高速胸部撞击伤家兔中性粒细胞凋亡与肺损伤

目的:观察兔胸部高速撞击伤后中性粒细胞凋亡的发生与肺损伤的关系.方法:样品采集与处理于2003-05/2004-12,分别在解放军第四军医大学西京医院心脏外科实验室和胸部战创伤基础理论与临床实验室完成.实验选用健康国内本土兔30只,随机分为对照组5只,实验组25只.实验组动物应用呼吸心跳同步触发撞击机致伤右侧胸壁,压缩幅度20%,撞击质量5.7kg,撞击面积3.14 cm^2,弹丸速度(20.29&;#177;0.03)m/s.对照组不做撞击伤,其余处理同实验组.实验组于伤后4,12,24,48和72 h分别处死动物5只(伤后4,12,24,48,72 h组),留取支气管肺泡灌洗液及肺组织,应用膜连蛋白V-异硫氰基荧光素及碘化丙啶染色、流式细胞仪检测中性粒细胞凋亡,应用考马氏亮兰法、比色法测定总蛋白和白蛋白含量,肺组织苏木精-伊红染色及测定肺干湿重比值.结果:①伤后4,12,24,48,72 h实验组支气管肺泡灌洗液凋亡的中性粒细胞比例明显低于对照组[(63.1&;#177;7.6)%,(62.5&;#177;9.5)%,(64.2&;#177;7.1)%,(63.6&;#177;7.7)%,(61.5&;#177;8.5)%;(82.3&;#177;12.6)%,t=2.80～3.06,P＜0.05].②伤后4,12,24,48,72 h实验组肺干湿重比值明显低于对照组(0.32&;#177;0.10,0.29&;#177;0.03,0.26&;#177;0.05,0.25&;#177;0.01,0.21&;#177;0.03;0.48&;#177;0.07,t=2.90～7.94,P＜0.05～0.01);伤后12,24,48,72 h实验组肺通透指数明显高于对照组(1.1&;#177;0.3,1.4&;#177;0.2,1.5&;#177;0.4,1.7&;#177;0.6;0.6&;#177;0.2,t=3.13～6.35,P＜0.05～0 01).结论:中性粒细胞凋亡抑制存在于创伤后肺损伤逐渐加重的过程中.     

胸部撞击致家兔急性肺损伤的实验研究

目的建立家兔垂直胸部撞击致急性肺损伤动物模型。方法选取新西兰大耳兔40只,随机分为轻度撞击组(以重物重量1 kg、离地高度100 cm进行垂直撞击)、中度撞击组(以重物重量1 kg、离地高度100 cm进行垂直撞击)、重度撞击组(重度撞击组以重物重量1 kg、离地高度100 cm进行垂直撞击)和空白对照组,除对照组外,其余各组通过对应质量和离地高度的撞击物,垂直撞击家兔右侧胸部,造成急性肺损伤。记录比较各组家兔撞击前后PaO_2/FiO_2值、肺干湿重比值、急性肺损伤评分以及垂直撞击指数。结果与撞击前相比,中、重度家兔撞击后4 h、8h、12 h PaO_2/FiO_2均低于撞击前,且差异具有统计学意义(P0.05),轻度撞击组则无显著差异(P0.05);与对照组相比,轻度撞击组PaO_2/FiO_2差异无显著性(P0.05);与轻度撞击组相比,中度及重度撞击组的肺干湿比明显降低(P0.05),与对照组相比,轻度撞击组肺干湿比差异无显著性(P0.05);与对照组相比,轻度撞击组肺组织明显增大、充血,但未见中性粒细胞浸润;中度撞击组肺组织充血水肿,部分间隙可见中性粒细胞浸润;重度撞击组肺泡腔水肿、出血,较多肺泡间隙可见中性粒细胞浸润。结论采用中、重度垂直胸部撞击方式建立的兔急性肺损伤动物模型,操作简便,更接近临床发病实况,为胸部撞击致急性肺损伤的研究提供了实验依据。     

