血清LDH紫外监测法试剂盒的研制和应用

作者研制了适用于在自动生化仪上测定血清LDH活性的LD-P紫外监测法试剂盒.实验室研究证明,自制试剂盒在Impact 400型自动生化仪上,与西德BM公司,美国Gilford公司同类试剂盒对比测定结果一致,呈非常显著相关.酶促反应的延迟时间短(<20s),血清LDH活性测定线性范围宽,可达1000u/L(37℃),批内变异系数1.1～4.7%.在4～8℃条件下贮存,本试剂盒可稳定7个月,重溶试剂可稳定7天.81名健康成人血清LDH活性测定结果为318.3±61.9u/L(37℃).     

微波ELISA法快速检测抗HAV-IgM

近年来微波技术在ELISA法检验中的应用多有报道。我们自开展了微波ELISA法快速检测乙肝病毒5项标志物和丙型肝炎抗体的工作后,接着又进行了微波ELISA法快速检测甲型肝炎病毒免疫球蛋白M型抗体（抗HAV-IgM）的尝试,取得了令人满意的效果,反应时间由115min缩短为11min,提高效率10倍多,现将其方法报告如下。1 材料与方法1.1 标本:采取门诊或住院病人血清,以标准方法测定ALT高于上限2.5倍（100U/L）为检测病例,其血清标本于-24℃冰箱保存备检。1.2 酶标试剂盒:ELISA抗HAV-IgM试剂盒,上海实业科华生物技术有限公司生产,批号950230。1.3 仪器:DG3022型酶标免疫检测仪,波长292nm,南京华东电子管厂生产。1.4 600W上菱牌家用微波炉,输出功率选择为20％。     

化学发光法和酶联免疫法检测乙肝病毒血清学的对比

目的 探讨化学发光法和酶联免疫法检测乙肝病毒血清学的对比分析.方法 采用随机数字表法,对检验科的400例血清标本进行检验,依照血清学检验方法的不同,分为对照组和观察组,每组200例,对照组给予酶联免疫法检验,观察组给予化学发光法检验,观察每组对在乙型肝炎血清标志物HBeAg的诊断疗效.结果观察组HBeAg阳性和HBeAg抗阳性的检验正确率为95(190/200)明显高于对照组检验正确70%(140/200),两组数据差异具有统计学意义(P<0.05).结论 化学发光法在乙肝病毒血清学检测中的应用疗效确切,具有较高的阳性检出率和正确率,且比酶联免疫法有着更高的敏感性和特异性强特点,值得临床应用实施.     

慢性乙型肝炎血清e系统与HBV DNA的相关性

目的　探讨慢性乙型肝炎患者血清e系统与HBVDNA的相关性。方法　采用ELISA法及荧光定量PCR法 ,检测 60例慢性乙型肝炎 (慢乙肝 )患者乙肝病毒标志 (HBV M)及血清HBVDNA含量 ,并与肝组织炎症活动度进行对比。结果　慢乙肝患者e系统与血清丙氨酸转移酶 (ALT)无显著差异 (P >0 .0 5 ) ;但HBeAg阳性组血清HBVDNA含量显著高于抗 HBe阳性组 (P <0 .0 1 ) ,在各级肝组织炎症活动度组 ,其HBeAg阳性率与抗 HBe阳性率在各组间无显著差异(P >0 .0 5 )。结论　临床上不宜单独凭慢乙肝患者e系统的检测结果作为评判病人是否有HBV的复制的指标 ,而应采用荧光定量PCR法 ,动态观察慢乙肝患者血清HBVDNA水平的变化 ;有条件的地方应尽可能开展肝脏活体组织检查术 ,以正确判断肝组织的病变。     

肾炎病人肾组织中乙型肝炎病毒前-S_2蛋白的检测及意义

对经肾活检确诊的30例肾炎病人应用单克隆抗体、间接免疫酶标技术检测肾组织中的前-S_2(Pre-S_2)蛋白,同时对肾脏中的HBsAg、HBeAg及血清HBsag、HBeAg、抗HBs、抗HBe、抗HBc进行了观察。结果显示,7/22例原发性肾炎、6/8例狼疮性肾炎病人的肾小球中有Pre-S_2蛋白沉积,分布于毛细血管袢和(或)系膜区,其分布与肾炎类型、肾组织中免疫球蛋白、补体沉积的多少有关。肾脏中Pre-S_2蛋白的沉积与相同部位HBsAg的沉积有联系,与HBeAg的沉积无关。膜性肾病时,Pre-S_2蛋白的沉积与病毒血症有良好的相关性。狼疮性肾炎时Pre-S_2蛋白的沉积很可能是非特异性的。     

