针刀干预对膝骨关节炎兔滑膜纤维化的影响

目的：探讨针刀干预对膝骨关节炎(KOA)兔滑膜纤维化的影响。方法：新西兰兔随机分为空白组、模型组、针刀组、电针组,各8只。采用改良Videman左后肢伸直位固定法制动4周,制备模型。空白、模型组不干预,针刀、电针组各干预3周。测量被动活动范围(PROM);天狼猩红染色观察滑膜胶原沉积的情况;Western Blot法检测膝关节滑膜组织TGF-β1、α-SMA、COL-Ⅰ蛋白表达情况。结果：与模型组比较,针刀、电针组PROM明显增大(P＜0.01),针刀组大于电针组(P＜0.05)。与模型组比较,针刀、电针组滑膜组织胶原沉积减轻。模型组TGF-β1、α-SMA、COL-Ⅰ蛋白表达显著高于正常组(P＜0.01);针刀、电针组可明显抑制TGF-β1、α-SMA、COL-Ⅰ的表达(P＜0.01);与电针组比较,针刀组TGF-β1、α-SMA、COL-Ⅰ蛋白表达明显降低(P＜0.05或P＜0.01)。结论：针刀通过调控TGF-β1的表达,从而下调α-SMA和COL-Ⅰ的表达,减轻滑膜纤维化达到治疗KOA的目的。     

针刀疗法对膝骨关节炎兔关节软骨细胞凋亡的影响

目的:观察针刀疗法治疗膝骨关节炎兔对其细胞凋亡的影响,探讨可能的作用机制。方法:正常新西兰兔随机分为:正常组、模型组、针刀组、中药组。左后膝伸直位石膏管型固定6周建立膝骨关节炎兔模型,原位末端标记(TUNEL)检测关节软骨细胞凋亡。结果:细胞凋亡指数正常组为(4.9±1.7),模型组为(25·2±4.3),针刀组为(11.6±3.1),中药组为(19.1±3.4)。模型组细胞凋亡指数显著升高,与正常组比较,经统计学处理,差异具有显著性意义(P<0.01)。针刀治疗和中药治疗均能降低细胞凋亡指数,两组比较,差异具有显著性意义(P<0.01)。结论:针刀疗法能抑制膝骨关节炎兔关节软骨细胞的凋亡,促进关节软骨形态恢复,这可能是针刀治疗膝骨关节炎的作用机制之一。     

针刀对膝骨关节炎兔软骨细胞氧化应激的影响

目的 通过观察针刀干预对膝骨关节炎（KOA）兔软骨细胞氧化应激的影响,探讨其治疗KOA的作用机制。方法 将28只健康清洁级雄性新西兰兔随机分为空白组、模型组、电针组及针刀组,每组7只。除空白组外,余组以改良后Videman左后肢伸直位固定法造模并制动6周。治疗组干预4周后离体取材,用试剂盒分别测定各组膝软骨细胞一氧化氮合酶（NOS）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px)活力,用免疫组化法测定各组膝软骨细胞内γ-H2AX表达。结果 模型组较空白组软骨细胞NOS及MDA活力升高（P <0.01）,SOD及GSH-Px活力下降（P <0.01）;针刀组NOS及MDA活力较模型组下降（P <0.05）,针刀组及电针组SOD活力较模型组均升高（P <0.05）;模型组、电针组、针刀组之间GSH-Px活力无明显差异（P> 0.05）。模型组软骨细胞内γ-H2AX表达较空白组强（P <0.01）,针刀组、电针组表达较模型组弱（P <0.05）。结论 针刀干预可通过降低软骨细胞NOS及MDA活力、升高SOD活力、减缓软...     