单侧胸部撞击致家兔对侧肺生物学标志的变化

目的研究单侧胸部撞击致家兔对侧肺损伤和早期炎症介质TNF-α在继发性肺损伤中的作用。方法选取新西兰大白兔48只,动物被随机分为正常对照组,伤后1、6、24 h各组。采用BIM-Ⅱ型生物撞击机复制单侧胸部撞击伤动物模型。在伤后1、6、24 h测定双肺生物学标志(肺湿/干重比、支气管肺泡灌洗液中性粒细胞、蛋白含量、肺微血管通透性)的变化,RT-PCR法测TNF-αmRNA在双侧肺组织中的表达。结果在伤后1、6、24 h与正常对照组相比双肺生物学标志均出现明显的变化(P＜0．05或P＜0．01), TNF-αmRNA在双侧肺组织中表达增加。结论单侧胸部撞击伤后,对侧肺生物学标志的改变和肺组织的病理变化程度一致,与对侧肺的机械性损伤因素和继发性炎症反应有关;TNF-αmRNA在肺组织中的表达增加,提示内源性炎症介质在继发性肺损伤的发生、发展过程中发挥重要作用。     

胸部撞击伤时游离Ca2+浓度与中性粒细胞凋亡及肺损伤的关系

目的 :动态观察兔胸部撞击伤时中性粒细胞 (PMN)凋亡的发生以及与肺损伤之间的关系。方法 :制备兔胸部撞击伤模型 ,分离纯化肺灌洗液中的 PMN,应用流式细胞术测定 PMN凋亡、坏死、存活细胞比例及呼吸爆发功能的变化 ,并且观察与乳酸脱氢酶 (L DH)和胞浆游离 Ca2 变化之间的关系。结果 :肺灌洗液中PMN的凋亡延迟持续至 12小时 ,在伤后各时间点活细胞增多 ;而肺灌洗液 PMN呼吸爆发从伤后 2小时即显著增强 ,8小时达到峰值 ;同时肺灌洗液 L DH的升高在伤后 4～ 2 4小时显著高于正常对照组 ;伤后 PMN胞浆游离 Ca2 有短暂升高。结论 :胸部撞击伤时 ,PMN在肺组织中大量扣押 ,且正常的凋亡途径发生障碍 ,造成PMN持续处于激活状态及毒性内容物的持续释放 ,与肺组织损伤有密切关系 ,并且 PMN凋亡延迟可能与胞浆游离 Ca2 的短暂升高有关     

吸烟及糖皮质激素对慢性阻塞性肺疾病患者肺泡巨噬细胞凋亡的影响

目的：探讨慢性阻塞性肺疾病患者肺泡巨噬细胞凋亡特点及其影响因素。 方法：①收集2002-12／2003-12解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所呼吸内科门诊接受纤维支气管镜检查患者21例。11例患者经 肺功能检查证实为慢性阻塞性肺疾病(患者组)，男6例，女5例，均为吸烟者，平均吸烟指数300年支。设未被证实为慢阻肺患者10例为对照组，男7例，女3例，均无吸烟史。纳入患者均对实验目的知情同意。②经支气管肺泡灌洗获取肺泡巨噬细胞。利用髓过氧化物酶染色法观察肺泡巨噬细胞的染色阳性率。利用原位末端标记法观察支气管肺泡灌洗液中肺泡巨噬细胞凋亡的变化和地塞米松的对其凋亡的影响。凋亡率=凋亡细胞数／细胞总数×100％。③计量资料差异比较采用双尾t检验分析。 结果：慢性阻塞性肺疾病患者11例和非慢性阻塞性肺疾病患者10例均进入结果分析。①患者组肺泡巨噬细胞的髓过氧化物酶染色阳性率明显低于对照组[(0．8±0．3)％，(1．2±0．4)％，P<0．05]，支气管肺泡灌洗液中肺泡巨噬细胞凋亡率明显低于对照组[(1．9±0．7)％，(4．8±1．3)％，P<0．01]。②地塞米松处理12和24及48h后的肺泡巨噬细胞凋亡率明显高于对照组[(9．2±2．3)％，(35．4±12．6)％，(45．8±9．2)％；(5．9±1．8)％，(10．8±2．7)％，(24．1+4．6)％，P<0．01]。 结论：①吸烟可能导致慢性阻塞性肺疾病患者的气道和肺泡腔中肺泡巨噬细胞凋亡率下降的一个重要因素。该种作用使肺泡巨噬细胞对凋亡中性粒细胞的吞噬能力下降，以上变化可能参与了慢性气道炎症的形成。②糖皮质激素能够诱导慢性阻塞性肺疾病患者肺泡巨噬细胞的凋亡，对防止炎症反应的形成有意义。     

