TUNEL方法结合图像分析技术检测缺血诱导的神经元损伤

目的 缺血性神经元损伤的性质(凋亡或坏死)是神经研究领域的热点.但目前用于区分凋亡与坏死细胞的TUNEL技术,较易受主观因素的影响.方法 本实验运用图像分析技术对缺血大鼠脑的TUNEL染色切片进行多视场多参数形态定量分析,即细胞形态定量参数(核面积、周长、直径、形状因子)和含量光密度(平均光密度、积分光密度).结果 局灶性脑缺血可引起神经元凋亡和坏死.尾壳核以发生凋亡为主,且凋亡神经元的出现先于坏死神经元.缺血0.5h,尾壳核开始出现凋亡神经元.缺血3h达高峰.缺血6h,出现选择性细胞丢失.结论 图像分析技术能客观而准确地鉴别1:TUNEL染色切片上神经元损伤的性质,由此为神经领域的研究提供了一种敏感准确的形态学定量方法.     

免疫组化结果的图像分析与人工计数方法的对比研究

针对长期以来免疫组化结果难以准确判定的问题，选取图像分析(Image analysis，IA)的常用参数——阳性面积(Area)，平均光密度(Mean Density)，积分光密度(IOD)和人工计数方法的常用参数——阳性细胞百分比，灰度及两者乘积，通过图像分析和人工计数两种方法对分别代表胞浆、胞核和胞膜阳性的乳腺癌PS2、ER、c—erbB—2三个指标的免疫组化结果进行分析比较，从而探讨图像分析与人工计数方法在免疫组化染色结果的半定量评分中各自的优缺点、重复性及两者的相关性。实验结果表明：IA对免疫组化中胞浆，胞核及胞膜着色的结果判定均有较好的重复性，人工计数方法对胞核、胞膜阳性的结果判定重复性尚可；两种方法在免疫组化结果的判定上存在正相关关系。此外，针对在图像分析过程中应该注意的问题进行了较深入的讨论。     

免疫组织化学图像光密度分析的标准化方法

免疫组织化学图像阳性物质着色的深浅和面积大小与绝对蛋白水平相关[1],即使阳性表达很弱的免疫组化图片,计算机图像分析也能准确地定量检测,并提供可重复的定量数据和客观的分析标准[2].但是对于阳性结果的定量分析方法和指标却没有统一的标准.因此,现介绍免疫组织化学图像光密度分析的标准化方法.     

甲襞微血管图像定量测量方法

对采用图像分析仪进行甲襞微血管定量测量的一些方法进行介绍。同时，所测的一些甲襞微血管定量参数是依据数学形态学和图像分析理论而测量和计算的。这些测量方法有较大的改进，从而更适合于甲襞微循环的医学研究及临床诊断和处理。     

多视场多参数形态定量分析模块在神经研究领域中的应用

缺血性神经元损伤的性质是神经研究关注的热点。但目前用于区分凋亡与坏死细胞的ＴＵＮＥＬ技术,较易受主观因素的影响。本实验和图像分析技术对缺血动物脑的ＴＵＮＥＬ染色切片进行多场多参数形态定量分析,即细胞形态这亘参数（核面积、周长、直径、形状因子）和含 密度（平均光密度、积分光密度）。本实验结果显示图像分析能提高ＴＵＮＥＬ鉴别凋亡与坏死的灵敏度和精确性,并提供了一种简便快捷的形态定量方法,是在神经研究中     

扫描电镜图像处理系统及其在细胞超微结构定量计算中的应用

本文介绍一种具有较高性能价格比的生物医学电镜图像处理系统,该系统以IBM PC/XT,AT或386计算机为主机,图像接口板直接插入机内扩展槽。应用软件可对生物医学图像作图像处理和定量计算。作者通过对人膈腹膜超微结构进行定量分析,为腹水的治疗和腹膜透析(CAPD)等临床医学研究,提供了形态学定量资料。     

影响组织免疫组化定量测定的原因及对策

免疫组织化学是用特异性抗体显示组织化学成分的重要方法,是实验结果以显微镜图像的形式显示出来,然后利用计算机来处理分析免疫组化图像,得到免疫组化阳性表达的面积分布、百分比分布、积分光密度、平均光密度、阳性细     

Preferences selection of immunohistochemistry semiquantitative analysis by Image Pro Plus image analysis system

目的:应用Image Pro Plus (IPP)图像分析软件测算阳性细胞面积(area)、平均光密度值、积分光密度值,研究面积参数选择、阳性结果选色方式对免疫组织化学结果的影响,以期获得IPP图像分析免疫组织化学的标准化结果.方法:采用人工计数法将矽肺免疫组织化学结果分为低表达、中表达、高表达3组.应用IPP软件,面积选择参数分为过滤10、30、50、100以下的阳性显色；采用吸管取色、RGB、HIS 3种选择阳性显色的方法；编写宏文件,计算各组阳性细胞面积、平均光密度值(MD)、移分光密度值(IOD)的均值和总和,并与人工计数法测算结果进行比较.结果:在滤过面积10～100范围内,面积参数对各组阳性细胞面积总和、IOD总和统计结果无影响,与人工计数法结果一致；采用HIS选色测算的面积总和、IOD总和与人工计数法结果一致.结论:IPP图像分析能够简易、快速地进行免疫组织化学结果的半定量分析,面积参数在一定范围内对测算结果无影响,HIS选色方式可能较吸管显色和RGB选色方式好,而IOD总和是比较可靠、稳定的半定量指标.     

