高等真核生物中mRNA稳定性的控制

对于高等真核生物的mRNA来说，尤其是寿命较短的mRNA来说，它的丰度、半衰期及基因表达之间的联系是非常重要的，因为对于这些mRNA来说，它们半衰期的微弱变化会在短时间内使其丰度发生1000倍甚至更大的变化，所以探讨mRNA稳定性控制机理对于研究细胞生长、分化、肿瘤的发生以及抗体对各种应激情况发生的反应有重要意义。     

大鼠脓毒性休克时肝α1—肾上腺素能受体的变化及其机制

在结扎和刺穿盲肠诱导的大鼠脓毒性休克模型上，发现休克大鼠发生两种代谢变化：早期（９ｈ）高代谢（高血糖）和晚期（１８ｈ）低代谢（低血搪）。３Ｈ－哌唑结合试验显示：早期脓毒性休克时，肝细胞质膜α_１－肾上腺素能受体〔α_１－ＡＲ）最大结合容量增加３５％。晚期休克时下降３０％。Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ、核ｒｕｎｏｆｆ测定显示：早期脓毒性休克大鼠α_１ｂ－肾上腺素能受体（α_１ｂ－ＡＲ）ｍＲＮＡ转录水平比对照组增加３４．７％，其ｍＲＮＡ合成相对比率增加５１．３％；晚期脓毒性休克大鼠α_１－ＡＲｍＲＮＡ转录水平比对照组降低２８．１％，其ｍＲＮＡ合成相对比率减少２４．９％，而ｍＲＮＡ半衰期无明显改变。提示脓毒性休克时α_１－ＡＲ的上调和下调的时相性变化也发生于转录水平，肝脏α_１ｂ－ＡＲ的变化可能是休克时糖代谢紊乱的重要机制之一     

转化生长因子α，β在人结、直肠癌、癌旁及正常肠粘膜组织中mRNA表达及其基因变化的分析

转化生长因子α，β（ＴＧＦ－α，β）分别作为正负自分泌生长调控因子，其在结、直肠癌的发生和发展过程中具有重要作用。本研究采用Ｄｏｔ，Ｎｏｒｔｈｅｒｎ及Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交等分子生物学方法，探讨了１２例人结、直肠癌组织、癌旁及正常肠粘膜组织中ＴＧＦ－α，βｍＲＮＡ表达程度及其基因变化。研究发现，ＴＧＦ－αｍＲＮＡ的表达由高到低依次为癌、癌旁及正常肠粘膜组织，但癌组织及癌旁肠粘膜组织间无显著差异（Ｐ＞０．０５）。另外，发现１例病人的癌旁组织ＴＧＦ－αｍＲＮＡ的表达明显升高，且高于其相应的癌组织。ＴＧＦ－βｍＲＮＡ表达由高到低的顺序与ＴＧＦ－αｍＲＮＡ相反，为正常肠粘膜组织、癌旁肠粘膜组织和癌组织，前两者间无显著差异（Ｐ＞０．０５），而其与癌组织间均有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。其中有２例病人的癌旁组织中，ＴＧＦ－βｍＲＮＡ表达高于其相应的正常组织。研究还发现，ＴＧＦ－αｍＲＮＡ表达可能与其基因扩增有关，而引起ＴＧＦ－βｍＲＮＡ表达变化的机制尚不清楚。上述研究结果初步表明：人结、直肠癌组织中ＴＧＦ－αｍＲＮＡ表达的增加和ＴＧＦ－βｍＲＮＡ表达的降低，可能通过自分泌和旁分泌生长调控作用同结、直肠癌的发生和进展有密切     

大鼠睾丸支持细胞硫酸糖蛋白—2mRNA水平的生后变化

对大鼠睾丸支持细胞硫酸糖蛋白－２ｍＲＮＡ水平生后变化的动态观察发现，大鼠生后２ｄ睾丸支持细胞即具有表达ＳＧＰ－２ｍＲＮＡ的能力。以后随着出生时间的延长，睾丸ＳＧＰ－２ｍＲＮＡ水平不断增加，于生后２５ｄ达高峰。随后迅速下降，于出生４０ｄ降至最低点。出生４０ｄ之后，睾丸ＳＧＰ－２ｍＲＮＡ水平再次呈现升高的趋势。本文对生后支持细胞ＳＧＰ－２ｍＲＮＡ水平的变化和作用进行了讨论。     