血清ALT紫外监测法试剂盒的研制和应用

作者采用国产原料研制成功适用于在临床生化自动分析仪或紫外分光光度计上测定血清ALT(GPT)活性的ALT紫外监测法试剂盒.在Impact400型生化仪上所作的试剂盒性能质量评价实验证明,酶促反应的延迟时间短(<20s),批内变异系数1.1～6.5%,血清ALT活性线性可达1000u/L(37℃),与进口同类试剂盒对比测定结果一致,呈非常显著相关.自制ALT试剂盒4～8℃存放可稳定6个月.81名健康成人血清ALT活性为26.91±8.91u/L(37℃).     

应用抗HBeAg单克隆抗体检测血清HBeAg/抗HBe

本研究室在建立分泌抗HBeAg单克隆抗体-的淋巴细胞杂交瘤细胞株之后,研究了应用单克隆抗HBe检测血清中HBeAg/抗HBe的某些条件以了解用于临床的可能性。现将结果扼要报告如下。 本研究中单克隆抗-HBe为HE_(20)IB_8及HE_(21)2G_(11)。多克隆抗-HBe为抗HBe阳性人血清,琼脂双向扩散效价在1∶16～1∶32之间,经DEAE纤维柱层析纯化IgG。单克隆抗HBe或多克隆抗HBe均以过碘酸钠法标记辣根过氧化物酶(HRP)。血清标本为本院住院病人血清,经过RPHA检测HBsAg;SP-RIA检测抗HBs;ELISA检测抗HBc,HBeAg/抗HBe,4℃保存1周或     

乙型肝炎26510例病毒血清学标志物分析

目的　探讨乙型肝炎病毒 (HBV)血清学标志物表现模式的临床意义。方法　应用酶联免疫吸附测定 (ELISA)法检测 2 65 1 0例受检者血清标本中HBsAg、抗 HBs、HBeAg、抗 HBe、抗 HBcIgM。 结果　HBV血清学标志物的表现模式共 1 9种 ,其中常见模式 1 2种 ,罕见模式 7种。结论　HBV血清学标志物的表现模式在乙型肝炎的诊断、疗效评价及预后具有重要意义 ,但如何正确判断罕见模式的临床意义 ,需进一步研究与探讨。     

三种HBV检测法联合诊断乙型肝炎66例

2006年8~9月,我们共对乙肝病毒(HBV)感染66例进行了HBV-DNA水平,蛋白芯片检测,HBsAg、HbeAg和HBV基因突变测定联合诊断乙型肝炎,效果满意。现分析报告如下。1临床资料1.1一般情况66例中,男30例,女36例;年龄24~45岁,平均35岁。大三阳组(HBsAg、HBeAg、抗HBc均阳性)32例,小三阳组(HBsAg、抗HBe、抗HBc均阳性)34例。1.2检测仪器及试剂盒998A型FQ-PCR仪,HBV-DNA试剂盒,生物蛋白芯片阅读仪及生物蛋白芯片试剂盒,HBV血清标志物诊断试剂盒。1.3判定标准(1)HBV-DNA水平:<1.0×103copy/ml判为阴性,>1.0×103copy/ml判为阳性;(2)生物蛋白芯片检测:HbsAg<1ng/ml为阴性,>1ng/ml为阳性;HbeAg<1:1为阴性,>1:1为阳性并给出确切比值;(3)基因突变点检测:C区G1896-A,P区A739-G、G741-A,S区G587-A,X区A1762-T、C1764-A。1.4结果1.4.1HBV-DNA水平测定结果大三阳组中,检出HBV-DNA阳性31例,阳性率96.8%,HBV-DNA平均...     

