不同方向外力打击致兔颅脑损伤时血清髓鞘碱性蛋白浓度的变化

背景垂直与水平打击产生的受力不同造成破坏性病变程度是否一致?血液中的髓鞘碱性蛋白含量变化与打击形式是否有关联?目的观察不同方向外力打击致兔颅脑损伤时血清髓鞘碱性蛋白浓度以及脑组织形态学变化.设计随机对照实验.单位一所医学院附属医院的神经外科.材料实验于2003-10/2004-01在沈阳医学院中心实验室完成.选择健康家兔30只,雌雄不拘,随机分为垂直打击组和水平打击组,15只/组.方法将全部家兔麻醉后俯卧位固定于多向颅脑损伤打击器的固定台上.分别抽取每只家兔的耳缘静脉血1 mL,用作受伤前髓鞘碱性蛋白对照.垂直打击组实施垂直打击,打击锤直接垂直撞击于颅顶骨上;水平打击组实施水平打击,打击锤水平撞击于兔头侧方.48 h后按相同方法制备两组血清,用作受伤后髓鞘碱性蛋白对照.最后将两组动物断头处死作病理检查.主要观察指标①打击前后两组血清髓鞘碱性蛋白浓度的变化差异.②两组颅脑损伤后的病理形态变化差异.结果按意向处理分析,30只动物均纳入实验.①两组家兔遭遇打击前髓鞘碱性蛋白浓度无明显差异.遭遇打击48 h后髓鞘碱性蛋白浓度垂直打击组与水平打击组亦无明显差异(P＞0.05);②垂直打击组髓鞘碱性蛋白打击前浓度明显低于打击后浓度[(1.68±0.86),(5.25±1.96)μg/L,t=3.226,P＜0.05];水平打击组髓鞘碱性蛋白打击前浓度明显低于打击后浓度[(1.70±0.91),(5.73±2.07)μg/L,t=3.080,P＜0.05].③打击后病理形态变化垂直打击组双侧额顶近中线部位出现皮层脑组织内血管扩张充血,深层白质水肿,血管外和细胞外间隙明显扩大;水平打击组动物除双侧额顶近中线部位出现与垂直打击组相似变化外,相同的病理还可见于颅底面,但深层白质的病理形式与前者基本一致.结论垂直或水平方向的外力打击均可造成脑损伤.打击前后髓鞘碱性蛋白浓度和打击后病理形态学表明这两种不同方向的外力打击使实验模型兔颅脑受损程度大致接近.     

肺保护性机械通气对急性肺损伤家兔血氧合指数及支气管灌洗液细胞因子和酶的影响

目的：观察不同机械通气模式对实验家兔血氧合指数和支气管肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、白细胞介素6、乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶的影响，探讨保护性机械通气减轻机械通气相关肺损伤的生物学机制。方法：2003—05／2004—02在解放军总医院动物实验中心完成动物实验，细胞因子的测定在解放军总医院呼吸内科实验室完成。实验选用清洁级健康雄性家兔30只，随机分为5组，每组6只。①油酸对照组：油酸注射、仰卧位、呼气末正压0kPa、潮气量13～15mL／kg。②小潮气+呼气末正压组：油酸注射，仰卧位，呼气末正压0．78kPa，潮气量8mL／kg。③单纯俯卧位组：注射油酸，俯卧位，呼气末正压0kPa，潮气量13～15mL／kg。④俯卧位+小潮气+呼气末正压组：油酸注射、俯卧位、呼气末正压0．78kPa，潮气量8mL／kg。⑤空白对照组：不注射油酸，仰卧位，呼气末正压0kPa，潮气量13～15mL／kg。通过将家兔油酸型急性肺损伤模型应用4种不同模式机械通气，比较支气管肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子α，白细胞介素1β，白细胞介素6和乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶的变化。结果：最终进入结果分析家兔30只。①5个实验组家兔基础氧合指数无明显差异，置管对氧合指数无影响(P&;gt;0．05)，4个注射油酸1．5h后的实验组家兔，氧合指数明显低于空白对照组。②油酸对照组和单纯俯卧位组家兔支气管肺泡灌注液肿瘤坏死因子α水平[(15．523&;#177;6．884)，(9．038&;#177;4．737)μg／L]明显高于小潮气+呼气末正压+俯卧位组和空白对照组[(0．985&;#177;0．538)，(0．357&;#177;0．151)μg／L，P&;lt;0．05]；油酸对照组肿瘤坏死因子α水平明显高于小潮气+呼气末正压组[(0．982&;#177;0．357)μg／L，P&;lt;0．05]。③单纯俯卧位组白细胞介素1β水平[(2．208&;#177;0．828)μg／L]明显高于小潮气+呼气末正压+俯卧位组和空白对照组[(0．596&;#177;0．399)，(0．472&;#177;0．200)μg／L，P&;lt;0．05]。④油酸对照组和单纯俯卧位组家兔支气管肺泡灌注液白细胞介素6水平[(1491．212&;#177;549．590)，(1102．14&;#177;477．368)μg／L]明显高于小潮气+呼气末正压+俯卧位组和空白对照组[(177．803&;#177;53．914)，(295．855&;#177;86．609)μg／L，P&;lt;0．05]；油酸对照组白介素6水平明显高于小潮气+呼气末正压组[(229．332&;#177;54．418)μg／L，P&;lt;0．05]。⑤小潮气+呼气末正压组、小潮气+呼气末正压+俯卧位组、空白对照组家兔支气管肺泡灌注洗液碱性磷酸酶、乳酸脱氢酶活性明显低于油酸对照组[碱性磷酸酶：(0．48&;#177;0．18)，(0．44&;#177;0．15)，(0．59&;#177;0．39)，(1．19&;#177;0．37)μkat／L；乳酸脱氢酶：(0．07&;#177;0．05)，(0．06&;#177;0．05)，(0．05&;#177;0．01)，(0．25&;#177;0．18)μkat／L，P&;lt;0．05]。结论：肺保护性通气不仅可以改善氧合，同时可以抑制支气管肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、白细胞介素6和乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶的释放，减轻血管内皮细胞损伤及降低通透性，减少渗出，减少呼吸机相关肺损伤。     

