肺腺癌血清肿瘤标志物的筛选与鉴定

目的：应用蛋白质组学方法筛选肺腺癌患者血清中的肿瘤标志物。方法收集8例肺腺癌患者及8例正常人血清,剔除血清中白蛋白干扰后,得到血清可溶性总蛋白并采用双向电泳方法分离,获得血清蛋白质的双向电泳图谱,经PDQuest7.1凝胶图像软件分析找出表达差异的蛋白点,经基质辅助电离解析飞行时间质谱检测获得待测蛋白的肽质量指纹图谱,通过搜寻蛋白质数据库鉴定出肺腺癌血清中候选的肿瘤相关蛋白。结果建立了肺腺癌患者及正常人血清蛋白质表达谱。经软件匹配分析,共筛选出24个差异的蛋白点,从中选出差异显著的7个蛋白点进行质谱分析,经数据库查询分析,成功的鉴定出5种蛋白质：凝聚素、触珠蛋白、血清淀粉样蛋白A、血清白蛋白A链、纤维胶凝蛋白3。结论本研究建立了人肺腺癌患者及正常人血清的双向电泳图谱;鉴定出了若干肺癌相关蛋白质,为进一步寻找肺癌蛋白标志物奠定了基础。     

骨肉瘤与正常骨组织的蛋白质组学分析

目的 比较骨肉瘤与正常骨组织蛋白质组学的差异,探寻骨肉瘤特异性标志物.方法 分别提取5例骨肉瘤肿瘤标本和5例正常骨组织总蛋白,进行双向电泳,重复3次;银染、扫描后进行ImageMaster 2-DE Platinum 6.0软件分析以发现差异蛋白并对差异蛋白质点进行MALDI-TOE TOF质谱鉴定,获取肽质指纹图谱后应用NCBI数据库查找匹配蛋白质.结果 获得重复性较好的双向电泳银染图谱,骨肉瘤组织蛋白质点数约为(1 296±179),正常骨组织蛋白质点数约为(1108±162),明显差异的蛋白质点25个,其中10个被成功鉴定,6个蛋白质在骨肉瘤中表达上调,以谷胱甘肽转移酶升高最为突出;4个蛋白质在骨肉瘤中表达下降,以核苷二磷酸激酶下降最明显.结论 蛋白质组学的分析能成功发现骨肉瘤与正常骨组织之间的差异蛋白质,为寻找骨肉瘤特异标志物提供依据.     

紫杉醇抗胆管癌细胞差异表达蛋白的分离、质谱鉴定及生物信息学分析

目的:筛选紫杉醇诱导胆管癌细胞凋亡的相关蛋白并鉴定差异表达的蛋白点以寻找抗胆管癌药物作用的新靶点,筛选胆管癌新的肿瘤标志物,为胆管癌的早期诊断、疗效观察提供基础理论依据.方法:应用比较蛋白质组学技术对紫杉醇诱导凋亡的胆管癌QBC939细胞进行蛋白分离和蛋白表达谱差异分析,筛选并鉴定其相关蛋白并测定其胶内酶解后的肽指纹图谱.结果:本研究发现对照组和实验组蛋白点匹配率分别为(90.1±0.14)%和(87.1±0.22)%(P＜0.05),匹配后在干预组中共发现68个差异表达蛋白点,其中47个表达下调和21个上调;共获得28张PMF,初步质谱鉴定发现11个与凋亡相关的差异表达蛋白,其中6种蛋白表达上调,5种蛋白表达下调.结论:应用蛋白质组学技术分析所获得的68个差异蛋白质点可能在QBC939细胞发生凋亡过程中发挥重要作用;被鉴定出的11个与细胞凋亡相关的差异蛋白点提示紫杉醇是通过多个重要蛋白,发挥其诱导细胞凋亡的抗癌作用机制的.     

胆管癌的蛋白质组学分析

背景与目的:胆管癌是目前常见的消化道恶性肿瘤,早期诊断困难,总体5年生存率极低,所以改善预后的关键在于早期诊断.近年来,蛋白质组学的迅猛发展,为检测肿瘤标志物提供了一种新技术.本研究通过比较胆管癌组织与正常胆管组织的蛋白质组表达差异,寻找胆管癌相关的蛋白质,选择敏感的分子标志物.方法:运用蛋白质组学技术,对16例胆管癌患者的胆管癌组织和正常胆管组织进行胶内差异双向凝胶电泳(2-DE),选择差异表达超过2倍的蛋白质进行MALDI-TOF质谱分析和生物信息学分析.结果:成功建立胆管癌组织和正常组织的双向凝胶电泳图谱,胆管癌组织和正常胆管组织平均蛋白质斑点数分别为1 087和1 048,其中表达差异超过2倍的斑点共有32个,质谱分析和数据库检索共鉴定出18种蛋白质,包括衔接蛋白成纤维细胞生长因子受体底物2(fibroblast growth factor recptor substrate 2,FRS2)、连环蛋白(catenin,beta 1)、细胞外信号调节激酶(extracellular response kinase)等.从功能上分析,这些差异蛋白质与癌细胞的发生、增殖、分化、转移等相关.结论:胆管癌组织与正常胆管组织间有18种差异蛋白质可能为研究胆管癌的生物学行为提供新的分子标记物.     

