温热对HPV感染皮肤LC成熟功能的影响

目的探讨不同局部温热条件对人乳头瘤病毒（HPV）感染皮损朗格汉斯细胞（LCs）CD1a／CD83表达变化的影响,为病毒疣的治疗提供理论依据。方法采用共聚焦显微镜检测正常皮肤组织和尖锐湿疣皮损内LCCD1a／CD83的表达变化;利用37℃,42℃,45℃不同温热条件处理正常皮肤组织和尖锐湿疣皮损,采用流式分析技术检测游走至培养液中CD1a^＋／CD83^＋LC的数量变化。结果正常皮肤组织和尖锐湿疣皮损内只见CD1a^＋LC,无CD83^＋LC;正常皮肤组织和尖锐湿疣组织游走细胞中CD1a^＋／CD83^＋LC的百分比均随局部温度升高而逐渐增多。温热对尖锐湿疣组织游走LC中CD1a CD83表达影响显著高于正常皮肤组织。结论局部温热可能通过促进LC的迁移和成熟,在局部细胞免疫应答中发挥作用。     

朗格汉斯细胞相关趋化因子基因在尖锐湿疣表皮中的表达

目的了解朗格汉斯细胞(LC)相关趋化因子基因在尖锐湿疣(CA)以及正常表皮中的表达。方法采用Affy-metrixHG-U133A2.0寡核苷酸芯片,对3例CA表皮和3例正常表皮LC相关趋化因子基因的表达进行了检测,并应用半定量RT-PCR验证其中部分基因的差异表达。结果基因芯片检测到CXCL2、CXCL8、CXCR4、CCL3/CCL3L1、CCL5、CCL20及CCL27共7个LC相关趋化因子基因在CA表皮中的表达普遍下调;半定量RT-PCR验证表明,CCL20和CXCR4基因在CA表皮中的表达显著下调。结论LC相关趋化因子基因在CA表皮中的表达普遍下调,这些基因表达的下调可能与CA表皮中LC数目减少和归巢障碍有关。     

尖锐湿疣组织CD1a、上皮细胞钙粘素分子及其mRNA的表达和朗格汉斯细胞的电镜观察

目的:研究尖锐湿疣(Condyloma accuminatum,CA)组织中朗格汉斯细胞(Langerhans cell,LC)数目、形态和功能改变及其分子机制.方法:免疫组化SP法和逆转录RT-PCR法分别检测LC表面标记分子CD1a、粘附分子上皮细胞钙粘素(E-cadherin)及其mRNA表达,透射电镜观察LC的超微结构,并以正常包皮组织作为对照.结果:与正常对照组(21.59±10.48)相比,CA组织中CD1a+LC数目(10.66 ±11.71)减少(P＜0.05),胞体缩小,树突减少.CD1a mRNA表达(0.4066±0.2671)低于正常(0.744 4±0.3667)(P＜0.01);CA组织中E-cadherin染色变淡,平均积分值(2.36±1.41)低于正常对照(7.67±1.64)(P＜0.01),E-cadherin mRNA表达(0.173 7±0.108 3)较正常对照(0.378 6±0.146 0)相比显著降低(P＜0.01);CD1a+细胞数目与E-cadherin表达强度之间存在正相关关系(r=0.940 4,P＜0.05)、CD1a mRNA与E-cadherin mRNA的表达呈正相关(r=0.838 1,P＜0.05);CA组织LC胞质内细胞器稀少,Birbeck颗粒少见.结论:CA组织中存在着LC的缺失和抗原提呈功能异常,可能导致HPV持续性感染,LC的减少可能与E-cadherin表达下降导致LC在表皮内难以滞留有关.     

成人皮肤弥漫性朗格汉斯细胞组织细胞增生症

目的探讨成人皮肤朗格汉斯细胞组织细胞增生症(LCH)的临床病理与免疫组化、电镜特征及鉴别诊断。方法应用光镜、免疫组化及电镜技术，观察1例病程长及4次活检证实为成人皮肤弥漫性LCH，并复习文献。结果初发皮损全身弥散分布丘疹，第一次活检病变限在真皮网状层分布，以单核细胞样朗格汉斯细胞(LC)为主。4年后，皮损发展至全身，呈弥漫分布结节状。活检病变真皮全层受累。LC形态多样：单核细胞、多核细胞、多核巨细胞、泡沫细胞；核形圆、椭圆、肾形、分叶状及纵形核沟等。淋巴细胞浸润，嗜酸性粒细胞少见。LC表达CDla、S-100蛋白、CD68、HLA1-DR、Vim阳性，CD45RO异型表达，2次电镜观察未见Berbeck颗粒。结论LCH是一种多态性疾病，发生在成人皮肤弥漫性LCH罕见。随病程进展，皮损加重，病变扩大，LC多样化。     

