人结肠癌羟基喜树碱耐药细胞株SW1116/HCPT的建立与鉴定

背景：肿瘤细胞的多药耐药性是造成化疗失败的主要原因，其机制是多种耐药相关基因表达的改变。目的：探讨消化道肿瘤的多药耐药机制和逆转策略。方法：应用药物浓度递增诱导法建立羟基喜树碱（HCPT）耐药结肠癌细胞株SW1116／HCPT；细胞计数法测定细胞生长曲线；流式细胞仪测定细胞周期分布；细胞染色体染色进行核型分析；四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法进行药物敏感实验；聚合酶链反应（PCR）-酶联免疫吸附测定（ELISA）检测细胞端粒酶活性；肿瘤药物耐受功能分类基因芯片筛选差异表达的耐药相关基因。结果：与亲代细胞相比，SW1116／HCPT细胞生长曲线无明显改变；对HCPT的耐药倍数增加120．0倍，并与阿霉素（48．2倍）、氧化苦参碱（2．1倍）、阿糖胞苷（2．0倍）、5．氟尿嘧啶（1．8倍）、顺铂（1-3倍）存在交叉耐药现象；细胞周期分布明显改变，G1期细胞增加，S期细胞减少；细胞染色体无明显变化，核型为非整倍体54-69；细胞端粒酶活性无明显改变；功能分类基因芯片显示，耐药细胞株表达改变的基因有30个。其中表达下调10个，上调20个。结论：SW1116／HCPT是研究消化道肿瘤多药耐药现象的模型之一。     

Ufd1基因沉默逆转SW1116／HCPT细胞株对羟基喜树碱耐药的研究

泛素融合降解1样蛋白（Ufd1）在蛋白质逆向转运中发挥一定作用。前期研究发现羟基喜树碱（HCPT）耐药人结肠癌细胞株SW1116／HCPTUfd1表达增高。目的：探讨Ufd1基因沉默在逆转SW1116／HCPT细胞株对HCPT耐药性中的作用。方法：干扰组SW1116／HCPT细胞转染Ufd1特异性siRNA以沉默Ufd1基因．对照组转染非特异性siRNA。体外药物敏感性试验检测细胞对HCPT的敏感性,流式细胞术检测细胞周期,比色法测定caspase-3活性,蛋白质印迹法检测p-JNK、p53表达情况和细胞内泛素化蛋白贮留情况。结果：干扰组SW1116／HCPT细胞对HCPT的敏感性显著高于对照组（P〈0．05）。经HCPT作用,干扰组和对照组细胞均出现S期阻滞、caspase-3活性增高和p-JNK、p53、泛素表达增加,干扰组更为明显。结论：以RNA干扰技术沉默Ufd1基因可逆转SW1116／HCPT细胞株对HCPT的耐药性,推测该作用可能与活化JNK信号通路、上调p53表达以及致细胞内泛素化蛋白贮留而破坏细胞内蛋白代谢的协调性有关。     

应用芯片技术筛查人结肠癌羟基喜树碱多药耐药相关微RNA的研究

目的 探讨新一类调控分子微RNA(miRNA)在人结肠癌羟基喜树碱多药耐药中的作用,为逆转肿瘤化学治疗的多药耐药性提供新的靶点.方法 运用miRCURYTM LNA Array V8.1版芯片检测人结肠癌细胞SW1116和人结肠癌羟基喜树碱多药耐药细胞SW1116/HCPT的miRNA表达谱,筛选出具有表达差异的miRNA(2倍以上).通过PiTcar,Targetscan,MIRanda等算法在线搜寻差异表达miRNA的靶基因.利用茎环特异miRNA引物反转录特异的miRNA,并采用荧光定量PCR法对个别差异表达的miRNA进行验证.结果 用于芯片分析的总RNA的吸光度比值分别为1.93(SW1116)和1.94(SW1116/HCPT).琼脂糖变性凝胶电泳进一步验证总RNA质量符合芯片要求.通过芯片检测后发现SW1116/HCPT相比SW1116表达下调的miRNA共有28条,表达上调的有36条.根据靶基因预测结果,我们选取其中2条表达下调hsa-miR-452,hsa-miR-373*和1条表达上调hsa-miR-506进行荧光定量PCR验证,hsa-miR-452和hsa-miR-506的结果与芯片相符合,但hsa-miR-373*表达量不足以由荧光定量PCR检测出.结论 miRNA表达量的改变可能在人结肠癌羟基喜树碱多药耐药中起有关键作用.     