免疫组织化学图像光度学参数的选择及测量

目的 探讨免疫组织化学图像定量分析的最佳光度学指标,并对其测量方法及影响因素进行分析,以提高图像分析的精度.方法 运用图像分析软件,建立统一的图像采集、分割及处理标准,对青年、老年大鼠海马CA3区突触素的平均光密度、积分光密度进行测量.结果 青年组与老年组大鼠海马CA3区突触素积分光密度较平均光密度差异性更为显著.结论 积分光密度与平均光密度相比将面积因素考虑在内,测量物质含量结果更为准确.     

计算机图像处理系统用于血管平滑肌细胞形态定量分析

采用计算机图像分析法，定量测定家兔培养主动脉血管平滑肌细胞的形态学参数及其与ＤＮＡ合成指标的相关关系，并在此基础上，从细胞形态学角度探讨了中药制剂川芎嗪对ＶＳＭＣ增殖的影响，以评价计算机图像分析技术在细胞学研究中的作用，建立一种研究ＶＳＭＣ增殖水平的新方法。     

系膜区IgA沉积物在IgA肾病中的预后价值

目的 分析IgA沉积物形态学参数与组织病理学指标之间的相关性,探讨IgA沉积物在IgA肾病中的预后价值.方法 选取IgA肾病肾穿组织标本80例,经肾穿标本常规染色和免疫组化染色,应用Motic Med 6.0计算机图像分析系统对沉积物面密度、平均光密度、积分光密度等相关形态学参数进行分析.根据肾小球硬化比将病例分为数组.统计分析IgA沉积物各形态学参数与IgA肾病组织病理学分级间的相关性.结果 沉积物面密度、积分光密度在不同肾小球硬化组比较有差异,随着组织病理学改变程度的加重数值增大;而平均光密度组间比较无统计学意义.结论 IgA肾病系膜区IgA沉积物面积有可能成为肾穿组织标本中辅助预后判断的较为简单有用的观察指标.     

平均阳性染色面积百分比法分析免疫组化结果初探

借助于计算机图像分析系统,使用平均阳性染色面积百分比(APSAP)法分析免疫组化切片结果,并与人工技术方法相比较,从而验证图像分析APSAP法与人工计数方法在免疫组化染色结果判定方面的符合程度。实验结果表明,采用APSAP法分析免疫组化切片结果与人工计数分析方法的符合程度较高。我们简要介绍以平均阳性染色面积所占测量面积的百分比来衡量免疫组化切片结果的方法。此外,我们还对APSAP法的理论基础、特点等问题进行了深入的讨论。     

p53、p63及p73在皮肤血管瘤组织中的表达

目的　为探讨p5 3p6 3及p73蛋白在皮肤血管瘤组织中的表达及意义。方法　采用免疫组织化学S P法和图像分析技术检测 4 0例血管瘤组织和 2 0例正常皮肤组织中p5 3、p6 3及p73基因的表达。结果　在增生期血管瘤、退化期血管瘤和正常皮肤组之间 ,p73蛋白免疫组化阳性反应颗粒的平均光密度分别为 6 4 0 8± 2 15 1、1 0 73± 0 5 16和 0 95 3± 0 12 0。p6 3蛋白免疫组化阳性反应颗粒的平均光密度分别为 8 2 71± 1 95 3、0 92 3± 0 191和 0 92 0± 0 187。p5 3蛋白免疫组化阳性反应颗粒的平均光密度分别为 7 2 4 0± 1 874、0 934± 0 187和 0 92 3± 0 16 5。增生期血管瘤与退化期血管瘤、正常皮肤组分别组比 ,p73、p6 3及p5 3阳性表达的差异均有高度显著性差异 (P <0 0 0 1) ,消退期血管瘤与正常皮肤组之间 ,p73、p6 3及p5 3阳性表达差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论　在增生期血管瘤组织中p73、p6 3及p5 3呈高表达 ,促进了内皮细胞的增殖 ,是导致血管瘤发生、发展的主要因素     

图像分析中光密度参数物理意义的正确理解和使用

在形态学实验结果中,表达反应强度或物质含量的测量参数有光密度(optical density,OD)、吸光度(absorbency,A)和灰度(grey level,GL)等,由光密度又引申出平均光密度(averageoptical density,AOD)和积分光密度(integral optical density,IOD)等参数.     