GST对转染APP695基因PC12细胞β淀粉样蛋白表达和形态功能的影响

目的:观察三羟基异黄酮(Genistein,GST)对APP695转染PC12细胞β淀粉样蛋白(Aβ)表达和形态功能的影响。方法:用pIRES2-EGFP空载体和pIRES2-EGFP/APP695MT表达载体转染正常的PC12细胞,神经生长因子(nerve growth factor,NGF)诱导PC12细胞72 h后,放射免疫法测定Aβ的变化,激光共聚焦显微镜观察细胞形态学的变化,荧光分析法测定儿茶酚胺类(CA)分泌量。结果:APP695转染组与对照组比较Aβ生成量明显增加(P<0.01),细胞突起数量少、突起长度较短,CA分泌量明显降低(P<0.01);GST干预组与APP695转染组比较Aβ生成量减少(P<0.05),细胞突起数量增多、突起较长,CA分泌量明显增加(P<0.01)。结论:GST能减少APP695基因转染引起的PC12细胞Aβ的表达,改善细胞分化程度,提高CA的分泌量,对转染PC12细胞具有一定的保护作用。     

新洁而灭和二硝基氯苯多次刺激皮肤后郎格罕细胞形态变化的动态观察

本文应用 ATP 酶细胞化学技术,观察豚鼠皮肤连续涂抹不同浓度原发刺激物新洁而灭(BB)或低浓度致敏原二硝基氯苯(DNCB)后表皮中郎格罕细胞(LC)的动态变化。发现两种刺激物所致的 LC 的密度和形态变化有明显的差异。5%BB 引起可逆性的 LC 密度下降和细胞形态改变。0.05%DNCB 则在涂抹后期引起 LC 的减少和 ATP 酶活性的减弱。本文进一步讨论了以表皮 LC 形态和密度的变化为指标,在评价化妆品安全检测中弱致敏原或弱原发刺激物的意义。     

IL-33对人永生化角质形成细胞系和模型小鼠银屑病样皮损的影响

目的观察白细胞介素-33(IL-33)对人永生化角质形成细胞系(HaCAT)和咪喹莫特(IMQ)诱导的小鼠银屑病样皮损的影响,并对其可能的机制进行探讨。方法不同浓度IL-33刺激HaCAT细胞;CCK8法检测细胞增殖;Western blot检测细胞中LC3、Beclin1和p-STAT3的表达。将BALB/c雌性小鼠随机分为:正常对照组、IMQ组(背部外涂5%咪喹莫特乳膏,建立银屑病样皮损模型)和IL-33处理组(腹腔注射IL-33)。Western blot检测皮损组织中自噬相关蛋白的表达。结果与对照组相比,25 ng/mL的IL-33处理组促进HaCAT细胞的增殖作用最明显(P<0.05),同时,IL-33可促进LC3、Beclin1和p-STAT3蛋白的表达(P<0.05)。在小鼠银屑病样模型中,与正常对照组相比,IMQ组小鼠背部出现鳞屑和红斑伴有表皮增厚,而IL-33处理组与IMQ组相比小鼠背部皮损鳞屑、红斑及增厚更明显(P<0.01)。IL-33处理组皮损中自噬相关蛋白的表达水平低于IMQ组(P<0.05),p-STAT3蛋白的表达水平均高于正常对照组和IMQ组(P<0.05)。结论IL-33促进HaCAT细胞的增殖,诱导细胞自噬,加重咪喹莫特诱导的小鼠银屑病样皮损的发生和发展,其机制可能是通过引起STAT3信号通路的活化而实现的。     

朗格汉斯细胞在神经性皮炎组织中的分布和CD40分子表达

通过分析神经性皮炎组织病理变化、炎性细胞浸润、朗格汉斯细胞(LC)的分布以及CD40分子的表达,探讨这些变化与临床分型及病程的相关性。应用常规病理切片分析以及免疫组化的方法,观察LC和CD40分子在不同病期和炎症浸润程度皮损中的分布和表达情况。结果显示神经性皮炎组织呈现慢性炎症反应,炎症细胞的浸润,LC向真皮迁移以及CD40分子表达增加,这些均与疾病严重程度相关。基此表明LC分布的改变和CD40分子的表达与神经性皮炎免疫病理变化有密切的相关性。     

