肝母细胞瘤细胞凋亡和增殖状况及其相关基因表达的研究

目的探讨肝母细胞瘤细胞凋亡和增殖状况及其相关调控基因p53和Bcl-2在各肿瘤中表达的意义。方法应用原位末端标记及免疫组化技术检测了38例肝母细胞瘤中细胞凋亡及增殖细胞核抗原(PCNA),p53和Bcl-2蛋白表达。结果肝母细胞中的凋亡细胞数120.6±24.52及增殖细胞数257.64±29.64均显著高于对照组(19.57±1.32,18.28±1.25,均P<0.001),p53和Bcl-2的表达率(分别为57.8%、36.8%)其表达强度也显著高于对照组(分别为0,17%,P<0.05),代表细胞增殖活性的PCNA在各型肝母细胞瘤中差异明显(P<0.01),而凋亡细胞数的差异无意义,细胞凋亡密度高的肿瘤预后较好。结论肝母细胞凋亡与增殖平衡调控异常在肝母瘤的发生、发展中可能起重要作用,突变型p53及Bcl-2蛋白均具有抑制细胞凋亡,促进细胞增殖的作用。     

自然流产蜕膜组织孕激素受体及p53、Bax、Bc1-2蛋白的表达及意义

[目的]通过检测自然流产蜕膜组织孕激素受体(PR)和凋亡相关调控蛋白p53、Bax及Bcl-2的表达,探讨自然流产发病机制.[方法]标本取自在解放军空军总医院妇科就诊要求流产的患者,自然流产组蜕膜标本23例,并以正常早孕蜕膜标本22例为对照组,采用免疫组化SP法检潮蜕膜组织PR、p53、Bax及Bcl-2蛋白的表达.[结果]自然流产组蜕膜组织PR及Bc1-2蛋白的表达均明显低于对照组(P＜0.01),而p53及Bax蛋白的表达均明显高于对照组(P＜0.01).[结论]蜕膜组织中PR表迭减少及凋亡相关调控蛋白p53、Bel_2及Bax的异常表达在自然流产发病机制中协同发挥作用.     

自然流产蜕膜组织孕激素受体及p53、Bax、Bc1-2蛋白的表达及意义

[目的]通过检测自然流产蜕膜组织孕激素受体(PR)和凋亡相关调控蛋白p53、Bax及Bcl-2的表达,探讨自然流产发病机制.[方法]标本取自在解放军空军总医院妇科就诊要求流产的患者,自然流产组蜕膜标本23例,并以正常早孕蜕膜标本22例为对照组,采用免疫组化SP法检潮蜕膜组织PR、p53、Bax及Bcl-2蛋白的表达.[结果]自然 流产组蜕膜组织PR及Bc1-2蛋白的表达均明显低于对照组(P＜0.01),而p53及Bax蛋白的表达均明显高于对照组(P＜0.01).[结论]蜕膜组织中PR表迭减少及凋亡相关调控蛋白p53、Bel_2及Bax的异常表达在自然流产发病机制中协同发挥作用.     

胰岛素样生长因子Ⅰ型受体在恶性血液病骨髓有核细胞的表达及其抗凋亡作用

为探索胰岛素样生长因子Ⅰ型受体(IGF-IR)在骨髓增生异常综合征(MDS)和急性髓细胞白血病(AML)骨髓有核细胞表面的表达及其与细胞凋亡的关系,收集MDS和AML患者各16例骨髓有核细胞,经离心涂片机制片,用免疫酶标记方法(APAAP)及TdT凋亡检测(TUNEL)法先后在同一标本上检测IGF-IR表达和凋亡信号,并以16名正常人骨髓有核细胞作对照.结果显示①MDS组骨髓细胞IGF-IR表达[(56.8±14.3)%]高于正常对照[(40.4±9.6)%](P＜0.01),AML组骨髓细胞IGF-IR表达[(86.8±13.8)%]高于正常对照(P＜0.01),AML骨髓细胞IGF-IR表达高于MDS骨髓细胞(P＜0.01);②MDS组骨髓细胞凋亡率为[(5.4±3.0)%]高于正常对照[(1.2±0.9)%](P＜0.01),AML组骨髓细胞凋亡率为[(0.3±0.4)%]低于正常对照(P＜0.01),MDS组细胞凋亡率明显高于AML组(P＜0.01);③细胞凋亡主要发生在IGF-IR阴性细胞[(9.0±4.8)%],IGF-IR阳性细胞中凋亡细胞仅占[(1.4±2.4)%](P＜0.01),IGF-IR表达与细胞凋亡呈负相关(r=-0.852;P＜0.01);④MDS骨髓细胞IGF-IR表达阳性率RAEB/RAEB-t/CMML组高于RA/RAS组,分别为(64.1±3.2)%和(53.5±16.2)%,但差异无显著性,细胞凋亡率RAEB/RAEB-t/CMML组低于RA/RAS组,分别为(3.1±2.1)%和(6.4±2.8)%,(P＜0.05);⑤MDS和AML中IGF-IR阳性率与原始细胞百分比存在明显的正相关(r=0.677;P＜0.01).结论MDS和AML造血细胞过度表达IGF-IR.IGF-IR表达增高可能预示造血细胞的恶性增殖倾向并通过某种途径抑制细胞凋亡.如果能证实此点,则抗IGF-IR治疗有希望成为治疗MDS和AML的新方法.     

