miR-1271-5p在胃癌组织的表达及对胃癌AGS细胞生物学行为的影响

目的 探讨miR-1271-5p在胃癌组织和细胞中的表达及其对胃癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法 收集2011年6月至2014年6月广西医科大学附属肿瘤医院90例手术切除胃癌组织及相应癌旁组织。采用qRT-PCR法检测胃癌组织及相应癌旁组织，人胃癌细胞系（SGC-7901、MGC-803、AGS）和人正常胃黏膜上皮细胞系GES1中miR-1271-5p的表达情况。利用瞬时转染法将miR-1271-5p mimics（过表达miR-1271-5p组）和miR-NC（阴性对照组）分别转染胃癌AGS细胞，建立过表达miR-1271-5p的胃癌AGS细胞系，然后采用CCK-8法检测转染后的胃癌AGS细胞增殖能力，平板克隆形成实验检测细胞克隆形成能力，Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力。结果 miR-1271-5p在胃癌组织和胃癌细胞（SGC-7901、MGC-803、AGS）中的表达均低于相应癌旁组织及人正常胃黏膜上皮GES1细胞（均P<0.01）。与阴性对照组相比，过表达miR-1271-5p组胃癌AGS细胞增殖活力降低（P<0.01），细胞集落形成数减少（P<0.01），迁移和侵袭细胞数量亦减少（P<0.01）。结论 miR-1271-5p在胃癌组织和细胞中低表达，上调miR-1271-5p可抑制胃癌AGS细胞的增殖、迁移和侵袭。     

MiR-144-5p在胃癌中的表达及其生物学功能

摘 要：［目的］ 探讨miR-144-5p在胃癌组织和细胞中的表达及生物学功能。［方法］ 采用qRT-PCR 检测miR-144-5p在胃癌组织和细胞系中的表达水平,并验证miR-144-5p mimics的转染效率;分别采用CCK-8法、克隆形成实验、流式细胞仪、Transwell实验检测miR-144-5p mimics对胃癌细胞AGS和HGC-27增殖、克隆形成能力、细胞周期和侵袭能力的影响。［结果］ MiR-144-5p在胃癌组织的表达水平明显低于癌旁组织（0.607±0.257 vs 1.000±0.360,t=5.616,P<0.001）。MiR-144-5p低表达与胃癌患者的肿瘤浸润深度、淋巴结转移、远处转移、TNM分期显著相关（P<0.05）。MiR-144-5p在胃癌细胞SNU-1、HGC-27、SGC-7901、KATO Ⅲ及AGS中表达水平显著低于正常人胃黏膜上皮细胞GES-1（F=12.17,P<0.001）。转染miR-144-5p mimics后,AGS（t=4.902,P=0.001）和HGC-27（t=4.154,P=0.003）细胞中miR-144-5p的表达水平显著增高;AGS和HGC-27细胞的增殖能力、克隆形成能力、侵袭能力均被抑制（P<0.05）,G1期细胞比例增加、而S期的细胞比例减少（P<0.05）。［结论］ MiR-144-5p在胃癌组织和细胞中表达降低,与胃癌患者的TNM分期较晚和胃癌细胞恶性程度较高有关,提示miR-144-5p在胃癌的恶性进程中起重要作用。     