贴附式头部亚低温治疗后胆红素脑病仔兔血中髓鞘碱性蛋白的改变

目的 通过贴附式头部亚低温对胆红素脑病仔兔治疗前后血中髓鞘碱性蛋白的测定，揭示贴附式头部亚低温对胆红素脑病有保护作用。方法 实验于2003—07／2005—09在哈尔滨医科大学完成。取生后两三天纯系新西兰仔兔20只，随机分为正常对照组仔兔10只，胆红素脑病仔兔10只。①胆红素脑病仔兔动物模型的建立。②胆红素脑病仔兔采用贴附式头部亚低温治疗48h。③采用酶联免疫法测定两组兔治疗前后血清中髓鞘碱性蛋白含量。结果 20只兔均进入结果分析。胆红素脑病仔兔血清髓鞘碱性蛋白含量治疗后较治疗前明显降低[（1．11&;#177;0.49），（1．87&;#177;0．51）μg／L，t=3．45，P〈0．01]；胆红素脑病仔兔治疗前血清髓鞘碱性蛋白含量明显高于正常组[（1．06&;#177;0．54）μg／L]（t=3．52，P〈0．01）。结论 ①贴附式头部亚低温对胆红素脑病有保护作用。②血中髓鞘碱性蛋白含量可作为胆红素致脑损伤早期诊断的敏感指标。     

胰岛素对缺血再灌注心肌超微结构和细胞凋亡的影响

目的：探讨极化液(胰岛素)对家兔心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法：选择健康雄性家兔48只，按随机抽签法分为3组：对照组，胰岛素组，葡萄糖-钾-胰岛素(gluecose-insulin-potassmm，GIK)组，每组16只。制备兔心肌缺血再灌注损伤模型，分别用GIK、胰岛素、生理盐水干预分组。再灌注结束后检测心肌梗死面积，在电镜下观察心肌细胞的超微结构，原位末端标记(TUNEL)法测定凋亡心肌细胞，免疫组化SP法测定原癌基因蛋白(Bcl-2)，Fas的含量。结果：与对照组比较，GIK及胰岛素组家兔心肌细胞超微结构表现为损伤减轻，心肌梗死面积明显减少[GIK组(38.9&;#177;4．33)％，胰岛素组(40．8&;#177;5．22)％，对照组(54．42&;#177;4．27)％](q=4．32，3．95．P&;lt;0.05)，凋亡指数[GIK组(1．38&;#177;0，82)，胰岛素组(1．28&;#177;0．54)，对照组(2．15&;#177;0，19)](q=0，65，0．72，P&;lt;0．05)和Fas含量显著减少(q=0.07，0．06，P&;lt;0．05)，Bcl-2含量增加(q=0．14，0．11．P&;lt;0．05)。GIK组和胰岛素组心肌细胞凋亡指数及Fas，Bcl-2蛋白含量比较，差异无显著性意义(P&;gt;0．05)。结论：GIK具有抗缺血再灌注损伤的作用，其机制可能是通过胰岛素调节Bcl-2和Fas介导的心肌缺血再灌注细胞凋亡而实现。     

