对造血的调节

ＮＫ细胞一直是个功能的概念。二十多年前美国国立肿瘤研究所（ＮＣＩ）的几位免疫学家在研究Ｔ细胞对靶细胞的特异杀伤时，发现对照组小鼠脾细胞可以象肿瘤免疫小鼠的脾细胞一样杀伤某些肿瘤细胞，从而将这类具备“天生”杀瘤功能的细胞称为天然杀伤细胞。二十多年的研究...     

rIL－6抗癌机理初探（Ⅱ）：rIL－6对小鼠LAK细胞体内外调节效应

为探讨ｒＩＬ－６对ＬＡＫ细胞的调节效应，进行了ｒＩＬ－６对小鼠脾脏ＬＡＫ细胞功能影响的体内外实验研究。实验采用Ｃ_（５７）ＢＬ／６荷瘤或正常小鼠，给予ｒＩＬ－６或生理盐水，１５ｄ后取小鼠脾细胞诱导活化后进行ＬＡＫ杀伤功能测定。结果表明①ｒＩＬ－６在体外对ＬＡＫ杀伤活性有明显的促进作用并在一定范围内呈剂量反应关系；②体内注射ｒＩＬ－６后对正常鼠和荷瘤鼠ＬＡＫ细胞的诱导及杀伤活性均有促进作用；③荷瘤对正常鼠ＬＡＫ细胞功能有抑制作用，而ｒＩＬ－６对荷瘤所致ＬＡＫ细胞功能下降有一定的预防作用。提示ｒＩＬ－６对小鼠脾脏ＬＡＫ细胞杀伤活性的促进效应可能是ｒＩＬ－６发挥抗癌作用的一个途径。     

枸杞多糖对免疫抑制小鼠红细胞免疫功能的影响

目的:探讨枸杞多糖对阿霉素化疗小鼠红细胞免疫功能的影响。方法:取BALB/ c 小鼠给予阿霉素化疗以制备免疫抑制模型,并灌服枸杞多糖(62.5、125、250 mg/ kg)干预处理7 d,实验同时设置正常对照组和模型组。采用流式细胞术检测红细胞膜CD59 表达水平;采用考马斯亮蓝染色法观察红细胞膜Band鄄3 蛋白表达;采用Western blot 法检测红细胞NKEF-A、NKEF-B 表达水平;流式细胞术检测脾NK 细胞杀伤H22 细胞的能力。结果:阿霉素化疗后小鼠红细胞Band-3 蛋白、NKEF-A、NKEF-B 表达水平和NK 细胞杀伤活力均显著降低,而CD59 分子表达未见显著变化。枸杞多糖对化疗小鼠红细胞Band-3蛋白表达、NKEF-A 和NKEF-B 表达水平均有显著恢复作用,并能恢复化疗小鼠NK 细胞杀伤活性。结论:枸杞多糖可以改善化疗小鼠红细胞免疫功能。     

白细胞介素4基因转移的肿瘤细胞体内诱导杀伤细胞活性及细胞因子产生的实验研究

观察了小鼠接种高分泌ＩＬ－４的黑色素瘤细胞后体内免疫效应细胞（包括ＣＴＬ、ＮＫ细胞及ＬＡＫ细胞）抗肿瘤活性及其分泌的细胞因子（包括ＩＬ－２、ＩＦＮ－ｒ、ＴＮＦ及ＧＭ－ＣＳＦ）水平的变化，荷瘤后第１５天小鼠脾细胞ＮＫ活性及经诱导后的ＬＡＫ活性有所降低，而经诱导后的ＣＴＬ杀伤活性显著升高，荷瘤小鼠腹腔内巨噬细胞杀伤活性及其分泌的ＩＬ－１水平也明显升高；在荷瘤后第４天及第１２天出现两个高峰，实验结果表明，高分泌ＩＬ－４的黑色素瘤细胞体内生长受抑制是因为ＩＬ－４基因的导入及ＩＬ－４的分泌使体内ＣＴＬ及巨噬细胞杀伤活性提高，因而使机体抗肿瘤免疫功能得以增强。     

磨菇多糖对小鼠S180肉瘤抗瘤效应的初步研究

研究了磨菇多糖（Ｌｅｎｔｉｎａｎ）抑制肿瘤生长和免疫调节作用，结果表明：磨菇多糖对小鼠肉瘤Ｓ１８０有较强的抑瘤作用，在体内可明显促进小鼠脾淋巴细胞转化率，增强小鼠ＮＫ细胞活性和腹腔巨噬细胞的杀伤活性，提示磨菇多糖可刺激机体免疫系统，激发机体的抗肿瘤机制，具有明显的抗肿瘤效应。     