miR-221-5p 通过靶向调控 ALDH1A2 对胃癌细胞生物学 行为的影响

目的 探讨 miR-221-5p 与醛脱氢酶 1 家族成员 A2(ALDH1A2)的靶向关系及其对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭和上皮 间质转化(EMT)的影响。 方法 收集 2020 年 7 月至 2022 年 7 月于岳池县人民医院接受根治性胃癌切除术的 50 例胃癌患者的 胃癌组织及其癌旁正常组织标本,体外培养的细胞株包括人正常胃黏膜上皮细胞系 GES-1 和人胃癌细胞系 BGC-803、AGS、 SGC-7901、BGC-823、HGC-27。 实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测组织和细胞中 miR-221-5p、ALDH1A2 mRNA 的 表达,Pearson 相关分析胃癌组织中二者的相关性,分析 miR-221-5p 表达与患者临床病理参数的关系;生物信息学预测和双 荧光素酶实验验证 miR-221-5p 对 ALDH1A2 的靶向调控作用;将 HGC-27 细胞分为对照组、抑制物-NC 组、miR-221-5p 抑制 物组、模拟物 NC 组、miR-221-5p 模拟物组、miR-221-5p 模拟物+pcDNA3. 1 组和 miR-221-5p 模拟物+pcDNA3. 1-ALDH1A2 组,转染相应的质粒;分别采用 MTT 法、克隆形成实验、Transwell 小室实验、划痕实验、流式细胞术检测细胞的增殖、侵袭、迁 移、凋亡及细胞周期分布情况;蛋白质印迹法分析细胞中 EMT 相关蛋白表达情况。 结果 miR-221-5p 在胃癌组织和细胞中显 著高表达,ALDH1A2 mRNA 表达显著下调,二者在胃癌组织中呈明显负相关(P<0. 05);miR-221-5p 表达与胃癌患者的 TNM 分期、肿瘤分化程度、淋巴结转移有明显相关性(P<0. 05);miR-221-5p 靶向抑制 ALDH1A2 表达;与 anti-miR-NC 组相比, anti-miR-221-5p 组细胞的 OD 值、划痕愈合率、N-cadherin、Vimentin 蛋白、miR-221-5p 表达水平、S 期细胞比例明显下降, E-cadherin、α-catenin、ALDH1A2 蛋白表达水平、G0 / G1 期细胞比例明显升高,单克隆形成、侵袭数目明显减少(P<0. 05);与 miR-NC 组相比,miR-221-5p 组细胞获得与上述相反的结果;上调 ALDH1A2 表达能够逆转 miR-221-5p 对 HGC-27 细胞恶 性生物学行为的影响。 结论 miR-221-5p 过表达可能通过靶向下调 ALDH1A2 表达促进胃癌细胞的增殖、迁移、侵袭、EMT 和 细胞周期进程,抑制细胞凋亡。     

miR-135b-5p靶向CMTM3调节胃癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力

目的:探究miR-135b-5p通过靶向CMTM3基因调节胃癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力。方法:采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测胃癌组织和细胞系中CMTM3和miR-135b-5p的表达水平。利用慢性病毒转染技术将miR-135b-5p inhibitor转染至胃癌细胞，RT-qPCR检测转染效率；CCK-8比色法和Transwell实验检测转染后细胞的增殖、侵袭和迁移能力；Western blotting 检测转染后细胞中CMTM3蛋白表达水平。利用生物信息学网站预测miR-135b-5p潜在靶基因CMTM3，利用荧光素酶实验进行验证。结果:RT-qPCR检测结果表明，miR-135b-5p在胃癌组织和胃癌细胞株中呈现高表达，CMTM3在胃癌组织中呈现低表达（P<0.01）。RT-qPCR检测转染效率,结果显示，转染miR-135b-5p inhibitor敲低了miR-135b-5p的表达水平（P<0.001）；CCK-8和Transwell实验结果表明，敲低miR-135b-5p后抑制了胃癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力（P<0.01），Western blotting实验结果表明，敲低miR-135b-5p促进了CMTM3蛋白的表达。生物信息学网站预测CMTM3为miR-135b-5p的潜在靶基因，荧光素酶实验证实了miR-135b-5p直接靶向胃癌细胞中CMTM3基因（P<0.01）。结论:miR-135b-5p作为重要的调节因子，反向调节抑癌靶基因CMTM3，从而促进胃癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力。     