心肌梗死后心力衰竭雄兔体内雄激素变化特征

目的：观察心肌梗死后心力衰竭雄兔体内雄激素水平变化特点。方法：实验于2003-09／2004—04在空军总医院动物研究中心和解放军总医院心内科实验室完成。实验选用60只4～5月龄健康雄性新西兰大白兔，随机将其分为模型组(n=52)和假手术组(n=8)。模型组进行冠状动脉结扎。造模3周后随机挑选10只模型兔继续观察到第15周，分别于造模前、心肌梗死后3，15周测定血清游离睾酮和硫酸脱氢表雄酮水平，并于同期行超声心动图检查评价左心室功能。结果：术后3周模型组、假手术组仍存活40，8只，15周时假手术组和模型组各存活7只。测兔血清雄激素水平时，由于部分兔子的血样不合格而剔除。①心肌梗死后(心肌梗死后3周即视为心力衰竭)3，15周模型组雄兔血清游离睾酮水平明显低于假手术组[(100．02&;#177;23．99)，(65．23&;#177;20．53)ng／L；(132．00&;#177;24．49)，(127．50&;#177;19．00)ng／L，t=3．31，5．68，P&;lt;0．05]。②心肌梗死后3，15周模型组雄兔血清硫酸脱氢表雄酮水平明显低于假手术组[(0．060&;#177;0．014)，(0．060&;#177;0．010)mg／L；(0．086&;#177;0.010)，(0.087&;#177;0．020)mg／L，t=3．94，2．92，P&;lt;0．05]。结论：从雄激素变化的角度讲，结扎兔冠状动脉后制作的心力衰竭模型具有复制人群心力衰竭的特征。本实验中心力衰竭雄兔血清游离睾酮和硫酸脱氢表雄酮水平显著下降，说明了雄激素水平下降是机体在心力衰竭发生发展过程中的内分泌反应之一。     

定志小丸对抑郁模型大鼠海马神经元结构和功能及雌激素分泌的影响

目的：观察定志小丸对抑郁模型大鼠海马神经元和血清雌二醇的影响。方法：实验于2004-09／2005-01在辽宁中医学院中心实验室进行。取成年Wistar雌性大鼠，采用0penfield法进行行为学评分，选评分相近的40只大鼠随机分为正常组、模型组、生理盐水组和定志小丸组，每组10只。除正常组外其他3组采用慢性不可预见性应激造成大鼠抑郁模型，定志小丸组于每次刺激前半小时灌服0．02mL／g的定志小丸提取物的浓缩液(1μg／L)，生理盐水组灌服等容积生理盐水。应用0penfield法在刺激前和刺激后第22天测定行为学(以3min内大鼠水平穿越方格数作为水平活动得分、前肢抬起次数为垂直活动得分)，放免法测定血清雌二醇水平，苏木精一伊红染色观察海马神经元形态变化。结果：所有40只大鼠均进入结果分析。①海马形态学：模型组和生理盐水组海马结构不清晰，细胞形态异常；定志小丸组与正常组无明显差异。②行为学评分：刺激前各组水平活动和垂直活动得分比较均无差异(P&;gt;0．05)，至第22天，模型组和生理盐水组的水平活动得分较正常组低[(34．9&;#177;16．3)，(30．5&;#177;17．7），(48．4&;#177;21．5）次，P&;lt;0．01]，垂直活动得分也较正常组低[(7．2&;#177;3．9)，(6．5&;#177;2．6)，(10．0&;#177;3．2)次，P&;lt;0．01)；定志小丸组此两项评分与正常组无明显差异[(49．3&;#177;23．6)，(9．9&;#177;3．0)次，P&;gt;0．05]。③血清雌二醇：模型组和生理盐水组雌二醇浓度低于正常组[(37．15&;#177;6．90)，(33．34&;#177;14．31)，(64．27&;#177;28．18)pmol／L，t=3．477，6．757，P&;lt;0．01]，而定志小丸组与正常组比无差异[(55．80&;#177;26．32)pmol／L，P&;gt;0．05]。结论：定志小丸对抑郁症模型大鼠的海马组织具有保护作用，对雌激素分泌有调整作用。     

术中应用携氧液对高血压脑出血患者血清髓鞘碱性蛋白的影响

背景：在高血压脑出血的治疗中，目前临床上应用多种方式改善机体缺氧，术中应用携氧液是否对高血压脑出血患者神经细胞有保护作用?目的：研究高血压脑出血术中应用携氧液对患者神经元特异性烯醇化酶的影响及脑保护作用。设计：随机对照的实验研究。地点和对象：研究地点为南京医科大学脑科医院临床麻醉研究室，对象为1999／2001年南京脑科医院收治的高血压脑出血手术患者。选择头颅CT示出血量40～60mL，美国麻醉协会(ASA)分级为Ⅰ～ⅡI级，其中男26例，女14例，平均62岁。随机分为携氧液组和对照组。方法：两组术中分别采用输注携氧液和平衡液。主要观察指标：分别观察两组患者术前和术后12h的血清髓鞘碱性蛋白的浓度，术前和术后第7天的格拉斯格评分以及手术各阶段的颅内压力。结果：两组颅内压在手术前和诱导后无差别，在清除血肿至术毕，携氧液组颅内压[(1．87&;#177;0．24，1．73&;#177;0．18)kPa]明显低于对照组[(2．10&;#177;0．38，1．92&;#177;0．22)kPa][(t=2．37，P&;lt;0．05；t=3．06，P&;lt;0．01)]；术后12h，携氧液组血清髓鞘碱性蛋白[(4．1&;#177;1．35)μg／L]明显低于对照组[(5．2&;#177;1．42)μg／L](t=2．58，P&;lt;0．05)。术后第7天，携氧液组格拉斯哥评分(13．6&;#177;0．88)明显高于对照组(12．7&;#177;1．22)(t=2．74，P&;lt;0．05)。结论：在高血压脑出血术中早期输入携氧液对血肿脑周围组织提供早期干预，有效减轻脑水肿，改善脑组织缺血缺氧，挽救血肿周围可逆性损伤的神经元是一项有效的措施，有利于高血压脑出血患者的脑保护。     

