大鼠丘脑下部室管膜上皮细胞间加压素和催产素神经元的免疫组织化学观察

本文应用免疫组化PAP技术观察了位于大鼠丘脑下部第三脑室室管膜上皮细胞之间的加压素(VP)和催产素(OXT)神经元。在视前区第三脑室空周,见有较多的OXT神经元和较少的VP神经元紧贴室管膜分布,其突伸至室管膜下神经毡,有的穿行于室管膜上皮细胞之间并多与室管膜上皮细胞接触。在室旁核平面,比较远离脑室的VP、OXT神经元发出长突起行向第三脑室,有的穿过室管膜上皮伸至第三脑室腔(图3)。在上述二区域也发现个别OXT及VP神经元的胞体位于第三脑室侧壁及底壁的宝管膜上皮细胞之间。此外,在视上核前部及结节部,VP神经元的树突,大多伸向脑的腹侧面,有的树突似乎伸入了蛛网膜下腔。上述这两种肽能神经元与室管膜上皮的密切位置关系,可作为VP、OXT神经元具有感受脑脊液的变化或直接向脑脊液释放其分泌产物等设想的形态学基础。     

加压素、催产素神经元在大鼠丘脑下部的分布——免疫组化PAP技术

本文应用免疫组化 PAP 技术观察了正常与经秋水仙素处理的大鼠丘脑下部及其附近区域加压素、催产素神经元的分布及形态特征。加压素、催产素神经元分布在丘脑下部的前连合核,室旁核,视上核,视前区、室周区,副视上核,环状核,穹窿周围区域,和丘脑下部外侧区。另外在丘脑下部以外的区域如终纹床核,丘脑靠近内囊膝处,苍白球腹内侧区,室间孔前壁腹侧份,也有少数这两种神经元的分布。经秋水仙素处理的大鼠,在前连合核和视前区出现较多淡染的加压素神经元。分布在室旁核、室周区的加压素、催产素神经元的突起多伸向第三脑室室管膜下神经毡,有的伸入室管膜上皮内,甚至伸达第三脑室,少数催产素、加压素神经元似居于室管膜上皮细胞之间。     

针刺“足三里”穴下丘脑血管加压素(Vp)样细胞的形态学变化——免疫组织化学法

采用免疫组化PAP技术,在电针大鼠“足三里”穴位后,观察丘脑下部Vp样神经元的变化。发现视上核与室旁核Vp样大神经元数目增多、胞体胀大,并伸出细长突起。室旁核少数串珠状神经纤维可插入第三脑室壁的细胞之间。在视交叉上核腹内侧Vp小神经元密集,而背外侧反应阳性神经元较少。视上核与室旁核间的神经元岛的细胞体积增大、轴索变长伸向视上区。该区的串珠状纤维集合成束达正中隆起的外层。以上实验结果提示,电针“足三里”可促进下丘脑有关核团Vp样物质的合成与分泌。     

生长抑素样神经元及其纤维在人胎下丘脑的分布与发育研究

本文用免疫细胞化学技术观察了人胎下丘脑内含生长抑素样神经元及其纤维的分布与发育。胎龄14周,见浅染的生长抑素免疫反应阳性神经元散布于下丘脑前部、室周带、第三脑室壁室管膜上皮深面。15～16周胎龄,含生长抑素样神经元除见于上述部位外,还见于腹内侧基底部、室旁核、视上核和室管膜上皮内,阳性纤维散布于正中隆起,室管膜上皮。17—18周胎龄,含生长抑素样结构在上述部位变化明显,神经元更加密集,分布范围扩大,反应染色加深,阳性突起延长。21周胎龄至足月胎儿,含生长抑素神经元及其纤维在下丘脑的分布变化不明显。生长抑素样神经元以中、小型细胞为主,室旁核内见有少量大细胞。电镜观察21周和29周胎龄正中隆起发现:毛细血管为窗孔型,基底膜外有生长抑素样阳性终末靠近。在阳性终末及非阳性终末内可见分泌囊泡。本结果提示人下丘脑内生长抑素系统在出生前已经发育并可能参与内分泌活动的调节。     