miR-372-3p 在膀胱癌组织中的表达及其对膀胱癌细胞增殖、迁移与侵袭的影响

目的：检测miR-372-3p 在膀胱癌组织和转染miR-372-3p mimics 膀胱癌细胞中的表达,研究miR-372-3p 对膀胱癌5637 和T24 细胞增殖、迁移与侵袭的影响。方法：采集2016 年3 月至2017 年1 月武汉中心医院收治的6 例膀胱癌患者癌及癌旁组织（距离肿瘤边缘>5 cm）,qPCR检测膀胱癌及癌旁组织miR-372-3p 表达。采用脂质体转染法将miR-372-3p mimics 或者miRNC转入膀胱癌5637 和T24 细胞。用qPCR和Western blotting 检测转染miR-372-3p mimics 和miR-NC膀胱癌细胞miR-372-3p 和ATAD2 mRNA和蛋白E-cadherin、N-cadherin 蛋白的表达,流式细胞术检测细胞周期分布,MTT法和集落形成实验检测细胞增殖和集落形成能力,划痕实验和Transwell 侵袭实验检测细胞的迁移和侵袭能力。结果：膀胱癌组织miR-372-3p mRNA的表达显著低于癌旁组织（0.65±0.56 vs 1.76±0.34,P<0.01）。和转染miR-NC膀胱癌细胞相比,转染miR-372-3p mimics 膀胱癌细胞的miR-372-3p mRNA表达显著增加,ATAD2 mRNA和蛋白的表达显著降低,E-cadherin 蛋白表达上调,N-cadherin 蛋白表达下调,细胞周期明显阻滞,细胞集落形成和增殖能力显著降低,细胞迁移数和侵袭数减少。结论：miR-372-3p 的低表达可能与膀胱癌的发生发展有关,其通过靶向调控ATAD2 抑制膀胱癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,可能成为膀胱癌生物治疗的新靶标。     

miR-590-5p介导lncRNA SNHG1信号影响卵巢癌细胞增殖的实验研究

目的:探讨miR-590-5p在卵巢癌组织中的表达情况以及其对卵巢癌细胞增殖的影响及作用机制。方法:Real-time PCR和双荧光素酶实验确定miR-590-5p与lncRNA SNHG1之间的调控作用。Real-time PCR检测卵巢癌、癌旁组织以及卵巢癌细胞中miR-590-5p的表达。分别采用NC mimic或者miR-590-5p mimic转染两株卵巢癌细胞，CCK-8检测各组细胞的增殖情况。此外，Real-time PCR检测两株细胞中SOX2、RECK和YAP1的表达。结果:Real-time PCR结果显示下调SNHG1后miR-590-5p的表达显著升高。双荧光素酶结果显示转染miR-590-5p mimic和野生型SNHG1片段的细胞中荧光素酶的活性显著降低。此外，Real-time PCR结果显示miR-590-5p在卵巢癌组织中的表达水平显著低于癌旁组织。CaOV3、OV-90细胞中miR-590-5p的表达水平明显低于其他卵巢癌细胞。转染miR-590-5p mimic显著上调了CaOV3、OV-90细胞中miR-590-5p的表达并且抑制了这两株细胞的增殖，同时抑制了两株细胞中SOX2、RECK和YAP1的表达。结论:miR-590-5p的低表达与卵巢癌的进展密切相关，miR-590-5p能够介导SNHG1信号并且通过对其下游靶基因的调控抑制卵巢癌细胞的增殖。     

