抵抗素促进子宫内膜癌细胞生长作用机制的探讨

目的:研究抵抗素对子宫内膜癌细胞增殖的影响及其对子宫内膜癌细胞PI3K/Akt信号传导通路的作用。方法:CCK-8法检测不同浓度抵抗素(0ng/ml、10ng/ml、50ng/ml、100ng/ml、200ng/ml)对Ishikawa和KLE两种子宫内膜癌细胞系增殖的影响。Western blot法检测不同浓度抵抗素作用下PI3K/Akt信号通路的变化及PI3K/Akt信号通路抑制剂对抵抗素活化PI3K/Akt信号通路作用的影响。结果:抵抗素能促进两种子宫内膜癌细胞系Ishikawa和KLE的生长,并呈时间和浓度依赖性。抵抗素可促进两种子宫内膜癌细胞系中PI3K/Akt信号通路的激活。PI3K/Akt信号通路抑制剂LY29004可减弱抵抗素诱导的Akt磷酸化水平。结论:抵抗素能促进子宫内膜癌细胞增殖,这种作用可通过激活PI3K/Akt信号通路来实现。     

PI3K/Akt/mTOR和MAPK信号通路与子宫内膜异位症的研究进展

子宫内膜异位症(EMs)是常见的妇科良性疾病,却具有侵袭、转移等特性。PI3K/Akt/m TOR和MAPK信号通路是两条重要的细胞内信号转导通路,在多种细胞反应中发挥着重要作用。研究显示,在EMs中存在PI3K/Akt/m TOR和MAPK信号通路的过度激活,并通过调节细胞黏附分子(CAM)、基质金属蛋白酶(MMP)、血管内皮生长因子(VEGF)及凋亡因子等的表达,影响异位内膜的黏附、侵袭,血管生成及凋亡,并受激素水平的调控,促进了子宫内膜细胞的异位侵袭和转移,与EMs的发生、发展密切相关。     

PARP抑制剂在子宫内膜癌治疗中的研究进展

子宫内膜癌是世界范围内第二常见的女性生殖道恶性肿瘤,晚期、复发及特殊病理类型的子宫内膜癌预后不佳且缺乏有效的治疗手段。PARP抑制剂主要是通过合成致死效应选择性杀伤同源重组修复缺陷的肿瘤细胞,其在卵巢癌的治疗中取得了良好成绩,但在子宫内膜癌中的临床应用暂未广泛开展。子宫内膜癌是携带高HRR突变基因的一类肿瘤,PARP抑制剂单药治疗子宫内膜癌的个案取得了良好疗效,而其联合PI3K/AKT/m TOR通路抑制剂、抗血管生成剂以及免疫检查点药物相关的临床研究也相继开展。     

PI3K/AKT/mTOR信号通路在卵巢透明细胞癌中的研究进展

卵巢透明细胞癌(OCCC)是上皮性卵巢癌的一种特殊组织学类型,对传统的化疗方案耐药,预后不良,寻找新的靶向治疗方案迫在眉睫。磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶体蛋白(PI3K/AKT/m TOR)信号通路在卵巢癌的发生和发展中发挥重要作用,并且与化疗耐药密切相关。该通路的活化不但可以抑制细胞凋亡,促进细胞增殖,还参与肿瘤的侵袭与转移。在OCCC中,PI3K/AKT/m TOR信号通路中的多种蛋白表达异常,该通路中的受体及激酶可能成为治疗OCCC的潜在靶点。现有研究表明PI3K/AKT/m TOR通路抑制剂不仅能增加紫杉醇或顺铂的细胞毒性效应,还可影响OCCC细胞系的生长情况。特别是OCCC中最常见的AT丰富结合域1A(ARID1A)突变与PI3K/AKT/m TOR信号通路关系十分密切。因此,针对PI3K/AKT/m TOR信号通路开发新的靶向治疗药物可能对OCCC的治疗具有一定意义。综述该通路与OCCC的关系,以期为探索新的靶向治疗提供理论基础。     