宫颈癌单克隆抗体AU14-1介导效应细胞对靶细胞的细胞毒

目的：研究单克隆抗体AU14-1介导的细胞毒作用对小鼠宫颈癌（U14）细胞的杀伤效果。 方法： 以小鼠淋巴因子激活的杀伤细胞（LAK）、脾淋巴细胞及巨噬细胞为效应细胞，应用MTT比色法测试在单克隆抗体AU14-1介导下对小鼠宫颈癌（U14）细胞的体外细胞毒作用。 结果： 3种效应细胞对于经单克隆抗体AU14-1处理的肿瘤细胞的杀伤率显著高于未经AU14-1处理的肿瘤细胞（P＜0.01）；以LAK的ADCC作用最强，巨噬细胞次之，脾淋巴细胞最弱（P＜0.01）。 结论： 单克隆抗体AU14-1能通过抗体依赖细胞介导细胞毒（ADCC）发挥淋巴样细胞、巨噬细胞及LAK细胞对靶肿瘤细胞的杀伤作用；提示特异性宫颈癌单克隆抗体AU14-1介导的ADCC在治疗宫颈癌中可能是一种有潜在价值的方法。     

枸杞水提液对海洛因损伤小鼠视网膜组织结构、诱导型一氧化氮合酶活性、Caspase-3及核因子κB蛋白表达的影响

目的 探讨枸杞水提液对海洛因损伤小鼠视网膜组织结构及相关活性物质的影响。 方法 120只昆明小鼠随机分为对照组、海洛因组、枸杞1组和枸杞2组。海洛因组和枸杞1组和2组用递增剂量（2、3、4 g/L）腹腔连续（1～5 d、6～10 d和11～15 d）注射海洛因溶液15 d,每天两次（9∶00 am,16∶00 pm）,每次0.2 ml,对照组注射等量生理盐水,注射海洛因溶液1 h后,枸杞1组和2组再分别灌胃（1.0 g/kg、2.0 g/kg）枸杞水提液0.2 ml,对照组和海洛因组灌胃等量生理盐水。用生物显微技术观察小鼠视网膜组织结构的变化,用比色法检测小鼠血浆乳酸脱氢酶（LDH）活性和视网膜组织诱导型一氧化氮合酶（iNOS）活性的变化,用免疫组织化学法检测视网膜组织Caspase-3和核因子（NF）-κB蛋白表达的变化。 结果 与对照组相比,海洛因组小鼠视网膜组织有不同程度的损伤,神经节细胞出现空泡样变性,内核层和外核层结构紊乱,血浆LDH活性显著升高,差异显著（P＜0.05 或 P＜0.01）,视网膜组织iNOS活性增加,差异极显著（P<0.01）;视网膜组织Caspase-3和NF-κB蛋白的阳性表达量升高,平均吸光度值明显增大（P＜0.05或P＜0.01）。与海洛因组相比,枸杞1组和2组小鼠视网膜组织神经节细胞空泡化减轻,内核层和外核层排列较为整齐,血浆LDH活性显著降低,差异显著或极显著（P<0.05或 P<0.01）,视网膜组织iNOS活性均又下降,差异显著或极显著（P<0.05或 P<0.01）;视网膜组织Caspase-3和NF-κB蛋白阳性表达又降低,差异极显著（P<0.01）。 结论 枸杞水提液可提高细胞的抗氧化能力和抗炎能力,抑制视网膜组织Caspase-3的表达和NF-κB的活化,可有效减轻海洛因对视网膜组织的损伤,对视网膜组织有一定的保护作用。     

脑型疟疾免疫病理机制的实验研究：肿瘤坏死因子的作用

本文以化学发光法（ＣＬ）、诱化学发光法（ＩＣＬ）、红细胞变形性（ＥＤ）检测等方法研究了感染伯氏疟原虫（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍｂｅｒｇｈｅｉ）Ａｎｋａ株的ＢＡＬＢ／ｃ小鼠在注射重组肿瘤坏死因子（ｒＴＮＦ）以后引起脑型疟疾（ＣＭ）时其血浆中活性氧（ＲＯＳ）及相关自由基与ＥＤ及ＥＤ与ＣＭ间的关系。结果发现在ＣＭ出现时动物血浆中ＲＯＳ及相关自由基水平明显增高，ＥＤ明显降低。使用抗氧化剂可以明显改善上述过程而使ＣＭ发生率下降。作者认为，疟原虫感染时ＴＮＦ的过量产生可使宿主吞噬细胞释放大量ＲＯＳ及相关自由基，血浆中这些物质的大量聚集使红细胞变形能力受到破坏，这时红细胞在通过具有极丰富血循环的脑组织时在脑微血管内易于形成广泛性微拴塞，导致ＣＭ形成。     

The immunomodulatory activity of the plant proteins Momordica charantia inhibitor and pokeweed antiviral protein