大鼠投射到垂体后叶的加压素样免疫反应神经元与第三脑室室管膜及软脑膜的关系

本文运用WGA-HRP逆行标记与加压素免疫组织化学相结合的双标记方法,观察了大鼠投射到垂体后叶的加压素神经元在第三脑室周围的分布及其形态特点。发现双标记神经元主要分布在视前区平面、室旁核后大细胞亚核平面处第三脑室的背侧份、交叉上核平面处第三脑室的腹侧份。细胞为圆形、梭形、多角形和梨形。它们嵌入室管膜细胞之间,或紧贴室管膜下层,部分突起伸向第三脑室。在视上核主部和交叉后部,均见到较多的双标记细胞,主部细胞发出许多突起形成丛,伸向脑腹侧面,与蛛网膜下腔的脑脊液非常接近。作者认为,位于第三脑室周围和软脑膜下投射到垂体后叶的加压素神经元,与脑脊液非常接近,提示它们自脑脊液获得信息,调节垂体后叶加压素的释放,还可能向脑脊液中分泌加压素。     

大鼠下丘脑及邻近区域催产素免疫阳性神经元与垂体后叶的关系

本文运用免疫细胞化学PAP及ABC法,显示大白鼠下丘脑内OXT免疫阳性神经元,并于垂体后叶注射WGA-HRP,显示下丘脑中逆行标记细胞,结合免疫细胞化学方法,观察下丘脑及其邻近区域内HRP与OXT双标记细胞,证实下丘脑视上核、室旁核、穹窿前核和后核、血管周细胞群、下丘脑视前区、下丘脑前区及外侧区、背侧副细胞群内、室周部、第三脑室侧壁室管膜细胞下及室间孔部室管膜细胞下,均有OXT免疫阳性神经元,其中至少部分神经元可发出向垂体后叶的投射纤维。位于第三脑室侧壁室管膜下及室间孔部室管膜下的神经元,可能监测脑脊液中各种因素的变化,调节垂体后叶OXT的分泌,也可能直接通过共树突向脑脊液内释放OXT。     

大鼠第三脑室一氧化氮合酶阳性触液神经元的分布及与催产素的共存

应用 NADPH-d组织化学方法观察了大鼠第三脑室一氧化氮合酶阳性触液神经元的分布及其形态 ,并结合免疫组织化学技术研究了一氧化氮合酶与催产素在第三脑室触液神经元内的共存。结果显示 :在视前区至室间核后大细胞亚核平面的第三脑室室壁均有一氧化氮合酶阳性触液神经元分布 ,呈自前向后 ,由腹侧部渐向背侧部过渡迁移的特征。一氧化氮合酶阳性触液神经元绝大部分为大细胞型标记神经元 ,胞体呈卵圆形、梭形、多角形与倒置梨形。它们位于脑室管膜内、室管膜下 ,或距室管膜有一定距离处 ,但有突起伸至第三脑室。第三脑室催产素免疫阳性触液神经元的形态及分布与一氧化氮合酶阳性触液神经元基本相似 ,两者高度共存。催产素 /一氧化氮合酶双标神经元 ,约占阳性细胞总数的 90 .9%。上述三种阳性触液神经元与邻近核团关系密切 ,尤其与室旁核之间有很多的阳性纤维互相交错。本研究结果表明 ,第三脑室有大量的一氧化氮合酶与催产素免疫阳性神经元分布 ,并且高度共存 ,从而建立了催产素的下丘脑 -脑脊液 -垂体神经体液调节环路的结构基础 ,对生殖与性行为起着重要的调控作用     