阿司匹林对HT-29、SW480结肠癌细胞株CD133表达的影响

目的:观察阿司匹林对人结肠癌肿瘤干细胞标志物CD133表达的影响,探讨其对结肠癌干细胞的作用.方法:流式细胞仪检测结肠癌细胞株HT-29和SW480在不同浓度阿司匹林(0、2.5、5.0、10.0mmol/L)作用下CD133的表达变化.结果:流式细胞仪检测结果显示CD133+细胞在HT-29细胞株中的比例为88.37%±1.00%,在SW480细胞系中的比例为65.22%±1.50%.用阿司匹林干预后,随着阿司匹林浓度的增加,CD133在结肠癌细胞系HT-29和SW480中的表达呈下降趋势,差异有统计学意义(45.41±1.09,55.31±1.07vs73.45±1.04;28.28±0.30,42.27±0.78vs58.96±0.09,均P<0.05).结论:阿司匹林能抑制结肠癌细胞株HT-29和SW480中CD133的表达,呈剂量依赖性.     

非小细胞肺癌肿瘤药敏与耐药基因MDR1、MRP、GST-π表达的相关性研究

目的研究非小细胞肺癌(NSCLC)多药耐药(MDR1)、谷胱甘肽转移酶(GST-π)、多药耐药相关蛋白(MRP)基因表达和肿瘤药物敏感试验之间的相关性及临床指导意义.方法 48例NSCLC(可手术)进入研究,药敏方法采用磷脂结合蛋白V(Annexin V)联合碘化丙啶(PI)双参数法,耐药基因MDR1、GST-π、MRP采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测.结果抗癌药物检测显示紫杉醇(商品名泰素)、顺铂、去甲长春花碱、丝裂霉素、鬼臼乙叉甙、双氟胞苷、长春碱酰胺、长春新碱的平均抑瘤率分别为(15.7±21.8)%, (20.7±22.2)%,(7.9±16.2)%,(10.3±17.1)%,(9.7±20.1)%,(11.2±13.8)%,(5.6±14.9)%,(4.7 ±8.7)%.耐药基因MDR1、MRP、GST-π阳性率分别为67%(32/48),42%(20/48),48%(23/48).耐药基因MRP、GST-π阳性及阴性表达与病理类型之间未见明显相关;而在MDR1组中鳞癌及腺癌的MDR1阳性表达明显高于阴性表达组(P<0.05).NSCLC各期别中MDR1、MRP、GST-π阳性表达统计学上未见明显差异.在所检测的所有抗癌药物与MDR1耐药基因阳性与阴性表达未见相关性.MRP表达阳性者对去甲长春花碱、长春碱酰胺、长春新碱和丝裂霉素的肿瘤抑制率显著低于阴性表达组(P<0.05).而MRP表达与顺铂、鬼臼乙叉甙、紫杉醇肿瘤药敏未见明显相关.耐药基因GST-π阳性表达者对顺铂、去甲长春花碱、丝裂霉素的抑瘤率显著低于阴性表达组(P<0.05).结论肺癌耐药基因GST-π、MRP表达与部分化疗药物肿瘤药敏存在相关性,耐药基因检测对指导临床化疗药物的选择具有一定的帮助.     

奥曲肽逆转肝细胞肝癌多药耐药的机制

目的 探讨生长抑素（SST）类似物奥曲肽逆转肝癌细胞多药耐药可能的机制。方法 应用MTT法分析肝癌细胞对化疗药物的敏感性；RT—PCR、流式细胞术检测肝癌细胞多药耐药基因多药耐药糖蛋白1（MDR1）、多药耐药相关蛋白2（MRP2）mRNA及其蛋白质的表达。结果 奥曲肽联合化疗药物可以显著降低化疗药物的IC50肝癌细胞有生长抑索受体2（SSTR2）、生长抑素受体3（SSTR3）、MDR1、MRP2的表达，奥曲肽可显著降低肝癌细胞表面MDR1、MRP2的表达。结论 SST可与肝癌细胞表面的SSTR结合，降低其表面MDR2、MRP2的表达，使细胞内细胞毒药物浓度增加，从而逆转肝癌细胞多药耐药。     