The immunological activity of Momordica Charantia inhibitor (MCI) and of Pokeweed antiviral protein (PAP-S), 30,000 daltons plant proteins possessing close similarity to Ricin A chain as inhibitor of protein synthesis, was investigated in mice. In vivo, single nontoxic injections of microgram amount of these substances delayed H2-incompatible skin allograft rejection, splenocyte responsiveness to ConA and PHA, but not to LPS, and abrogated the PFC response to a T-dependent (SRBC) antigen while totally sparing that to a T-independent (S III) stimulus. Injection of these substances could also reduce NK cell activity while increasing macrophage-mediated spontaneous cytotoxicity. In vitro, MCI and PAP-S at non-cytotoxic concentrations inhibited lymphoid cell responsiveness to PHA and ConA, but not to LPS, and markedly enhanced macrophage-dependent cytotoxicity.     

In vitro activation of murine bone marrow-derived macrophages with cisplatin and mitomycin-C

Peritoneal macrophages from BALB/c mice after treatment for 24 h in vitro with cisplatin, lipopolysaccharide (LPS) or mitomycin-C were rendered significantly cytotoxic against L-929 tumor target cells. In a similar experiment none of these agents could induce tumoricidal activity of fresh non-adherent bone marrow cells (NABMC). NABMC when incubated in medium alone or in medium containing L-929 culture medium (L-929 CM), a form of macrophage colony stimulating factor (M-CSF), for three days matured to macrophages which were positive for non-specific esterase staining. These bone marrow-derived macrophages cultured with medium alone did not respond to cisplatin. LPS or mitomycin-C for induction of tumoricidal activity whereas bone marrow derived macrophages with that were incubated with L-929 CM showed also significantly enhanced cytotoxicity after treatment with cisplatin, LPS and mitomycin-C. Culturing of NABMC with L-929 CM significantly enhanced cell survival as compared to the cells incubated in medium alone. These results suggest that bone marrow cells not only mature in L-929 CM but also are primed by L-929 CM for induction of tumoricidal activity.     

胸腺五肽对鼠免疫功能的影响

本文研究了合成胸腺五肽(TP-5)对正常小鼠和老龄大鼠免疫功能的影响。TP-50.5,1,2,5mg/kg ip×3d可明显增强脾淋巴细胞的增殖反应,选择性地抑制脾细胞溶血空斑数(PFC),TP-52,5mg/kg可显著增加ICR小鼠胸腺的重量,用5mg/kg TP-5可对抗50mg/kg环孢霉素A(CysA)对淋巴细胞增殖的抑制作用。体外脾细胞培养中,TP-51,5,10,20μg/ml与ConA协同作用能明显增强小鼠脾淋巴细胞的增殖,同样,对老龄大鼠TP-5具有相同的刺激作用。     

白桦三萜类物质的抗肿瘤作用及其对免疫功能的增强效应

目的：研究白桦三萜类物质（ＴＢＰ）体内抗肿瘤作用及其对荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法：利用小鼠体内移植瘤模型,测定ＴＢＰ对小鼠黑色素瘤Ｂ１６、肉瘤Ｓ１８０、Ｌｅｗｉｓ肺癌和艾氏腹水癌等肿瘤的抑瘤率。采用放射性掺入法检测ＣｏｎＡ诱导的脾细胞增殖反应;放射性释放法检测巨噬细胞细胞毒活性;中性红释放法检测ＴＮＦ和ＮＫ细胞活性,结果：ＴＢＰ对各瘤株的抑瘤率均达到３０％以上,对黑色素瘤Ｂ１６的效果最好,抑瘤率     

铜绿假单胞菌外毒素A的抗原性及其与辅助细胞的关系

目的　研究铜绿假单胞菌外毒素A(PE)的某些抗原性及其与辅助细胞的关系。方法用MTT法观察PE在有无辅助细胞参与条件下对鼠脾淋巴细胞的刺激作用 ,并用鼠细胞毒性T细胞株CTLL进行证实。结果　PE在 0 0 1～ 10 0ng/ml浓度范围能刺激鼠脾淋巴细胞增殖 ,PE的丝裂原作用无需粘附细胞的辅助 ,但粘附细胞及其粘附细胞的PE刺激上清能协同PE对鼠脾淋巴细胞的刺激作用。PE在丝裂原作用范围内能刺激CTLL细胞生长 ,并与IL 2有协同作用。PE在体内能使小鼠脾淋巴细胞自发淋转率增高 ,对ConA刺激的增殖反应增强 ,但对淋巴细胞自发分泌IL 2和ConA诱导IL 2的产生水平无影响。结论　PE在无辅助细胞参与条件下也能刺激淋巴细胞增殖     