大鼠睾丸支持细胞硫酸糖蛋白－2 mRNA水平的生后变化

对大鼠睾丸支持细胞硫酸糖蛋白－２ｍＲＮＡ水平生后变化的动态观察发现，大鼠生后２ｄ睾丸支持细胞即具有表达ＳＧＰ－２ｍＲＮＡ的能力。以后随着出生时间的延长，睾丸ＳＧｐ－２ｍＲＮＡ水平不断增加，于生后２５ｄ达高峰。随后迅速下降，于出生４０ｄ降至最低点。出生４０ｄ之后，睾丸ＳＧＰ－２ｍＲＮＡ水平再次呈现升高的趋势。本文对生后支持细胞ＳＧＰ－２ｍＲＮＡ水平的变化和作用进行了讨论。     

小鼠胸腺,肝,脾非粘附细胞的TNFmRNA的研究

本研究用小鼠ＴＮＦｃＤＮＡ探针，从ＢＡＬＢ／ｃ小鼠的胸腺、肝、脾非粘附细胞中检测到ＴＮＦｍＲＮＡ，表明ＴＮＦｍＲＮＡ可以一种细胞内库形式预先存在于体内。经Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹分析，发现这些非粘附细胞中ＴＮＦｍＲＮＡ有４．７ｋｂ和１．９５ｋｂ两种杂交带，前者可能是后者的前体。又小鼠体内经地塞米松处理后，肝、脾非粘附细胞中ＴＮＦｍＲＮＡ可暂时减少，但胸腺中ＴＮＦｍＲＮＡ含量无明显变化。     

cDNA文库的构建方法及实验应用

自 70年代首例ｃＤＮＡ克隆问世以来 ,已用构建和筛选ｃＤＮＡ文库的方法克隆了很多基因。最初的ｃＤＮＡ克隆技术主要适合于获得高丰度ｍＲＮＡ的拷贝 ,即通过使用相应的核酸或抗体探针来筛选富含该ｍＲＮＡ的组织ｃＤＮＡ文库来克隆目的ｃＤＮＡ ,但对于那些低丰度ｍＲＮＡ的拷贝 ,通常需要筛选文库有大量克隆 ,才能获得相应的ｃＤＮＡ ,近年来已发展了一些ｃＲＮＡ文库构建的新方法和新技术 ,主要有 :减数ｃＤＮＡ文库、标准化ｃＲＮＡ文库 ,以及染色体及其区域特异性ｃＤＮＡ文库的构建方法 ,这 3种特殊的ｃＤＮＡ文库构建方法用不同的…     

间隙连接Cx32mRNA,Cx43mRNA及其蛋白产物在肝细？…

探讨间隙连接基因Ｃｘ３２ｍＲＮＡ、Ｃｘ４３ｍＲＮＡ及其蛋白产物在肝细胞癌（ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒｃａｒｃｉｏｎｍａ，ＨＣＣ）发生的重要意义，方法应用Ｓ－Ｐ免疫组织化学法，原位杂交和流式细胞仪分析技术，研究６１例ＨＣＣ、１４例正常肝组织以及肝癌细胞系ＨＨＣＣ、ＳＭＭＣ－７７２１、正常肝细胞系ＱＺＧ中，Ｃｘ３２ｍＲＮＡ，Ｃｘ４３ｍＲＮＡ及其蛋白产物的表达规律。结果：Ｃｘ３２蛋白在ＨＣＣⅠ、Ⅱ、Ⅲ     

马桑内酯致痫后大鼠海马生长抑素mRNA表达的变化

为探讨马桑内酯致痫与生长抑素的关系，用原位杂交组织化学法研究了马桑内酯致痫后大鼠海马生长抑素ｍＲＮＡ阳性神经元的变化，结果表明：致痫组大鼠ＣＡ１，ＣＡ２区及齿状回生长抑素ｍＲＮＡ的反应明显增强，以上各区的中，小神经内生长抑素ｍＲＮＡ神经元的数目及强度明显高于正常对照组，两者有显著性差异。     

