中性粒细胞CD64在新生儿败血症诊断中的价值

目的探讨外周血中性粒细胞CD64表达水平在新生儿败血症早期诊断中的价值。方法败血症患儿36例,根据病史、临床表现、实验室检查确定诊断;另设对照组26例。应用流式细胞仪检测两组外周血中性粒细胞CD64表达水平。结果败血症组外周血中性粒细胞CD64表达为(60.37±22.70)[平均荧光强度(MFI)],显著高于对照组(23.14±5.10)MFI(P<0.001);败血症组恢复期CD64表达水平下降,但仍高于对照组。中性粒细胞CD64对新生儿败血症诊断的敏感性为95.7%,特异性95.8%,阳性预测值95.6%,阴性预测值为95.4%。结论外周血中性粒细胞CD64测定有助于早期诊断新生儿败血症,判断病情、评价疗效和估计预后。     

幼年特发性关节炎患儿外周血Th细胞亚群变化

目的探讨幼年特发性关节炎(JIA)患儿外周血CD4 T淋巴细胞及其亚群CD4 CD45RA 、CD4 CD45RO 的表达及其临床意义。方法采用免疫荧光标记技术和流式细胞仪检测36例JIA患儿外周血CD4 T淋巴细胞及其亚群CD4 CD45RA 、CD4 CD45RO 的表达,同期检测20例年龄、性别无差异的健康儿童为对照。结果JIA患儿外周血CD4 T淋巴细胞明显低于对照组(t=2.099,P<0.05),CD4 CD45RA T淋巴细胞数与对照组比较明显降低(t=3.450,P<0.01),CD4 CD45RO T淋巴细胞数明显升高(t=3.913,P<0.01),CD4 CD45RA T/CD4 CD45RO T比值明显降低(t=4.904,P<0.01);与对照组比较,JIA各亚型(全身型、多关节型、少关节型)的CD4 CD45RO T淋巴细胞数均明显升高,CD4 CD45RA T/CD4 CD45RO T比值明显降低(P<0.01);CD4 CD45RA T淋巴细胞数与正常对照组比较在全身型中显著降低(t=4.192,P<0.01);在多关节型中明显降低(t=2.214,P<0.05);在少关节型中稍有降低,但与对照组比较差异无显著性(t=1.793,P>0.05)。结论JIA患儿的免疫功能紊乱主要表现为CD4 T淋巴细胞及其亚群CD4 CD45RA T/CD4 CD45RO T失衡,这可能在JIA发病机制中起着重要的作用。     

支气管哮喘患儿外周血中性粒细胞功能检测及其与哮喘病情关系的探讨

目的了解支气管哮喘患儿外周血中性粒细胞(PMN)功能状况及其与哮喘病情的关系。方法对2005—2008年广西医科大学第一附属医院收治的67例临床确诊为支气管哮喘的患儿和作为健康对照组的16名儿童进行哮喘症状评分、肺功能检查,将哮喘组分为轻-中度哮喘组(MA)和重度哮喘组(SA)。所有研究对象抽取静脉血分离外周血中性粒细胞,体外培养12h,收集培养上清液。采用荧光标记流式细胞仪检测中性粒细胞活化率及中性粒细胞吞噬功能,比色法检测中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)活性,还原比色法检测上清液一氧化氮(NO)水平,酶联免疫吸附实验(ELISA)法测定上清白细胞介素-8(IL-8)水平。比较对照组与哮喘组以及轻-中度哮喘组与重度哮喘组反映中性粒细胞功能各指标的差异;比较哮喘急性发作期与缓解期外周血中性粒细胞功能各指标的差异。结果 (1)与对照组比较,哮喘组PMN活化率及PMN噬菌率高于对照组,差异有统计学意义(P0.01);哮喘组上清液NE、NO、IL-8高于对照组,差异有统计学意义(P0.01)。(2)重度哮喘组PMN活化率高于轻-中度哮喘组,PMN噬菌率低于轻-中度哮喘组,差异有统计学意义(P0.01),上清NE、NO、IL-8高于轻-中度哮喘组,差异有统计学意义(P0.01)。(3)急性发作期PMN活化率、上清液NE、NO、IL-8与缓解期比较差异无统计学意义(P0.05),急性发作期患儿PMN噬菌率高于缓解期,差异有统计学意义(P0.01)。结论哮喘患儿外周血存在中性粒细胞活化的证据,表现为吞噬、趋化、释放功能的改变。哮喘患儿外周血中性粒细胞活化与哮喘的病情程度有关,外周血中性粒细胞活化相关指标可用于判断哮喘病情。布地奈德吸入治疗对哮喘患儿外周血中性粒细胞功能可能无明显影响。     