不同程度低氧对家兔心电图变化的影响

目的：探讨不同程度低氧对家兔心电图的影响。方法：选择家兔30只，随机分为3组，以吸入空气为对照组，吸入125mL／L氮氧混合气体为低氧125mL／L组，吸入85mL／L氮氧混合气体为低氧85mL／L组。急性低氧时间分为5，10，15，20min，分别测定不同低氧时间的心电图变化情况。结果：与对照组比较，两个急性低氧组心电图变化情况：心率明显减慢(P&;lt;0．05)，P波时间延长(P&;lt;0．05～0．01)，电压降低(P&;lt;0.05～0．01)；P—R，QRS间期延长(P&;gt;0．05，&;lt;0．01)；ST段两组都抬高在基线上，以低氧85mL／L组抬高较明显[实验前，低氧5,10，15，20min分别为(0．109&;#177;0．019)，(0.120&;#177;0.027)，(0.132&;#177;0．027)，(0．163&;#177;0.036)，(0．167&;#177;0．039)mV](P&;lt;0．05～0．01)；T波电压稍降低但不明显(P&;gt;0.05)；QT间期延长(P&;lt;0．05～0．01)；R波电压在低氧125mL／L组升高，而低氧85mL／L组降低(P&;gt;0．05)；S波深度变浅(P&;gt;0．05)．结论：急性低氧对家兔心电图的影响根据其低氧程度不同有明显的变化．     

余甘子对动脉粥样硬化家兔血浆总抗氧化能力及丙二醛和内皮素1水平的影响

背景：余甘子含有丰富的维生素C、有机酸及矿物质。现代研究表明．余甘子还含有防癌、抗衰老等功效。近年来，对余甘子功能因子的研究及其相应功能食品的开发越来越引起重视。其降脂作用及其体外抗氧化作用已得到证实，但尚缺乏足够的基础研究支持。目的：探讨余甘子提高高脂血症家兔机体抗氧化能力及保护血管内皮功能作用及其机制。设计：以实验动物为研究对象的随机对照的实验研究。单位：一所大学医院的动脉硬化实验室。材料：健康新西兰家兔24只，雄性，体质量(2．2&;#177;0．5)kg。方法：实验于2001-09／2002-05在北京市安贞医院动脉硬化实验室完成。将24只新西兰雄性白兔随机分为对照组、余甘子粉组(4g／kg&;#183;d)和高胆固醇血症模型组，每组8只，余甘子和高胆固醇组实验期间均饲以高胆固醇饮食。采用酶法测定血清脂质含量；化学法测定血浆总抗氧化能力和丙二醛含量；放免法测定血浆内皮素-1含量；地高辛标记探针，组织原位杂交检测主动脉内膜内皮素mRNA表达；图象分析法测定主动脉内膜粥样硬化斑块面积，和内膜面积与中膜面积比值。主要观察指标：主要结局为家兔血脂水平，血清丙二醛浓度，及动脉斑块面积比较。次要结局为血浆内皮素-1的变化。结果：实验8周后余甘子果粉组与高脂组相比，①血清总胆固醇(total cholesterol，TC)、三酰甘油(triglyceride，TG)、低密度脂蛋白胆固醇(Low density lipoprotein cholesterol，LDL-C)水平显著下降[分别为：(11．70&;#177;1．73)，(14．32&;#177;2．22)mmol／L，P&;lt;0．05；(0．740&;#177;0．107)，(1．450&;#177;0．220)mmol／L，P&;lt;0．01]，血清高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol，HDL—C)增高[(1．652&;#177;0．155)，(1.179&;#177;0.142)mmol／L，P&;lt;0．01]。②血浆丙二醛显著降低[(3．88&;#177;0.51)，(6．29&;#177;1．43)mmol／L，P&;lt;0．01]而总抗氧化能力显著增高[(10．771&;#177;1．818)，(7．350&;#177;1．158)mmol／L，P&;lt;0．05]。③光镜下斑块面积、内膜面积与中膜面积比值明显降低[(39．46&;#177;6．53)，(50．69&;#177;12．36)mmol／L，P&;lt;0．05；(0．62&;#177;0．32)，(1．38&;#177;0．38)mmol／L，P&;lt;0．01]。④血浆内皮素-1显著降低；主动脉内膜内皮素-1基因杂交阳性颗粒比高脂组明显减少。结论：余甘子可能通过调整家兔脂质代谢、提高抗氧化能力减少脂质过氧化、保护内皮功能抑制动脉内膜内皮素-1基因表达而起到防止兔实验性粥样斑块的形成的作用。     