卵白蛋白诱导哮喘小鼠脾细胞增殖中STAT5的变化

目的 :研究卵白蛋白 (OVA)在哮喘小鼠脾细胞增殖中信号转导蛋白和转录激活因子 5 (STAT5 )的变化 ,探讨STAT5在OVA诱导哮喘小鼠脾细胞增殖中的作用。方法 :经腹腔注射与雾化吸入OVA诱发小鼠哮喘发作。激发后分离小鼠脾细胞 ,采用MTT比色法测定经OVA诱导的脾细胞增殖 ;用双染免疫组化法检查脾细胞中STAT5磷酸化与STAT5抗原的定位。用电泳迁移率变动分析 (EMSA)测定STAT5与DNA探针的结合力。结果 :OVA在体外能明显诱导哮喘小鼠脾细胞增殖 (平均A值为 0 .5 4 3± 0 .112 ) ,呈剂量依赖性 ,与对照组相 (平均A值为 0 .2 0 3± 0 .0 32 )比较差异明显 (P <0 .0 1)。OVA诱导 1、3h ,能诱导哮喘小鼠脾细胞中的STAT5磷酸化 ,脾细胞中出现STAT5 DNA结合带。结论 :OVA能诱导哮喘小鼠脾细胞增殖和脾细胞中的STAT5磷酸化 ,增加STAT5与DNA探针的结合力 ,说明STAT5信号途径在OVA诱导的哮喘小鼠脾细胞增殖中起重要作用     

Changes of natural killer cell activity in different mouse lines by acute and asymptomatic flavivirus infections

Effect of certain flaviviruses on the activity of mouse natural killer (NK) cells was investigated using the classical mouse splenocyte system and YAC-1 cells for demonstration of NK cell cytotoxicity. Infection of mice with Langat and West Nile (WN) viruses was accompanied by temporary activation of NK cells. In mice infected with tick-borne encephalitis (TBE) virus the stimulation phase of NK cell cytotoxicity on days 2-4 post-infection (p.i.) was followed by suppression of their activity. As to the surface markers (sensitivity to antitheta and antiimmunoglobulin serum, respectively), the flavivirus-activated NK cells did not differ from the endogenous NK cells of intact mice. The stimulatory effect of flaviviruses on cytotoxicity of NK cells varied in different mouse lines. An increased NK cell activity at early stages of TBE virus infection was observed in mouse lines characterized by low (C57B1/6) and medium (BALB/c)--but not by high (CBA)-activity of their non-stimulated NK cells. Suppression of NK cell activity at later stages of TBE virus infection was not associated with virus multiplication in mouse splenocytes.     

HFRSV感染乳鼠的脾细胞增殖及IL-2产生能力的变化

本文研究了HFRSV感染3～5日龄BALB/C新生乳鼠脾脏的病理变化、脾细胞对丝裂原或/和细胞因子诱导的增殖效应及IL-2产生能力的变化。结果表明:感染组鼠较正常组鼠(1)脾脏体积明显缩小,脾细胞数量显著减少;(2)脾细胞在无刺激原条件下培养,~3H-TdR掺入cpm值明显升高;(3)脾细胞对ConA或/和rHuTNF-α、rHu IL-2诱导的增殖反应显著降低,但是rHu IL-2、rHuTNF-α对ConA诱导的感染鼠脾细胞增殖反应仍有明显的促进作用,且这两种细胞因子有协同效应;(4)脾细胞经ConA诱导后的IL-2产生能力显著降低。此结果对于进一步了解HFRSV感染过程中细胞免疫功能变化有重要意义,同时也为临床应用细胞因子进行免疫治疗提供了有价值的实验依据。     

Laser Doppler Anemometry Study of Bidimensional Flows Downstream of Three 19 mm Bileaflet Valves in the Mitral Position, Under Kinematic Similarity

Three small-size (nominal size: 19 mm) bileaflet valves, CarboMedics R (CM), St Jude Standard (SJ) and Sorin Bicarbon (SB), have been tested by means of a two-component laser Doppler anemometry (LDA) system, in the mitral position, in order to assess the potential damage to blood elements entailed by the turbulent flow through them. A high regime (6 l/min cardiac output) was chosen to perform measurements for the worst case in generated turbulence. Two half-diameter profiles, at 13 and 26 mm downstream of the valve plane, have been investigated for each model. Besides velocity profiles, turbulence shear stresses (TSS) are reported, after the application of the stress analysis technique, in order to assess the maximum values of TSS (TSS_max exerted on blood particles. Results show the typical bileaflet-type velocity profile for SB and SJ, with three jets exiting the valve, whereas CM lacks the central jet, due to instabilities of its flow field. As for TSS_max, CM reaches the highest values, presumably due to leaflets fluttering. SJ's TSS_max profiles maintain similar shapes at the two downstream locations, whereas SB presents an unexpected increase in the peak value of TSS_max from 13 to 26 mm downstream of the valve plane, probably due to the curved leaflet design. The three prosthetic heart valves (PHVs) tested show many differences as for their turbulence properties, although they are similarly constructed.