银杏内酯对大鼠局灶脑缺血再灌注后神经功能缺失评分、脑梗死体积及皮质神经元凋亡的影响

目的:观察银杏内酯对大鼠局灶脑缺血再灌注后神经功能缺失评分、脑梗死体积、皮质神经元凋亡的影响及其银杏内酯的脑保护作用。方法:实验于2004-01/09在福建医科大学解剖学研究所完成。将月龄3个月雄性SD大鼠96只随机分为实验组和对照组,采用改良线栓法制作大脑中动脉闭塞局灶缺血模型。实验组在缺血即刻腹腔注射银杏内酯20mg/kg,对照组腹腔注射等量的生理盐水。两组又随机分为再灌注6,24和48h组,每组16只,运用Zea-Longa法进行神经功能缺失评分。在再灌注6,24,48h时间点每组随机取8只采用2,3,5-三苯四氮唑染色法观察梗死灶范围,并计算梗死灶体积占半球体积的百分率。另每组8只大鼠应用原位细胞凋亡检测法计数神经元凋亡数目。结果:实验过程中有4只大鼠因未出现神经功能缺损体征予以剔除,补充4只造模成功大鼠,进入结果分析大鼠保持为96只。①再灌注6,24h实验组神经功能缺损评分明显低于对照组(1.69±0.6,1.25±0.45,2.56±0.51,2.06±0.77,U=37,41,P<0.001),再灌注48h实验组评分与对照组基本一致(0.62±0.50,0.69±0.48,U=120,P=0.714)。②再灌注6,24,48h实验组脑梗死体积占半球体积的百分率明显低于对照组犤(12.27±0.55)%,(15.28±0.45)%,(16.30±0.36)%,(19.06±0.80)%,(24.19±0.57)%,(29.27±1.09)%     

早期支气管肺泡灌洗对重型颅脑损伤后吸入性肺炎的影响

目的:探讨早期支气管肺泡灌洗对重型颅脑损伤后吸入性肺炎的临床价值。方法:160例该类患者随机分为实验组83例和对照组77例,实验组伤后早期加行支气管灌洗,其他治疗措施基本相同。结果:实验组成人呼吸窘迫综合征(ARDS)发生率22%,对照组36%,有显著性差异(P<0.01);实验组肺部感染率43%,对照组78%,有显著性差异(P<0.01);实验组肺部感染持续平均时间6.8±2.2d,对照组16.2±3.4d,有显著性差异(P<0.01)。结论:早期支气管肺泡灌洗能有效防治重型颅脑损伤后吸入性肺炎患者并发肺部感染和ARDS,并缩短肺部感染时间,有较高的临床应用价值,值得推广。     

烟雾吸入性损伤大鼠肺泡巨噬细胞吞噬功能与炎症消散关系研究

目的 :探讨烟雾吸入性损伤大鼠肺泡巨噬细胞吞噬功能与炎症消散关系。方法 :建立大鼠烟雾吸入损伤模型后于伤后 2、6、12、2 4h及 2、3、4、5d各时相点动态观察 (1)肺泡巨噬细胞体外对鸡红细胞吞噬功能 ;(2 )肺泡巨噬细胞体内对凋亡中性粒细胞吞噬功能。结果 :(1)致伤后 2～ 6h肺泡巨噬细胞对鸡红细胞吞噬率、吞噬指数下降 ,12h后逐渐恢复正常 ,2～ 5d仍保持较高的吞噬功能。 (2 )肺泡巨噬细胞对凋亡中性粒细胞吞噬在伤后 2h即开始逐渐升高 ,2 4h达峰值 ,然后逐渐下降。结论 :(1)烟雾吸入伤早期 (2～ 6h)肺泡巨噬细胞吞噬功能受损害 ,然后逐渐恢复正常 ,并保持较高吞噬活性 ,它有利于清除异物、细菌等。 (2 )肺内中性粒细胞发生凋亡 ,然后被巨噬细胞吞噬参与了恢复期肺内炎症消散的过程     