针刀干预对膝骨关节炎模型兔膝关节软骨应力变化的影响

目的：观察针刀对膝骨关节炎（KOA）兔膝关节软骨退变、膝关节整体应力、关节软骨应力变化以及肿瘤坏死因子-ɑ（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）的影响,探讨其治疗KOA的作用机制。方法：将28只兔随机分为空白组、模型组、电针组、针刀组,每组7只。除空白组均进行6周兔左后肢制动,建立兔KOA模型,电针组、针刀组均干预3周。采用苏木精-伊红（HE）法光镜下观察兔软骨病理改变,并评价软骨退变程度;运用有限元技术模拟KOA模型兔膝关节屈曲60°进行检测,观察膝关节整体应力及关节软骨最大应力变化;采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测滑液中TNF-α、IL-1β表达水平。结果：与空白组比较,模型组Mankin评分升高(P<0.05）,膝关节整体应力、关节软骨最大应力显著降低（P<0.01）,TNF-α、IL-1β水平均显著升高（P<0.01）;干预后,与模型组比较,电针组、针刀组Mankin评分均显著降低(P<0.05),膝关节整体应力、关节软骨最大应力均升高(P<0.01),TNF-α、IL-1β水平均明显降低(P<0.01）;与电针组比较,针刀组Mankin评分降低(P<0.05),膝关节整体应力和关节软骨最大应力较电针组升高（P<0.05）,TNF-α、IL-1β水平较电针组显著降低(P<0.01）。结论：针刀干预能够调节膝关节整体应力及关节软骨的最大应力,进而恢复膝关节应力环境、抑制炎症介质释放,从而改善关节软骨退变,达到治疗KOA的目的。     

以电针对照观察针刀干预对膝骨关节炎兔股直肌的修复作用

目的:探讨针刀对于膝骨关节炎(KOA)兔股直肌萎缩的修复作用。方法:雄兔随机分为针刀组(A)、电针组(EA)、正常组(N)和模型组(M),各9只。采用左后肢膝关节制动6周制备退行性膝骨关节炎模型。N组、M组不予干预,A组、EA组各干预4周。测量兔大腿围度并用Western Blot法观测兔股直肌中Akt、mTOR、p70s6k蛋白含量。结果:腹股沟下缘大腿围度M组显著小于N组(P 0. 01),A组大于M组(P 0. 05); M组较N组股直肌中mTOR、p70s6k、Akt蛋白的表达水平明显下降(P 0. 01或P 0. 05);股直肌Akt蛋白表达:A组与EA组相比M组显著升高(P 0. 01);股直肌mTOR蛋白表达:相比M组,A组与EA组升高(P 0. 01或P 0. 05);股直肌p70s6k蛋白表达:A组较M组显著升高(P 0. 05),而EA组与M组比较差异无统计学意义(P 0. 05)。结论:针刀通过修复萎缩的股直肌,改善膝周软组织的生物力学,促进膝关节的恢复。     

针刀干预对膝骨关节炎模型兔股直肌p16、p21表达的影响

目的:观察针刀治疗后膝骨关节炎(KOA)兔股直肌内p16、p21蛋白表达的变化,探讨针刀治疗对KOA兔股直肌细胞衰老的抑制作用。方法:清洁级新西兰雄兔24只随机分为针刀组、电针组、正常组和模型组,每组6只。采用改良Videman左后肢膝关节制动制备KOA兔模型。针刀组和电针组各干预3周后,用改良Lequesne MG指数评分和膝关节被动活动度(PROM)进行行为学评价,HE染色法观察光镜下股直肌肌肉及肌腱病理学变化并用Western blot法检测股直肌中p21、p16的蛋白表达。结果:与正常组相比,模型组兔Lequesne MG评分显著升高,PROM显著降低(P <0.01);光镜下股直肌肌束排列紊乱,有炎细胞浸润,肌纤维横截面积显著减少(P <0.01),肌细胞数量显著增多(P <0.01); p16和p21的蛋白表达上调(P <0.01,P <0.05)。与模型组相比,针刀组与电针组Lequesne MG评分显著降低,PROM显著升高(P <0.01);光镜下见肌细胞再生,炎细胞浸润减轻,肌纤维横截面积显著增多,肌细胞数量显著减少(P <0.01)。p16和p21蛋白均呈不同程度降低(P <0.01,P <0.05)。结论:针刀干预可改善膝关节周围骨骼肌力学性能,促进KOA的恢复,其机制可能与下调p16、p21表达和抑制股直肌细胞衰老以修复萎缩的股直肌有关。     