幼年类风湿关节炎患儿血清白介素-15变化与T_H细胞亚群表达的研究

目的：探讨幼年类风湿关节炎(JRA)患儿血清白介素15变化及其TH细胞亚群CD4+CD45RA+,CD4+CD45RO+的表达变化。方法：采用ELISA方法检测39例JRA患儿的血清IL15的水平,并同期选择26例年龄、性别无差异的健康儿童为对照。对其中24例JRA患儿采用免疫荧光标记技术和流式细胞仪检测外周血CD4+T淋巴细胞亚群CD4+CD45RA+,CD4+CD45RO+的表达。结果：JRA患儿组血清IL15水平显著高于正常对照组(P<0.05);JRA常见亚型中全身型患儿血清IL15水平明显升高,与对照组比较差异有显著性(P<0.01),而少关节型、多关节型患儿IL15水平与对照组比较差异无显著性(P>0.05);治疗后IL15水平较治疗前明显下降(P<0.01);JRA患儿血清IL15水平与外周血白细胞计数呈正相关(r=0.347,P<0.05),与血沉无相关(r=0.307,P>0.05),与C反应蛋白呈显著正相关(r=0.452,P<0.01);IL15高表达组患儿外周血CD4+CD45RO+T淋巴细胞数明显高于IL15低表达组患儿(P<0.05),CD4+CD45RA+T淋巴细胞数、CD4+CD45RA+T/CD4+CD45RO+T比值略低于IL15低表达组患儿,差异无显著性(P>0.05)。结论：JRA患儿血清IL15的水平显著升高;IL15升高使JRA患儿外周血CD4+T细胞表面CD45RA分子向CD45RO分子转换,促使T淋巴细胞大量激活,进而介导组织免疫病理损伤;在临床上可通过检测IL15以判断JRA的病情状况,为JRA治疗提供理论依据。     

肾病综合征患儿血清骨钙蛋白、血钙和24 h尿钙关系研究

目的探讨泼尼松导致骨质疏松的发病机理。方法用患儿自身对照形式将26例原发性肾病(单纯性肾病18例,肾炎性肾病8例)分激素治疗前组和激素足量治疗组两组,测定患儿血清骨钙蛋白、血钙和24h尿钙水平。结果血清骨钙水平在应用激素治疗4～8周后明显低于激素治疗前P<0.001),24h尿钙明显升高(P<0.001),血钙无明显变化;激素治疗后血钙与24h尿钙呈显著负相关(r=-0.536P<0.05)。结论肾病综合征患儿应用泼尼松治疗后骨合成明显下降,24h尿钙排泄增加的原因是骨吸收增强所致。     

大剂量静脉滴注免疫球蛋白对川崎病患儿中性粒细胞的影响

目的研究大剂量静脉注射免疫球蛋白(IVIG)对川崎病患儿中性粒细胞的影响。方法以30例经大剂量IVIG治疗的川崎病患儿为研究对象,测定治疗前后外周血中性粒细胞计数,分析其变化特点。结果IVIG治疗后外周血中性粒细胞计数明显下降。结论IVIG可能通过降低川崎病患儿外周血中性粒细胞的数量来发挥其治疗作用。     