LncRNA PVT1抑制miR-497-5p表达调控子宫内膜癌细胞增殖和迁移侵袭的分子机制研究

目的:研究长链非编码RNA PVT1和miR-497-5p在子宫内膜癌组织中的表达以及其对癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响，并探讨其机制。方法:运用实时荧光定量法测定子宫内膜癌组织、癌旁正常组织及子宫内膜癌细胞HEC-1-B中PVT1和miR-497-5p的表达。用脂质体法将siRNA-PVT1和miR-497-5p mimic转染至子宫内膜癌细胞HEC-1-B；MTT法、Transwell法检测HEC-1-B细胞的增殖、迁移和侵袭。Targetscan在线分析网站预测和双荧光素酶报告基因实验验证LncRNA PVT1和miR-497-5p的靶向关系。将siRNA-PVT1和miR-497-5p inhibitor共转染至HEC-1-B细胞，MTT法、Transwell法检测HEC-1-B细胞的增殖、迁移和侵袭。结果:与癌旁正常组织相比，子宫内膜癌组织中PVT1表达显著上调，miR-497-5p表达显著下调（P<0.05）。沉默PVT1、过表达miR-497-5p均可抑制HEC-1-B细胞的增殖、迁移和侵袭（P<0.05）。PVT1靶向miR-497-5p。抑制miR-497-5p的表达可逆转沉默PVT1对HEC-1-B细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用。结论:沉默PVT1可抑制子宫内膜癌细胞增殖、迁移和侵袭，其机制可能与PVT1靶向miR-497-5p有关，将可为子宫内膜癌的靶向治疗提供新靶点。     

miR-299-5p通过靶向SOX4调控胃癌细胞的增殖与凋亡

目的:探讨miR-299-5p对胃癌细胞增殖与凋亡的作用及相关机制。方法:采用RT-qPCR法检测胃癌细胞（SGC-7901、BGC-823）及正常胃黏膜上皮细胞（RGM-1）中miR-299-5p的表达差异。利用生物信息学方法预测miR-299-5p的靶基因，并使用荧光素酶报告实验验证miR-299-5p与SOX4的靶向关系。分别将miR-299-5p mimics和pcDNA3.1-SOX4转染至胃癌细胞中构建过表达模型，采用CCK-8法、流式细胞仪检测细胞增殖、凋亡情况。Western blot检测靶基因SOX4及相关蛋白（Bcl-2、Bax）表达水平。结果:胃癌细胞中miR-299-5p呈低表达，SOX4呈过表达；miR-299-5p 过表达可显著下调SOX4蛋白水平；miR-299-5p与SOX4的mRNA 3' UTR区序列配对互补，SOX4是miR-299-5p的一个潜在靶作用结合位点；miR-299-5p过表达显著降低SOX4野生型荧光素酶活性，抑制胃癌细胞增殖，诱导细胞凋亡，同时可下调SOX4、Bcl-2水平，上调Bax蛋白表达水平；上调SOX4可逆转miR-299-5p过表达对胃癌细胞的作用效果。结论:miR-299-5p在胃癌细胞中呈低表达，其通过下调SOX4表达抑制细胞增殖，诱导细胞凋亡。     

miR-9-5p靶向FGF9抑制胃癌细胞迁移侵袭的作用机制

目的:探讨miR-9-5p在胃癌组织中的表达及对胃癌细胞株SGC7901、AGS细胞迁移和侵袭影响的作用机制。方法:real-time PCR和Western blot检测癌旁组织、胃癌组织及其细胞系中miR-9-5p和FGF9的表达；Transwell小室检测过表达miR-9-5p或敲除FGF9对SGC7901和AGS细胞迁移和侵袭能力的影响；TargetScan在线分析、双荧光素酶报告基因和Western blot实验验证miR-9-5p和FGF9的靶向关系；将转染后的SGC7901细胞分为对照（NC）组和实验（miR-9-5p）组接种于裸鼠右侧腋窝皮下，观察记录裸鼠成瘤情况并绘制生长曲线。结果:与癌旁组织相比，胃癌组织及其细胞系中miR-9-5p表达下调、FGF9表达上调（P＜0.05）；过表达miR-9-5p或敲除FGF9能抑制SGC7901、AGS细胞迁移和侵袭；TargetScan在线分析、双荧光素酶报告基因和Western blot实验表明miR-9-5p能调控FGF9表达；miR-9-5p组细胞成瘤速度较NC组慢（P＜0.05），肿瘤体积及重量小（P＜0.05）。结论:miR-9-5p在胃癌组织中表达下调，过表达miR-9-5p可抑制FGF9表达，从而抑制胃癌细胞的迁移和侵袭，减缓肿瘤生长。     

