丝氨酸蛋白酶抑制剂、烟酰胺磷酸核糖基转移酶、白细胞介素-6在妊娠期糖尿病患者血清中的表达及关系研究

目的探讨丝氨酸蛋白酶抑制剂(Vaspin)和烟酰胺磷酸核糖基转移酶(Visfatin)和白细胞介素-6 (IL-6)在孕晚期妊娠期糖尿病(GDM)患者血清中的表达情况及三者的关系。方法选取2016年10月-2017年10月在河北省人民医院妇产科择期剖宫产终止妊娠的产妇57例为研究对象,其中GDM患者30例为GDM组,正常妊娠产妇27例对照组。检测并比较两组研究对象血清Vaspin、Visfatin、IL-6水平的差异,并分析三者相关性。结果 GDM组血清Vaspin和Visfatin水平明显低于对照组,IL-6水平则明显高于对照组,差异有统计学意义(P0. 05)。对照组血清Vaspin水平与TG、LDL呈正相关关系(P0. 05)。GDM组血清IL-6水平与血清Vaspin及Visfatin水平均呈负相关关系(P0. 05)。结论 Vaspin、Visfatin在GDM中起重要作用,Vaspin可能主要参与了脂代谢的调控。IL-6可能对Vaspin、Visfatin均有抑制作用。     

妊娠期糖尿病患者血清Vaspin、Chemerin及CRP水平表达及临床意义

目的研究妊娠期糖尿病(GDM)患者内脏脂肪组织源性丝氨酸蛋白酶抑制剂(Vaspin)、脂肪因子趋化素(Chemerin)及C反应蛋白(CRP)水平的表达及临床意义,为临床治疗GDM提供指标监测的靶点。方法选择2015年9月-2017年1月在西安医学院第二附属医院就诊的GDM患者92例为研究对象并记为观察组,另选择同期在本院进行产检的健康孕妇90例为对照组,检测并对比两组孕妇血清Vaspin、Chemerin、CRP水平以及血糖、血脂及胰岛素有关指标,分析患者血清Vaspin、Chemerin及CRP水平与血糖、血脂及胰岛素有关指标的相关性。结果观察组孕妇血清Vaspin、Chemerin及CRP水平均明显高于对照组孕妇,差异有统计学意义(P0.05)。观察组孕妇空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)及甘油三酯(TG)水平均明显高于对照组孕妇,差异有统计学意义(P0.05)。根据Spearman相关性分析显示,患者血清Vaspin与FPG、FINS、HOMA-IR及TG均呈正相关,Chemerin与TG及HOMA-IR呈正相关,CRP与FPG呈正相关,差异均有统计学意义(P0.05)。结论 GDM患者血清Vaspin、Chemerin以及CRP水平均升高,且三者与其机体的糖脂代谢及胰岛素抵抗存在明显联系,临床上可通过监测Vaspin、Chemerin以及CRP水平辅助临床诊治工作的进行。     

脂联素基因表达与妊娠糖尿病关系

目的检测脂联素mRNA在妊娠糖尿病患者脂肪及胎盘组织中的表达及在妊娠糖尿病发病机制中的作用。方法用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测60名正常产妇及60例妊娠糖尿病(GDM)患者剖宫产后脂肪及胎盘中脂联素基因在转录水平的表达。结果 GDM患者脂肪组织中脂联素mRNA表达量为(1.05±0.12),正常妊娠者为(1.28±0.14),GDM患者低于正常妊娠组,差异有统计学意义(P0.01);脂肪组织中脂联素mRNA表达量与GDM胰岛素抵抗指标相关(P0.01);GDM患者与正常妊娠患者胎盘组织中脂联素mRNA表达差异无统计学意义(P0.05)。结论脂肪组织脂联素表达的减少可能是GDM患者胰岛素抵抗的重要原因;胎盘脂联素的表达与GDM及其胰岛素抵抗关系不明显。     