全身型幼年特发性关节炎并巨噬细胞活化综合征9例

目的探讨幼年特发性关节炎(SO-JIA)并巨噬细胞活化综合征(MAS)患儿的临床特点,为儿童SO-JIA并MAS的诊疗提供临床依据。方法回顾性分析2010年5月-2011年10月于上海交通大学医学院附属仁济医院儿科住院的9例SO-JIA并MAS患儿资料,总结其临床表现、实验室检查、治疗及预后等,并选择同期住院9例未并MAS的SO-JIA患儿作为对照。结果 SO-JIA并MAS患儿关节症状多以下肢关节为主,以膝、髋、踝关节多见,上肢关节少见;多为2个或2个以上的关节受累(7例),单关节累及较少(1例);关节以大关节受累为主,小关节受累较少(1例)。浅表淋巴结大易见,肝大较脾大多见。肺高分辨率CT显示肺间质性变6例,炎性渗出5例,胸腔积液1例。MAS发作时,ALT、LDH急剧上升,WBC、中性粒细胞、RBC、CRP、ESR、纤维蛋白原(FIB)下降明显,与发病前后比较差异有统计学意义。在疾病的极期阶段,并MAS的SO-JIA患儿较非MAS的SO-JIA患儿ALT、LDH、γ-GT、CK-MB、铁蛋白明显升高,WBC、中性粒细胞、RBC、CRP、ESR、FIB明显下降。经联合方案(激素联合环孢素及丙种球蛋白)治疗,好转7例,死亡2例。结论 MAS是SO-JIA的危重并发症,激素联合环孢素及丙种球蛋白治疗可有一定的临床缓解率,早期诊断和干预有利于控制病情、改善预后,检测一些敏感指标有利于MAS的早期发现。     

肺炎并发麻痹性肠梗阻患儿血浆生长抑素水平的变化

目的研究肺炎并发麻痹性肠梗阻患儿血浆生长抑素(SST)水平的变化及意义。方法检测并比较肺炎并发麻痹性肠梗阻组、普通肺炎组和对照组血浆SST水平,观察麻痹性肠梗阻患儿治疗前后血浆SST水平变化,分析SST水平与麻痹性肠梗阻持续时间的相关性。结果肺炎并发麻痹性肠梗阻患儿血浆SST水平较普通肺炎组和对照组明显降低(P<0.001),经治疗临床症状消失后血浆SST水平较前升高(P<0.001),麻痹性肠梗阻持续时间与血浆SST水平呈负相关(r=-0.994,P<0.001)。结论检测血浆SST水平有助于了解麻痹性肠梗阻患儿的病情及预后;SST可用于治疗麻痹性肠梗阻患儿,有利于胃肠功能的恢复。     

脓毒性休克患儿血浆生长抑素水平的变化

目的探讨脓毒性休克患儿血浆生长抑素(SST)水平的变化。方法采用竞争性放射免疫分析法检测脓毒性休克患儿(试验组,n=21)休克期(入院当时)、血压和心率恢复正常时及恢复期(临床症状体征消失、血常规及CRP等感染指标恢复正常时,入院6～12d)清晨空腹状态下血浆SST水平,同期门诊健康体检婴幼儿(健康对照组,n=25)清晨空腹血浆SST水平作为对比,比较脓毒性休克并麻痹性肠梗阻与未并麻痹性肠梗阻脓毒性休克患儿血浆SST水平的差异。结果试验组患儿休克期血浆SST水平[(44.60±16.83)ng/L]明显低于健康对照组[(123.15±26.57)ng/L](t=-12.16P<0.001),血压及心率恢复正常时血浆SST水平[(87.64±12.69)ng/L]较休克期上升(t=-9.36P<0.001),但仍低于恢复期[(124.07±27.84)ng/L](t=-5.45P<0.001),恢复期患儿血浆SST水平与健康对照组比较无显著性差异(t=0.11P>0.05)。并麻痹性肠梗阻患儿血浆SST水平[(28.10±7.0)ng/L]显著低于未并麻痹性肠梗阻患儿[(56.98±9.44)ng/L](t=-7.70P<0.001)。结论监测脓毒性休克患儿治疗过程中血浆SST水平变化有助于了解胃肠道灌注情况;血浆SST水平可预示脓毒性休克患儿麻痹性肠梗阻发生,有助于评估患儿病情的严重程度、判断预后。     

