IGF-1信号通路相关蛋白在大鼠髁突软骨细胞增殖分化中的表达

目的:研究胰岛素样生长因子-1(IGF-1)信号转导通路在大鼠髁突软骨细胞增殖分化调控过程中相关基因的表达。方法:体外单层培养并鉴定出生后1、7、14、28 d共4组SD大鼠髁突软骨细胞。免疫组织化学方法检测细胞内IGF-1表达情况,Real-time PCR及Western印迹法检测细胞内IGF-1R、Bcl-2、Bax mRNA及蛋白表达。饥饿培养24 h后,实验组加入质量浓度为100 ng/mL的重组大鼠IGF-1细胞因子(rrIGF-1)继续培养24、48 h,CCK-8检测细胞增殖情况,Real-time PCR技术检测各组髁突软骨细胞内IGF-1R、IGF-2R、Raf1、GSK-3、IGFBP3、NF-κB、Bcl-2、Bax、integrin、TGF-βmRNA表达情况;对照组培养液不加rrIGF-1。结果:各鼠龄组SD大鼠髁突软骨细胞内IGF-1表达均阳性,IGF-1R mRNA及蛋白表达相对平稳,Bcl-2、Bax mRNA及蛋白表达逐渐增强,在出生14 d后表达下降(P<0.05)。加入100 ng/mL rrIGF-1后,髁突软骨细胞增殖速度显著增加,细胞凋亡减少,Real-time PCR结果显示实验组IGF-1R、GSK-3、Bax、integrin mRNA表达整体呈下降趋势;IGF-2R、Raf1、IGFBP3、NF-κB、Bcl-2、TGF-βmRNA表达水平总体呈上调趋势,差异有统计学意义。结论 :IGF-1介导的信号转导途径参与了髁突软骨细胞的增殖、分化以及软骨形成早期的调控,并可能与integrin、TGF-β等其他蛋白相互作用,共同参与髁突发育过程。     

Runx2在下颌髁突软骨发育、改建中的作用研究进展

Runt相关转录因子2(Runx2)是一种蛋白转录因子,广泛参与多种生物过程.近年来的研究显示,Runx2是髁突软骨发育的关键调控因子,参与髁突软骨增殖分化、功能改建和病变等进程.本文就Runx2在下颌髁突软骨发育、改建和关节病变中的作用作一综述.     

渐进性咬合紊乱对幼、成年雌性大鼠髁突软骨中VEGFR-1,2表达的影响

目的：探讨渐进性咬合紊乱对幼年和成年雌性大鼠髁突软骨中血管内皮生长因子受体（VEGFR）1,2表达情况的影响。方法：建立大鼠渐进性咬合紊乱模型,采用免疫组化方法检测髁突软骨中VEGFRs的表达情况,通过计算阳性细胞数的方法,分析大鼠髁突软骨适应性改建过程中VEGFRs的表达变化规律。结果：VEGFR-1,VEGFR-2在大鼠髁突软骨中的分布趋势基本相同,均主要分布在大鼠髁突软骨的肥大层和过渡层,在增殖层少量表达,在纤维层未见到其阳性细胞表达;正常雌性大鼠髁突软骨从7~11周龄VEGFRs表达逐渐增强,11周龄后降低,并保持在一个稳定水平;幼年及成年实验2周组、幼年实验8周组、成年实验6周组VEGFRs阳性细胞数与其同龄对照组相比均无显著差异;幼年实验4周组及6周组,成年实验4周组VEGFRs阳性细胞数分别明显低于其同龄对照组（P〈0.05）,而成年实验8周组则明显高于其同龄对照组（P〈0.05）。结论：VEGFRs参与了大鼠渐进性咬合紊乱所致髁突软骨的改建活动。     