细胞因子移植排斥反应

急性器官移植排斥反应时，多种细胞因子血清水平呈现升高现象，但需要与感染及ＣＭＶ等因素引起的细胞因子变化鉴别。移植物局部以ＩＬ－１，ＴＮＦ及Ｍ－ＣＳＦ升高为明显，ＩＬ－２，ＩＬ－３，ＩＬ－４，ＩＬ－６，Ｇ－ＣＳＦ或ＧＭ－ＣＳＦ未见升高。实体器官排斥时ＩＬ－４ｍＲＮＡ，ＩＬ－２ｍＲＮＡ及ＩＬ－５ｍＲＮＡ表达可升高。而炎性因子ＩＬ－１βｍＲＮＡ，ＩＬ－６ｍＲＮＡ及ＴＮＦａｍＲＮＡ表达不升高。某些细胞因子     

秋水仙碱对肿瘤坏死因子—α基因表达的影响

微管聚合抑制剂秋水仙碱（Ｃｏｌ，１０μｍｏｌ／Ｌ）可抑制ＬＰＳ刺激ＰＵ５－１．８细胞的ＴＮＦ－ａ基因表达，以前工作曾证实Ｃｏｌ主要抑制ＴＮＦ－αｍＲＮＡ的转录。本研究进一步证实这种抑制作用呈延迟性，即Ｃｏｌ需作用３小时才能充分表现其负性影响。而且这种抑制作用可被蛋白合成抑制剂放线菌酮（ＣＨＸ）完全阻断。单用Ｃｏｌ对ＬＰＳ诱导的ＴＮＦ－αｍＲＮＡ稳定性无明显影响，而与ＣＨＸ联用时则可明显延长ＬＰＳ诱导的ＴＮＦ－αｍＲＮＡ半衰期。以上资料堤示，Ｃｏｌ对ＴＮＦ－α基因表达的影响可能是对其在转录及转录后水平综合影响的结果。     

mRNA编辑及其在NF1肿瘤发生中的作用

本阐述了ｍＲＮＡ编辑的概念及目前已知的ｍＲＮＡ编辑形式，机制，讨论了ＮＦ１ ｍＲＮＡ编辑在ＮＦ１肿瘤发生中的作用，提示ＮＦ１ ｍＲＮＡ编辑可能是使ＮＦ１基因丧失肿瘤抑制作用的一种机制。     

mRNA编辑及其在NF1肿瘤发生中的作用

本文阐述了ｍＲＮＡ编辑的概念及目前已知的ｍＲＮＡ编辑形式、机制，讨论了ＮＦ１ｍＲＮＡ编辑在ＮＦ１肿瘤发生中的作用，提示ＮＦ１ｍＲＮＡ编辑可能是使ＮＦ１基因丧失肿瘤抑制作用的一种机制。     

大鼠三叉神经节及尾侧亚核内PPTAmRNA在伤害性刺激条件下的…

将福尔马林注入大鼠一侧口以下的时程变化用原位杂交法观察三叉神经一叉神经脊束核尾侧亚核内ＰＰＴＡｍＲＮＡ表达的时变化。证明：ＰＰＴＡｍＲＮＡ的表达及变化主要限于Ⅰ、Ⅱ层，其时程变化琚三叉神经节中的变化相似。     

血小板源生长因子及其受体基因表达在低氧大鼠肺中的变化

本文观察了血小板源生长因子（ＰＤＧＦ）Ａ、Ｂ链及其α、β受体基因表达在低氧大鼠肺中的变化。Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交显示正常大鼠肺中可表达ＰＤＧＦ－Ａ链、Ｂ链和ＰＤＧＦ－α受体、β受体的ｍＲＮＡ。随着低氧时间的延长，ｍＲＮＡ水平迅速增加。ＰＤＧＦ－Ａ、Ｂ链ｍＲＮＡ均在低氧的第二天达高峰，分别为正常的１．５１倍及１．６９倍，且Ｂ链ｍＲＮＡ基本维持在该水平至第七天。ＰＤＧＦ－α、β受体的ｍＲＮＡ在低氧第     

金属硫蛋白mRNA在异丙肾上腺素心肌损伤大鼠心肌组织中的表达

采用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交技术，探讨心肌损伤和外源性诱导后金属硫蛋白ｍＲＮＡ表达水平变化及其与ＭＴ含量的关系。结果表明：心肌损伤后，心肌组织ＭＴ ｍＲＮＡ表达水平明显增加且与ＭＴ含量呈明显的正相关。提示：ＭＴ ｍＲＮＡ可能作为心肌损伤的一种应激反应基因，且能被诱导合成。     