外周血中性粒细胞CD64表达在儿童社区获得性肺炎早期病原学鉴别诊断中的应用价值

目的 评价外周血中性粒细胞CD64表达在儿童社区获得性肺炎早期病原学鉴别诊断中的应用价值.方法 选取2014年6月至2015年6月就诊我院儿科的99例患儿,依据感染的病原体不同分为3组,细菌性肺炎组(41例)、非细菌性肺炎组(38例)及正常对照组(20例);非细菌性肺炎组又分为病毒性肺炎组(22例)和肺炎支原体肺炎组(16例).采用流式细胞术检测外周血中性粒细胞CD64的平均荧光强度(median fluorescence intensity,MFI),同时检测外周血C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、WBC计数及中性粒细胞比例的水平.结果 细菌性肺炎组患儿中性粒细胞CD64表达水平、CRP值及WBC计数均较非细菌性肺炎组及正常对照组高,差异均有统计学意义(P均＜0.01);以ROC曲线确定CD64的最佳截断值为6 519 MFI,其诊断细菌性肺炎的敏感性及特异性分别为87.8％、89.7％;细菌性肺炎组CD64表达水平较病毒性肺炎组、肺炎支原体肺炎组及正常对照组明显增高,差异均有统计学意义(P均＜0.01).结论 儿童社区获得性肺炎细菌感染患儿,外周血中性粒细胞表面标志物CD64表达水平显著升高,可以作为小儿细菌性肺炎的早期诊断依据,用于指导临床是否使用抗生素的依据.     

哮喘儿童血清、诱导痰Clara细胞分泌蛋白的相关研究

目的探讨Clara细胞分泌蛋白(CCSP)在儿童哮喘中的作用及血清和诱导痰CCSP的相关性。方法采用酶联免疫吸附法检测34例哮喘临床缓解期儿童血清、诱导痰CCSP水平,同时对25例健康儿童血清CCSP水平进行测定,对两者进行比较。结果临床缓解期哮喘儿童血清CCSP明显低于正常对照组(P<0.001);血清和诱导痰CCSP水平呈正相关(r=0.772 P<0.01)。结论CCSP在儿童哮喘的发生、发展中可能起保护作用,血清CCSP水平可反映呼吸道中CCSP水平。     

儿童股骨头坏死患髋软骨蛋白多糖及滑液血清透明质酸的生物化学研究

目的研究股骨头坏死患儿患髋的生物化学改变,分析关节功能状态在疾病中所起的作用。方法本实验运用放射免疫学方法检测了２０例儿童股骨头坏死患髓软骨,１０例与患儿年龄相当的尸体同部位软骨的蛋白多糖（ＰＧ）三组份：氨基己糖、己糖醛酸、硫酸基含量和患儿关节腔液及外周血清透明质酸（ＨＡ）含量,并分别与正常对照组相比较,同时分析软骨ＰＧ、关节腔液和血清ＨＡ三者相互之间的相关性。结果①儿童股骨头坏死患儿软骨ＰＧ三组份含量较正常对照明显下降（Ｐ＜０．０１）;②股骨头坏死患儿血清ＨＡ浓度明显高于正常对照组（Ｐ＜０．０１）,关节腔液ＨＡ与血清ＨＡ呈负相关（ｒ＝－０．６６３,Ｐ＜０．０５）;③股骨头坏死患儿关节腔液ＨＡ浓度与软骨ＰＧ含量均呈正相关（ｒ＝０．６８２,Ｐ＜０．０５）;软骨ＰＧ含量与血清ＨＡ浓度呈负相关（ｒ＝－０．６３２,Ｐ＜０．０５）。结论①儿童股骨头坏死患髓关节功能有明显障碍;②血清ＨＡ对于儿童股骨头坏死病可在一定程度上反映软骨功能状态;③关节功能障碍与股骨头坏死病变相互促进,恶性循环。     