大鼠第三脑室一氧化氮合酶阳性触液神经元的分布及催产素的共存

应用NADPH－d组织化学方法观察了大鼠第三脑室一氧化氮合酶阳性触液神经元的分布及其形态，并结合免疫组织化学技术研究了一氧化氮合酶与催产素在第三脑室触液神经元内的共存。结果显示：在视前区至室间核后大细胞亚核平面的第三脑室室壁均有一氧化氮合酶阳性触液神经元分布，呈自前向后，由腹侧部渐向背侧部过渡迁移的特征。一氧化氮合酶阳性触液神经元绝大部分为大细胞型标记神经元，胞体呈卵圆形、梭形、多角形与倒置梨形。它们位于脑室管膜内、室管膜下，或距室管膜有一定距离处，但有突起伸至第三脑室。第三脑室催产素免疫阳性触液神经元的形态及分布与一氧化氮合酶阳性触液神经元基本相似，两者高度共存。催产素／一氧化氮合酶双标神经元，约占阳性细胞总数的90.9%。上述三种阳性触液神经元与邻近核团关系密切，尤其与室旁核之间有很多的阳性纤维互相交错。本研究结果表明，第三脑室有大量的一氧化氮合酶与催产素免疫阳性神经元分布，并且高度共存，从而建立了催产素的下丘脑－脑脊液－垂体神经体液调节环路的结构基础，对生殖与性行为起着重要的调控作用。     

电击足底对大鼠下丘脑视上核及室旁核加压素样细胞的影响

本实验用特异性兔抗精氨酸加压素血清对正常和受到不同时间电击足底刺激的雄性大鼠下丘脑组织切片作了免疫细胞化学染色,观察了视上核和室旁核内加压素样细胞的形态学变化,并以显微分光光度计和显微图象分析仪列这些细胞内加压素样物质的相对含量和细胞截面积的变化进行了研究,以期对这种应激条件下下丘脑加压素释放与否问题有一较直观的了解。结果显示,电击组与对照组相比,视上核和室旁核细胞内加压素样物质减少,细胞胞体缩小。早期下丘脑垂体束细串珠样纤维增多,后期减少。正中隆起内带加压素样纤维染色略变淡,外带内细串珠状加压素样纤维增加。视上核和室旁核某些加压素样细胞的树状突起的变化较为特殊。一些向第三脑室侧壁和脑底面神经胶质板投射的树突在电击组染色依旧很深,并出现了许多大的串珠样结构,提示这些树突有向第三脑室和蛛网膜下腔分泌加压素样物质的可能。上述结果说明电击足底刺激视上核和室旁核细胞的神经分泌机能增强,可能通过下丘脑垂体束向垂体后叶,经正中隆起外带门脉血管向垂体前叶以及通过树突向脑脊液中释放加压素样物质增加。     

大鼠垂体后叶中神经降压素阳性神经纤维的起源

向垂体后叶注射WGA-HRP,进行逆行追踪并与免疫组织化学相结合研究了大鼠垂体后叶中神经降压素(NT)能神经纤维的起源。投射到垂体后叶的NT免疫阳性神经元胞体主要位于下丘脑室旁核小细胞部、室周区,环状核、室旁核大细胞亚核内侧部、视上核背侧部、穹窿后核及下丘脑前区、外侧区。弓状核内未见任何双标记神经元,从而否定了Goedert等用损毁的方法得出的大鼠垂体后叶中NT阳性神经纤维起源于弓状核的结论。一些室周双标记神经元位于室管膜内,距第三脑室腔很近,常挤在室管膜细胞之间。提示这些神元在监测脑脊液的化学变化,调节垂体后叶分泌方面起一定的作用。     

Immunocytochemical localization of the catecholamine-synthesizing enzymes, tyrosine hydroxylase and dopamine-β-hydroxylase, in the hypothalamus of cattle