Graves病患者外周血免疫调节细胞及其亚群比例异常

目的观察Graves病(GD)患者外周血各种免疫调节细胞及其亚群的变化。方法采用流式细胞术(FCM)分别检测32例GD患者及30例健康人外周血调节性T细胞(Treg)、Th1细胞、Th2细胞、调节性B细胞(Breg)、树突状细胞(DC)等免疫细胞亚群,并进行比较。结果与正常对照组相比,GD患者Treg比例降低,Th1细胞、Th2细胞数量增加;Breg数量减少;DC数量下降,髓样DC(mDC)占DC比例下降,而浆细胞样DC(pDC)比例升高,成熟型DC比例升高。结论 GD患者外周血中存在免疫调节细胞的失衡,可能在GD的发生、发展中起一定作用。     

尖锐湿疣患者皮损及外周血CD4^＋和CD8^＋细胞免疫功能的检测

目的通过对尖锐湿疣（CA）患者皮损及外周血CD4^＋和CD8^＋细胞免疫功能检测的分析,探讨尖锐湿疣患者细胞免疫功能的变化及其对CA的影响。方法通过流式细胞仪（FCM）对40例CA患者及20名正常人外周血进行反映细胞免疫功能的T淋巴细胞亚群的检测,实验采用免疫组化的方法对40例CA皮损样本中CD4^＋和CD8^＋细胞的数目进行检测。结果CA患者外周血及皮损较正常对照组中的CD8^＋细胞百分率增加．CD4^＋细胞百分率及CD4^＋／CD8^＋比值降低。结论CA患者存在全身和局部的细胞免疫功能低下,而且局部皮损细胞免疫功能低下可能在CA的发病中具有重要作用。     

A comparative study of the quantitative distribution and ultrastructure of Langerhans cells in the epidermis of patients with chronic benign dermatoses and mycosis fungoides]

Using histoenzymatic assay for ATPase activity and electron microscopy, Langerhans' cells (LC) in biopsy specimens taken from skin lesions of 20 patients with chronic benign dermatoses (CBD) and of 28 patients suffering from mycosis fungoides (MF) were identified. In the early lesions of MF the reduction of the number of cell dendrites, disappearance of normal arrangement and the reduced absolute quantity of LC were observed on comparison with patients with CBD. Ultrastructurally, the destroyed forms of LC were predominantly observed in MF lesions, while in cases of CBD most of the LC were functionally active. The authors suggest that the examination of functional activity, quantitative distribution and ultrastructural features of LC should be used as an early morphologic test for differential diagnosis of early signs of MF and CBD this being of vital importance for an adequate and due treatment.     

睫状神经营养因子对应激引起海马CA3神经元损害的作用

目的;探讨睫状神经营养因子对应激引起海马ＣＡ３区神经元损害的作用。方法：采用Ｂｉｅｌｓｃｈｏｗｓｋｙ－Ｇｒｏｓ－Ｌａｗｒｅｎｔｊｅｗ染色法和常规透射电镜技术,观察急性和慢性足底电击大鼠的海马ＣＡ３区神经元开矿的变化,及双侧海马注射睫状神经营养因子对其影响。结果;急性应激大鼠海马神经元形态无明显变化;慢性应激大鼠海马神经元出现明显的损伤性形态变化;睫状神经营养因子对正常大鼠和急性应激大鼠的海马神经元     

Malpighian epithelia infected by DNA viruses and Langerhans cells

Malpighian epithelia exhibit an immune surveillance through Langerhans cells (LC) against the DNA viruses, which induce various epithelial lesions, mainly on the skin, conjunctiva, mouth, uterine cervix. These viral infections are usual during childhood. The most common DNA viruses are: adenoviruses (more than 40 types), human papillomaviruses (HPV, more than 50 types) and Herpes viruses (herpes simplex type 1 and 2, varicella and Zooster, Epstein-Barr virus). Different clinical aspects are observed (exanthema, erythema, eruption, papillomas, vesicle, bullous) are well as histological signs. All of these viruses are replicating in the nuclei of epithelial cells which show eosinophilic inclusions and finally cell degeneresence with a typical aspect for each virus such as koilocyte for HPV infection. These lesions are commonly infiltrated with T lymphocytes; the intensity of the local cellular immune response varies with the lesion. LC are reduced in infected epithelia; they are sometimes found in conjunctive tissues and their morphology can be altered; their role in antigen presentation to T lymphocytes has only been demonstrated in herpes simplex virus infections. Profound modifications of membrane antigens of epithelial cells (loss of HLA class 1 antigen) might contribute to the disappearance of LC or to their functional inability. Most of the DNA virus infections are inapparent, benign and transient. However some lesions can evolve towards malignancy; this progression depends on the oncogenic potential of the viruses (such as HPV types 16 and 18 or herpes simplex virus type 2) associated to a local or a general immune deficiency of the patient as well as to other exogenous factors (UV for example).     