基于TRPV4通路探讨针刀对兔膝骨关节炎软骨细胞凋亡的影响

目的观察针刀对膝骨关节炎(KOA)兔软骨香草素受体亚家族4(TRPV4)通路调控作用及软骨细胞凋亡的影响。方法选取6月龄健康雄性新西兰兔24只,采用随机数字表法分为空白组、模型组和针刀组,每组各8只。采用改良Videman法左后肢伸直位石膏固定6周制备KOA兔模型。针刀组选取经筋病灶点"鹤顶次""髌外上""髌内上""髌外下""髌内下""阴陵上"行针刀松解治疗,每周1次,共治疗4次;空白组和模型组不予处理。采用苏木素-伊红(HE)染色及Mankin’s评分评价软骨形态学改变;采用原位缺口标记法(Tunel)检测软骨细胞凋亡率;采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)和免疫印迹(Western blot)检测软骨TRPV4、半胱氨酸天冬酰胺酶-3(Caspase-3)分子表达情况。结果与空白组比较,模型组软骨表面不光滑,部分缺损,细胞分布不均匀,潮线紊乱,Mankin’s评分明显增高(P<0.05);细胞凋亡率及TRPV4、Caspase-3 m RNA和蛋白表达均明显提高(P<0.05)。与模型组比较,针刀组软骨表面较光滑,细胞排列较整齐,软骨细胞数量增多,潮线较完整,Mank...     

针刀干预对膝骨关节炎兔软骨细胞整合素β1表达的长期影响

目的:探讨针刀对KOA的长期作用。方法:按随机数字表法将48只兔分为空白组、模型组、针刀组、电针组各12只,后3组用伸直位固定制动法造模,治疗后取材检测软骨整合素β1mRNA、蛋白。结果:模型组整合素mRNA水平降低,较空白组比较差异有统计学意义;针刀组整合素mRNA水平上升,较空白组比较差异无统计学意义;电针组整合素蛋白水平上升,较空白组差异显著。结论:针刀可上调整合素β1基因和蛋白水平,长期观察发现其含量接近正常,即针刀的长期疗效是显著的。     

针刀干预对中期膝骨关节炎兔软骨下骨压缩力学性能的影响

目的 研究针刀对中期膝骨关节炎（KOA）兔软骨下骨压缩力学性能的影响。方法 24只新西兰雄兔随机分为空白组、模型组、针刀组和电针组。除空白组外,其余3组采用改良后Videman法制动9周建立模型,分别干预3周。采用蕃红O/固绿染色法光镜下观察各组兔膝关节软骨及软骨下骨病理改变,参照Mankin评分标准对软骨退变程度进行评分,对软骨下骨进行压缩力学性能测试,观察最大位移、最大载荷、压缩强度和弹性模量。结果 1）蕃红O/固绿染色及Mankin评分：模型组显示软骨层明显变薄,结构紊乱破坏,软骨下骨板明显增厚,Mankin评分明显升高（P <0.01）;针刀组、电针组染色情况改善,Mankin评分显著降低（P <0.01）;针刀组与电针组相比,Mankin评分较低,两组间差异有统计学意义（P <0.01）。2）压缩力学测试：模型组软骨下骨最大位移、最大载荷、压缩强度和弹性模量显著降低（P <0.01）;针刀组、电针组最大位移、最大载荷、压缩强度、弹性模量显著升高（P <0.01或P <0.05）,针刀组和电针组之间差异无统计学意义（P> 0.05）,但...     