胎盘组织中IGFBP-1、VCAM-1、AQP3与妊娠期糖尿病的相关性

目的探究妊娠期糖尿病(GDM)患者胎盘组织中胰岛素生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、水通道蛋白3(AQP3)与胰岛素抵抗及妊娠结局的关系。方法选取郑州大学附属南阳市中心医院120例单胎妊娠的GDM患者(GDM组)及同期接受分娩的80例糖耐量正常者(健康对照组)为研究受试者。分娩后收集胎盘组织1 g,检测并比较两组受试者IGFBP-1、VCAM-1、AQP3基因表达差异及胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)水平,经Pearson相关分析评估GDM患者IGFBP-1、VCAM-1、AQP3基因表达与胰岛素指标的相关性。根据GDM组不良妊娠结局发生情况将其分为结局正常组及结局异常组两亚组,分别比较不同妊娠结局亚组间IGFBP-1、VCAM-1、AQP3基因表达差异,经Spearman相关分析评估GDM患者IGFBP-1、VCAM-1、AQP3基因表达与妊娠结局之间的相关性。结果 GDM组胎盘组织中IGFBP-1、AQP3的mRNA相对表达量及HOMA-β水平显著低于健康对照组,VCAM-1的mRNA相对表达量、HOMA-IR水平显著高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05);经Pearson相关分析,GDM组患者IGFBP-1、AQP3的mRNA相对表达量与HOMA-IR均具有负相关性(P<0.05),与HOMA-β呈正相关性(P<0.05),而VCAM-1与HOMA-IR具有正相关性(P<0.05),与HOM A-β呈负相关性(P<0.05);GDM组胎盘组织中IGFBP-1、AQP3的mRNA相对表达量显著低于健康对照组,VCAM-1的mRNA相对表达量显著高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05);经Spearman相关分析,GDM组患者妊娠结局与IGFBP-1、AQP3的mRNA相对表达量具有负相关性(P<0.05),与VCAM-1 mRNA相对表达量具有正相关性(P<0.05)。结论胎盘组织中IGFBP-1、VCAM-1、AQP3对评估GDM患者胰岛素抵抗及妊娠结局有重要意义。     

酒精对高脂喂养大鼠肝脏胰岛素抵抗的影响

目的探讨长期高脂饮食状态下不同剂量酒精摄入对大鼠胰岛素抵抗的影响及可能机制。方法清洁级Wistar大鼠,随机分为正常对照、高脂对照、高脂+5%、10%、20%、30%、40%酒精共7组。13w后,断头取血,测空腹血糖(FPG)及血胰岛素(FINS)浓度,计算胰岛素抵抗指数(homeostasis model assessment,HOMA-IR)及HOMA-β功能指数(HOMAβ-cellindex,HBCI)。RT-PCR法测定肝脏胰岛素受体底物-1(IRS-1),磷脂酰肌醇3激酶(PI-3K)、葡萄糖转运体-2(GLUT-2)的mRNA表达水平。Westernblotting测定肝脏PI-3K(p85α)、GLUT-2的蛋白表达水平。结果高脂对照组与正常对照组比,血胰岛素、HOMA-IR、HBCI明显升高(P0.05),肝脏胰岛素信号传导关键分子没有显著差异。与高脂对照组比,高脂+酒精组空腹血糖、胰岛素抵抗指数明显升高(P0.05),血胰岛素、胰岛β细胞功能指数明显下降(P0.05);肝脏胰岛素信号传导关键分子mRNA、蛋白表达水平随酒精剂量的增加而逐渐下降。结论长期高脂饮食联合酒精摄入导致胰岛素抵抗;同时抑制肝脏胰岛素信号传导关键分子表达水平,在高剂量酒精组更明显,这可能是其导致胰岛素抵抗的分子机制。     

妊娠期糖尿病产妇胎盘组织中蛋白酪氨酸磷酸酶1B的表达及其与胰岛素抵抗和炎症应激的相关性

目的探讨妊娠期糖尿病(GDM)产妇胎盘组织中蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)的表达及其与胰岛素抵抗和炎症应激的相关性。方法选择2013年6月-2017年1月间在阳谷县妇幼保健院进行分娩的98例GDM产妇为观察组,同期50例健康产妇为对照组。采用Western印迹法测定两组产妇胎盘组织中PTP1B蛋白的表达水平,测定其分娩前外周血中胰岛素抵抗相关指标水平、血清中炎症及氧化应激指标的水平。采用Pearson检验判断GDM产妇胎盘组织中PTP1B蛋白表达水平与病情严重程度的相关关系。结果观察组胎盘组织中PTP1B蛋白表达水平显著高于对照组(P0.05)。观察组分娩前外周血中胰岛素抵抗相关指标空腹胰岛素(INS)、胰岛β细胞分泌指数(HOMA-β)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)的水平均显著高于对照组(P0.05);血清中炎症因子白介素-1(IL-1)、白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平均显著高于对照组(P0.05);血清中氧化应激指标氧自由基(ROS)、丙二醛(MDA)水平显著高于对照组(P0.05),超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽氧化酶(GSH-Px)、总抗氧化能力(T-AOC)的水平低于对照组(P0.05)。经Pearson检验发现,GDM产妇胎盘组织中PTP1B蛋白的表达水平与其胰岛素抵抗、炎症应激程度直接相关。结论 GDM产妇胎盘组织中存在PTP1B蛋白的异常高表达,且PTP1B蛋白表达水平与GDM病情直接相关。     