miR-1180-5p通过激活CDKN1A基因表达抑制前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的：研究微小RNA-1180-5p（miR-1180-5p）对前列腺癌细胞株VCAP和LNCaP恶性生物行为的影响及可能的作用机制。方法：合成dsControl （dsControl 组）和miR-1180-5p（miR-1180-5p 组）,分别转染至两个前列腺癌细胞株VCAP和LNCaP。采用qPCR 和Western blotting 分析转染后各组细胞CDKN1A、Cyclin D1 和CDK6 mRNA及蛋白的表达变化,采用流式细胞术、MTT法、平板克隆实验和Transwell 实验分别检测细胞周期分布、增殖活力、克隆形成能力、细胞迁移和侵袭能力。结果：qPCR结果显示,相比dsControl,转染miR-1180-5p 后VCAP 和LNCaP 细胞中CDKN1A mRNA 表达明显上调(P<0.01);Cyclin D1 和CDK6 mRNA表达明显下调(P<0.05 或P<0.01)。Western blotting 与qPCR 结果相符。转染miR-1180-5p 后VCAP和LNCaP 位于G0/G1 期的细胞比例增加(P<0.01),而位于S 期和G2/M期的细胞比例减少(P<0.05),细胞周期被阻滞在G0/G1 期。转染miR-1180-5p 后,两种前列腺癌细胞增殖活力较dsControl 组明显降低(P<0.05),miR-1180-5p 组两种细胞的克隆数量明显较少（P<0.01）,同时miR-1180-5p 组两组细胞迁移和侵袭能力均下降（P<0.01）。结论：miR-1180-5p 能显著激活前列腺癌细胞中CDKN1A基因的表达,从而抑制前列腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭等恶性生物行为。     

上调结肠癌间充质干细胞中miR-93-5p表达抑制结肠癌细胞增殖及促进凋亡的机制探讨

目的:观察miR-93-5p上调的结肠癌间充质干细胞（colon cancer mesenchymal stem cell,CCMSC）对结肠癌细胞增殖、凋亡的影响,并初步探讨其机制。方法:以贴壁细胞培养法抽提癌组织CCMSC,从正常结肠组织抽提结肠间充质干细胞（colon mesenchymal stem cell,CMSC）,观察miR-93-5p及PD-L1的表达差异;以拟似剂上调CCMSC中miR-93-5p表达,CCK8法及流式细胞术检测CCMSC诱导的SW480细胞增殖及凋亡变化。结果:miR-93-5p在结肠癌细胞株中表达低于正常结肠上皮细胞（P＜0.001）,PD-L1 mRNA和PD-L1蛋白在结肠癌细胞株中表达高于正常结肠上皮细胞（P＜0.001,P＜0.001）;miR-93-5p在CCMSC组中表达明显低于CMSC（P＜0.001）;与SW480细胞比较,给予CCMSC干预后SW480细胞存活率上升（P＜0.001）,凋亡率下降（P＜0.05）,与SW480细胞或CCMSC/SW480细胞比较,给予转染miR-93-5p mimics CCMSC干预的SW480细胞存活率下降（P＜0.01,P＜0.001）,凋亡率上升（P＜0.05,P＜0.01）。结论:上调CCMSC中miR-93-5p通过靶向调控PD-L1抑制结肠癌细胞增殖,促进凋亡。     