慢性阻塞性肺疾病患者外周血中性粒细胞凋亡率的动态变化

背景慢性阻塞性肺疾病是以气道、肺实质和肺血管的慢性炎症为特征,这些炎症细胞数量增加和活性改变的机制目前还不十分清楚.目的探讨慢性阻塞性肺疾病患者外周血中性粒细胞凋亡特点及其与慢性阻塞性肺疾病发生发展的关系,以期为慢性阻塞性肺疾病患者的早期干预和功能监测提供参考方向.设计以慢性阻塞性肺疾病患者为观察对象,健康人群为对照组的观察对比研究. 单位一所军医大学医院的呼吸内科.对象观察对象为2003-02/12因慢性阻塞性肺疾病急性发作在第三军医大学大坪医院野战外科研究所呼吸内科住院的慢性阻塞性肺疾病患者,同期同类住院患者98例,采用随机数字表法随机选择18例患者作为慢性阻塞性肺疾病组,其中男12例,女6例,年龄48～70岁,平均(56±7)岁.对照组14例,为来本院查体的健康成年人,其中男10例,女4例,年龄50～70岁,平均(59±8)岁.方法用密度梯度离心法分离外周血中性粒细胞,利用流式细胞仪和原位末端标记技术观察外周血中中性粒细胞凋亡的动态变化.主要观察指标各组外周血中性粒细胞凋亡率比较.结果流式细胞分析显示,缓解期慢性阻塞性肺疾病患者凋亡早期中性粒细胞的比率为(8.5±1.3)%,明显低于正常对照组[(12.5±1.8)%](t=6.25,P＜0.01),急性加重期[(5.1±0.6)%]又明显低于缓解期组(t=5.66,P＜0.01).原位末端标记技术分析也显示,慢性阻塞性肺疾病患者缓解期凋亡中性粒细胞的比率[(12.4±2.7)%]明显低于正常对照组[(21.5±4.8)%](t=5.76,P＜0.01),急性加重期[(4.9±0.4)%]又明显低于缓解期组(t=6.12,P＜0.01).凋亡晚期/坏死中性粒细胞的变化却出现相反的趋势,即缓解期慢性阻塞性肺疾病患者凋亡晚期/坏死中性粒细胞的比率[(2.8±0.5)%]明显高于正常对照组的比率[(1.3±0.4)%](t=6.37,P＜0.01),急性加重期[(3.7±0.3)%]又明显高于缓解期组(t=5.81,P＜0.01).结论中性粒细胞的凋亡异常可能是引起慢性阻塞性肺疾病气道和肺组织中性粒细胞聚集的一个重要原因,该过程可能会在慢性气道炎症的发生发展中具有重要意义,为慢性阻塞性肺疾病的一级康复干预提供病因学基础.     