Immunocytochemical staining for the presence of catecholamine synthesizing enzymes, tyrosine hydroxylase and dopamine β-hydroxylase, was used to characterize the regional distribution of catecholaminergic neurons in the hypothalamus and adjacent areas of domestic cattle, Bos taurus. In steers, heifers and cows, tyrosine hydroxylase-immunoreactive perikarya was located throughout periventricular regions of the third cerebral ventricle, in both anterior and retrochiasmatic divisions of the supraoptic nucleus, suprachiasmatic nucleus, and ventral and dorsolateral regions of the paraventricular nucleus, dorsal hypothalamus, ventrolateral aspects of the arcuate nucleus, along the ventral hypothalamic surface between the median eminence and optic tract, and in the posterior hypothalamus. Immunostained perikarya ranged from small (10–20 μm, parvicellular) to large (30–50 μm, magnocellular) and were of multiple shapes: round, triangular, fusiform or multipolar, often with 2–5 processes of branched arborization. There were no dopamine-β-hydroxylase immunoreactive perikarya observed within the hypothalamus and adjacent structures. However, both tyrosine hydroxylase and dopamine-β-hydroxylase immunoreactive fibers and punctate varicosities were observed throughout regions of tyrosine hydroxylase immunoreactivity perikarya. Generally, the location and pattern of hypothalamic tyrosine hydroxylase immunoreactivity and dopamine-β-hydroxylase immunoreactive were similar to those reported for most other large brain mammalian species, however, there were several differences with commonly used small laboratory animals. These included intense tyrosine hydroxylase immunoreactivity of perikarya within the retrochiasmatic division of the supraoptic nucleus (ventral A15 region), the absence of tyrosine hydroxylase immunoreactive perikarya below the anterior commissure or within the bed nucleus of stria terminalis (absence of the dorsal A15 region), an abundance of tyrosine hydroxylase immunoreactive perikarya within the ependymal layer of the median eminence, heavy innervation of the arcuate nucleus with dopamine-β-hydroxylase immunoreactive fibers and varicosities, and the paucity of dopamine-β-hydroxylase immunoreactive throughout the median eminence.     

后叶加压素在下丘脑的分布和释放途径及失水对正中隆起中后叶加压素的影响

我们用免疫细胞化学方法(ICC)对大白鼠下丘脑中加压素(VP)免疫反应阳性的神经元作了较详细研究。观察到VP阳性神经元存在于下丘脑室旁核(PVN)各亚核、视上核(SON)、交叉上核(SCN)、室周核(PN)及一些附属核团,包括环状核(CN)、交叉后核(RCN)、下丘脑外侧核(HLN)、穹窿周围核(PFN)。且发现一特殊的VP阳性胞体聚集区—很可能是多巴胺神经元聚集区A_(14)中的细胞,位于第三脑室侧壁中1/3段两侧,腹内侧核背侧。本文首次观察到在PVN和SON之间有VP阳性的神经纤维相联系。ICC和免疫电镜研究进一步证明在正中隆起外带存在VP阳性纤维,含大颗粒囊泡的VP末梢紧邻门脉毛细血管。将HRP注入第四脑室用HRP逆行追踪与ICC方法相结合,在PVN中观察到双标细胞,与直接用ICC法所见VP阳性轴突伸入第三脑室腔的结果一致。说明PVN中存在接触脑脊液神经元。干渴动物正中隆起的内、外带中的VP免疫反应明显减弱。     

Organization of ovine corticotropin-releasing factor immunoreactive neurons in the canine hypothalamo-pituitary system

The distribution of corticotropin-releasing factor immunoreactive (CRF-i) cell bodies and varicose fibers in the hypothalamus and the pituitary of the canine brain was studied by indirect immunofluorescence. CRF-i cell bodies were demonstrated mainly in the periventricular zone of the third ventricle, while some CRF-i cell bodies were scattered throughout the ventral part of the caudomedial hypothalamus. CRF-positive fibers were mostly situated in the median eminence. In addition some CRF-positive fibers were detected in the ventromedial aspect of the lateral hypothalamus forming a pathway arising from the CRF-i cell bodies, running via the median eminence through the infundibular stalk and terminating in the pars nervosa of the pituitary. The localization of the cell bodies and their projection points towards a possible (patho)physiological role of this peptide-transmitter system in the release of ACTH and beta-endorphin.     

大鼠腹侧间脑至室管膜的传出联系——PHA-L法研究

用PHA-L免疫组织化学顺行追踪技术对20只大鼠腹侧间脑至室管膜的传出联系进行了研究。在脑室系统一些部位的室管膜层或其下方见有丰富的标记纤维,并附有许多膨体。这些纤维似乎参与构成室管膜上、下丛,是脑-脑脊液神经体液回路的重要组成环节。