p38MAPK信号转导通路及其与细胞凋亡的关系

丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activatedproteinkinases,MAPKs)是广泛表达的丝氨酸/酪氨酸激酶,在哺乳动物细胞多种信号转导通路中起重要作用,MAPKs有3个主要家族:ERKs,JNKs和p38MAPKs。p38信号通路是MAPK通路的一重要分支,它在炎症、细胞应激、凋亡、细胞周期和生长等多种生理和病理过程中起重要作用。4种已知的p38异构体包括p38α、p38β、p38γ和p38δ。多年来已发现p38MAPK通路可以由应激包括高渗、热休克、放射线和其他应激反应活化。因此,p38MAPK通路参与了多种刺激引起的信号级联反应,表明它在引起多种细胞反应中起重要作用,并且,p38在细胞凋亡中也显示调节效应。     

MAPK 信号通路在肝细胞癌发生发展中的作用

丝裂原活化蛋白激酶（mitogen activated protein kinase,MAPK）信号通路对多种肿瘤的发生发展过程起着重要的调节作用。肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）细胞的凋亡、增殖、侵袭和转移等过程与p38MAPK、ERK、JNK 等 MAPK 信号通路同样有密切联系。本文将从这三条信号转导通路对 MAPK 信号通路在 HCC 发生发展中的作用进行综述。     

p38丝裂原活化蛋白激酶信号转导对肿瘤细胞凋亡的调控

p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路是丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)家族的一条重要途径,可被多种细胞外刺激而激活,近年来研究发现在细胞凋亡中发挥重要作用.p38MAPK可通过活化半胱天冬氨酸蛋白酶(caspase)家族成员、调节Bcl-2家族成员的活性、活化p53、参与Fas-FasL通路等多种途径介导肿瘤细胞的凋亡过程.     

p38 MAPK在喹乙醇诱导HepG2细胞凋亡中的作用

目的:研究p38 MAPK信号通路在喹乙醇诱导的HepG2细胞凋亡中的作用。方法:分别用不同浓度(0、200、400、800μg/ml)的喹乙醇染毒HepG2细胞24 h和800μg/ml喹乙醇染毒HepG2细胞不同时间(0、0.5、1、2、4、6、12、24 h)后,采用Westernblot法检测细胞内磷酸化p38蛋白和p38总蛋白的表达情况,以p38 MAPK磷酸化水平反映p38 MAPK信号通路的活性。分别采用0、10、20μmol/L的p38 MAPK特异性抑制剂SB203580预处理HepG2细胞1 h后,再用800μg/ml喹乙醇染毒24 h,采用Annexin VFITC/PI法检测细胞凋亡。结果:随着喹乙醇染毒浓度和时间的增加,HepG2细胞的p38磷酸化蛋白表达量逐步增加,其中800μg/ml喹乙醇染毒细胞24 h的实验组与对照组相比,p38磷酸化蛋白的表达量明显上调(P0.01)。10、20μmol/L的SB203580对喹乙醇诱导细胞凋亡有促进作用,细胞的凋亡率分别为35.4%±2.83%、40.2%±3.98%,较喹乙醇对照组(23.1%±3.59%)明显升高(P0.05)。结论:喹乙醇能激活p38 MAPK信号通路,且p38 MAPK信号通路的激活参与抑制喹乙醇介导的HepG2细胞凋亡的过程。     

Effects of p38 MAPK signaling pathway on apoptosis stimulated by olaquindox in human hepatoma G2 cells

目的:研究p38 MAPK信号通路在喹乙醇诱导的HepG2细胞凋亡中的作用.方法:分别用不同浓度(0、200、400、800μg/ml)的喹乙醇染毒HepG2细胞24h和800μg/ml喹乙醇染毒HepG2细胞不同时间(0、0.5、1、2、4、6、12、24 h)后,采用Western blot法检测细胞内磷酸化p38蛋白和p38总蛋白的表达情况,以p38 MAPK磷酸化水平反映p38 MAPK信号通路的活性.分别采用0、10、20μmol/L的p38 MAPK特异性抑制剂SB203580预处理HepG2细胞1h后,再用800μg/ml喹乙醇染毒24h,采用Annexin VFITC/PI法检测细胞凋亡.结果:随着喹乙醇染毒浓度和时间的增加,HepG2细胞的p38磷酸化蛋白表达量逐步增加,其中800μg/ml喹乙醇染毒细胞24h的实验组与对照组相比,p38磷酸化蛋白的表达量明显上调(P＜0.01).10、20μmol/L的SB203580对喹乙醇诱导细胞凋亡有促进作用,细胞的凋亡率分别为35.4％±2.83％、40.2％±3.98％,较喹乙醇对照组(23.1％±3.59％)明显升高(P＜0.05).结论:喹乙醇能激活p38 MAPK信号通路,且p38 MAPK信号通路的激活参与抑制喹乙醇介导的HepG2细胞凋亡的过程.     

丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)信号转导通路与卵巢上皮癌

丝裂原激活的蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）是一组可以被多种细胞外信号激活的丝／苏氨酸激酶，其参与细胞的多种生物学行为，包括基因的转录、细胞的分化及增殖、细胞周期调控、诱导细胞凋亡和维持细胞生存以及细胞的恶性化等。在信号转导过程中，3种MAPK（ERK、JNK和p38）信号通路所调节的细胞反应有所不同，持续活化的ERKI／2途径有助于肿瘤细胞的生长、增强抗凋亡能力；而JNK和p38的活化则可引起肿瘤抑制，诱导肿瘤细胞的凋亡。在卵巢癌细胞中MAPK级联可以被顺铂、TNF（肿瘤坏死因子）和GnRH促性腺激素释放激素等激活和调节。本文将对激素、生长因子和化疗药物作用于卵巢上皮细胞及肿瘤细胞后引起MAPK通路的变化情况作一综述。     

p38MAPK信号通路与uPA在乳腺癌细胞及组织中表达的相关性

背景与目的:p38MAPK信号通路介导多种转移相关基因表达调控,尿激酶型纤溶酶原激活剂(urokinase-type plasminogen activator,uPA)在肿瘤浸润和转移中发挥着重要作用.本实验研究人乳腺癌组织中3种信号分子p-p38、p-Akt、p-Erk及uPA表达与临床病理特征的关系,并分析它们与uPA表达的相关性,探讨p38MAPK通路对乳腺癌uPA蛋白表达的影响,分析p-p38和uPA表达与乳腺癌预后的关系.方法:应用免疫组织化学(SP)法检测p-p38、p-Akt、p-Erk和uPA在60例乳腺癌组织中的表达.Western blot检测人乳腺癌细胞MDA-MB-231及MCF-7中p-p38及uPA蛋白表达及用p38MAPK特异性抑制剂SB203580阻断p38MAPK信号通路后uPA蛋白表达水平的变化.结果:p-p38、p-Akt、p-Erk、uPA蛋白在乳腺癌组织中表达阳性率分别为56.7%、95.0%、93.3%、60.0%.p-p38与uPA表达存在正相关(r=0.316,P＜0.05),并与乳腺癌的TNM分期及淋巴结转移状况相关(P＜0.05),而与患者年龄、肿瘤大小无明显相关性(P＞0.05).p-Akt、p-Erk与uPA表达无明显相关性,p-Akt和p-Erk蛋白表达与乳腺癌的淋巴结转移有关(P＜0.05)而与患者年龄、肿瘤大小、TNM分期均无明显关系(P＞0.05).乳腺癌细胞MDA-MB-231中p-p38及uPA蛋白表达水平高于MCF-7.用SB203580阻断p38MAPK通路可降低uPA蛋白表达水平,且随着SB203580浓度升高uPA表达水平逐渐降低.乳腺癌中p-p38和uPA蛋白的表达与肿瘤的预后显著相关(分别为log-rank=4.98、5.40,P=0.0256、0.0201).结论:p38MAPK信号通路可能通过上调uPA的表达促进乳腺癌的恶性进展,p38MAPK信号通路可能是乳腺癌侵袭和转移的重要途径,p-p38和uPA的表达可辅助用于乳腺癌的预后评估.     

p38MAPK通路在消化系肿瘤研究中的新进展

丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase,MAPK）是细胞内主要的信号转导系统之一。p38MAPK属于MAPK亚家族中的重要一类,其介导的信号转导通路不仅在炎症、应激反应中具有重要作用,还参与细胞的存活、分化和凋亡等过程。近年来发现该通路在调节消化道肿瘤的发病、耐药、转移中起重要作用。本文就其在消化系肿瘤中研究的新进展作一综述。     