参七汤对大鼠缺血心肌内皮素基因表达的影响

目的：研究参七汤对心肌缺血大鼠心肌内皮素影响的分子机制。方法：将SD大鼠随机分为正常对照组、缺血组和参七汤组，利用垂体后叶素造模，分别测定各组心肌内皮素浓度及内皮素-1基因的表达。结果：参七汤组心肌内皮素浓度明显低于缺血组(2．28&;#177;0．50，6．87&;#177;1．70，P&;lt;0．01）。免疫组化显示缺血组心肌内皮素-1染色灰度值明显低于参七汤组(心房肌：167．63&;#177;4．28，182．75&;#177;7．74，P&;lt;0．01；心室肌：154．38&;#177;4．05，182．97&;#177;2．14，P&;lt;0．05)。结论：参七汤可显著降低缺血心肌内皮素浓度，可能是参七汤所代表的益气补元活血法能有效抑制缺血心肌内皮素-1基因的表达及蛋白合成。     

动脉粥样硬化与辛伐他汀的抗氧化应激作用

目的：他汀类药物抑制动脉粥样硬化的机制尚未完全阐明。观察他汀对动脉粥样硬化氧化应激作用的影响，探讨其抗动脉粥样硬化机制，以期为他汀类药物在动脉粥样硬化患者临床干预中的应用提供病因学依据。方法：本实验于2004—09／2005-01在中国医科大学动物部实验室完成。选择21只健康白兔，平均分为3组，观察造模后各组兔超氧化物歧化酶活力、谷胱甘肽过氧化物酶活力、丙二醛含量及血清脂质浓度的变化，并计算各组兔主动脉动脉粥样硬化斑块面积比。结果：模型组血清总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇的浓度显著高于对照组(P&;lt;0．01)，辛伐他汀组总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇高于对照组，但显著低于模型组(P&;lt;0．01)；模型组超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活力分别为(2．23&;#177;0．34)NU／μL和(96．54&;#177;15．82)mmol／(L&;#183;min)，均显著低于对照组(3．54&;#177;0．57)NU／μL，(118．53&;#177;17．29)mmol／(L&;#183;min)(P&;lt;0．01，P&;lt;0．05)，而辛伐他汀组超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活力(2．95&;#177;0．37)NU／μL，(120．06&;#177;20．55)mmol／(L&;#183;min)则高于模型组(P&;lt;0．01，P&;lt;0．05)；模型组丙二醛含量(10．15&;#177;1．63)μmol／L明显高于对照组(6．10&;#177;1．03)μmol／L(P&;lt;0．01)，而辛伐他汀组丙二醛含量(7．52&;#177;1．22)μmol／L显著低于模型组(P&;lt;0．01)。模型组动脉粥样硬化斑块面积比(51．45&;#177;6．93)％，而辛伐他汀组为(23．46&;#177;3．97)％，两组间差异有显著性意义(P&;lt;0．01)。结论：辛伐他汀抗氧化应激作用是其抗动脉粥样硬化机制之一，深入研究他汀类药物作用机制，将为其在动脉粥样硬化患者临床干预中的充分应用提供理论依据，并将有助于冠心病的早期预防及患者的预后。     

碱性成纤维细胞生长因子转染兔关节软骨细胞的研究

背景：软骨细胞体外培养困难和表型难以维持是软骨组织工程研究的一大难题。目的：探讨碱性成纤维细胞生长因子(basic Fibroblast Growth Factor，bFGF)基因转染兔关节软骨细胞后对培养的关节软骨细胞形态、分裂增殖及代谢等方面的影响。设计：完全随机对照实验研究。地点和方法：实验在解放军第一军医大学热带军队卫生学系完成，对象为兔软骨细胞(3周龄新西兰新生兔购于第一军医大学实验动物中心)。干预：将bFGF基因克隆于真核表达载体pHβ0AP-1中，构建重组真核表达载体pHβ-bFGF，转染兔关节软骨细胞。G418筛选阳性克隆，检测阳性细胞bFGF基因的表达水平。测定培养软骨细胞的DNA含量、糖醛酸含量、软骨细胞增殖情况及进行细胞周期分析。主要观察指标：DNA含量、糖醛酸含量、软骨细胞增殖情况及细胞周期分析。结果：bFGF基因转染软骨细胞表型未见显著变化；bFGF基因转染组、载体对照组、空白对照组DNA含量分别为(77．37&;#177;6．21)，(40．39&;#177;4．33)，(33．77&;#177;4．25)μg／瓶(P&;lt;0．01)，糖醛酸含量分别为(308．8&;#177;10．2)，(77．9&;#177;8．7)，(80．2&;#177;10．5)μg／瓶(P&;lt;0．01)，软骨细胞G1期分别为59．3&;#177;2．1，69．5&;#177;4．0，73．1&;#177;3．9(P&;lt;0．05)。结论：bFGF转染关节软骨细胞后，可显著促进细胞分裂增殖并缩短细胞周期，为软骨组织工程研究提供新的技术路线及理论基础。     