乙型肝炎病毒前S_2蛋白活力与病毒复制的关系

本文通过用ELISA法检测了122例各型乙型肝炎病人血清中的Pre-s_2蛋白:研究其与HBV复制的各种标志的关系,并讨论了其临床意义。 前s_2蛋白(Pre-s_z蛋白)测定以单克隆抗Pre-s_2抗体为主要试剂,采用夹心法原理,检测患者血清中Pre-s_2蛋白,具体操作方法按试剂盒说明书进行,S/N比值≥2.1及血清滴度>1∶10为阳性;HBV标志(HB_sAg,抗-HB_s、HB_eAg、抗-HB_e、抗-HB_c)均采用ELISA法     

多聚酶链式反应与酶联免疫吸附试验检测丙型肝炎病毒感染的比较

本文报告了用逆转录套式多聚酶链式反应(RT nested PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中HCV—RNA和抗—HCV.用军科院丙肝抗体酶免试剂盒检测了2086份血清,病区和门诊病人抗—HCV阳性率为13.4%,献血员为2.2%,一些高危人群HCV感染率比较高.用军科院和肝研所两个单位的丙肝抗体酶免疫试剂盒同时检测100份血清,抗—HCV总符合率为95.0%.用PCR法检测了34份抗—HCV阳性和20份抗—HCV阴性血清,阳性符合率为70.6%,总符合率为79.6%.PCR与ELISA法检测HCV感染各有长短,目前仍需找到一种敏感、特异、简便、快速的诊断方法,以适应临床需要.     

干扰素对慢性乙型肝炎血清IL-1β、IL-6和TNF-α活性的临床研究

目的 检测慢性乙型肝炎患者经干扰素治疗前后血清IL-1β、IL-6和TNF-α活性,探索应用干扰素抗病毒作用后它们的变化规律。方法 用ELISA法检测HBsAg、抗HBs、抗HBc、HBeAg和抗HBe;用聚合酶链反应(PCR)检测HBV-DNA;用双抗体夹心法检测IL-1β,IL-6和TNF-α。结果 (1)干扰素治疗组治疗后IL-1β、IL-6和TNF-α均显著低于治疗前(P<0.01),而对照组则无明显差异(P>0.05)。(2)两组中HBeAg和HBV-DNA阴转的29例中,治疗前IL-1β、IL-6和TNF-α明显高于未转阴组(P<0.01,P<0.05和P<0.05)。结论 慢性乙型肝炎患者血清IL-1β、IL-6和TNF-α活性测定可以作为评估干扰素抗病毒作用的参考指标之一。     

大肠杆菌合成的乙肝病毒核心抗原转化为e抗原的探索

在一些乙肝表面抗原(HBsAg)阳性的乙肝患者血清中出现e抗原(HBeAg)与血清中存在有大量Dane颗粒、高活力DNA聚合酶有关,说明乙肝病毒(HBV)的复制活跃,传染性强。凡血清中无HBeAg或有抗-HBe的人,一般来讲循环病毒较少,即其传染性较弱,所以检查HBeAg和抗-HBe在临床上具有重要的意义。科学家们对HBeAg的重视不仅在于它在临床和流行病学上的意义,同时也对它的结构与功能的关系感到兴趣。至今为止,HBeAg基因在HBV DNA序列上的位置尚未确定,HBeAg与核心抗原(HBcAg)结构间     

无症状HBsAg携带者血清标志的模式及e系统的探讨

通过对214名无症状HBsAg携带者血清HBsAg滴度分布、血清标志模式及e系统与血清HBsAg滴度的关系进行分析,发现HBsAg滴度高的(>1:128)占携带者的50%以上,携带者中传染性较强的HBeAg阳性携带者占一半多,无症状HBsAg携带者血清标志模式中HBsAg、抗HBc、HBeAg三项阳性者占57%;HBsAg、抗HBc、抗HBe三项阳性占24.3%;单纯的HBsAg阳性者仅占1.9%;血清HBeAg出现机率与HBsAg滴度成正相关(r=0.958,P<0.005);抗HBe出现机率与HBsAg滴度成负相关(r=-0.930,P相似文献   

四种乙型肝炎病毒表面抗体试剂盒检测人乙型肝炎病毒表面抗体效果比较

目的分析商品化试剂盒检测人乙型肝炎病毒（乙肝）表面抗体（抗-HBs）之间的差异。方法本院实验标本252份,分别用雅培I2000定量试剂盒、罗氏e601定量试剂盒、安图Auto Lumo A2000定量检测试剂盒和国内主流酶联免疫法定性试剂盒（上海科华）检测人乙肝表面抗体,以假定金标准对各厂家的阴、阳性结果进行比对分析,并对3个定量检测系统进行量值相关性分析。结果 4种乙肝表面抗体试剂与假定金标准相比,灵敏度和特异性都达到了93%以上,其中安图和罗氏的灵敏度和特异性最高,达到了98%以上;罗氏试剂盒的跃登指数（灵敏度＋特异性-100%）最高,为99.3%;与金标准比较,3种化学发光试剂盒检测结果无统计学差异（P〉0.05）,而酶联免疫法定性试剂盒检测结果有统计学差异（P〈0.05）。结论主流乙肝表面抗体试剂盒在检验乙肝表面抗体时均存在一定的假阳性或假阴性,量值相关性较好,不影响临床应用分析。     