Tip30基因过表达对人胃癌细胞生长的影响及分子机制

目的 探讨Tip30基因过表达对人胃癌AGS细胞增殖、凋亡的影响及相关分子机制.方法 人胃癌AGS细胞中Tip30基因过表达采用腺病毒转染法,使用实时定量PCR和Western blotting验证Tip30过表达的效果,分别采用MTT法、划痕试验检测细胞增殖、迁移情况,流式细胞术分析细胞凋亡,Western blotting分析p53、Bax、Bcl-2蛋白表达. 结果 过表达组AGS细胞Tip30基因mRNA和蛋白表达水平均显著高于对照组(P＜0.05).与对照组比较,Tip30过表达后,细胞增殖、体外迁移能力均显著减弱(P＜0.05);Tip30过表达后AGS细胞凋亡率相比对照组显著增大,Tip30过表达促进AGS细胞凋亡与上调p53、Bax蛋白表达,下调Bcl-2蛋白表达水平相关. 结论 Tip30基因过表达可抑制人胃癌AGS细胞增殖活性、体外迁移能力,且促进胃癌细胞凋亡.     

茵陈蒿汤对妊娠期肝内胆汁淤积症胎盘中p53, Bax和Bcl-2表达的影响

[目的]探讨p53,Bax和Bcl-2在妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)胎盘组织上的表达及茵陈蒿汤对其调控作用.[方法]选择三组病例,即正常妊娠组30例(对照组)、ICP未用茵陈蒿汤治疗组30例(未服药组)和ICP用茵陈蒿汤治疗组30例(服药组).采用酶联免疫吸附试验(ELISA法)测定孕妇血清胆汁酸水平.采用免疫组化EnVision法分别检测三组胎盘组织细胞凋亡调控基因p53,Bax和Bcl-2的表达.[结果]①ICP患者血清胆汁酸水平明显高于正常对照组(P<0.01);ICP服药组治疗前与治疗后血清胆汁酸水平比较有差异(P<0.01).②未服药组p53、bax在胎盘组织的表达高于对照组和高于服药组,差异有统计学意义(P<0.05);③未服药组Bcl-2在胎盘组织的表达低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).[结论]①ICP患者的胎盘功能减退可能与胎盘组织细胞在外界有害物质作用下对细胞凋亡的敏感性增加有关系;②茵陈蒿汤治疗ICP可能是通过下调细胞凋亡调控基因bax和p53,延缓细胞凋亡,改善胎盘功能而发挥作用.     

miR-26a靶向调控AP-2γ表达对神经母细胞瘤细胞增殖的影响

[目的]探讨miR-26a是否可通过靶向调控AP-2γ表达而抑制神经母细胞瘤细胞增殖.[方法]通过双荧光素酶基因分析检测miR-26a对AP-2γ 3＇非编码区（3＇UTR）-荧光素酶的影响;采用Western blot方法检测miR-26a模拟物转染神经母细胞瘤细胞中AP 2γ表达水平;将AP-2γ shRNA转染SK-N AS细胞,MTS细胞增殖活性检测分析干扰AP-2γ表达对神经母细胞瘤细胞增殖能力.[结果]双荧光素酶活性检测显示miR-26a特异性地与AP-2γ的3＇UTR结合,抑制其荧光素酶活性.过表达miR-26a的神经母细胞瘤细胞AP2γ蛋白表达水平降低;shRNA干扰AP-2γ表达能抑制SK-N-AS细胞的增殖能力.[结论]miR-26a通过靶向调控AP-2γ表达而抑制神经母细胞瘤细胞的增殖.     