针刀干预对膝骨关节炎兔关节腔内压和滑膜血管增生的影响

目的：探讨针刀对于膝骨关节炎(KOA)兔关节腔内压和滑膜血管增生的作用。方法：新西兰雄兔随机分为正常组、模型组、针刀组和电针组,各7只。左后肢膝关节制动6周制备退行性膝骨关节炎模型。正常组、模型组不予干预,针刀组、电针组各干预3周。测量兔关节腔内压,用HE染色法观察兔滑膜形态学,并用Western Blot技术观测兔滑膜中HIF-1α、VEGF蛋白含量。结果：与正常组相比,模型组关节腔内压显著升高（P<0.01）,滑膜HE染色出现血管增生改变,滑膜HIF-1α、VEGF蛋白含量显著升高（P<0.01）;干预结果表明,与模型组相比,针刀组、电针组关节腔内压显著降低（P<0.01）,滑膜HE染色血管增生减轻,滑膜HIF-1α、VEGF蛋白含量显著降低（P<0.01或P<0.05）;与电针组相比,针刀组关节腔内压显著降低（P<0.01）,滑膜HE染色血管增生减少明显,滑膜VEGF蛋白含量明显降低（P<0.05）,HIF-1α蛋白含量有下降趋势,无统计学差异（P>0.05）。结论：针刀通过降低关节腔内压,进而减少滑膜血管增生,发挥对KOA治疗作用。     

针刀对中晚期膝骨关节炎兔软骨下骨重塑的影响

目的 观察针刀对中晚期膝骨关节炎兔行为学及膝关节软骨下骨重塑的影响。方法 将30只新西兰兔随机分为空白组、模型组、针刀组、电针组及骨代谢调节剂组,每组6只。采用改良Videman法左后肢伸直位固定制动9周制备模型。空白组与模型组不予干预,其余干预3周。采用改良Lequesne MG评估量表对各组进行行为学评价,应用Micro-CT检测软骨下骨显微结构Tb.Th、Tb.N、Tb.Sp、BVF及BMD。结果 改良Lequesne MG评分模型组较空白组升高（P <0.01）,针刀组、电针组较模型组降低（P <0.01）,骨代谢调节剂组较模型组无明显改变（P> 0.05）。Micro-CT软骨下骨组织参数定量分析显示,与空白组相比,模型组Tb.Th、Tb.N、BVF及BMD明显升高,Tb.Sp显著下降（P <0.01）;与模型组相比,针刀组及电针组Tb.Th、Tb.N、BVF及BMD明显降低,Tb.Sp明显升高（P <0.05或P <0.01）。骨代谢调节剂组无明显改变（P> 0.05）。结论 针刀可通过调整软骨下骨骨组织参数,有效改善异常骨重塑,达...     

针刀干预对颈椎病兔颈肌细胞凋亡的影响

目的:观察针刀干预对颈椎病兔劳损颈肌细胞凋亡的影响,揭示针刀治疗颈椎病可能的疗效机制。方法:6月龄新西兰兔随机分为空白组、模型组、针刀组、电针组,每组各6只,采用长期低头位方法制备颈椎病模型。造模后针刀组于斜方肌起点、胸锁乳突肌乳突附着点、颈椎关节突及局部硬结或条索状物,每次选2~3个点定为针刀进针部位,针刀干预每周1次,共3次;电针组取双侧天柱颈百劳大杼,毫针针刺,同侧天柱大杼穴接韩氏穴位神经刺激仪,每次治疗20min,隔天1次,共3周。干预结束1周后取颈肌行TUNEL检测和Western blot检测Bcl-2、Bax蛋白表达水平。结果:颈肌TUNEL阳性细胞核计数模型组较空白组明显升高(P0.01),针刀组较模型组、电针组明显降低(P0.01)。Western blot结果显示,各组Bcl-2蛋白表达水平差异无统计学意义(P0.05);模型组Bax蛋白表达水平较空白组明显升高(P0.01),针刀组Bax蛋白表达水平较模型组降低(P0.05);模型组Bcl-2/Bax蛋白比值较空白组降低(P0.05),针刀组Bcl-2/Bax蛋白比值较模型组、电针组升高(P0.05)。电针组各项指标与模型组比较差异均无统计学意义(P0.05)。结论:针刀干预颈椎病可降低颈肌细胞凋亡,这可能是针刀治疗颈椎病的疗效机制之一。     