槲皮素联合survivin反义核苷酸对肝癌SMMC7721/ADM细胞MDR的逆转作用

目的 探讨槲皮素与survivin反义核苷酸(ASODN)联合应用对肝癌SMMC7721/ADM细胞多药耐药(MDR)的逆转作用.方法 选择肝癌敏感细胞株SMMC7721和MDR细胞株SMMC7721/阿霉素(ADM),观察其对四种不同化疗药物的耐药性及槲皮素、survivin反义核苷酸(ASODN)对SMMC7721/ADM细胞MDR的逆转效果.结果 槲皮素和ASODN联合时较两者单独应用时能显著降低四种化疗药物对SMMC7721/ADM细胞的半数抑制浓度(IC50) (P<0.05).槲皮素单独应用及联合ASODN时均能明显降低SMMC7721/ADM细胞的多药耐药基因1(MDR1)mRNA及p170和多药耐药相关蛋白基因(MRP)mRNA及p190的表达(P均<0.05). 结论 槲皮素与ASODN联合能明显逆转SMMC7721/ADM细胞对四种化疗药物的耐药性.槲皮素可能通过抑制MDR1 mRNA和MRP mRNA的表达使p170和p190的合成减少而发挥耐药逆转作用,ASODN不能通过该途径发挥作用.     

肝癌MHCC97H细胞中CD133~+和CD133~-亚群分选及其生物学特性

目的分选肝癌MHCC97H细胞中的CD133+和CD133-细胞亚群,并初步探讨CD133+细胞亚群的干细胞特性。方法用磁珠分选技术分选MHCC97H细胞株中的CD133+和CD133-细胞亚群,用流式细胞仪检测分选前后CD133的表达,用MTT法检测其增殖能力,比较其体内成瘤能力,用Western印迹法检测其干细胞相关基因蛋白的表达。结果分选前后MHCC97H细胞中CD133表达分别为(1.09±0.43)vs(86.65±6.49)%(P<0.01)。与CD133-亚群相比,CD133+亚群的体外增殖能力较强,成瘤能力高,高表达干细胞相关基因蛋白(P<0.05,P<0.01)。结论肝癌细胞株MHCC97H中的CD133+细胞亚群具有肿瘤干细胞的特性;CD133是人肝癌MHCC97H细胞株的肿瘤干细胞的表型之一。     

小干扰RNA表达质粒转导逆转人结肠癌羟基喜树碱耐药表型的研究

目的探讨结肠癌羟基喜树碱(HCPT)多药耐药现象的逆转策略。方法应用RT-PCR法检测结肠癌HCPT耐药细胞中耐药相关基因的表达;构建并转导乳腺癌耐药蛋白(BCRP)基因小干扰RNA(siRNA)表达质粒;四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法进行药物敏感实验;流式细胞仪测定细胞周期分布;软琼脂克隆形成实验检测肿瘤细胞体外成瘤性;RT-PCR和Western印迹法测定BCRP基因敲除效果。结果SW1116/HCPT细胞8个耐药相关基因中,2个表达下调,4个表达上调,还有2个表达无明显改变;成功构建BCRP基因siRNA表达质粒,转染效率约42%;与耐药细胞相比,转染细胞对HCPT敏感性增加,IC_(50)下降62.5%;转染细胞周期分布有明显改变:G1期细胞减少,S期细胞增加;转染细胞体外成瘤性下降,形成克隆体积减小;RT-PCR和Western印迹显示,转染细胞中BCRP基因mRNA和蛋白质的表达下降甚至消失。结论siRNA表达质粒转导是逆转结肠癌HCPT耐药现象的一种有效手段。     