鲑鱼降钙素的两种定量分析方法比较

目的:研究测定降钙素制剂含量的高效液相色谱法,并与酶免法作比较.方法:色谱法采用C_(18)柱(5μm,100mm×4.6mm),流动相为1M氢氧化四甲铵-水-乙腈(8:692:300),进样量200μl;酶免法采用酶免试剂盒,测定同一样品含量.结果:高效液相色谱法在5μg/ml～40μg/ml范围内线性良好,批内和批间误差均小于10%,平均回收率为100.04%;高效液相色谱法和酶免法测定结果相关系数r=0.9931.结论:高效液相色谱法灵敏度不如酶免法,但已能满足测定要求,且精确度高,操作省时,成本低,可以作为精确检测降钙素制剂含量的方法.     

硝酸纤维素膜酶联免疫吸附法检测乙型肝炎病毒核心抗原

将待测血清中乙型肝炎病毒(HBV)与抗-HB_s制成复合物,抽滤浓集于硝酸纤维素膜上,经3mol/L NaCNS处理后直接用酶标记抗-HBc染色。其方法简便易行,敏感性、特异性和重复性均可满足常规工作要求。测定结果表明,血清HBcAg与HBsAg、抗-HBc、聚合人血清白蛋白受体(PHSAR)密切相关,可显著提高乙肝诊断水平。     

家兔血清中抗体对地高辛放免测定的干扰及解决方法

家兔血清中抗体对地高辛放免测定的干扰及解决方法刘奉亭为探讨临床放射免疫分析（ＲＩＡ）试剂盒是否适用于动物模型的血清分析，笔者采用地高辛固相二抗ＲＩＡ试剂盒，测定家兔血清地高辛浓度，就兔血清中抗体干扰进行了初步探讨。一、材料与方法地高辛固相ＲＩＡ试剂盒...     

分泌抗HBe单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立及初步鉴定

HBeAg与HBcAg是乙型肝炎特有的两类抗原性不同的抗原,但均由同一基因区所编码。我们采用内切酶定位剪切及简易快速克隆的方法,选择了仅N末端3个氨基酸编码子差别的PMM2166和PMM2066作了系统比较,获得HBeAg在大肠杆菌中高效表达。将基因工程菌制备的HBeAg(下称基因HBeAg)用十二烷基磺酸钠(SDS)和2巯基乙醇(2-ME)处理后常规免疫BALB/c小鼠。取小鼠脾细胞与同系小鼠SP2/O骨髓瘤细胞融合,选用两种不同的酶免疫试验进行筛选,结果共获16个分泌HBe单克     

血清中肝特异性膜脂蛋白的检测及其临床意义的研究

本文报告用自制的抗-LSpMcab作为试剂,建立了ELISA双夹心法检测病毒性肝炎、系统性红斑狼疮、慢性肾病患者血清中LSp抗原水平,并探讨LSp与抗-LSp、HBeAg、SGPT变化的关系及其临床意义。结果为:正常人血清中未能测到LSp抗原,但在肝细胞损伤时(病毒性或自身免疫性肝病)则可出现LSp阳性(48.2～70％),无症状HBsAg携带者及慢性肾病患者LSp阳性率较低(10～22.2％),二组之间有显著性差异(P<0.01)。抗-LSp阳性者中LSp同时阳性者占68.3％,而抗-LSp阴性者中LSp阳性者只占25.3％(P<0.01)。HBeAg阳性者中LSp阳性者占59.6％,HBeAg阴性者中LSp阳性者占20.4％(P<0.01)。由此表明:(1)血清中LSp的检出与肝细胞损伤有直接关系;(2)LSp的检出率与抗-LSp、HBeAg存在有关;(3)LSp与抗-LSp同时被检出的原因可能是肝病患者免疫功能紊乱、肝细胞持续性进行性损伤所致。