电针对脑缺血再灌注大鼠海马Fos蛋白的影响

目的：探讨脑缺血再灌注后电针对大鼠海马Fos蛋白表达的影响：方法：SD大鼠18只，体质量250～280g，雌雄不限。动物随机分为3组．对照组、模型组和治疗组。采用夹闭大鼠双侧颈总动脉造成的脑缺血再灌注损伤模型，电针百会、风池、大钟及足三里穴，频率2～20Hz，强度2．0A，持续30min，4h后观察海马Fos蛋白的表达。结果：电针能明显加强脑缺血再灌注后海马各区Fos蛋白的表达：治疗组与模型组相比海马各区阳性细胞数显著增加，CA1区（236&;#177;26．126&;#177;19.P&;lt;0.05)；CA3(328&;#177;80，212&;#177;55．P&;lt;0.05)：CA4(594&;#177;104．381&;#177;92、P&;lt;0．01)：DG(621&;#177;111，341&;#177;89．P&;lt;0.01)。结论：缺血再灌注可诱导海马Fos蛋白的显著表达，电针可增强Fos蛋白的表达。     

定量评估经皮神经电刺激促进周围神经的再生和功能恢复

目的：探讨经皮电刺激对周围神经损伤后组织修复和功能恢复的作用，以神经传导速度为量化恢复指标，以髓鞘增生数目定量分析再生神经纤维数目。方法：实验于1998-09／1999-06在复旦大学附属华山医院实验动物部和显微外科实验室、复旦大学上海医学院手外科研究所肌电图研究室、复旦大学上海医学院电镜中心和病理实验室完成。雄性SD大鼠20只随机分成2组，每组10只。用显微外科手术造成大鼠坐骨神经损伤模型后电刺激组行神经吻合术并进行经皮电刺激，对照组只固定于和电刺激组相同的固定装置上，不进行干预。采用电生理学方法和组织学方法分别观察经皮电刺激对损伤周围神经的神经电位参数和髓鞘结构及数目的影响。结果：实验过程中对照组1只大鼠和电刺激组2只大鼠在麻醉过程中死亡，进入结果分析对照组9只大鼠，电刺激组8只大鼠。①电刺激组大鼠受损坐骨神经的潜伏期较对照组缩短[(0．58&;#177;0．33)ms，(2．27&;#177;0．88)ms，(f=5．12，P&;lt;0．001)]。电刺激组的神经传导速度较对照组增快[(21．44&;#177;8．31)m／s，(16．74&;#177;22．82)m／s，P&;gt;0．05l，波幅低于对照组[(1．95&;#177;1．56)mV，(6．64&;#177;8．42)mV，P&;gt;0．05]。②电刺激组可见大量新生髓鞘，其数目较对照组明显增多[9900．86&;#177;1433．65，6505．83&;#177;77950，(t=5．16，P&;lt;0．001)]。结论：电刺激定量检测的大鼠坐骨神经潜伏期缩短，神经髓鞘计数增高。说明电刺激可能通过促进许旺细胞增殖和髓鞘形成来改善受损周围神经再生和修复的作用。     

全自动血凝仪对兔创伤性深静脉血栓形成因素的监测和评估

目的：应用全自动血凝仪检测兔凝血指标变化情况，为创伤性肢体深静脉血栓形成的预防监测提供实验依据。方法：实验于2003—11／2004—11在昆明医学院外科总实验室进行。新西兰大白兔120只，随机分为4组，每组30只。骨折组(造模后骨折)、创伤组(造模后创伤，不骨折)和固定组(不造模)均行左侧屈髋屈膝位石膏固定；对照组不造模，不固定。各组均于处理后第5，7，9天分别用全自动血凝仪检测活化部分凝血活酶时间、凝血酶原时间、国际标准化比值、纤维蛋白酶原和凝血酶时间变化。结果：骨折组30只兔中死亡5只，进入结果分析115只。除活化部分凝血活酶时间外，各时间点各项指标骨折组和创伤组无明显差别(P&;gt;0．05)，固定组和对照组无明显差别(P&;gt;0．05)。①各组凝血酶原时间比较：第9天骨折组和创伤组均较固定组和对照组降低[(10．58&;#177;0．65，11．83&;#177;0．28，12．35&;#177;0．23，12．18&;#177;0．38)s，(P&;lt;0．05)]。②各组国际标准化比值比较：第9天骨折组和创伤组均较固定组和对照组降低[(0．82&;#177;0．17，0．85&;#177;0．06，1．01&;#177;0．02，1．00&;#177;0．03，(P&;lt;0．05)]。③各组纤维蛋白酶原比较：第9天骨折组和创伤组均较固定组和对照组升高[(2．51&;#177;0．23)，(2．52&;#177;0．17)，(1．62&;#177;0．15)，(1．57&;#177;0．33)g／L，(P&;lt;0．05))。④各组活化部分凝血活酶时间比较：第9天骨折组明显低于创伤组[(21．78&;#177;1．86，25．00&;#177;2．58)s，P&;lt;0．05]，均较固定组和对照组降低[(27．10&;#177;2．33，27．00&;#177;2．79)s，(P&;lt;0．05)]。结论：全自动血凝仪能为深静脉血栓形成和凝血功能监测提供较准确、客观和稳定的凝血指标，在本实验中反映了创伤与固定等因素与血凝状态及血栓之间的关系。     