不同ABO血型HBV相关肝病免疫功能与预后的关系探讨

目的探讨不同ABO血型的各型肝病患者体液和细胞免疫指标改变状况。方法应用免疫扩散和APAAP桥联酶标等方法,检测健康对照组(NC)500例、乙肝标志物阳性的各型肝炎562例,分别测定体液及细胞免疫功能。结果各肝病组与NC组相比,体液免疫指标改变明显,自ASC至PHC,IgE递增显著,IgD、IgG次之,PHC组C3、CIC明显升高,ERFC明显降低。AB血型的肝病IgG、IgE、C3、CIC明显升高,ERFC显著降低,AB血型的LC和PHC患者CD4+、CD4+CD8+明显降低,与其他各血型组和NC组相比,有显著性差异(P<005)。结论在HBV感染者中,AB血型者易于发生LC和PHC,这一血型的肝病患者易出现体液免疫亢进和细胞免疫功能不足。     

Mechanisms of hypoglycemic brain damage

Summary Selective lesions of the noradrenergic locus coeruleus (LC) system have recently been shown to aggravate both ischemic and epileptic brain damage. This study explores the possibility that the LC system also influences hypoglycemic brain injury. Bilateral 6-hydroxydopamine lesions of the LC projection to the forebrain were found to cause no change in the degree of neuronal necrosis in the neocortex, hippocampal formation and caudateputamen following 30 min of reversible insulin-induced hypoglycemic coma. We propose that selective neuronal necrosis in ischemia and status epilepticus is due to the action of excitatory amino acids at synaptic sites, which can be partly counteracted by noradrenaline release from inhibitory LC terminals. In hypoglycemia, excitatory amino acids probably cause brain damage via a local and more diffuse toxic effect which is not significantly influenced by the activation of the LC system.     

喉癌发生中人乳头瘤病毒感染与Langerhans细胞、p53表达的关系

目的：探讨喉癌的发生机理。方法：应用免疫组化ＬＳＡＢ法对３０例喉鳞状细胞癌人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）感染、Ｌａｎｇｅｒｈａｎｓ细胞（ＬＣ）及ｐ５３蛋白表达进行了研究。结果：２６．７％的病例可以检测到ＨＰＶ抗原成分。ＨＰＶ感染的癌旁粘膜内ＬＣ数量明显少于无感染者，且形态也发生改变。ｐ５３蛋白表达阳性率在ＨＰＶ感染组（３７．５％）明显低于ＨＰＶ检测阴性组（８３．３３％）。结论：提示ＨＰＶ、ＬＣ、ｐ５３在喉癌发生发展过程中起一定作用，且相互影响，ＨＰＶ感染引起ＬＣ数量减少，局部免疫功能降低，ＨＰＶ感染还可能通过表达的肿瘤蛋白或其他机制使抑癌基因ｐ５３失活，进而导致肿瘤的发生。     

样本量对等位基因检出数量的影响

以中国37个不同民族9个常染色体STR基因座的群体遗传研究数据资料为例，探讨群体遗传学研究中常染色体STR基因座等位基因检出数量与样本量之间的关系，即样本量对等住基因检出数量的影响。结果显示在一定范围之内，样本量的大小与所观测到的不同基因座等位基因检出数量之间存在正相关关系。当超过一定范围时，样本量的继续增加不再明显影响等位基因的检出数量。杂合度较低的位点随样本量的变化波动较大，杂合度较高的位点随样本量的变化波动较小。     

胰岛素对糖尿病大鼠海马内神经营养因子-3阳性神经元表达的影响

目的：观察糖尿病大鼠海马中神经营养因子-3(NT-3)的表达变化及胰岛素治疗对其表达的影响。方法：将雄性大鼠随机分为对照组,糖尿病1,3月组,胰岛素治疗1,3月组,STZ 腹腔注射制模,测体重与血糖值并取海马行 HE 和免疫组化 SABC 法染色,计算机图像分析系统测平均光密度值。结果：血糖在糖尿病组比对照组显著升高；胰岛素组与对照组无显著性差异。海马各区 NT-3免疫阳性神经元的数量及阳性强度在糖尿病组有不同程度降低,以 CA1区最明显。胰岛素组则不降低。结论：糖尿病大鼠海马神经元 NT-3表达减弱,胰岛素治疗可使海马神经元 NT-3表达恢复正常。