无血清悬浮法培养结肠癌HT29细胞系及肿瘤干细胞样亚群筛选

目的:研究无血清培养基悬浮培养人结肠癌细胞系HT29,筛选并鉴定HT29结肠癌细胞系中肿瘤干细胞相关亚群。方法:通过无血清培养基筛选结肠癌细胞系肿瘤干细胞相关亚群。应用克隆形成实验、表面标志检测、双苯酰亚胺(Hoechst)33342染色检测来确定培养细胞中肿瘤干细胞比例及其培养后的肿瘤干细胞含量变化。结果:结肠癌细胞系HT29中约50%的肿瘤细胞在无血清培养基中能够存活、增殖,形成自由飘浮的细胞球。细胞球可连续传代,若重新接种于含血清培养基中可重新贴壁分化,分化后细胞与培养储存的HT29细胞形态无明显差异。流式细胞仪检测表面标志,HT29细胞系中CD44+细胞含量为(44.18±2.18)%,而细胞球中CD44+细胞含量为(83.41±11.21)%;双苯酰亚胺33342染色检测提示HT29中侧群(sidepopulation,SP)细胞含量为(3.82±0.08)%,而细胞球中含量明显增高。结论:结肠癌细胞系HT29可在含生长因子的无血清培养基中悬浮生长,并维持细胞系。该细胞系中含有一定比例的具有增殖和自我更新能力的结肠癌干细胞样细胞亚群。表面标志以及双苯酰亚胺33342检测差异提示细胞球中仅部分细胞具有干细胞的功能。     

肝癌细胞株SMMC7721中CD133＋和CD133-亚群生物学特性的比较

背景：肝癌是常见的恶性肿瘤之一,易复发、转移,术后5年生存率较低。目前肿瘤干细胞学说已成为肿瘤研究的热点．CD133是一种肿瘤干细胞的标记物。目的：比较肝癌细胞株SMMC7721中CD133＋和CD133一亚群的生物学特性差异．并初步探讨CD133＋亚群的干细胞特性。方法：采用免疫磁珠法（MACS）分选SMMC7721细胞中CD133＋和CD133一亚群．以流式细胞术检测CD133表达量,平板克隆形成实验检测CDl33体外增殖能力,裸鼠成瘤实验检测体内致瘤性．CCK-8法检测对5-氟尿嘧啶（5-Fu）的敏感性。结果：MACS分选并培养1周后,CD133＋亚群中CD133表达量明显下降。与CD133-亚群相比．CD133＋亚群的体外克隆形成率明显增高,裸鼠肿瘤的体积明显升高,对5-Fu的敏感性降低．差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论：肝癌SMMC7721细胞中CD133＋亚群较CD133-亚群更具有肿瘤干细胞的特性．     

PPIs抑制P13K/Akt／mTOR信号通路逆转胃癌细胞的化疗多药耐药

背景：前期实验显示质子泵抑制剂（PPIs）可抑制空泡型质子泵（V-H＋-ATPases）和多药耐药蛋白P—gP、MRP1表达,增强胃癌细胞的化疗敏感性。目的：探讨PPIs抑制空泡型质子泵逆转胃癌细胞化疗多药耐药与P13K／Akt／mTOR信号通路的关系。方法：应用不同浓度埃索美拉唑或泮托拉唑预处理人胃腺癌细胞敏感株SGC7901和多药耐药株SGC7901／MDR,或以V—H＋-ATPasessiRNA干扰SGC7901／MDR细胞内的V-H＋-ATPases表达,或以雷帕霉素阻断mTOR表达,以蛋白质印迹法检测经不同方式处理的细胞内V—H＋ATPases、P—SP、MRPl蛋白表达以及P13K／Akt/mT0R／HIF—1α信号通路及其信号旁路TSCl／2-Rheb中的相关蛋白表达;以免疫荧光法检测经埃索美拉唑预处理的SGC7901／MDR细胞内的V-H＋ATPases、P—gP蛋白表达和定位。结果：PPIs可呈浓度依赖性地抑制SGC7901／MDR细胞内的V—H＋ATPases、P13K、Akt、roTOR、HIF-1仅、TSCI、TSC2、Rheb、P—gP、MRP1表达以及Akt底物和TSC2磷酸化,改变V-H＋ATPases、P—gP的胞内定位,对SGC7901细胞则无上述影响。以V—H＋-ATPasessiRNA抑制SGC7901／MDR细胞内的V—H＋-ATPases表达,作用与PPIs预处理相似。以雷帕霉素阻断mTOR可呈浓度依赖性地抑制SGC7901／MDR细胞内的HIF-1α、P—gP表达。结论：PPIs抑制空泡型质子泵逆转胃癌细胞化疗多药耐药的机制与抑制P13K／Akt／mTOR信号通路有关。     

Effects of CD133 Silencing on Survival and Migration of HT-29 Colorectal Cancer Cells