miR-140-5p靶向HDAC7抑制非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制探讨

目的:探讨miR-140-5p靶向组蛋白去乙酰化酶7(histone deacetylase 7,HDAC7)调控非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）细胞增殖、迁移和侵袭的机制。方法:采用qRT-PCR检测人NSCLC组织及癌旁组织中miR-140-5p的表达水平。用miR-140-5p mimic（模拟物）及miR-140-5p NC（阴性对照）转染A549细胞,CCK8法及克隆形成实验检测细胞增殖能力,划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,双荧光素酶报告基因实验验证miR-140-5p与HDAC7的靶向关系,Western blot检测各组细胞HDAC7及PI3K、p-PI3K、AKT、和p-AKT表达水平。结果:与癌旁组织相比,miR-140-5p在NSCLC组织中的表达水平明显减低,差异有统计学意义（P＜0.01）。与miR-140-5p NC组相比,过表达miR-140-5p后A549细胞在48和72 h的增殖能力明显降低（P＜0.05）;且细胞克隆形成、细胞迁移和侵袭能力均降低（均P＜0.05）,PI3K/AKT信号通路中关键分子p-PI3K和p-AKT蛋白水平明显降低（均P＜0.05)。生物信息学预测HDAC7可能是miR-140-5p的一个靶基因,且双荧光素酶报告结果证实miR-140-5p直接靶向调节HDAC7表达。结论:miR-140-5p通过靶向HDAC7表达进而抑制NSCLC A549细胞的增殖、迁移和侵袭,其机制可能与通过抑制PI3K/AKT信号通路的激活有关。     

长链非编码RNA TUG1调控miR-138-5p对骨肉瘤细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响

目的:探讨长链非编码RNA(LncRNA)牛磺酸调节基因1(TUG1)调控miR-138-5p对骨肉瘤细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响。方法:在骨肉瘤细胞U-2OS中转染TUG1 siRNA和siRNA control，qRT-PCR测定干扰效果，MTT测定增殖，流式细胞术测定凋亡，Transwell小室测定细胞侵袭和迁移。starBase预测TUG1与miR-138-5p有结合位点，双荧光素酶报告载体鉴定靶向调控关系。将miR-138-5p抑制物和TUG1 siRNA共转染至骨肉瘤细胞中，测定干扰miR-138-5p对下调TUG1的骨肉瘤细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响。结果:转染TUG1 siRNA后的骨肉瘤细胞中TUG1表达水平明显低于转染siRNA control后的细胞（P<0.05）。下调TUG1后的骨肉瘤细胞增殖、侵袭和迁移能力降低，细胞凋亡率升高（P<0.05）。野生型TUG1荧光素酶报告载体与miR-138-5p共转染后细胞荧光素酶活性降低（P<0.05）。与转染TUG1 siRNA的细胞比较，miR-138-5p抑制物和TUG1 siRNA共转染后的细胞增殖、侵袭和迁移能力升高，细胞凋亡率降低（P<0.05）。结论:下调LncRNA TUG1表达通过调控miR-138-5p表达抑制骨肉瘤细胞增殖、侵袭、迁移能力并诱导细胞凋亡。     

CircCSNK1G1调节miR-381-3p/BRD4轴对喉癌细胞恶性生物学行为的影响

目的:探讨CircCSNK1G1调节miR-381-3p/溴结构域蛋白4(BRD4)轴对喉癌(laryngeal cancer, LC)细胞恶性生物学行为的影响。方法:实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、western blot分别检测60例LC患者癌组织、癌旁组织及喉上皮细胞NP69及人LC细胞Hep-2、Tu212、M4E中CircCSNK1G1、miR-381-3p、BRD4蛋白表达;将人喉癌Hep-2细胞分为：control组(正常培养)、si-NC组(转染si-NC)、si-CircCSNK1G1组(转染si-CircCSNK1G1)、si-CircCSNK1G1+inhibitor-NC组(si-CircCSNK1G1和inhibitor-NC共转染)、si-CircCSNK1G1+miR-381-3p inhibitor组(si-CircCSNK1G1和miR-381-3p inhibitor共转染);RT-qPCR检测Hep-2细胞中CircCSNK1G1、miR-381-3p的表达水平;MTT法检测Hep-2细胞增殖;划痕实验检测Hep-2细胞迁移;Transwel...     