益肾为主对兔膝骨关节炎模型软骨细胞凋亡的影响

目的:观察益肾为主治法对兔骨关节炎软骨细胞凋亡的影响。方法:取新西兰白兔20只,随机分为三组,模型组、中药组用石膏外固定兔右后肢膝关节造模,造模后同空白组分别灌服生理盐水、益肾方和生理盐水,6周后取兔膝关节软骨,肉眼、光镜观察形态学变化,用原位末端标记法观察软骨细胞凋亡。结果:中药组软骨细胞凋亡指数明显低于模型组(P<0.01)。结论:益肾为主能减少兔膝实验性膝骨关节炎软骨细胞的凋亡,具有关节软骨保护作用。     

蠲痹颗粒对兔膝骨关节炎软骨细胞凋亡的影响

目的探讨蠲痹颗粒对兔膝骨关节炎软骨软骨细胞凋亡的影响,揭示其治疗骨关节炎(OA)的部分作用机制,为蠲痹颗粒方治疗OA提供理论依据。方法将42只新西兰兔采用改良Hulth法建立兔膝OA模型,造模后,随机分为假手术组、模型组、蠲痹颗粒组及阳性药(双醋瑞因)组。药物干预或灌生理盐水6周后,取出关节软骨,石蜡切片HE染色观察软骨组织镜下病理形态改变,免疫组化法检测软骨组织caspase-3表达水平,TUNEL法检测软骨细胞凋亡情况。结果蠲痹颗粒组和阳性药对照组兔膝关节软骨组织caspase-3蛋白的表达、软骨细胞凋亡率明显低于模型组,比较有统计学意义(P0.05)。结论蠲痹颗粒能下调caspase-3蛋白表达,抑制膝关节软骨细胞凋亡,可能是蠲痹颗粒治疗骨关节炎的作用机制之一。     

电针治疗对膝骨关节炎兔膝关节软骨细胞凋亡的影响

目的:观察电针治疗对膝骨关节炎兔膝关节软骨细胞凋亡的影响,探讨电针治疗膝骨关节炎的作用机制.方法:将30只健康新西兰大白兔随机分为正常对照组、模型对照组和电针治疗组,每组10只.采用Hulth法对模型对照组及电针治疗组实验兔左膝关节进行造模,造模后第5周开始对电针治疗组实验兔进行电针治疗,正常对照组、模型对照组同期正常饲养,不作任何治疗.治疗4周后同时处死3组实验兔,取左膝关节股骨端制成切片,观察各组实验兔软骨组织形态及软骨细胞凋亡情况.结果:①软骨组织形态.正常对照组软骨表层光滑、平整,4层结构清晰,软骨细胞分布均匀、无簇聚,潮线完整;模型对照组关节软骨厚度减小,表面毛糙,可见明显纤维化、裂隙、软骨细胞簇聚,潮线断裂;电针治疗组关节软骨厚度减小,表面不光滑,少见纤维化、裂隙、软骨细胞簇聚,潮线断裂.②软骨细胞凋亡情况.3组实验兔软骨细胞凋亡率比较,差异有统计学意义(F=126.753,P=0.000);进一步两两比较,模型对照组软骨细胞凋亡率大于正常对照组和电针治疗组(LSD -t=3.769,P=0.000;LSD-t=7.000,P =0.000),电针治疗组软骨细胞凋亡率大于正常对照组(LSD -t=10.769,P =0.000).结论:电针治疗可以通过抑制软骨细胞凋亡,减轻膝骨关节炎软骨的损伤,这可能是电针治疗膝骨关节炎的机制之一.     