胰岛素样生长因子-Ⅰ及其与髁突软骨发育的调控

出生后的髁突软骨处于复杂的力学微环境中,其生长改建的生物学基础是髁突软骨细胞的增殖和分化。胰岛素样生长因子(IGF)-Ⅰ是髁突软骨生长发育过程中重要的生长因子之一。在细胞学水平,IGF-Ⅰ受胰岛素样生长因子连接蛋白(IGFBP)调控,通过与其受体的结合、激活来发挥生物学效应,其中包括调控细胞增殖、分化及程序性死亡,加快髁突软骨基质合成,参与髁突软骨细胞内力学信号的转导等。本文就IGF-Ⅰ及其受体,IGFBP及IGF-Ⅰ调控髁突软骨发育及其机制的研究作一综述。     

单侧咀嚼对大鼠髁突软骨细胞中p53、Bcl-2及caspase-12表达的影响

目的探究p53、Bcl-2及caspase-12在单侧咀嚼大鼠髁突软骨细胞凋亡反应中的表达变化及作用。方法通过拔除大鼠单侧磨牙建立大鼠单侧咀嚼模型,采用免疫组化方法检测不同时间caspase-12的含量变化,RTPCR方法检测p53、Bcl-2的表达。结果拔牙后,实验组左侧的caspase-12免疫组化IHS评分显著高于对照组(P<0.05),且随时间延长逐渐升高,实验组右侧的caspase-12 IHS评分在1d,7d,14d显著高于对照组(P<0.05),随时间延长逐渐降低。RT-PCR结果显示,实验组左侧p53含量显著高于对照组(P<0.05),随时间延长逐渐升高,实验组右侧p53含量1d,7d,14d高于对照组(P<0.05),随时间延长逐渐降低。实验组左侧Bcl-2含量低于对照组(P<0.05),随时间延长逐渐降低,实验组右侧Bcl-2含量1d,7d,14d低于对照组(P<0.05),随时间延长逐渐升高。结论 p53、Bcl-2及caspase-12参与了单侧咀嚼大鼠髁突软骨的改建。     

TGF-β_1在不同发育阶段胎儿髁突软骨中的表达

目的 :研究β转化生长因子 - 1(TGF - β1)在胎儿髁突软骨中表达 ,探讨该因子在软骨发育中的作用。方法 :30例 13～ 33周胎儿分为A、B、C和D四组 ,应用HE染色和免疫组化S -P法观察髁突软骨TGF - β1的表达。结果 :TGF - β1在所观察各组髁突软骨各层中均有表达 ,成软骨细胞层表达最强 ,主要在胞浆。TGF - β1积分光密度在上、中、下三层之间存在差异 (P <0 .0 5 )。平均灰度和平均光密度在不同胎龄组间存在差异 (P <0 .0 5 )。A组与B组、A组与C组、B组与D组、C组与D组之间有显著性差异。结论 :在髁突软骨不同发育时间、不同分化阶段TGF - β1的表达水平不同。     

TGF-β1在不同发育阶段胎儿髁突软骨中的表达

目的研究β转化生长因子-1(TGF-β1)在胎儿髁突软骨中表达,探讨该因子在软骨发育中的作用.方法30例13～33周胎儿分为A、B、C和D四组,应用HE染色和免疫组化S-P法观察髁突软骨TGF-β1的表达.结果TGF-β1在所观察各组髁突软骨各层中均有表达,成软骨细胞层表达最强,主要在胞浆.TGF-β1积分光密度在上、中、下三层之间存在差异(P<0.05).平均灰度和平均光密度在不同胎龄组间存在差异(P<0.05).A组与B组、A组与C组、B组与D组、C组与D组之间有显著性差异.结论在髁突软骨不同发育时间、不同分化阶段TGF-β1的表达水平不同.     