抑制PI3K/Akt信号通路拮抗胰岛素诱导的子宫内膜癌细胞增殖

目的:研究抑制磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/Akt信号通路对胰岛素诱导的子宫内膜癌细胞增殖的拮抗作用。方法:将无血清饥饿的子宫内膜癌Ishikawa3-H-12细胞分为空白对照组、10-6mol/L胰岛素单独刺激组以及不同剂量PI3K抑制剂-LY294002预处理后再用胰岛素刺激组。Western blot检测各组Akt磷酸化(p-Akt)水平,MTT试验观察细胞增殖情况。结果:胰岛素可引起内膜癌细胞Akt活化,刺激15min后p-Akt/Akt比值显著高于空白对照组(68.68%vs 26.21%,P<0.001)。LY294002以浓度依赖方式抑制胰岛素引起的Akt磷酸化。MTT试验显示,在药物处理24h,48h和72h 3个时间点,不同组别570nm吸光度值(OD570nm)均有显著差异(F=156.329,700.973,812.224,均P<0.001)。胰岛素组OD570nm值均高于同时间点的空白对照组(均P<0.001),胰岛素促内膜癌细胞增殖作用于48h时最为显著。LY294002可抑制胰岛素的增殖促进作用,此抑制作用具有浓度依赖性。不同剂量LY294002抑制作用的时间依赖性不同,48h时小剂量(0.1、1、10μmol/L)的抑制作用最为显著,72h时胰岛素重新呈现一定的促增殖作用;而50μmol/L LY294002可以持久抑制胰岛素的促增殖作用。结论:PI3K抑制剂LY294002可以通过抑制Akt磷酸化阻断胰岛素信号传导,拮抗后者促子宫内膜癌细胞增殖的作用。     

胰岛素样生长因子-1及其受体在子宫内膜癌中的研究进展

胰岛素样生长因子-1(IGF-1)能通过Ras/Raf/MEK/MAPK-Erk(有丝分裂原活化蛋白激酶)和PI3K/Akt信号通路来调控子宫内膜癌细胞的生长、增殖、转移及凋亡。靶向IGF-1、胰岛素样生长因子-1受体(IGF-1R)及其信号通路治疗可以抑制子宫内膜癌细胞的增殖和促进癌细胞凋亡,增强癌细胞对化疗药物的敏感性,减少癌细胞转移。因此将IGF-1、IGF-1R及其信号通路作为治疗靶点为临床诊疗提供了新思路。本文综述了IGF-1、IGF-1R及其信号通路在子宫内膜癌诊断和靶向治疗中的研究进展。     

PI3K/Akt信号通路与卵巢早衰相关性的研究进展

近年研究发现,PI3K/Akt信号通路参与卵巢早衰(POF)疾病发生。磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)和蛋白激酶B(Akt)的过度激活可使原始卵泡过早发育及卵泡过快凋亡,进而发展成为POF。本文就关于PI3K/Akt信号通路与POF关系的研究进展做一综述。     

长链非编码RNA与子宫内膜癌关系的研究进展

子宫内膜癌是妇科常见的恶性肿瘤之一,其发病率逐年增长。长链非编码RNA(lncRNA)是非编码RNA家族的成员之一,近年研究发现其在子宫内膜癌的病理过程中发挥重要的调控作用,成为研究热点。lncRNA可作为促进基因,通过人类第10号染色体上磷酸酶和张力蛋白同源缺失的基因/磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PTEN/PI3K/AKT/mTOR)、Wnt/β连环蛋白(Wnt/β-Catenin)、细胞外信号调节激酶/腺苷酸活化蛋白激酶(ERK/AMPK)等多种信号通路调控子宫内膜癌细胞的增殖、迁移、侵袭、凋亡过程,亦可通过PTEN/PI3K/AKT/mTOR途径抑制子宫内膜癌过程。在lncRNA调控子宫内膜癌的过程中,形成的lncRNA-miRNA轴可作为未来干预治疗的新方向。lncRNA还可影响化疗药的耐药性,并对子宫内膜癌的诊断和预后有重要价值。综述近年lncRNA和子宫内膜癌的研究,为lncRNA对于子宫内膜癌的诊断、预后或治疗靶点提供理论依据。     

长链非编码RNA与子宫内膜癌关系的研究进展

子宫内膜癌是妇科常见的恶性肿瘤之一,其发病率逐年增长。长链非编码RNA(lncRNA)是非编码RNA家族的成员之一,近年研究发现其在子宫内膜癌的病理过程中发挥重要的调控作用,成为研究热点。lncRNA可作为促进基因,通过人类第10号染色体上磷酸酶和张力蛋白同源缺失的基因/磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PTEN/PI3K/AKT/mTOR)、Wnt/β连环蛋白(Wnt/β-Catenin)、细胞外信号调节激酶/腺苷酸活化蛋白激酶(ERK/AMPK)等多种信号通路调控子宫内膜癌细胞的增殖、迁移、侵袭、凋亡过程,亦可通过PTEN/PI3K/AKT/mTOR途径抑制子宫内膜癌过程。在lncRNA调控子宫内膜癌的过程中,形成的lncRNA-miRNA轴可作为未来干预治疗的新方向。lncRNA还可影响化疗药的耐药性,并对子宫内膜癌的诊断和预后有重要价值。综述近年lncRNA和子宫内膜癌的研究,为lncRNA对于子宫内膜癌的诊断、预后或治疗靶点提供理论依据。     