Background: Colorectal cancer (CRC) is attributed as one of the most common malignancies worldwide. CD133 molecule, as a pentaspan transmembrane glycoprotein, confers stem cell-related characteristics, including self-renewal and multi-directional differentiation capability. CD133 plays important roles in the progression of CRC by conferring apoptotic resistance and migration ability. Objective: To investigate the anti-apoptotic and anti-angiogenic effect of CD-133 targeted siRNA in a colorectal cancer cell line. Methods: In this study, CD133-targeted siRNA transfection was conducted into HT-29 cells. MTT assay was employed to evaluate the cytotoxic effects of transfection on the cells. Flow cytometry was used to evaluate the apoptosis rate. The mRNA expression of apoptosis and metastasis related genes were assessed by quantitative Real-Time PCR (qRT-PCR). Wound healing assay was used to assess the migration potency of the infected cells. Results: Expression of CD133 was significantly downregulated after transfection of CD133-specific siRNA. Moreover, the rate of apoptosis was significantly increased after transfection. The migration potential of cells was diminished after transfection. siRNA delivery resulted in the modulation of expression of apoptosis and metastasis-related genes. Conclusion: siRNA mediated targeting of CD133 could be considered as a promising approach to treat CRC through suppressing the cancerous behavior of tumor cells.     

高温对SGC7901/ADM细胞多药耐药蛋白表达的影响和意义

目的:研究高温43℃对多药耐药基因表达产物P-gp、MRP、LRP在蛋白水平上的影响及其生物学意义,更深入地了解热效应逆转耐药的机制.方法:采用免疫细胞化学染色法、RT-PCR以及Western blot方法,检测在不同温度和不同药物作用下,人胃癌耐药细胞株SGC7901/ADM和对照的人胃癌敏感细胞SGC7901株中,与人胃癌多药耐药相关的分子MDR1、P-gp、MRP、LRP在蛋白水平上的表达差异.结果:采用免疫细胞化学染色法检测人胃癌耐药株SGC7901/ADM细胞,发现高温43℃60 min处理可使P-gp蛋白表达下调率(down-regulated rate,DRR)31.78%(P=0.016),而MRP表达DRR为20.22%(P=0.037),差异有统计学意义,LRP未表达.采用Western blot法在SGC7901细胞中未检测出P-gp蛋白表达,而SGC7901/ADM细胞中P-gp高表达;在ADM和CDDP处理组细胞中,高温43℃时P-gp的表达量较37℃时DRR分别为45.65%(P=0.007)、17.95%(P=0.021),差异有显著学意义;TAX处理组DRR为11.90%,差异无显著学意义(P=0.065).结论:高温43℃的短期处理对人胃癌SGC7901/ADM细胞中P-gp和MRP多药耐药蛋白的表达有一定的抑制作用,可能是逆转耐药的机制之一.     

Identification and characterization of tumorigenic liver cancer stem/progenitor cells

BACKGROUND & AIMS: Recent efforts in stem cell biology suggest that tumors are organized in a hierarchy of heterogeneous cell populations and that the capability to maintain tumor formation/growth specifically resides in a small population of cells called cancer stem cells (CSCs). The aim of this study is to identify, isolate, and characterize the CSC population that drives and maintains hepatocellular carcinoma (HCC) growth and metastasis. METHODS: Normal stem cells involved in liver regeneration were identified using a severe partial hepatectomy model. Purified HCC cells, with or without expression of the identified normal stem cell phenotype, were evaluated, based on their tumorigenic potential and exhibition of defined stem/progenitor cell-like properties, to determine whether liver CSCs can be or partly be identified by this surface marker. RESULTS: We report the identification and isolation of a population of CSCs expressing a CD133 surface phenotype from human liver cell lines. CD133(+) cells possess a greater colony-forming efficiency, higher proliferative output, and greater ability to form tumor in vivo. These cells are endowed with characteristics similar to those of progenitor cells including the expression of "stemness" genes, the ability to self-renew, and the ability to differentiate into nonhepatocyte-like lineages. Furthermore, CD133 is found to represent only a minority of the tumor cell population in human HCC specimens. CONCLUSIONS: We report the identification of a CSC population in HCC characterized by their CD133 phenotype. The identification of tumorigenic liver CSCs could provide new insight into the HCC tumorigenic process and possibly bear great therapeutic implications.     