渐进性咬合紊乱对髁突软骨成纤维细胞生长因子受体1表达的影响

目的：探讨渐进性咬合紊乱对大鼠髁突软骨中成纤维细胞生长因子受体1（Fibroblast growth factor receptor1,FGFR1）表达的影响。方法：建立大鼠渐进性咬合紊乱模型,采用免疫组化方法检测髁突软骨中FGFR1的表达,并通过比较阳性细胞密度,分析FGFR1的表达变化规律。采用SPSS11．0软件包进行统计学分析。结果：FGFR1主要表达在大鼠髁突软骨过渡层和肥大层,增殖层很少;正常组大鼠髁突软骨从6周龄到10周龄FGFR1表达逐渐增强,10周龄后降低．并保持在一个稳定水平;成年组和幼年组实验4、6周时FGFRI的表达均显著低于对照组,实验8周时的表达高于对照组（P〈0．05）,幼年组尤为明显,实验2周组与对照组无显著差异。结论：FGFRI参与了大鼠渐进性咬合紊乱所致髁突软骨的改建活动。     

TGF—β1在不同发育阶段胎儿髁突软骨中的表达

目的：研究β转化生长因子－1（TGF－β1）在胎儿髁突软骨中表达,探讨该因子在软骨发育中的作用。方法：30例13－33周胎儿分为A、B、C和D四组,应用HE染色和免疫组化S－P法观察髁突软骨TGF－β1的表达。结果：TGF－β1在所观察各组髁突软骨各层中均有表达,成软骨细胞 层表达最强,主要在胞浆。TGF－β1积分光密度在上、中、下三层之间 存在差异（P＜0．05）。平均灰度和平均光密度在不同胎龄组间存在差异（P＜0．05）。A组与B组、A组与C组、B组与D组、C组与D组之间有显著性差异。结论：在髁突软骨不同发育时间、不同分化阶段TGF－β1的表达水平不同。     

大鼠下颌功能前伸后激活髁突胰岛素样生长因子1基因表达

目的研究用功能矫治器前伸生长期大鼠下颌后，髁突软骨中胰岛素样生长因子（ＩＧＦ１）基因表达的变化规律，探讨功能矫形治疗的分子机理。方法将６０只雄性５周龄ＳＤ大鼠分为对照组和实验组，按１天、３天、１周、２周、３周和４周６个阶段，应用原位杂交技术研究髁突软骨中ＩＧＦ１ｍＲＮＡ的表达变化。结果正常生长期大鼠下颌髁突软骨有ＩＧＦ１ｍＲＮＡ表达；前伸大鼠下颌使髁突软骨细胞中ＩＧＦ１ｍＲＮＡ阳性强度和阳性细胞数目均增加。这一变化具有时间性，即实验３天后开始升高，实验后１周～２周达最高值，３周～４周时逐渐降低。结论功能前伸下颌后ＩＧＦ１ｍＲＮＡ转录升高，表明功能矫形后髁突软骨的生长改建可能是由于咀嚼肌牵张激活了ＩＧＦ１的基因表达。     

咀嚼力降低对大鼠髁突软骨中Bax和Bcl-2 mRNA表达的影响

目的：探讨咀嚼力降低对发育期大鼠下颌髁突软骨中凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2 mRNA表达水平的影响.方法：40只18 d雄性大鼠随机分为2组.一组喂以标准的硬食,另一组以粉末状软食喂养.于大鼠4周、5周、6周、7周龄时取其髁突软骨以RT-PCR方法检测其中Bax和Bcl-2mRNA的表达水平.结果：正常硬食组大鼠髁突软骨中Bax mRNA和Bcl-2 mRNA的表达均随时间延长而降低.软食对Bcl-2mRNA表达的影响不大,但却使Bax mRNA表达上调.软食组Bax mRNA与Bcl-2 mRNA的比值在6周和7周时明显高于硬食组p＜0.05）.结论：咀嚼力降低使发育期大鼠髁突软骨Bax mRNA表达水平和Bax mRNA/Bcl-2 mRNA的比值上升,但对Bcl-2 mRNA影响不大.     