大肠癌湿热蕴结证患者蛋白质差异性表达的研究

目的:研究大肠癌湿热蕴结证患者蛋白质差异性表达,从蛋白质水平上探讨大肠癌湿热蕴结证的本质.方法:采用双向凝胶电泳法分离30例大肠癌湿热蕴结证患者肿瘤组织和20名正常人结肠黏膜组织的蛋白质,用银染、PDQuest 2-DE软件分析,对部分差异蛋白质点进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)测定其胶内酶解后的肽质量指纹图谱,查询人类蛋白质公共数据库(NCBI、SWISSPROT),获得蛋白质的相关信息.结果:从组织中获得了分辨率和重复性均较好的双向电泳图谱,共筛选出22个差异蛋白点,其中有20个差异蛋白质得到鉴定,这些蛋白包括热休克蛋白、细胞骨架蛋白、抗氧化蛋白、信号转导相关蛋白、能量产生相关蛋白和血液蛋白等.大肠癌湿热蕴结证与对照组比较,有15个蛋白上调,5个蛋白下调.结论:建立了大肠癌湿热蕴结证的双向电泳图谱,提示大肠癌湿热蕴结证患者和正常人的蛋白质表达具有差异,这些蛋白质的差异分析对在蛋白质水平上研究湿热蕴结证本质提供了物质基础.     

蛋白质组学方法筛选早期肺鳞癌相关蛋白

目的:应用蛋白质组学技术筛选早期肺癌癌变相关蛋白.方法:利用双向凝胶电泳方法分离人早期肺鳞癌组织和相应癌旁正常组织总蛋白,选择差异蛋白质点进行质谱分析.免疫组织化学法验证部分差异蛋白质的表达差异.结果:肺鳞癌组织与癌旁正常组织的双向凝胶电泳图谱中平均蛋白质点数分别为626和602个.选择在癌组织中高表达的10个差异蛋白点进行质谱分析,最终鉴定为膜联蛋白1 (annexin-1, Anx-A1)、热休克蛋白27(heat shock protein 27, HSP27)等与细胞周期、信号转导等功能相关的蛋白质.免疫组织化学检测结果显示,Anx-A1和HSP27蛋白在肺鳞癌组织中的阳性表达率均显著增高(P<0.05).结论:蛋白质组学方法是一种应用于初步筛选早期肺癌相关蛋白的有效方法,所鉴定的蛋白为进一步筛选用于肺癌早期诊断及其治疗的分子标志物奠定了前期基础.     

促凋亡胱天蛋白酶衔接蛋白在前列腺癌组织中的表达研究

[目的]寻找前列腺肿瘤组织与正常组织的差异表达蛋白.[方法]运用蛋白质组学的方法分析前列腺癌组织和正常组织蛋白表达谱的差异,通过双向电泳筛选差异蛋白,质谱鉴定.[结果]成功构建了前列腺组织的双向电泳图谱,并筛选出一个差异蛋白,该差异蛋白在17例( 17/24,70.8％)前列腺癌组织中表达上调,仅在5例(5/24,20.8％)对照组中呈高表达,两者具有统计学差异(P=0.001).经鉴定,该差异蛋白为促凋亡胱天蛋白酶衔接蛋白(PACAP).[结论]促凋亡胱天蛋白酶衔接蛋白可以视作潜在的前列腺癌肿瘤标志物.     

小细胞肺癌细胞系SBC-5蛋白质组双向凝胶电泳图谱的建立

目的:建立人小细胞肺癌细胞系 SBC-5 蛋白质组双向凝胶电泳图谱.方法:用固相pH梯度双向凝胶电泳技术分离 SBC-5 细胞总蛋白质,凝胶银染显色,PDQuest图像分析系统分析,从凝胶中选取1个分离较好的蛋白质点,应用基质辅助激光解析离子化-飞行时间-质谱技术(MALDI-TOF-MS)和数据库搜索鉴定蛋白质.结果:获得了背景清晰、分辨率和重复性较好的双向凝胶电泳图谱,三块胶平均蛋白质点数为1116±64,匹配率达84%.蛋白质点分布以 PI 4-7、相对分子质量20 000-80 000范围内最多.1个蛋白点通过质谱分析和数据库检索得到了初步的鉴定.结论:建立了人小细胞肺癌细胞系SBC-5蛋白质组双向电泳参考图谱,为其蛋白质组学的进一步研究奠定了基础,也为人小细胞肺癌蛋白质组表达数据库的建立提供了有意义的数据.     