支气管哮喘患儿血清可溶性细胞间黏附分子-1的临床意义

目的探讨可溶性细胞间黏附分子1(sICAM1)在儿童哮喘发病机制中的作用。方法采用ELISA双抗体夹心法测定16例哮喘患儿急性发作期血清中sICAM1水平,以10例健康儿童为对照。结果哮喘患儿发作期血清sICAM1明显高于对照组(P<0.001)。且sICAM1与IgE呈显著正相关(r=0.603P<0.05)。结论sICAM1参与哮喘的发病,并可作为哮喘发病的检测指标。     

miR-98在哮喘患儿外周血单个核细胞中的表达及意义

目的 探讨支气管哮喘患儿外周血单个核细胞(PBMCs)中miR-98的表达及其临床意义.方法 收集43例发作期和缓解期哮喘患儿,30例健康儿童(对照组)的外周血标本,分离PBMCs,采用实时定量PCR法检测PBMCs中miR-98及IL-13、IL-4 mRNA的相对表达量.结果 miR-98在哮喘发作期患儿PBMCs中的表达低于缓解期和对照组儿童,而IL-13、IL-4在哮喘发作期患儿PBMCs中的mRNA水平均高于缓解期和对照组,差异有统计学意义(P均<0.01);缓解期患儿和对照组间miR-98、IL-4 mRNA和IL-13 mRNA水平差异无统计学意义(P均>0.05).哮喘患儿发作期,miR-98水平与IL-4、IL-13 mRNA相对表达量均呈负相关(r=-0.794、-0.804,P均<0.001),IL-4和IL-13 mRNA相对表达量呈正相关(r=0.853,P<0.001).结论 miR-98在哮喘发作期患儿PBMCs中表达降低,可能与小儿哮喘的发作相关.     

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目的探讨小儿骨髓增生异常综合征(MDS)的临床特点。方法回顾性分析同济医学院附属同济医院1991～2005年间收治的94例小儿MDS的幼稚前体细胞异常定位(ALIP)、血清乳酸脱氢酶(LDH)、血红蛋白F(HbF)、血清铁蛋白(SF)以及细胞遗传学与预后的关系。结果94例中难治性贫血(RA)48例(51.1%),难治性贫血伴原始细胞增多(RAEB)26例(27.7%),转化中的难治性贫血伴原始细胞转化增多(RAEBt)20例(21.3%)。44.0%的病例(11/25)检出ALIP,随访中5例转为白血病。9.6%病例(9/94)伴有嗜酸性粒细胞增多,随访中的7例全部死亡,平均存活时间10.5个月。高危组的SF和LDH明显高于低危组,LDH<300U/L组平均存活时间明显长于LDH≥300U/L组。42.9%(9/21)病例伴有细胞遗传学改变,55.6%(5/9)转为白血病。结论小儿MDS伴有SF和LDH的明显升高以及伴有嗜酸性粒细胞增多者预后不良,染色体核型分析对小儿MDS的诊断、预后评估有重要价值。     

激素敏感型肾病综合征患儿血清、外周血单个核细胞白细胞介素-18表达的意义

目的探讨小儿激素敏感型肾病综合征(SSNS)与白细胞介素-18(IL-18)的关系及地塞米松(DEX)对外周血单个核细胞(PBMC)体外培养表达IL-18的抑制作用。方法单纯型SSNS23例。采用ELISA测定患儿治疗前后血清、尿液IL-18水平和PBMC体外培养上清液中IL-18表达。对照组为相应年龄健康儿童15例;另18例年龄相似的呼吸道感染病例作为感染对照组。结果治疗前后血清、尿液IL-18水平有显著性差异(t=15.072,16.149Pa<0.001)。治疗前PBMC在植物血凝素(PHA)刺激下体外培养上清液中IL-18表达明显高于治疗后和正常对照组(t=6.526,5.585Pa<0.001)。培养液中加入DEX后PBMC表达IL-18水平明显低于未加DEX组(t=4.217P<0.001)。血、尿IL-18与24h尿蛋白定量呈显著正相关(r=0.768,0.638P<0.05)。血清IL-18与PBMC体外培养上清液中IL-18水平呈正相关(r=0.574P<0.05)。结论SSNS的发病与IL-18密切相关;PBMC高表达IL-18可能是其血清IL-18增高原因之一。     