免疫组织化学显微图像分析技术进展

免疫组织化学是用特异性抗体显示组织化学成分的重要方法 ,是实验结果以显微图像的形式显示出来。对免疫组化图像的分析方法主要包括人工分析和计算机图像处理分析。前者简便易行 ,对实验的标准化要求不高 ,但无法做精确的量化分析 ;后者在精确性、客观性、分析速度等方面具有巨大优势 ,但目前仍不完善。本文对两种分析技术的应用现状、实验要求及特点进行了综述 ,并指出了计算机图像处理技术已经成为免疫组化显微图像分析技术发展的趋势     

精子核DNA及形态图像定量分析在男性不育中的应用

目的：探讨男性不育精子核ＤＮＡ及形态图像变化。方法：采用真彩色图像分析仪定量检测。结论：精子核ＤＮＡ及形态图像定量分析可作为精子功能评估方法,是男性不育诊断和疗效观察的可靠指标。结果：与正常生育组比较,精子静脉曲张组精子核宽有非常显著性差异（Ｐ〈０．０１）,ＤＮＡ积分光密度、平均灰度、面积、圆度有显著属于性差异（Ｐ〈０．０５）;不明原因不育组ＤＮＡ积分光密度、平均灰度有非常显著性差异（Ｐ〈０．０１）;慢性疽旬腺炎组精子核长、核宽、尾长有非常显著性差异（Ｐ〈０．０１）,圆度有显著性差异（Ｐ〈０．０５）。     

维生素A阻抑大鼠实验性肝纤维化的病理研究

利用光镜、电镜、免疫组化和形态学定量技术动态研究维生素A对大鼠四氯化碳肝纤维化的抑制作用。结果表明,维生素A可减少四氯化碳中毒大鼠肝内纤维连接蛋白和Ⅰ、Ⅲ型胶原沉积,抑制贮脂细胞向成纤维细胞转化,并可明显地减轻肝纤维化程度。本文还对维生素A抑制肝纤维化的机理及意义作了初步探讨。     

免疫组织化学显微图像分析技术进展

免疫组织化学是用特异性抗体显示组织化学成分的重要方法，是实验结果以显微图像的形式显示出来。对免疫组化图像的分析方法主要包括人工分析和计算机图像处理分析。前简便易行，对实验的标准化要求不高，但无法做精确的量化分析；后在精确性、客观性、分析速度等方面具有巨大优势，但目前仍不完善。本对两种分析技术的应用现状、实验要求及特点进行了综述，并指出了计算机图像处理技术已经成为免疫组化显微图像分析技术发展的趋势。     

两种肝纤维化的组织学量化方法的实验研究

评价肝纤维化半定量计分及计算机图像分析肝纤维化面积百分比这两种组织学量化方法。分别采用半定量计分系统(Semiquantative scorning system,SSS)中纤维化程度计分及计算机图像分析纤维面积百分比两种方法,对温阳中药肝之福预防及治疗四氯化碳(CCl4)所致肝纤维化大鼠的肝脏组织共73份标本进行量化诊断,比较各组间差异,同时检测每份肝脏标本组织中的羟脯氨酸(Hyp)含量,分别与上述两种量化方法进行相关性分析。不论预防实验还是治疗实验,SSS计分、图像分析及Hyp含量三项指标结果均一致,SSS计分及图像分析与羟脯氨酸含量均有较好的相关性(r分别为0.604、0.630,P<0.01)。本研究表明SSS中纤维化程度计分法与计算机图像分析法均可作为比较可靠的肝纤维化的组织学量化诊断方法。     

基于图像分析的周围神经Karnovsky-Roots法染色规律的效果观察

目的　基于图像分析探讨用于鉴别周围神经功能束的乙酰胆碱酯酶（AChE）染色Karnovsky-Roots法24小时内的染色规律,为基于乙酰胆碱酯酶染色的周围神经功能束三维重建确定标准化的孵育条件。 方法　新鲜人体截肢腓总神经标本,连续横断冰冻切片,片厚10 μm,共切取56 张,随机分为7组,每组8张切片,采用Karnovsky-Roots法进行乙酰胆碱酯酶孵育,其中1～6 组分别为1、2、4、8、12和24 h,第7组切片为阴性对照组。采用Image-Pro Plus 6.0 图像分析软件对不同时间染色组图像进行图像分析,指标为：(1) AChE 反应阳性区域的面积;(2) AChE 反应阳性区域的平均光密度;(3) 　AChE 反应阳性区域的累积光密度。组间结果采用SPSS13.0进行t-test 统计检验,以P<0.05为有统计学差异。 结果　8h 组的平均光密度值与12 h组有显著性差异,而12 h 与24 h 的平均光密度值无显著性差异;8 h、12 h 和24 h 间的染色面积、累计光密度值均存在显著性差异,但镜下可观察到24 h组存在过度染色。 结论　孵育12～24 h间的染色效果趋于一致,染色结果稳定可靠,神经束功能性质鉴别容易,神经束膜与染色的神经纤维间有清晰的分界,利于轮廓获取,可作为基于乙酰胆碱酯酶染色的周围神经功能束三维重建的标准化的育条件。