半乳糖凝集素3在妊娠期糖尿病孕妇中表达及与胰岛素抵抗关系

目的:探讨半乳糖凝集素3(Galectin-3)在妊娠期糖尿病(GDM)孕妇外周血以及胎盘组织中的表达特点,分析其与胰岛素抵抗关系。方法:收集2016年2月—2017年12月本院定期产检的116例孕妇为研究对象,依据GDM诊断标准将孕妇分为GDM组(56例),非GDM组(60例),采用稳态效应模型计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),将GDM组分为胰岛素抵抗组(HOMA-IR≥1.66)(30例)、非胰岛素抵抗组(HOMA-IR1.66)(26例),分析各组血清Galectin-3水平,采用荧光定量PCR技术、蛋白免疫印迹法检测产妇胎盘Galectin-3mRNA、蛋白表达并分析与血清Galectin-3、HOMA-IR的相关性。结果:血清Galectin-3水平GDM组(32.01±6.17)ng/ml高于非GDM组(8.01±2.05ng/ml),胰岛素抵抗组(42.17±7.85)高于非胰岛素抵抗组(28.14±5.37ng/ml)(均P0.05)。胎盘组织Galectin-3mRNA表达GDM组(0.71±0.67)高于非GDM组(0.41±0.25),胰岛素抵抗组(0.97±0.85)高于非胰岛素抵抗组(0.54±0.37);Galectin-3蛋白表达水平GDM组(0.81±0.17)高于非GDM组(0.41±0.05),胰岛素抵抗组(1.07±0.83)高于非胰岛素抵抗组(0.64±0.27)(均P0.05)。Galectin-3mRNA、蛋白表达、血清Galectin-3与HOMA-IR呈正相关(r=0.437、0.357、0.309,P0.05),Galectin-3mRNA、蛋白表达与血清Galectin-3无关(r=0.019、0.025,P0.05)。结论:GDM孕产妇血清Galectin-3水平、胎盘组织Galectin-3mRNA、蛋白表达均明显增高,提示GDM有胰岛素抵抗的可能,Galectin-3可作为GDM诊断和治疗的有效指标。     

不同时间持续缺氧对3 T3-L1脂肪细胞炎症因子mRNA的影响

目的探讨不同时间持续缺氧孵育后脂肪细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)表达的变化。明确肥胖缺氧状态下是否存在炎症因子表达增加导致胰岛素抵抗(IR)。方法将3T3-L1脂肪细胞随机分为4组,即常氧和缺氧4 h、12 h、24 h组,实时定量PCR(q RT-PCR)法测定各时间点脂肪细胞缺氧诱导因子1-α(HIF-1α),葡萄糖转运子-1(GLUT-1),TNF-α,IL-6,IL-1β的mRNA。结果与常氧组相比,缺氧12 h、24 h组HIF-1α,GLUT-1 mRNA表达水平均升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论缺氧使脂肪细胞HIF-1α,GLUT-1升高,确认脂肪细胞缺氧状态形成,在缺氧状态下炎症因子TNF-α,IL-6,IL-1β mRNA水平升高,缺氧处理24 h变化最为明显。     

雌激素对去卵巢大鼠肝细胞胰岛素受体底物-1和2表达的影响

目的观察雌激素对去卵巢大鼠肝细胞胰岛素受体底物-1(IRS-1)和胰岛素受体底物-2(IRS-2)表达的影响,以探讨其改善胰岛素抵抗的机制。方法取6周SD雌性大鼠随机分为3组:假手术组(Sham组)、手术组(OVX组)和戊酸雌二醇组(E_2组),E_2组每天灌胃戊酸雌二醇水溶液(1 mg/kg),而其他组给予相应体积的蒸馏水,连续给药12周。然后采用葡萄糖氧化酶法测定血糖,实时荧光定量PCR法检测肝细胞IRS-1和IRS-2 mRNA的表达,免疫组织化学法检测肝细胞IRS-1和IRS-2蛋白的表达。结果 OVX大鼠终末体重、肝重、内脏脂肪指数KITT显著高于Sham组,而葡萄糖利用常数KITT显著低于Sham组(P0.05);与OVX组大鼠相比,E_2组大鼠终末体重、肝重、内脏脂肪指数显著降低,而葡萄糖利用常数显著升高(P0.05);免疫组化结果显示,OVX大鼠肝组织IRS-1、IRS-2表达阳性细胞数目及染色程度较Sham组显著减少,而雌激素替代治疗后肝组织IRS-2阳性表达细胞数目及染色程度显著改善,但IRS-1改善不显著;OVX大鼠肝细胞IRS-1和IRS-2mRNA表达水平显著低于Sham组,而E_2组大鼠IRS-1和IRS-2 mRNA表达水平显著高于OVX组(P0.05)。结论雌激素可上调去卵巢大鼠肝细胞IRS-1和IRS-2的表达水平,进而改善胰岛素抵抗。     