miR-142-5p对人上皮性卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨miR-142-5p靶向PTEN-PI3K/Akt信号调控人上皮性卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的具体机制。方法:Real-time PCR检测miR-142-5p在人卵巢癌组织及各卵巢癌细胞系中的表达情况。利用MTT、细胞克隆形成实验观察miR-142-5p对SKOV3细胞增殖活力的影响；Caspase-3活力检测miR-142-5p对SKOV3细胞凋亡情况；信号通路抑制剂处理及Western blot检测miR-142-5p、PTEN与PI3K/Akt信号通路的关系及PI3K/Akt信号下游基因Akt、FOXO1、cyclin D1等的表达情况；Luciferase实验验证miR-142-5p和PTEN 3' UTR的结合。结果:人上皮性卵巢癌组织及其细胞系中miR-142-5p表达显著增加（P<0.05)。与对照组相比，SKOV3细胞转染miR-142-5p mimics后活细胞数量显著增加，增殖能力显著上升，细胞凋亡下降（P<0.05)；与之相反的，转染miR-142-5p inhibitor后SKOV3细胞增殖能力下调，凋亡增加。信号通路抑制剂处理显示miR-142-5p过表达激活PI3K/Akt信号通路。Luciferase实验显示miR-142-5p与PTEN 3' UTR直接结合。与对照组相比，miR-142-5p mimics组PTEN表达显著降低，p-Akt蛋白表达则显著上调（P<0.05），同时过表达PTEN后p-Akt表达则显著降低（P<0.05）。结论:miR-142-5p通过抑制PTEN基因表达活化PI3K/Akt信号通路，促进人上皮性卵巢癌组织及SKOV3细胞增殖存活，抑制细胞凋亡。     

MiR-101 inhibits cell growth and tumorigenesis of Helicobacter pylori related gastric cancer by repression of SOCS2

Several microRNAs (miRNA) have been implicated in H. pylori related gastric cancer (GC). However, the molecular mechanism of miRNAs in gastric cancer has not been fully understood. In this study, we reported that miR-101 is significantly down-regulated in H. pylori positive tissues and cells and in tumor tissues with important functional consequences. Ectopic expression of miR-101 dramatically suppressed cell proliferation and colony formation by inducing G1-phase cell-cycle arrest. We found that miR-101 strongly reduced the expression of SOCS2 oncogene in GC cells. Similar to the restoring miR-26 expression, SOCS2 down-regulation inhibited cell growth and cell-cycle progression, whereas SOCS2 over-expression rescued the suppressive effect of miR-101. Mechanistic investigations revealed that miR-101 suppressed the expression of c-myc, CDK2, CDK4, CDK6, CCND2, CCND3, and CCNE2, while promoted tumor suppressor p14, p16, p21 and p27 expression. In clinical specimens, SOCS2 was over-expressed in tumors and H. pylori positive tissues and its mRNA levels were inversely correlated with miR-101 expression. Taken together, our results indicated that miR-101 functions as a growth-suppressive miRNA in H. pylori related GC, and that its suppressive effects are mediated mainly by repressing SOCS2 expression.     