针刀对膝骨关节炎兔韧带细胞中TGF-β1/Smads信号通路的影响

摘要：目的:探讨针刀松解股二头肌对膝骨关节炎（KOA）兔肌细胞凋亡的影响。方法:6月龄新西兰兔48只随机分为正常组（N）、模型组（M）、电针组（EA）和针刀组（A）,KOA模型采用改良后维德曼左后肢伸直位固定制动法制动8周,于造模成功1周后分别对A组、EA组进行针刀和电针干预3周。干预结束1周后取股二头肌进行HE染色观察、TUNEL检测阳性凋亡细胞核数和Western blot检测Bax、 Caspase-3蛋白表达水平。结果:A组细胞核和间质组织的水肿、炎性肌细胞与M组相比显著改善,改善程度优于EA组。M组兔股二头肌阳性细胞核数较N组明显升高（P<0.01）;EA组较N组明显升高（P<0.01）;EA组较M组有所降低（P<0.05）;A组较N组明显升高（P<0.01）;A组较M组明显降低（P<0.01）;A组较EA组明显降低（P<0.05）。M组兔股二头肌Caspase-3蛋白表达水平较N组明显升高（P<0.01）;EA组与N组比较差异无统计学意义（P>0.05）;A组与N组比较差异无统计学意义（P>0.05）;EA组较M组有所降低（P<0.05）;A组较M组明显降低（P<0.01）;A组与EA组比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论:针刀干预对KOA股二头肌细胞的凋亡有良好的调节作用,为针刀“调筋治骨”提供了新的理论依据。     

海桐皮汤熏蒸对兔实验性膝骨关节炎软骨细胞凋亡的影响

目的:探讨海桐皮汤熏蒸对实验性兔膝关节骨性关节炎软骨细胞凋亡的影响。方法:取45只新西兰大白兔,随机取10只作为正常对照组(A组),其余35只采用Hulth方法造模,1周后取30只元膝关节感染实验兔,随机分为3组(每组10只):并随机分为模型组(B组)、水蒸气熏蒸组(C组)和海桐皮汤熏蒸组(D组)。分别采取相应的处理方法4周后处死取材,采用流式细胞术检测软骨细胞凋亡状况。结果:正常组兔关节软骨细胞凋亡率为18.57%,模型组29.41%,水治疗组和药物治疗组分别为28.26%、21.09%。与正常组相比,模型组、水蒸气熏蒸组、海桐皮汤熏蒸组有显著差异(P<0.05);与模型组相比水蒸气熏蒸组、海桐皮汤熏蒸组有显著差异(P<0.05);与水蒸气熏蒸组相比海桐皮汤熏蒸组有显著差异(P<0.05)。结论:海桐皮汤熏蒸可显著减少实验性兔膝关节骨性关节炎软骨细胞凋亡,从而延缓关节软骨的退变,促进软骨修复的作用。     

针刀干预对膝骨关节炎兔韧带组织中TGF-β1/Smads信号通路的影响

目的:探讨针刀干预对膝骨关节炎(KOA)兔韧带组织中转化生长因子(TGF-β1)/Smads信号通路的作用机制.方法:将日本大耳白兔32只随机分成空白组、模型组、电针组和针刀组,每组8只.采用改良的Videman法即左后肢伸直位固定制动法造模6周,造模结束后,空白组和模型组不予任何处理;电针组以阴陵泉、阳陵泉、内膝眼和...     

药物电针刀疗法对兔膝骨性关节炎软骨细胞凋亡的影响

目的研究药物电针刀疗法对骨关节炎家兔一氧化氮(NO)及软骨细胞凋亡的影响。方法应用关节制动的方法复制骨关节炎(OA)模型,18只造模成功的中国家兔,随机分为药物电针刀组(简称 A组)、液针刀组(简称 B 组)和对照组(简称 C 组),A 组用药物电针刀加手法治疗,B 组用液针刀加手法治疗,C组仅予以手法治疗,每3日1次,疗程为1个月。用硝酸还原法检测关节滑液中 NO 含量;用流式细胞仪检测软骨细胞的凋亡率。结果 A、B、C 组关节滑液中 NO 的含量分别为(33.67±17.72)μmol·L~(-1)、(58.90±22.07)μmol·L~(-1)和(83.30±16.20)μmol·L~(-1),软骨细胞的凋亡率分别为(25.27±10.82)%、(51.71±12.42)%和(74.80±9.37)%,3组间差异有显著性。结论与液针刀加手法相比较,药物电针刀疗法加手法能更显著减少关节液 NO 的含量,抑制软骨细胞的凋亡,而治疗膝骨性关节炎。