GOLPH3通过PI3K/Akt信号通路调控上皮性卵巢癌细胞增殖与凋亡的研究

目的:探讨GOLPH3基因对上皮性卵巢癌细胞增殖及凋亡的影响及作用机制。方法:siRNA干扰技术沉默SKOV3细胞株中GOLPH3基因表达,MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot法检测PI3K/Akt信号通路相关基因Akt、p-Akt 473、p-Akt 308及Bcl-2表达。PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002处理卵巢癌SKOV3细胞后,检测SKOV3细胞的增殖能力及凋亡情况。结果:siRNA干扰SKOV3细胞株中GOLPH3基因,GOLPH3表达下调,细胞增殖减少,凋亡增多;PI3K/Akt信号通路相关基因p-Akt 473、p-Akt 308、抗凋亡基因Bcl-2蛋白表达水平均下降,Akt蛋白水平表达无显著变化。LY294002处理SKOV3细胞后,细胞增殖率降低,凋亡率升高。结论:GOLPH3基因可能通过激活PI3K/Akt信号通路促进卵巢癌细胞增殖,并抑制其凋亡的作用。     

PI3K/PKB信号传导通路与子宫内膜癌研究进展

磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(PKB)信号通路是许多生长因子、细胞因子等的下游信号传导通路,通过抑制细胞凋亡,促进细胞生长、增殖、迁移、侵袭和肿瘤血管生成而与肿瘤发生发展密切相关。许多与子宫内膜癌相关的因素通过PI3K/PKB通路参与肿瘤发生发展,这为子宫内膜癌病因学研究及寻找新的治疗靶点提供了新思路。     

PI3K/PKB信号传导通路与子宫内膜癌研究进展

磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(PKB)信号通路是许多生长因子、细胞因子等的下游信号传导通路,通过抑制细胞凋亡,促进细胞生长、增殖、迁移、侵袭和肿瘤血管生成而与肿瘤发生发展密切相关.许多与子宫内膜癌相关的因素通过PI3K/PKB通路参与肿瘤发生发展,这为子宫内膜癌病因学研究及寻找新的治疗靶点提供了新思路.     

色素上皮衍生因子通过抑制PI3K/Akt通路降低宫颈癌HeLa细胞活性和侵袭相关蛋白表达

目的：探讨色素上皮衍生因子（PEDF）通过抑制磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信号通路,从而下调人宫颈癌HeLa细胞的活性和侵袭相关蛋白c-Met表达的相关机制。方法：选取本院病理已确诊的40例宫颈癌样本及对应的40例癌旁正常组织样本,通过免疫组织化学法检测PEDF、PI3K和p-Akt蛋白的表达。在细胞水平分为正常宫颈上皮细胞HCerEpiC组、HeLa组、HeLa+PEDF组、HeLa+PEDF+PI3K/Akt激活剂组和HeLa+PI3K/Akt抑制剂组。通过蛋白质印迹（Western blotting）检测各组细胞内PEDF、PI3K、p-Akt、Akt及c-Met蛋白的表达水平,CCK-8法检测各组细胞的活性。结果：宫颈癌样本和HeLa细胞中的PI3K/Akt通路显著激活,且PEDF表达显著下降（P＜0.01）。PEDF可以显著抑制HeLa细胞中PI3K/Akt激活和细胞活性以及侵袭相关蛋白水平的增加（P＜0.01）。Akt激活剂可以逆转PEDF对HeLa细胞活性和侵袭蛋白表达的影响,而激活PI3K无法改变PEDF的作用。单纯的药物抑制PI3K/Akt通路不足以模拟PEDF对HeLa细胞的作用。结论：PEDF通过PI3K/Akt双重抑制作用降低HeLa细胞活性和侵袭相关蛋白表达,这为临床上PEDF治疗宫颈癌提供了新的思路和理论依据。     