膀胱癌大鼠LASS2基因及肿瘤增殖凋亡相关蛋白表达分析

目的通过构建膀胱癌大鼠模型,分析膀胱癌大鼠LASS2基因及肿瘤增殖凋亡相关蛋白表达水平变化。方法将20只大鼠随机分为膀胱癌模型组及空白对照组。对模型组大鼠饲喂含0. 05%N-正丁基-N-(4-羟基-丁基)亚硝胺(BBN)的饮用水至第8周,建立膀胱癌模型;空白对照组正常饲养。观察记录两组大鼠状态,检测两组大鼠膀胱组织或肿瘤组织的LASS2蛋白及mRNA表达水平,检测肿瘤增殖相关蛋白Ki-67、增殖细胞核抗原(PCNA),细胞凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、P53表达水平。结果对照组大鼠无异常症状;模型组大鼠饲喂过程中死亡3只,活动减少,毛发无光泽,出现血尿症状,HE染色肿瘤组织中大量细胞胞质深着色,胞核异形,形态不规则,膀胱黏膜固有层出现浸润;模型组大鼠相较于对照组,LASS2蛋白及mRNA表达水平均显著降低(P 0. 05),肿瘤增殖相关蛋白Ki-67及PCNA表达水平均更高,细胞凋亡相关蛋白Bcl-2表达水平更高,P53表达水平更低,差异具有统计学意义(P 0. 05)。结论在膀胱癌大鼠中,LASS2表达下调,肿瘤增殖相关蛋白Ki-67及PCNA蛋白表达上调,抗凋亡蛋白Bcl-2表达上调,促凋亡蛋白P53表达下调,LASS2可能与肿瘤增殖及凋亡存在一定关系。     

毫米波辐射对人急性早幼粒白血病细胞诱导凋亡的作用

目的 探讨毫米波对人急性早幼粒白血病细胞增殖和凋亡的影响。方法 以波长7.1mm,频率42.2GHz的毫米波辐射体外培养的NB4细胞,光镜及电镜观察细胞形态改变,生长曲线测定细胞生长及增殖情况。流式细胞仪（FCM）检测细胞周期分布。细胞凋亡指数及凋亡相关基因表达的改变。结果 1mW/cm^2的毫米波辐射,每日1次,30min,可明显抑制NB4细胞的生长,辐射第3天细胞生长抑制率为44.1%;光镜及电镜下可见凋亡细胞形态,FCM示G0/G1期细胞及凋亡百分比增加;p21、p53、Bax和Fas表达增加,c-Myc、Bcl-2表达下降,5mW/cm^2的毫米波对细胞增殖及凋亡的影响却不明显,虽然p53、Bax和Fax表达增加,Bcl-2表达下降,但c-Myc和p21的表达却无改变。结论 1mW/cm^2毫米波辐射适当时间后能显著抑制NB4细胞增殖、诱导细胞凋亡;其凋亡诱导机制可能与调控细胞凋亡相关基因的表达有关,其中对c-Myc蛋白表达的下调可能具有关键作用。     

星形细胞肿瘤中的细胞凋亡及其与p53、bcl—2的关系

目的探讨细胞凋亡在星形细胞肿瘤发展中的作用及其与p53、bcl-2的关系.方法对52例星形细胞肿瘤标本分别进行HE染色,TUNEL及PCNA、p53、bc1-2免疫组化染色.结果高级别星形细胞肿瘤的PI(增殖指数)显著高于低级别肿瘤(P＜0.01);高级别肿瘤和低级别肿瘤间的AI(凋亡指数)无显著性差异(P＞0.05).高级别星形细胞肿瘤p53的表达高于低级别肿瘤(0.01＜P＜0.05);p53阴性组和p53阳性组的AI(P＞0.05)和PI(P＞0.05)无显著性差异.低级别肿瘤中bcl-2的表达较高级别组肿瘤高(0.01＜P＜0.05);bc1-2免疫组化染色表达的阳性组与阴性组的AI(P＞0.05)和PI(P＞0.05)无显著性差异.结论与低级别星形细胞肿瘤相比,高级别肿瘤中的细胞凋亡受到了抑制;p53免疫组化染色结果可作为分析星形细胞肿瘤生物学行为的参考指标.星形细胞肿瘤中bcl-2的过表达对细胞凋亡未产生明显影响.