幽门螺杆菌诱导人胃癌MKN45细胞COX-2表达的信号转导研究

目的:探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38MAPK)信号转导对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染的胃上皮细胞MKN45中环氧合酶(cyclooxygenase-2,COX-2)表达的调控作用,揭示Hp感染引发胃癌的部分机制.方法:采用实时荧光定量-PCR(real-time fluorogentic quantitative-PCR,RFQ-PCR)检测Hp标准株NCTC11637感染对MKN45 细胞中COX-2 mRNA表达的影响,Western 印迹法检测Hp 感染MKN45细胞后p38MAPK信号通路的激活情况;运用p38MAPK特异性抑制剂SB203580阻断p38MAPK信号通路后,观察Hp对MKN45细胞COX-2 mRNA表达的影响.结果:Hp感染MKN45细胞后COX-2 mRNA水平明显上调,Hp感染后3、6、9和12 h时COX-2 mRNA 的表达量分别为正常值的3.0、7.2、5.1和4.3倍,各时间组COX-2 mRNA表达均明显高于对照组(P<0.01).Hp作用MNK45细胞20 min后p38MAPK 信号通路被激活,60 min时达峰值;而采用p38MAPK特异性抑制剂SB203580阻断p38MAPK信号转导通路后,Hp诱导的COX-2 mRNA表达明显降低(P<0.01).结论:Hp感染能激活p38MAPK信号通路,通过p38MAPK信号转导上调COX-2的表达,这可能是Hp感染引发胃癌的重要机制之一.     

HL-60细胞淫羊藿甙诱导后信号传导因子表达变化与意义

目的检测急性早幼粒白血病细胞HL-60经过淫羊藿甙(ICA)诱导后信号传导与转录激活因子(STAT1、STAT3)和有丝分裂原激活蛋白激酶(p38MAPK、p42MAPK)表达变化在分化中的作用。方法建立ICA诱导分化模型,用瑞氏染色观察细胞形态,MTT实验测定细胞增殖的变化,NBT还原实验测定细胞分化状态,RT-PCR方法检测STAT1、STAT3、p38MAPK、p42MAPK 的mRNA的表达。结果 HL-60细胞经ICA作用24 h后,随着细胞增殖降低和分化的发生, p42MAPK的mRNA表达增加,STAT3的mRNA表达降低,STAT1和p38MAPK的mRNA未见明显的表达。结论 p42MAPK和STAT3与ICA诱导HL-60细胞分化有关,而p38MAPK和STAT1则与ICA诱导HL-60细胞分化无关。     

二甲双胍通过抑制p38MAPK信号通路逆转卵巢癌细胞对顺铂的耐药性

目的:探讨二甲双胍是否能够逆转卵巢癌细胞对顺铂的耐药性,以及其可能的作用机制。方法:CCK-8法检测二甲双胍作用后卵巢癌细胞顺铂耐药株C13K和CP70细胞对顺铂的耐药性变化,以及转染针对切除修复交叉互补基因1(excision repair cross-complemention 1,ERCC1)的特异性小干扰RNA(small interfering RNA,si RNA)后C13K和CP70细胞耐药性的变化。实时荧光定量PCR法检测不同浓度二甲双胍作用后,C13K和CP70细胞中ERCC1基因表达的变化。蛋白质印迹法检测二甲双胍作用后C13K和CP70细胞中腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)信号通路的激活和p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38MAPK)信号通路的抑制情况,以及联合或不联合AMPK信号通路阻断剂Compound C作用后ERCC1蛋白的表达情况。同时,蛋白质印迹法检测p38MAPK信号通路抑制剂SB203580作用后耐药细胞中ERCC1蛋白表达的变化,以及二甲双胍作用联合p38MAPK si RNA转染前后耐药细胞中ERCC1蛋白的表达变化。结果:二甲双胍能够逆转C13K和CP70细胞对顺铂的耐药性(P<0.05)。二甲双胍作用能够降低C13K和CP70细胞中ERCC1 m RNA和蛋白的表达水平(P<0.05),并激活AMPK信号通路(P<0.05);而联合应用AMPK信号通路阻断剂Compound C可以阻断二甲双胍的这种作用(即ERCC1蛋白表达水平升高)(P<0.01)。p38MAPK信号通路抑制剂SB203580作用后,C13K和CP70细胞中ERCC1蛋白表达水平降低(P<0.05);而二甲双胍作用可降低p38MAPK的磷酸化水平(P<0.01),抑制p38MAPK信号通路。二甲双胍作用转染了p38MAPK si RNA的C13K和CP70细胞后,ERCC1蛋白的表达水平无明显变化(P>0.05)。结论:二甲双胍可能逆转卵巢癌顺铂耐药株对顺铂的耐药性,并且这一作用可能是通过抑制p38MAPK信号通路和降低细胞中ERCC1的表达而实现的。     