子宫内膜癌患者孕激素抵抗机制的研究

子宫内膜癌是发达国家最常见的妇科恶性肿瘤之一,也是女性癌症患者的第八大死亡因素,在我国其发病率仅次于宫颈癌。对早期、复发及有生育要求的子宫内膜癌患者,孕激素治疗是主要治疗措施。但部分子宫内膜癌患者对孕激素治疗不敏感(即孕激素抵抗),给临床治疗带来困难。研究发现,在机体循环过程中有多种因素可导致孕激素抵抗,其中孕激素受体的异常改变是目前孕激素抵抗的主要原因。此外,Fas/Fasl、PI3K/Akt、Survivin、EGFR及胰岛素抵抗等都与孕激素抵抗密切相关。     

SDF-1对卵巢癌细胞增殖和侵袭能力作用的相关通路研究

目的:探讨PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002、MEK通路抑制剂PD98059对基质衍生因子-1(SDF-1)作用下卵巢癌细胞SKOV3的增殖、侵袭能力的影响,初步探讨SDF-1在卵巢癌中的相关作用通路。方法:细胞免疫化学法检测SDF-1不同作用时间及不同作用浓度对卵巢癌细胞中磷酸化Akt(p-Akt)和ERK(p-ERK)表达的影响。选取对数生长期细胞,分别加SDF-1 100ng/ml、CXCR4中和抗体10μg/ml、CXCR4抑制剂AMD3100 1μg/ml、LY294002 50μmol/L、PD98059 50μmol/L。MTT、Transwell细胞侵袭实验检测细胞的增殖、侵袭能力的变化。结果:随着SDF-1作用时间的延长,p-Akt、p-ERK蛋白表达水平增高;Akt、ERK蛋白的最佳活化时间为30min。作用30min时,随着SDF-1作用浓度的增加,p-ERK1、p-Akt蛋白表达水平增高,差异具有统计学意义(P0.05)。SDF-1可明显促进SKOV3细胞的增殖、侵袭能力(P0.05);但加入CXCR4中和抗体、CXCR4抑制剂AMD3100、通路抑制剂PD98059、LY294002后,SKOV3细胞的增殖、侵袭能力无明显变化(P0.05)。结论:SDF-1对卵巢癌SKOV3细胞的增殖、侵袭能力的增强作用可被PI3K/Akt信号通路抑制剂、MEK通路抑制剂所阻断。SDF-1可能通过Ras/ERK信号转导通路、PI3K/Akt信号通路发挥作用。     

色素上皮衍生因子通过抑制PI3K/Akt通路降低宫颈癌HeLa细胞活性和侵袭相关蛋白表达

目的:探讨色素上皮衍生因子(PEDF)通过抑制磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路,从而下调人宫颈癌HeLa细胞的活性和侵袭相关蛋白c-Met表达的相关机制。方法:选取本院病理已确诊的40例宫颈癌样本及对应的40例癌旁正常组织样本,通过免疫组织化学法检测PEDF、PI3K和p-Akt蛋白的表达。在细胞水平分为正常宫颈上皮细胞HCerEpiC组、HeLa组、HeLa+PEDF组、HeLa+PEDF+PI3K/Akt激活剂组和HeLa+PI3K/Akt抑制剂组。通过蛋白质印迹(Western blotting)检测各组细胞内PEDF、PI3K、p-Akt、Akt及c-Met蛋白的表达水平,CCK-8法检测各组细胞的活性。结果:宫颈癌样本和HeLa细胞中的PI3K/Akt通路显著激活,且PEDF表达显著下降(P0.01)。PEDF可以显著抑制HeLa细胞中PI3K/Akt激活和细胞活性以及侵袭相关蛋白水平的增加(P0.01)。Akt激活剂可以逆转PEDF对HeLa细胞活性和侵袭蛋白表达的影响,而激活PI3K无法改变PEDF的作用。单纯的药物抑制PI3K/Akt通路不足以模拟PEDF对HeLa细胞的作用。结论:PEDF通过PI3K/Akt双重抑制作用降低HeLa细胞活性和侵袭相关蛋白表达,这为临床上PEDF治疗宫颈癌提供了新的思路和理论依据。     