脑出血大鼠血肿周边脑组织氧化损伤的实验研究

目的：观察脑出血后血肿周围脑组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)活力和丙二醛浓度变化，探讨其氧化损害的机制。方法：实验于2003一09／2004-01在泸州医学院附属医院传染与免疫研究室进行。80只SD大鼠单纯随机分为脑出血组和假手术组。每组分为手术前、术后6，12，24，48，72，96，120h等8个时点，每个时点5只大鼠。采用立体定向自体血注人大鼠尾状核建立脑出血模型，观察各组术前及术后各时点血肿周围脑组织SOD活力和丙二醛浓度及脑含水量变化。结果：脑出血组术后各时点SOD活力明显低于假手术组(P&;lt;0．05)，而术后各时间点丙二醛浓度为[分别为(1．73&;#177;0．15)，(1．64&;#177;0．22)，(4．92&;#177;0．30)，(4．96&;#177;0．47)，(4．44&;#177;0．32)，(4．29&;#177;0．33)和(2．16&;#177;0．28)μmol／L，显著高于假手术组[分别为(O．92&;#177;0．10)，(0．85&;#177;0．10)，(0．91&;#177;0．12)，(1．18&;#177;0．13)，(1．05&;#177;0．15)，(0．87&;#177;0．24)和(1．11&;#177;0．14)μmol／L]，差异有非常显著性意义(F=11．863，15．601，362．221，120．272，168．950，182．187，27．452，P&;lt;0，001)。脑出血组术后各时点含水量与SOD活力呈负相关(r=-0．626，P&;lt;0．001)，与丙二醛浓度呈正相关(r=0．648，P&;lt;0．001)。结论：脑出血大鼠血肿周边脑组织有明显的氧化损伤，此损伤可能导致脑出血后脑水肿发生或加重。     

碱性成纤维细胞生长因子对大鼠骨骼肌拉伤修复的影响

目的：探讨外源性碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对大鼠骨骼肌拉伤后肌肉再生修复的影响。方法：雄性Sprague—Dawley大鼠，体质量约250g，随机区组法分为3组，每组6只：肌肉拉伤后给bFGF组、拉伤后给生理盐水对照组以及假拉伤组。用万能材料测试仪对大鼠腓肠肌造成拉伤后，于损伤肌肉皮下肌膜外注射bFGF(200AU／d&;#215;6)或生理盐水，免疫组织化学染色观察再生肌纤维中结蛋白的表达(用其积分光密度integra optical density,IOD表示)。结果：生理盐水对照组结蛋白IOD值(25．79&;#177;10．44)&;#215;10^3显著高于假拉伤组(9．28&;#177;4．83)&;#215;10^3(t=13．85，P&;lt;0．01)，bFGF治疗组肌肉结蛋白IOD值(34．48&;#177;10．62)&;#215;10^3高于生理盐水对照组(25．79&;#177;10．44)&;#215;10^3组，差异具有显著性(t=24．08，P&;lt;0．01)。结论：外源性碱性成纤维生长因子可以促进肌肉拉伤后的结蛋白表达，提高肌肉再生能力，从而改善肌肉损伤后的结构修复。     