β整合素家族在儿童急性T淋巴细胞白血病的表达及其临床意义

目的探讨β整合素家族成员在儿童急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)的表达及临床意义。方法收集22例初诊T-ALL患儿和21例对照(非恶性血液病患者和骨髓移植供者)的骨髓标本,采用实时荧光定量PCR方法,检测β整合素家族各成员的m RNA表达;并利用整合素抑制剂精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)肽作用于Jurkat细胞,采用CCK 8法和流式细胞术检测Jurkat细胞生存率和凋亡情况。结果与对照组相比,T-ALL患儿的整合素β_2、β_3、β_5的m RNA表达水平显著下调(P0.05)。在外周血白细胞计数100×10~9/L、第33天骨髓不缓解或MRD阳性的T-ALL患儿中,整合素β_3表达水平较高(P0.05);复发T-ALL患儿整合素β_5的表达高于无复发T-ALL患儿(P0.05)。整合素β3高表达T-ALL患儿的EFS率、OS率均低于β_3低表达者(P0.05)。与未处理组比较,RGD肽处理的Jurkat细胞生存率较低、凋亡率均高(P0.05)。结论β整合素可能通过影响细胞的增殖和凋亡而影响T-ALL的发生发展,整合素β_5的表达与T-ALL复发风险密切相关,整合素β_3的表达与T-ALL患儿治疗反应及预后密切相关。     

Mannose-binding lectin levels in children with asthma

Mannose-binding lectin (mbl), one of the important components of innate immunity, can activate the lectin pathway of the complement system. After binding mannose containing carbohydrate structures of foreign antigen, mbl initiates and regulates the inflammatory responses. Asthma is a complex inflammatory disease of the lung involving many components of the immune system. Our objective was to investigate the serum mbl levels of asthmatic children in comparison with healthy controls. Serum mbl levels were determined by nephelometric assay in 72 asthmatic children (5-15 yr old) and 30 healthy age-matched controls. Mbl levels of asthmatic children were measured both during acute attack and after complete remission. There was no significant difference between the mbl levels during acute attack (median 4.1 mg/l) or quiescence of symptoms (median 3.6 mg/l). Serum mbl levels both during acute attack or quiescence of symptoms was significantly higher in asthmatic children than in the healthy controls (median 2.8 mg/l, p < 0.0001 for each). Furthermore, mbl levels of asthmatic children positively correlated with peripheral blood eosinophils (r = 0.377, p < 0.001), which is a systemic component of airway inflammation in asthma. Our findings indicate that mbl may be implicated in the pathogenesis of asthma by contributing to airway inflammation or by increasing the risk of developing asthma.     

尿巨细胞病毒定量检测在巨细胞病毒感染诊断中的意义

目的探讨尿巨细胞病毒(CMV)定量检测在儿科CMV感染诊断中的意义。方法应用荧光定量聚合酶链反应 (FQ-PCR)方法检测110例确诊或疑诊CMV感染和81例对照患儿尿CMV-DNA,并与血清抗体检测、pp65抗原检测比较,对更昔洛韦治疗的17例病人进行治疗后尿CMV-DNA;拷贝监测。结果 1．确诊或疑诊为CMV活动性感染患儿110例,其中82例尿中检测到CMV-DNA;对照11例检测到尿CMV-DNA,其中10例为正常健康儿童;且不同年龄组CMV-DNA的阳性率不同。17 例更昔洛韦治疗后,尿CMV-DNA的平均拷贝数明显下降(P<0．001)。2．FQ-PCR、pp65、IgM检测方法敏感性分别为87％、 74％、59％,特异性分别为97％、86％、69％;与其他两种方法比较,FQ-PCR方法敏感性和特异性均明显高(P均<0.001)。结论 FQ-PCR检测尿CMV-DNA对诊断活动性CMV感染有一定意义,量化结果便于治疗过程中进行连续的监测。