甲状旁腺激素受体1在大鼠颞下颌关节炎髁突软骨中的表达变化研究

目的 研究甲状旁腺激素受体1(parathyroid hormone receptor 1,PTH1R)在大鼠颞下颌关节骨关节炎（temporomandibular joint osteoarthritis,TMJOA）髁突软骨中的表达变化。方法 研究于2022年7月至2023年1月在潍坊医学院动物实验中心和潍坊市口腔生物医学重点实验室进行。选取8周龄健康雄性SD大鼠48只,将大鼠随机分为实验组和对照组,每组各24只。实验组大鼠用咬合升高法构建TMJOA动物模型,并于造模后的第2、4、6、8周分别处死6只大鼠,解剖分离双侧髁突;对照组大鼠仅进行相同时长的张口动作,其余操作与实验组相同。通过苏木精-伊红和番红O-固绿染色,观察大鼠髁突软骨的组织学变化,按照改良Mankin评分系统对大鼠髁突软骨及软骨下骨拍照并评分;再应用实时定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)和免疫组化染色,检测大鼠髁突软骨内PTH1R mRNA和蛋白的表达情况。结果 苏木精-伊红和番红O-固绿染色结果显示,所有时间点对照组髁突软骨的组织学形态具有一致性,而实验组颞下颌关节的...     

功能矫形前伸大鼠下颌后髁突软骨β转化生长因子-1(TGF-β_1)表达变化的研究

目的：检测快速生长期大鼠髁突软骨在功能矫形前伸下颌后β转化生长因子－１（ＴＧＦ－β１）分布的变化，探讨髁突软骨生长代谢的生长因子控制机理。方法：实验组戴模拟临床功能矫治器，引导大鼠下颌前伸，并在实验后不同时期处死大鼠，取下髁突，应用免疫组织化学方法探测ＴＧＦ－β１在髁突中的含量及分布。结果：髁突各层软骨细胞均有ＴＧＦ－β１的分布，以成熟层阳性强度最高；功能矫形前伸下颌后，髁突软骨细胞各层ＴＧＦ－β１的表达均增强。结论：ＴＧＦ－β１介导了功能矫形的机械刺激作用，使软骨细胞增生，分化功能增强，髁突软骨增生     

升高咬合对青春期大鼠髁突软骨BMP-2表达变化的影响

目的 观察升高咬合后髁状突软骨骨形成蛋白-2(BMP-2)的表达。方法 40只5周龄雄性SD大鼠,随机分为4组对照组和4组实验组(双侧后牙板升高咬合)。实验组与对照组动物分别在第7、14、21及28天时处死。取其右侧髁突,采用SABC免疫组化方法观察髁突软骨细胞BMP-2阳性细胞的分布及含量改变。结果 与对照组相比,实验组髁突软骨细胞BMP-2阳性细胞表达在实验第7、14天明显减少,第28天明显增多(P<0.05)。结论 咬合升高后引起髁突软骨BMP-2高表达,髁突软骨发生适应性改建。     

功能矫形前伸大鼠下颌后髁突胰岛素样生长因子Ⅰ表达变化的研究

采用免疫组织化学技术结合数字图像分析，对功能矫治器前伸大鼠下颌后，髁突软骨中胰岛素样生长因子Ｉ（ＩＧＦ－Ⅰ）表达变化的规律进行研究，以探讨功能矫形治疗的分子机制。结果显示：髁突软骨中滑膜层、纤维层和生发层细胞中ＩＧＦ－Ⅰ阳性最强，在过渡层中较强，成熟层和移行层中较弱，在骨小梁中的成骨细胞也有阳性信号；实验组各层细胞阳性强度高于对照组，并且与功能矫形引起的组织学改变和细胞功能变化一致。表明ＩＧＦ－Ⅰ在髁突软骨的增生和下颌功能前伸引起的适应性生长改建中可能有重要作用     