胶质瘤组织中miR-205-5p的表达及其对胶质瘤细胞恶性生物学行为的影响

目的 探讨miR-205-5p在胶质瘤中的表达以及对胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭的调控及可能的作用机制。方法 收集2018 年6 月至2019 年12 月于郴州市第一人民医院诊治的58 例新发神经胶质瘤患者的胶质瘤组织和癌旁组织标本。将miR-205-5p mimic转染至U251和T98G细胞，构建过表达细胞模型。采用RT-qPCR检测胶质瘤组织及细胞模型中miR-205-5p的表达水平并分析其表达水平与患者临床病理特征的关系，CCK-8法、平板克隆形成实验、划痕实验和Transwell小室实验分别检测胶质瘤细胞的增殖、克隆形成、迁移和侵袭情况，Western blot检测过表达miR-205-5p对Runt相关因子2（runt-related gene 2，Runx2）蛋白表达水平的影响；用双荧光素酶报告基因实验检测miR-205-5p与Runx2的靶向关系。结果 miR-205-5p在胶质瘤组织和胶质瘤细胞U251和T98G中低表达（均P＜0.01），其表达水平与肿瘤大小和病理分级有关（均P＜0.05）。过表达miR-205-5p可以显著抑制胶质瘤细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力（均P＜0.05）。双荧光素酶报告实验证实Runx2基因是miR-205-5p的潜在靶基因。过表达miR-205-5p可明显下调胶质瘤细胞中Runx2蛋白的表达水平（P＜0.001）。结论 miR-205-5p在胶质瘤中低表达，过表达miR-205-5p可抑制胶质瘤细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭，作用机制可能与靶向调控Runx2有关。     

miR-124-3p靶向FOXQ1抑制宫颈鳞状细胞癌细胞增殖和侵袭的机制研究

目的:探讨miR-124-3p在宫颈鳞状细胞癌（cervical squamous cell carcinoma,CSCC）中的表达水平及对细胞增殖、侵袭能力的影响，初步阐明miR-124-3p对癌基因叉头框蛋白Q1(forkhead box Q1,FOXQ1)的靶向调控机制。方法:收集2015年1月至2017年12月手术切除的CSCC组织标本61份,分别应用RT-qPCR和IHC检测癌组织和癌旁组织中miR-124-3p和FOXQ1蛋白的表达水平，分析miR-124-3p和FOXQ1 mRNA表达的相关性；RT-qPCR检测miR-124-3p和FOXQ1 mRNA在人CSCC细胞株（SiHa和CaSki）及人宫颈永生化鳞状细胞株（Ect1/E6E7）中的表达水平；应用miR-124-3p模拟物转染CaSki细胞，分别采用CCK-8法和Transwell小室检测miR-124-3p对细胞增殖和侵袭能力的影响；采用Western blot检测miR-124-3p对FOXQ1、E-cadherin和Vimentin蛋白表达水平的影响；最后，应用双荧光素酶报告基因验证miR-124-3p对FOXQ1的靶向调控作用。结果:miR-124-3p在CSCC组织的表达水平低于癌旁组织（P＜0.05），在人CSCC细胞株（SiHa和CaSki）中的表达水平也均低于人宫颈永生化鳞状细胞株（Ect1/E6E7）（P＜0.05）；与转染阴性对照细胞比较，转染miR-124-3p模拟物的CaSki细胞的增殖和侵袭能力明显受到抑制（P＜0.05）。FOXQ1 mRNA和蛋白在CSCC组织中的表达水平均显著高于癌旁组织(P＜0.05)，相关性分析显示，FOXQ1 mRNA的表达水平与miR-124-3p呈负相关(r=-0.882,P＜0.05)。在转染miR-124-3p模拟物后，CSCC细胞株CaSki中FOXQ1和Vimentin蛋白表达水平均降低，而E-cadherin蛋白表达增高。双荧光素酶报告基因试验确认miR-124-3p可通过与FOXQ1 mRNA的3' UTR直接结合，靶向调控FOXQ1的表达。结论:miR-124-3p在CSCC中表达下调，其通过靶向调控FOXQ1的表达影响细胞的上皮间质转化状态，从而影响CSCC细胞的增殖和侵袭。     

lncRNA TPTEP1通过抑制miR-129-5p影响膀胱癌T24细胞的增殖和侵袭

目的:分析长链非编码RNA(long-chain non-coding RNA,lncRNA) TPTEPl在膀胱癌组织和细胞的表达,观察其对膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响及其作用机制.方法:收集2017年8月至2019年10月在武汉市东西湖人民医院泌尿外科接受手术治疗的43例膀胱癌患者的癌与癌旁组织标本,采用实时荧光定量...