胰腺癌胰液蛋白质组学分析

目的:利用比较蛋白质组学方法鏊定胰腺癌早期诊断的蛋白标志.方法:采用双向电泳(2-DE)分离比较9个胰腺导管腺癌患者和9个非胰腺癌患者的胰液蛋白质表达谱,用肤质量指纹图谱(PMF)为基础的基质辅助激光解析离子化飞行时间串联质谱(MALDF-TO-F-MS/MS)对差异蛋白进行鉴定.采用蛋白质印迹方法进一步验证蛋白质MMP-9和DJ-1在胰液中的表迭.结果:2-DE显示共24个蛋白质点出现>2.0倍的表达差异,上调14个,下调10个.蛋白质印迹检测显示在胰腺癌胰液中高表达MMP-9和DJ-1蛋白.结论:MMP-9和DJ-1可能成为通过内镜下逆行胰胆管造影术(ERCP)筛查胰腺癌高危患者及早期诊断胰腺癌的潜在的胰液肿瘤标志.     

Common bile duct stones in non-dilated bile ducts? An ultrasound study

In a consecutive series of 870 patients having cholecystectomy performed by the laparoscopic technique in a single surgical unit, prospective data collection has permitted analysis of the relationship between common bile duct (CBD) diameter, as measured pre-operatively by ultrasound (US) examination, and the frequency of CBD stones. Overall, 85 patients (9.8%) have been shown to have CBD stones; the interval frequency for CBD size 0–4, 4.1–6, 6.1–8, 8.1–10 and > 10mm, was 3.9, 9.4, 28, 32 and 50%, respectively. Because most patients have small ducts (736 with CBD size < 6.1 mm) almost half (42) of those with CBD stones came from this group. In reporting CBD size as ‘not dilated', radiologists should remind clinicians that this does not equate with ‘no CBD stones'.     

胆管癌组织及胆汁中端粒酶活性的检测及意义

目的：检测胆管癌组织和胆汁中的端粒酶活性，以研究与端粒酶与胆管癌的关系及对胆管癌的诊断意义。方法：用PCR—ELISA方法检测20例胆管癌的癌组织和胆汁中端粒酶活性，同时用相同的方法检测20例正常胆管组织和胆汁中的端粒酶活性以作对照。结果：20例胆管癌组织中，端粒酶活性阳性为80％（16／20），胆汁中端粒酶活性阳性率75％（15／20）。正常胆管组织端粒酶活性阳性表达率为0（0／20），胆汁中端粒酶活性阳性率为0（0／20）。结论：端粒酶可能参与了胆管癌的发生发展过程，检测胆汁中端粒酶活性可有助于胆管癌的诊断。     

Markers of bile duct tumors

Biliary tract carcinomas are relatively rare,representing less than 1%of cancers.However,their incidence has increased in Japan and in industrialized countries like the USA.Biliary tract tumors have a poor prognosis and a high mortality rate because they are usually detected late in the course of the disease;therapeutic treatment options are often limited and of minimal utility.Recent studies have shown the importance of serum and molecularmarkers in the diagnosis and follow up of biliary tract tumors.This review aims to introduce the main features of the most important serum and molecular markers of biliary tree tumors.Some considerable tumor markers are cancer antigen 125,carbohydrate antigen 19-9,carcinoembryonic antigen,chromogranin A,mucin 1,mucin 5,alpha-fetoprotein,claudins and cytokeratins.     

胆汁酸与肿瘤的相关性

近年来的研究表明,胆汁酸与肿瘤的发生发展密切相关.胆汁酸可以通过氧化应激、慢性炎症、核受体信号转导等途径影响肿瘤的形成过程,对肿瘤细胞生长、凋亡产生一定影响.     

Imaging diagnosis of bile duct cystadenocarcinoma

Two patients with surgically resected biliary cystadenocarcinoma are presented. Both were asymptomatic and the cancer was incidentally found by ultrasonography (US). In the first case, a huge multilocular tumor (21 X 15 cm in diameter) having many papillary projections and septa within it and small daughter lesions occupied both the right anterior and left medial areas of the liver. They were clearly demonstrated on US and computed tomography (CT). Angiography disclosed tumor vessels in some area of the lesion, these features strongly suggested cystadenocarcinoma. The second case had a solid mass (7 X 7 cm) in the left hepatic lobe, in which many septal structures within the lesion were seen on enhanced CT and light dot like stains were recognized on angiography. The former findings coincided with the internal gross feature of the resected specimen. Both patients are doing well 8 months and 1 year and 6 months after operation, respectively.     

Neuroma of the common bile duct

Two cases of neuroma of the common bile duct (CBD) associated with jaundice and cholangitis both 15 years after cholecystectomy are presented. The surgical treatment, excision of the diseased CBD, followed by Roux-en-Y biliary drainage in one case and excision of the tumor with T-tube drainage in the other, was curative. A review of the world literature revealed 20 prior cases of CBD neuromas, 19 associated with jaundice. None was diagnosed prior to operation or autopsy. Mortality of treatment was 15% and all deaths were associated with a failure to excise the neuroma.