HL-60细胞淫羊藿甙诱导后信号传导因子表达变化与意义

目的检测急性早幼粒白血病细胞HL-60经过淫羊藿甙（ICA）诱导后信号传导与转录激活因子（STAT1、STAT3）和有丝分裂原激活蛋白激酶（p38MAPK、p42MAPK）表达变化在分化中的作用。方法建立ICA诱导分化模型，用瑞氏染色观察细胞形态，MTF实验测定细胞增殖的变化，NBT还原实验测定细胞分化状态，RT-PCR方法检测STATI、STAT3、p38MAPK、p42MAPK的mRNA的表达。结果HL-60细胞经ICA作用24h后，随着细胞增殖降低和分化的发生，p42MAPK的mRNA表达增加，STAT3的mRNA表达降低，STAT1和p38MAPK的mRNA未见明显的表达。结论p42MAPK和STAT3与ICA诱导HL-60细胞分化有关，而p38MAPK和STAT1则与ICA诱导HL-60细胞分化无关。     

p38MAPK抑制剂SB203580抑制人绒癌JAR细胞的体外侵袭作用

目的：研究p38MAPK通路在人绒癌JAR细胞体外侵袭中的作用。方法：用细胞ELISA法测定JAR细胞中p38MAPK的活性变化，用Transwell细胞侵入系统检测细胞的侵袭作用。结果：PMA呈浓度依赖性地激活JAR细胞中p38MAPK,PMA能促进人绒癌JAR细胞的体外侵袭作用，而p38特异性抑制剂SB203580抑制了JAR细胞的侵袭能力。结论：p38MAPK通路在人滋养细胞的侵袭行为以及人绒癌的形成中具有重要作用，P38抑制剂可能会为人绒癌的防治提供新的途径。     

p38 MAPK在胃泌素诱导结肠癌细胞表达u-PA中的作用

目的研究胃泌素对人结肠癌细胞尿激酶型纤溶酶原激活物(u-PA)mRNA和蛋白表达的影响,探讨信号分子p38 MAPK在其中的作用。方法采用脂质体介导法,将胃泌素受体(CCK_2R)的真核表达载体pCR3.1/CCK_2R稳定转染人结肠癌细胞株colo320,上调胃泌素的作用;用胃泌素拮抗剂(L-365、260)下调胃泌素的作用。给予10nmo/L胃泌素刺激不同时间,阻断实验以SB203580阻断p38通路,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞内u-PA mRNA的表达,采用Western blot检测细胞内u-PA和p38 MAPK蛋白表达的强度。结果胃泌素可明显增强colo320/ CCK_2R细胞u-PA mRNA和蛋白的表达,并可激活p38 MAPK蛋白的磷酸化,具有时间依赖性,但对colo320细胞的影响程度明显低于colo320/CCK_2R细胞。使用L-365、260后,胃泌素对u-PA和phospho p38 MAPK的诱导作用明显下降。SB203580可明显抑制胃泌素诱导的p38 MAPK激酶的磷酸化,用其阻断p38激酶信号通路后,胃泌素对u-PA的诱导作用受到显著的抑制,并且具有剂量依赖性。结论胃泌素与其受体结合后,可通过p38 MAPK信号转导通路诱导结肠癌细胞表达u-PA。     

DADS通过MAPK和PI3K/Akt 信号通路下调Mcl-1诱导白血病细胞凋亡*

目的:二烯丙基二硫（DADS）为天然植物大蒜中的提取物,能抑制多种肿瘤细胞生长,本文探讨丝裂原激活的蛋白激酶（MAPKs）、3- 磷酸肌醇激酶（PI 3K/Akt）信号通路和Bcl- 2 家族成员在DADS诱导的人白血病HL- 60细胞凋亡中的作用。方法:利用流式细胞术检测DADS 诱导的白血病细胞凋亡,Western blot研究MAPKs和PI 3K/Akt信号通路在DADS 诱导的人白血病HL- 60细胞凋亡中的变化及对Bcl- 2 家族凋亡相关蛋白表达的影响。结果:DADS呈浓度和时间依赖性地诱导人白血病HL- 60细胞凋亡,在此过程中ERK/MAPK 和PI 3K/Akt信号通路被抑制,而p38MAPK 信号通路被激活,ERK/MAPK 和PI 3K/Akt信号通路通过降低Mcl-1（myeloid cell leukemia-1）和升高Bax 的表达诱导人白血病细胞凋亡,而p38MAPK 则不是通过调控Mcl-1 和Bax 的表达诱导人白血病细胞凋亡,进一步利用RNA干扰技术沉默Mcl-1 基因可增加DADS对HL- 60细胞增殖抑制和诱导凋亡作用。结论:MAPK 和PI 3K/Akt信号通路通过下调Mcl-1 的表达参与了DADS诱导的HL- 60细胞凋亡作用。      