TFF3激活PI3K/Akt通路参与宫颈腺癌的发病机制

目的:探讨TFF3通过激活PI3K/Akt信号通路调控宫颈腺癌发生发展的机制。方法:TFF3细胞因子和PI3K/Akt信号通路抑制剂(LY294002)或两者共同处理Hela细胞,CCK-8法检测Hela细胞增殖能力,Transwell小室观察细胞迁移能力,流式细胞学方法检测细胞凋亡,Western blot检测PI3K/Akt信号通路关键蛋白Akt及其激活状态蛋白p-Akt的表达。结果:与对照组相比,TFF3处理后Hela细胞的增殖和迁移能力明显提高,细胞凋亡减弱,差异有统计学意义(P0.05);LY294002处理后Hela细胞的增殖及迁移能力明显降低,细胞凋亡增多,差异有统计学意义(P0.05);TFF3+LY294002处理后Hela细胞的增殖、迁移能力及细胞凋亡与TFF3和LY294002处理组比较,差异均有统计学意义(P0.05)。Western blot结果表明,TFF3能激活p-Akt基因表达。结论:TFF3能通过提高p-Akt蛋白表达激活PI3K/Akt信号通路,从而参与调节宫颈腺癌细胞的恶性行为。     

阻断PI3K/PKB通路对卵巢癌OVACA-3细胞株增殖和凋亡的影响

目的采用PI3K/PKB信号传导通路特异性抑制剂LY294002作用于人卵巢癌OVACA-3细胞,观察阻断PI3K/PKB信号传导通路对卵巢癌细胞增殖和凋亡等生物学特性的影响,揭示阻断PI3K/PKB信号传导通路治疗卵巢癌的机理和可行性。方法不同浓度的PI3K抑制剂LY294002作用于人卵巢癌OVACA-3细胞后,运用Western Blotting检测P-AKT及细胞核内NF-κBp65表达情况;MTT法、Annexin V-FITC流式细胞技术检测不同浓度的LY294002对卵巢癌OVACA-3细胞增殖及凋亡的影响。结果 LY294002可抑制人卵巢癌OVACA-3细胞中通路效应蛋白AKT、NF-κBp65的激活,且呈浓度及剂量依赖性。LY294002对细胞增殖抑制作用具有时间依赖性(F=10.398,P=0.001)和剂量依赖性(F=9.801,P=0.002)。LY294002可使卵巢癌细胞S期比例显著减少,G0/G1期比例增多,提示LY294002促使细胞在细胞周期G0-G1期受到阻滞。最终,抑制卵巢癌细胞增殖,促使其发生细胞凋亡,使细胞周期停滞在G1期。结论 PI3K/PKB信号传导通路阻断剂LY294002有可能成为治疗卵巢癌的新药,阻断PI3K/AKT信号传导通路可作为治疗卵巢癌的新切入点。     

巨噬细胞移动抑制因子在妇科恶性肿瘤中的研究进展

巨噬细胞移动抑制因子(MIF)是近年研究非常广泛的细胞因子之一。生理情况下,MIF可以介导炎症及免疫反应,参与胚胎期的发育、组织创伤后的修复等。MIF还被证实在妇科恶性肿瘤,如宫颈癌、卵巢癌、子宫内膜癌等的发展过程中发挥重要作用,并与肿瘤的恶性程度密切相关。MIF可以激活多种信号通路,如c-Jun氨基末端激酶(JNK/cJun)、磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)等,通过促进细胞增殖、黏附、转移、血管新生、上皮间质转化和增强免疫抑制等方式加速肿瘤的发展。此外,许多研究都显示,抑制MIF的分泌及生物学活性可以有效减慢,甚至逆转肿瘤的发展,有效的MIF抑制剂有望成为治疗癌症的新希望。     

表皮生长因子受体信号通路对卵巢癌细胞自噬的调控

表皮生长因子受体(EGFR)下游的信号通路影响卵巢癌细胞的多种生理活动,包括对自噬的调节。自噬是细胞自我消化的过程,既是细胞在不利生存条件下的自我保护机制,又可以诱导细胞凋亡,并可引起肿瘤耐药。在卵巢癌细胞中,EGFR-Ras-Raf-c-Jun氨基末端激酶(JNK)通路、EGFR-磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)-蛋白激酶B(Akt)-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)通路和EGFR-两面神激酶(JAK)-信号传导和转录激活因子3(STAT3)通路对自噬既有促进作用,又有抑制作用。近年来,EGFR抑制剂试图通过阻断EGFR信号通路,抑制卵巢癌细胞自噬活动,逆转耐药。综述EGFR下游的3条主要信号通路对卵巢癌细胞自噬的调控作用,以期为卵巢癌的治疗和抗耐药提供新的作用靶点。