他克莫司对创伤性脑损伤大鼠神经行为和记忆能力的影响

背景目前他克莫司对周围神经保护作用的研究比较多,而其是否具有促进中枢神经再生和保护作用.目的通过神经行为学观察和检测突触素的表达及细胞凋亡数量,探讨他克莫司对大鼠脑液压伤后神经行为和记忆的影响.设计随机分组,平行对照(自我前后对照、相互对照)实验.单位大连医科大学附属第二医院神经外科和复旦大学附属中山医院神经外科.材料实验于2002-11在上海长征医院神经外科实验室完成.选择由复旦大学实验动物科学部提供的雄性SD大鼠24只为观察对象,体质量(200±20)g,用抽签法随机分为对照组、损伤组和治疗组,每组8只.干预伤前24 h以20 g/L戊巴比妥钠(40 mg/kg)腹腔麻醉,损伤组和治疗组模型制备参照美国Dixon建立的大鼠脑液压损伤模型,打击能量为151.95～172.21 kPa,相当于中度颅脑损伤,对照组只埋管不打击.治疗组伤后5 min以1 mg/kg腹腔注射他克莫司,1次/d,连续7 d.损伤组和对照组腹腔注射生理盐水.伤前、伤后3 d和伤后1周分别进行行走试验、平衡试验和记忆试验.于伤后1周全部大鼠断头取脑,分别取海马、伤灶周围额叶皮质、基底核部位进行免疫组织化学检测,图像定量分析技术检测突触素在海马各区以及伤灶周围的额叶皮质与基底节的分布,用流式细胞仪检测凋亡细胞计数.主要观察指标①各组动物于伤前、伤后3 d和伤后1周时行走试验、平衡试验和记忆试验成绩.②各组动物皮质、海马、基底核区突触素表达定量分析结果.③各组动物皮质、海马、基底核区细胞凋亡百分率.结果24只大鼠全部进入结果分析.①治疗组伤后3 d和伤后1周时行走试验成绩和平衡试验成绩低于损伤组[行走试验成绩(7.5±2.5)s,(5.5±2.1)s,(10.5±2.5)s,(8.2±2.5)s.平衡试验成绩(3.4±0.5)分,(2.5±0.2)分,(5.7±0.2)分,(5.0±0.5)分,P＜0.05～0.01],治疗组伤后3 d和伤后1周时记忆实验成绩高于损伤组[(4.9±1.7)s,(6.2±2.3)s,(4.0±1.5)s,(4.4±2.6)s,P＜0.05～0.01].②治疗组皮质、海马、基底核区突触素表达量显著高于损伤组(140.36±3.87,45.52±2.16,31.67±2.35,96.25±2.85,24.35±2.47,20.49±2.08,P＜0.01);对照组显著高于治疗组(162.24±3.52,50.58±2.31,42.69±2.53,P＜0.01).③治疗组海马、皮质、基底节的细胞凋亡率显著低于损伤组[(10.37±2.12)%,(18.39±2.87)%,(12.78±2.45)%,(21.14±4.85)%,(38.57±3.78)%,(21.18±4.59)%,P＜0.01].损伤组海马、皮质、基底核的细胞凋亡率显著高于对照组[(3.85±2.56)%,(4.96±2.15)%,(3.52±2.17)%,P＜0.01].结论他克莫司治疗后能促进大鼠海马、皮质及基底核区突触素表达,减少海马和皮质及基底核区神经细胞凋亡,对实验动物脑损伤后神经行为和记忆的恢复有促进作用.     

重型颅脑损伤中的弥漫性轴索损伤

报告５１例脑弥漫性轴索损伤，占同期重型颅脑损伤的１３．３５％，其主要临床特点为患者由事故等致伤，伤后即持续昏迷，而ＣＴ检查表现较轻微。作者结合文献对发病机制、病理、临床论断进行初步总结。认为使用ＭＲＩ检查有助于ＤＡＩ的临床诊断。     

Spinal cord injury: preventing secondary injury.

Spinal cord injury is devastating to the victim, as well as being costly in terms of medical expenses, lost wages, and lost independence. The initial damage to the spinal cord results from several mechanisms of injury--flexion, extension, compression, penetration, rotation, and the disease process. When the spinal cord is injured and there is necrosis of the nervous tissue, no regeneration of that tissue occurs. Unlike in the peripheral nervous system, where regeneration is possible, the spinal cord is part of the central nervous system, as is the brain. The spinal cord extends from the base of the skull to the L1 vertebrae: the cervical levels innervate the diaphragm and muscles of the arms; the thoracic levels innervate the muscles of the chest and abdomen; and the lumbar and sacral levels innervate the muscles of the legs. In addition, the sacral levels are responsible for bowel, bladder, and sexual function. The higher the level of injury, the more severe the loss of function because, not only is the level of injury affected, but also the levels below. Injury occurs by initial trauma to the surrounding ligaments, bones, and muscles, which then affect the spinal cord. There may be total loss of function with damage completely across the cord or partial loss of function with damage affecting only part of the cord. No current treatment can reverse this initial injury, which causes irreversible damage within minutes of injury. Secondary damage occurs as the injury spreads over several hours. Treatment can help prevent this secondary damage.     

Inviting injury

PPE equals one thing personal safety. Employers must ensure that responders are provided with applicable PPE and taught how to use it for the incidents and environments they may encounter. Responders who fail to wear PPE or wear it inappropriately invite injury. Employers should not assume that responders know how or even when to use certain PPE--regular in-service training should be provided. As a responder, you have a responsibility to always undertake safe actions. If you follow this monthly column, you have no doubt heard me say repeatedly that nothing, absolutely nothing, supercedes safety. You are not an expendable resource. Wear your PPE and, most important, wear it the right way.