GDM患者脂肪组织中HMGB1表达与产后糖代谢异常的关系

目的研究脂肪组织中高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达增加与妊娠期糖尿病(GDM)患者胰岛素抵抗程度及产后糖代谢异常的关系。方法选择2016年10月至2019年3月期间在海安市中医院诊断为GDM并接受剖宫产的126例患者作为GDM组,选择同期在该院接受剖宫产的健康孕妇150例作为对照组,检测剖宫产当天孕妇血清HMGB1、空腹胰岛素(FINS)的含量及脂肪组织中HMBG1、胰岛素受体底物(IRS)-1、IRS-2的表达水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。随访产后1年内糖代谢异常的发生情况并绘制K-M曲线。结果GDM组患者脂肪组织中HMGB1的表达水平、血清HMGB1含量及FINS、HOMA-IR水平明显高于对照组(t值分别为14.496、16.503、19.068、13.446,P<0.05),脂肪组织中IRS-1、IRS-2的表达水平明显低于对照组(t值分别为11.616、10.596,P<0.05);GDM组患者脂肪组织中HMGB-1的表达水平与血清HMGB1、FINS的含量及HOMA-IR的水平呈正相关(r值分别为0.405、0.358、0.405,P<0.05),与脂肪组织中IRS-1、IRS-2的表达水平呈负相关(r值分别为-0.278、0.255,P<0.05);经K-M曲线分析,与GDM组中脂肪组织HMGB1低表达患者比较,HMGB1高表达患者产后1年糖代谢异常累积发生率明显升高(χ^(2)=3.933,P<0.05)。结论GDM患者脂肪组织中HMGB1表达增加与胰岛素抵抗的加重、产后糖代谢异常的发生有关。     

性激素结合蛋白、胰岛素受体底物、葡萄糖转运蛋白表达及在妊娠期糖尿病发病过程中的作用分析

目的探讨妊娠期糖尿病孕妇胎盘组织中性激素结合球蛋白(SHBG)、胰岛素受体底物(IRS)、葡萄糖转运蛋白(GLUT)的表达及在妊娠期糖尿病发病过程中的作用,为临床诊治提供参考依据。方法收集2017年1月-2018年6月在南开医院产科定期产检,择期行剖宫产手术的单胎足月孕妇,其中妊娠期糖尿病孕妇120例为妊娠期糖尿病组,糖代谢正常孕妇120例为正常对照组。应用实时PCR (qPCR)和Western blot技术检测两组孕妇胎盘组织中SHBG、IRS-1、IRS-2、PI3K-p85β、GLUT1、GLUT3、GLUT4 mRNA和蛋白的表达水平,并分析各指标间的相关性。结果妊娠期糖尿病组孕妇胎盘组织中SHBG、IRS-2、PI3K-p85β、GLUT3、GLUT4 mRNA表达水平明显低于正常对照组,差异有统计学意义(均P0. 05);两组孕妇胎盘组织中IRS-1、GLUT1 mRNA表达水平差异无统计学意义(均P0. 05)。妊娠期糖尿病组孕妇胎盘组织中SHBG、IRS-1、GLUT3、GLUT4蛋白表达水平明显低于正常对照组,差异有统计学意义(均P0. 05);两组孕妇胎盘组织中IRS-2、PI3K-p85β、GLUT1蛋白表达水平差异无统计学意义(均P0. 05)。Pearson分析显示,SHBG与IRS-2、PI3K-p85β、GLUT3、GLUT4 mRNA表达呈正相关; IRS-2与GLUT1、GLUT4 mRNA表达呈正相关; IRS-1与PI3K-p85β、GLUT3 mRNA表达呈负相关。SHBG与IRS-2、GLUT3、GLUT4蛋白表达呈正相关; IRS-2与GLUT1、GLUT4蛋白表达呈正相关; IRS-1与GLUT3蛋白表达呈负相关。结论妊娠期糖尿病孕妇胎盘组织中SHBG、IRS及GLUT表达异常; SHBG浓度降低可能通过影响胰岛素信号传导通路导致胎盘葡萄糖利用障碍,最终引发妊娠期糖尿病。     