p38MAPK在EGCG诱导人胃癌MGC803细胞凋亡中的作用

目的：探讨p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 mitogen—activaced protein kinase，v38MAPK）在表没食子儿茶素没食子酸酯（epigallocatechin-3-gallate，EGCG）诱导人胃癌MGC803细胞凋亡中的作用。方法：采用MTT法检测MGC803细胞的存活率，荧光显微镜观察和碘化丙啶染色FCM检测MGC803细胞凋亡率，Western印迹法检测MGC803细胞中p38MAPK蛋白及磷酸化p38MAPK蛋白的表达。结果：EGCG可诱导MGC803细胞凋亡，且p38MAPK被激活。用p38MAPK特异性抑制剂SB203580干预后，EGCG抑制MGC803细胞生长的作用明显减弱，细胞凋亡率下降，p38MAPK活性显著下降。结论：EGCG可诱导MGC803细胞凋亡，该作用可被SB203580显著抑制，提示EGCG可能通过激活D38MAPK使部分MGCR03细胞凋亡。     

丝裂原活化蛋白激酶信号通路与白血病的研究新进展

丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路可参与凋亡、分化、自噬等多种细胞活动,人类细胞中主要有细胞外信号调节激酶(Erk)、p38 MAPK、c-Jun N端激酶(JNK)3条通路,每条信号通路都具有高度特异性,有其独立的功能.MAPK信号通路与白血病的发生、发展密切相关,其对白血病细胞的作用主要通过与细胞凋亡、介导细胞耐药、调控细胞自噬分化等方面有关.现就MAPK信号通路与白血病的相关研究进展进行综述.     

脑胶质瘤细胞化疗耐药中p38MAPK信号通路的作用

探讨p38MAPK信号通路在脑胶质瘤细胞化疗耐药中的作用及相关机制。 方法 在 前期建立U251/TMZ胶质瘤耐药细胞株的基础上,用特异性阻断剂SB203580阻断耐药细胞株中 p38MAPK信号通路,替莫唑胺作用下检测耐药株的细胞活性变化,同时检测MDR1、TopoⅡ、BCL-2 等耐药相关基因的蛋白表达变化。 结果 阻断通路后替莫唑胺作用下细胞的抑制率明显低于未阻 断组,两组之间比较差异有统计学意义（P＜0.05）,阻断后耐药细胞中BCL-2、MDR1的表达明 显升高,TopoⅡ的表达明显降低,与未阻断的耐药细胞相比较差异有统计学意义（P＜0.05）。结 论 U251/TMZ胶质瘤耐药细胞中p38MAPK信号通路被阻断后细胞的耐药性增强,其机制可能与耐药 株中耐药相关基因BCL-2、TopoⅡ、MDR1的表达变化有关。     

P38MAPK及其研究进展

机体内环境的稳定和生命活动的各种过程是通过细胞与细胞，细胞与细胞外间质以及细胞内信息传递来实现的。MAPK(mitogen-activated protein kinase)级联是细胞内的主要信息传递系统，可将细胞外信息传递至细胞核中，从而介导细胞产生各种反应。MAPK通路主要有四条途径：Ras／ERK，JNK／Sapk，P38／HOG-1，ERK5，其中P38信号途径是MAPK家族中的重要组成部分，经外界刺激应激而激活，故又称为MAPK应急信号通路，其在全身炎性反应，细胞凋亡，休克，肿瘤转移、耐药等方面具有十分重要的作用，现对其目前的研究进展作一综述。     

MAPK信号通路与肿瘤侵袭和转移研究进展

 肿瘤侵袭和转移是多阶段、多基因参与的过程，转移相关基因的调节涉及复杂的机制及多条信号传导途径，其中胞浆蛋白激酶介导的调节逐渐被认识，常见的蛋白激酶有MAPK、PKC、PKA、CAMK、PI|3等，而MAPK通路是研究最多的激酶通路。MAPK是MAPK信号通路的枢纽，属丝氨酸/苏氨酸激酶，较为保守，其特点是它的丝氨酸/苏氨酸和酪氨酸须同时被磷酸化，才能获得全部酶活性。活化前的MAPK位于胞浆，一旦活化即进入核内激活靶基因。MAPK有多个亚家族，其中较为确定的，在细胞功能中发挥重要作用的有细胞外信号调节激酶（ERK），c|Jun|N端激酶（JNK/SAPK）以及p38MAPK。近年来，较多研究发现MAPK信号通路与肿瘤恶性演进相关。本文主要就以上三种MAPK亚家族介导的转移相关基因表达调控的研究进展作一介绍。