肝细胞癌中耐药基因的表达及意义

目的通过对肝细胞癌（HCC）中3种耐药基因MDR1、MRP、GST-π的检测,探讨肝细胞癌中耐药基因的表达特点及临床意义。方法应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测3种耐药基因在51例肝细胞癌组织和10例正常肝组织中的表达。结果 （1）MDR1、MRP、GST-π在肝细胞癌中的表达分别为0.55±0.27、0.62±0.29、0.64±0.31,正常肝组织中的表达分别为0.23±0.10、0.25±0.07、0.26±0.12,耐药基因在肝细胞癌中的表达高于正常肝组织,差异具有统计学意义（P〈0.05）;（2）耐药基因的表达与肿瘤Edmondson分级呈正相关（P〈0.05）;（3）MRP与GST-π的表达相关。结论肝细胞癌中存在有原发性耐药的现象,且多种机制并存。MDR1、MRP、GST-π在肝细胞癌中有较高的表达。联合检测对制定科学有效的治疗方案有一定价值。     

Expression of MDR proteins in breast cancer and its correlation with some clinical and pathological parameters

The aim of this work was to determine the expression of the multidrug resistance (MDR) proteins, namely MDR1 (P-glycoprotein), MRP1 (multidrug resistance-related protein) and LRP (lung resistance-related protein), in 87 samples of breast carcinoma. Detection of these proteins was provided by using indirect enzymatic immunohistochemistry. Our findings were compared with the other clinical and pathological parameters: expression of Her2/neu, estrogen receptor status (ER), progesteron receptor status (PR), histological grade and regional lymph node status. For statistical analysis, non-parametric two sided Mann-Whitney-U test was used. Majority of breast carcinoma specimens show positivity for these proteins. The MDR1 and MRP1 signal was found in the cytoplasm of cancer cells. The expression of LRP was detected in the cytoplasm close to the nuclear membrane. The samples were positive for MDR1 protein in 57%, for MRP1 in 84% and for LRP in 79%. Comparing our results with other clinical and pathological parameters, negative correlation between ER, PR and MDR1 expressions and histological grading status was found. No associations were observed between the MRP1 and LRP proteins and histological grading, as well as between the expression of three MDR proteins and the other clinically relevant parameters. In conclusion, high frequency of expression of MDR proteins in breast carcinoma cells suggests, that these proteins might be an important factor of drug resistance in breast carcinoma. Nevertheless, the negative correlation between the histological grade of malignancy of tumor and the expression of ER, PR and MDR1 indicates possible influence of progressive tumor cell de-differentiation. However, this finding has to be confirmed in additional evaluations.     

大肠癌细胞系Lovo中亚群(SP)细胞的分离培养和鉴定

目的:应用无血清培养液(SFM)培养Lovo细胞系,克隆分离具有干细胞样特性SP细胞.方法:应用SFM培养Lovo细胞,分离成球样生长的细胞群作为SP细胞,并通过有限稀释,分化,自我更新,含血清培养基(SSM)和SFM交替培养及Musashi-1化学染色方法来鉴定SP细胞.结果:Lovo细胞中约含有0.54%-0.62%的SP能够在无血清培养基中能够存活、增殖,形成悬浮的肿瘤细胞球;在SFM中加入血清可促使SP细胞分化;SP细胞可以连续传代,并可交替培养于SSM和SFM中,细胞形态无明显变化;SP细胞Musashi-1染色阳性.结论:应用SFM可从Lovo细胞中分离出极少量的具有干细胞特性的SP细胞.     

恶性脑胶质瘤U87细胞系肿瘤干细胞放疗敏感性的体外实验研究

目的探讨脑胶质瘤细胞系U87细胞及其肿瘤干细胞（CSCs）对体外放疗的敏感性。方法应用神经干细胞（NSCs）培养基分离培养形成细胞球克隆,检测细胞球细胞的NSCs特性。采用不同剂量放射线照射U87细胞及其CSCs,应用集落形成实验和生存曲线检测其生存情况。结果 U87细胞在NSCs培养基中形成悬浮的细胞球克隆,具有自我更新和多向分化能力,表达CD133、Nestin;两种细胞的存活率均随照射剂量增加而下降,且CSCs的存活率明显高于U87细胞（P〈0.01）。结论在体外条件下,CSCs的放射敏感性明显低于U87细胞,其可能是恶性脑胶质瘤放疗抵抗的主要原因。