维生素A对胸腺凋亡有关基因的影响

为观察营养缺乏及补充维生素Ａ（ＶＡ）对胸腺细胞凋亡有关基因的影响，采用原位杂交及免疫组化的方法观察了胸腺组织ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ，Ｆａｓ及Ｂａｘ蛋白的表达。结果表明营养缺乏的大鼠胸腺细胞ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ的表达明显降低，而Ｆａｓ及Ｂａｘ蛋白的表达则明显增强；补充ＶＡ后大鼠胸腺ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ的表达明显增强，Ｂａｘ蛋白的表达明显降低，而Ｆａｓ蛋白的表达无明显变化。本结果表明：营养缺乏时胸腺细胞凋亡增加导致免疫功能降低，补充ＶＡ可抑制细胞凋亡，可能是通过促进ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ的表达，抑制Ｂａｘ蛋白的表达而起作用     

白细胞介素3基因表达的调控机制及影响因素

白细胞介素８通常在抗原／丝裂原刺激Ｔ细胞后产生，ＩＬ－３基因中存在着一系列能调节其表达的结构区，特别是在其基因５＇起始端上游的一组结构对转录的调控有特殊意义：同时，各种因素又可改变ｍＲＮＡ的半衰期及干扰其前体的成熟，从而在转录和转录后水平精细调节ＩＬ－３ｍＲＮＡ的产生。本文着重阐明通过ＴＣＲ／ＣＤ３途径激活Ｔ细胞时，ＩＬ－３基因表达的调控机制及各种影响因素。     

白细胞介素3基因表达的调控机制及影响因素

白细胞介素３通常在抗原／丝裂原刺激Ｔ细胞后产生，ＩＬ－３基因中存在着一系列能调节其表达的结构区，特别是在其基因５＇起始端上游的一组结构对转录的调控有特殊意义；同时，各种因素又可改变ｍＲＮＡ的半衰期及干扰其前体的成熟，从而在转录和转录后水平精细调节ＩＬ－３ｍＲＮＡ的产生。本文着重阐明通过ＴＣＲ／ＣＤ３途径激活Ｔ细胞时，ＩＬ－３基因表达的调控机制及各种影响因素。     

面口部炎症刺激增强CGRP mRNA、PPTA mRNA及NOS在大鼠三叉神经节中的表达

为了研究ＣＧＲＰｍＲＮＡ、ＰＰＴＡｍＲＮＡ和ＮＯＳ在伤害性刺激后大鼠ＴＧ中合成和表达的变化，将４％鹿角菜胶（ＣＡＲ）溶液注射到大鼠一侧口周皮下作为伤害性刺激模型，用ＮＡＤＰＨ－ｄ组织化学法结合ＣＧＲＰ、ＰＰＴＡｍＲＮＡｓ原位杂交组织化学法对此进行了观察。结果显示：对照组大鼠ＴＧ中约有３２．２％、１６．２％和１０％的神经元分别呈ＣＧＲＰｍＲＮＡ、ＰＰＴＡｍＲＮＡ和ＮＯＳ阳性。ＣＡＲ刺激后，在刺激侧ＴＧ、ＣＧＲＰｍＲＮＡ、ＰＰＴＡｍＲＮＡ和ＮＯＳ阳性神经元的数量均增多，其阳性率分别达到了３８．６％、２２．８％和１４．２％。ＴＧ中约有６．８％和７．３％的神经元同时呈ＮＯＳ和ＣＧＲＰｍＲＮＡ或ＮＯＳ和ＰＰＴＡｍＲＮＡ阳性，ＣＡＲ刺激使得两种双标神经元的数量也明显增多，双标细胞占ＴＧ细胞总数的百分比分别达到了１１．０％和１０．９％，而且刺激后增加的ＮＯＳ阳性神经元主要为双标神经元。上述结果提示ＣＧＲＰｍＲＮＡ、ＰＰＴＡｍＲＮＡ和ＮＯＳ阳性神经元，尤其是共存神经元可能在面口部伤害性信息的传递和调节中起重要作用，伤害性刺激所诱导的ＮＯＳ合成的增加与ＣＧＲＰｍＲＮＡ和ＰＰＴＡｍＲＮＡ表达的增强可能有密切的关系。