雌二醇对骨形态发生蛋白受体表达的影响

目的：研究骨髓基质细胞向成骨细胞分化过程中，雌二醇对其骨形态发生蛋白受体(BMPR)IA，IB mRNA表达的影响，探讨雌二醇对成骨细胞生成的作用，试阐明绝经后高转换骨代谢始动环节的可能机制。方法：SD大鼠骨髓基质细胞在生长培养基中传代培养后，用1，25(OH)2D3和地塞米松(DEX)诱导骨髓基质细胞向成骨细胞分化，17β-雌二醇(E2)处理培养细胞，观察E2对骨髓基质细胞分化过程中骨形态发生蛋白受体IA、IB mRNA、碱性磷酸酶(ALP)活性和Ⅰ型胶原合成的影响，β-actin作内对照半定量RT-PCR分析骨形态发生蛋白受体IA，IB mRNA的表达，以α-磷酸奈酚为底物，测定细胞碱性磷酸酶的活性，Van Gieson染色法显示Ⅰ型腔原的含量。结果：E2能明显抑制骨髓基质细胞分化过程中BMPR-IA mRNA的表达，且呈剂量依赖性，随E2浓度增加(0～1&;#215;10^3nmol／L)BMPR-IA mRNA从(27．0&;#177;3．4)％降至(17．0&;#177;1．8)％(t=5．2，P&;lt;0．01)和(9．3&;#177;1．6)％(t=9．2，P&;lt;0．01)；BMPR-IB mRNA随E2浓度增加而增加，从(2．0&;#177;0．8)％增至(4．8&;#177;1．5)％(t=3．3，P&;lt;0．05)和(17．2&;#177;2．2)％(t=13，P&;lt;0．01)。Northernblot结果显示在上述E2浓度时BMPR-IA mRNA的表达从4．21&;#177;0．36降至1．24&;#177;0．10(t=18．2，P&;lt;0．01)；BMPR-IB mRNA的表达从1．72&;#177;0．11增至3．73&;#177;0．31(t=12．2，P&;lt;0．01)。ALP活性随E2浓度增加而降低，从(42．6&;#177;2．5)U／g蛋白降至(17．9&;#177;2．0)U／g蛋白(t=15，P&;lt;0．01)，(10．8&;#177;1．5)U／g蛋白（t=22，P&;lt;0．01)和(3．6&;#177;0．7)U原蛋白(t=30，P&;lt;0．01)；细胞I型胶原的含量随E2浓度增加而减少。VanGieson染色由鲜红、淡红到黄色，红色越深，表明胶原越多。绪论：E2能明显抑制骨髓基质细胞分化过程中BMPR-IA mRNA的表达，降低ALP的活性和Ⅰ型胶原含量，增加BMPR-IB mRNA的表达)。     

幼鼠持续惊厥状态脑损伤时托吡酯的神经保护作用

目的：研究托吡酯对惊厥性脑损伤是否具有保护作用。方法：制作毛果芸香碱惊厥持续状态动物模型，给予托毗酯干预，检测海马区神经元坏死、凋亡、凋亡蛋白表达和胶质细胞增生变化情况。结果：毛果芸香碱惊厥持续状态模型鼠病理损伤特点为神经元坏死、细胞凋亡、凋亡蛋白表达增多，胶质细胞增生。托吡酯可减少海马区细胞坏死：CA3区坏死细胞百分比由(72．1&;#177;13．4)％降至(20．6&;#177;7．2)％(P&;lt;0．05)；CA1区由(67．1&;#177;9．3)％降至(18．3&;#177;4．8)％(P&;lt;0．05)；减少细胞凋亡：CA1区单位面积凋亡细胞数由9．4&;#177;6．1降至1．7&;#177;0．8(P&;lt;0．05)；减少凋亡蛋白表达：单位面积caspase-3阳性面积由1．49&;#177;0．25降至0．71&;#177;0．12(P&;lt;0．05)；缓解胶质细胞增生：单位面积胶质细胞数由47．3&;#177;3．6降至19．5&;#177;3．9(P&;lt;0．05)。结论：托吡酯对幼鼠惊厥性神经变性，可减少神经的死亡和凋亡，缓解胶质细胞增生。     

姜黄素对脑出血大鼠血肿周围脑组织肿瘤坏死因子水平的影响

目的：探讨姜黄素对脑出血大鼠脑组织肿瘤坏死因子(tunaor necrosis factor-alpha，TNF-α)水平的影响。方法：将120只健康雄性SD大鼠随机分为姜黄素治疗组、脑出血对照组和假手术组。每组分为手术前、术后6，12，24，48，72，96，120h8个时点，每个时点5只大鼠。采用立体定向自体血注入大鼠尾状核建立脑出血模型，观察各组术前及术后各时点血肿周围脑组织肿瘤坏死因子(TNF-α)水平及含水量变化。结果：脑出血对照组术后12～96h各时点血肿周围脑组织TNF-α水平[分别为(1.48&;#177;0.13)，(1．53&;#177;0．20)，(1．56&;#177;0．39)，(1.49&;#177;0．28)，(1．47&;#177;0.21)μg／L]较假手术组[分别为(1．06&;#177;0．33)，(1．05&;#177;0．28)，(1．14&;#177;0．15)，(1．04&;#177;0．14)，(1．08&;#177;0．11)μg／L]明显升高(P&;lt;0．05)。姜黄素治疗组术后12～96h各时点TNF-α水平[分别为(1．12&;#177;0．21)，(1．11&;#177;0．18)，(1．21&;#177;0.11)，(1．15&;#177;0．15)，(1．14&;#177;0．21)μg／L]均明显低于脑出血对照组(P&;lt;0．05)。脑出血对照组和姜黄素治疗组术后各时点血肿周围脑组织含水量分别与相应脑组织TNF-α水平呈正相关(r=0．541，P&;lt;0．05；r=0．548，P&;lt;0．05)。结论：姜黄素可抑制大鼠脑出血后TNF-α含量增加，其对抗脑出血后脑水肿作用可能与此有关。