静压力对髁突软骨转化生长因子β1表达影响的体外研究

目的:观察静压力对体外培养髁突软骨细胞表达TGF-β1的影响。方法:解剖、培养SD大鼠髁突软骨,应用静压力加载装置对实验组软骨加载强度为10kPa的持续静压力1h。对照组除软骨不加力外,其它培养条件与实验组相同,加力完成后2组同时收集样本。用免疫组化技术检测2-实验组和对照组髁突软骨TGF-β1的含量和分布,用彩色病理图像分析仪检测髁突软骨各层TGF-β1表达的强度。结果:实验组的髁突软骨各层细胞TGF-β1表达均增强,与对照组比较差异有显著性(P<0.05)。其中成软骨细胞层改变最明显(P<0.01)。结论:静压力促进髁突软骨各层细胞TGF-β1表达增强,其中成软骨细胞层表达增强最为明显。     

Swell1基因在小鼠髁突软骨发育中的时空表达

目的: 探讨Swell1(LRRC8A)基因在小鼠髁突软骨中的时空表达模式。方法: 通过获取胚胎15.5、16.5、18.5天以及新生小鼠的髁突样本,利用H-E染色、免疫荧光染色和qRT-PCR探讨小鼠髁突显微结构及软骨发育相关基因和Swell1基因的时空表达变化。采用SPSS 25.0软件包对数据进行统计学分析。结果: Swell1基因表达于髁突发育过程中,从胚胎16.5天开始,在肥大软骨细胞层表达,之后表达逐渐增强,并在小鼠胚胎发育过程中持续表达,直至小鼠出生仍有明显表达。结论: Swell1在小鼠髁发育过程中主要在肥大软骨细胞中表达,可能参与软骨细胞肥大的调控。     

成纤维细胞生长因子受体3在髁突软骨化骨中的表达及其意义

近年来研究发现，成纤维细胞生长因子受体3(fibroblast growth factor receptor3，FGFR-3)在骨的软骨化骨过程中发挥着极其重要的作用，我们探讨其在下颌骨髁突软骨化骨过程中的作用。     

应力在髁突软骨改建中的作用及其可能机制

应力在髁突软骨生长、改建和退行性关节病中的作用正日益受到重视，应力作用下，髁突软骨具有生长改建的趋势，也有发生退行性改变的可能，其最终作用效果决定于应力的特征和软骨细胞的生物学反应情况。深入研究应力对髁突软骨改建的影响及其作用机制，将为临床医疗工作提供有益的借鉴。     

颌间Ⅲ类矫形力作用下转化生长因子β1在髁突软骨中的基因表达

目的　观察颌间Ⅲ类矫形力不同作用时间下转化生长因子β1(TGF-β1)在髁突软骨中的基因表达。方法　选用青春生长发育期雌性恒河猴6只,随机分为3、6月实验组和对照组,实验组戴用颌间Ⅲ类双阻板磁力矫治器,对照组不戴。苏木精-伊红染色观察髁突软骨组织形态,原位杂交方法检测髁突软骨TGF-β1 mRNA的表达,并进行统计学处理。结果　①组织学观察表明:与对照组相比3月组髁突软骨前份有一定程度增厚,中、后份变薄;6 月组髁突软骨厚度变化与3月组相似。②原位杂交结果表明:对照组TGF-β1 mRNA前份表达较弱,中、后份表达较强;3月组髁突软骨前中后份TGF-β1 mRNA表达均增强,以前份最强;6月组髁突软骨TGF-β1 mRNA表达比3月组明显减少,但前份仍强于中后份。实验组之间以及实验组与对照组之间的差异均有统计学意义(P<0·01)。结论　髁突软骨TGF-β1 mRNA的表达强弱与颌间Ⅲ类矫形力不同的作用时间有关。3月组TGF-β1 mRNA表达较6月组明显,提示3月组髁突软骨改建较活跃。