妊娠糖尿病患者脂肪组织中IRS-1、IRS-2、Omentin-1表达与胰岛素抵抗

目的:探讨妊娠糖尿病患者脂肪组织中胰岛素受体底物-1(IRS-1)、IRS-2及血清网膜素1(Omentin-1)的表达特征,分析与胰岛素抵抗的相关性。方法:选取50例妊娠糖尿病患者和50例正常孕妇分别纳入观察组和对照组。产前测定血清Omentin-1水平、空腹胰岛素(FIns)、空腹葡萄糖(FPG)水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。分娩过程中采集大网膜脂肪组织,检测IRS-1、IRS-2蛋白表达水平。结果:观察组FPG、FIns、HOMA-IR水平均高于对照组,Omentin-1水平低于对照组(P0.05),脂肪组织中IRS-1、IRS-2蛋白表达水平均低于对照组(P0.05)。HOMA-IR与Omentin-1、IRS-1、IRS-2均呈负相关(P0.05),Omentin-1与IRS-1、IRS-2均呈正相关(P0.05)。结论:血清Omentin-1表达可激活胰岛素受体后信号传导通路,增加胰岛素敏感性,血清Omentin-1及脂肪组织中IRS-1、IRS-2表达降低均使胰岛素抵抗进一步加剧。     

妊娠期糖尿病孕妇胎盘组织Akt和GLUT-1的表达与新生儿体重的相关性

目的探讨妊娠期糖尿病(GDM)孕妇胎盘组织Akt和GLUT-1的表达与新生儿体重的相关性。方法选取我院收治的40例GDM患者作为研究组,另选取40例健康孕妇作为对照组,检测两组孕妇的孕期BMI、孕期增重、 FPG、 FINS、HbA1c水平,分析胎盘组织Akt和GLUT-1表达情况及其与新生儿体重的相关性。结果研究组胎盘组织Akt和GLUT-1表达明显低于对照组(P <0.05)。Pearson相关性分析显示,Akt表达(r=-0.697, P=0.035)、 GLUT-1表达(r=-0.768, P=0.029)均与新生儿体重呈负相关。结论 GDM孕妇胎盘组织中Akt和GLUT-1表达水平下降可能是造成新生儿体重上升的原因。     

慢性酒精摄入对大鼠脂肪组织胰岛素敏感性影响

目的观察不同剂量酒精对雄性大鼠脂肪组织胰岛素敏感性的影响,并研究其可能的分子机制。方法用不同浓度(v/v)的酒精灌胃19 w,检测大鼠血清中胰岛素、葡萄糖含量,计算胰岛素抵抗程度;采用RT-PCR检测脂肪组织中磷脂酰肌醇-3-磷酸激酶(PI3K)mRNA、葡萄糖转运体4(GLUT4)mRNA表达水平。结果与对照组相比,中、高剂量组空腹葡萄糖浓度升高有统计学意义(P<0.05),低、中剂量组胰岛素浓度升高有统计学意义(P<0.05);各剂量组胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)的升高均有统计学意义(P<0.05)。各剂量组的PI3K mRNA和GLUT4 mRNA表达均升高。结论长期过量酒精摄入引起胰岛素抵抗,引起脂肪组织胰岛素信号转导途径中磷PI3K mRNA和GLUT4 mRNA的表达升高。     

酒精对大鼠胰岛素受体及底物-1基因表达影响

目的 研究慢性酒精摄入对雄性大鼠脂肪组织胰岛素受体(insulin receptor,IR)、胰岛素受体底物-1(insulin receptor substrate-1,IRS-1)mRNA表达的影响,探讨酒精与胰岛素敏感性的关系及相关分子机制.方法 清洁级雄性Wistar大鼠40只,按体重随机分为对照组和低、中、高酒精剂量组,每天分别给予0,0.8,1.6和2.4g/(kg·bw)的酒精灌胃.第19周末,断头处死大鼠,测定空腹血糖和血胰岛素,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR).提取脂肪组织总RNA,通过半定量聚合酶链式反应方法测定IR、IRS-1 mRNA表达水平.结果 与对照组相比,中、高剂量组空腹血糖(葡萄糖)浓度升高,差异有统计学意义(P<0.05);低、中剂量组胰岛素浓度升高,差异有统计学意义(P<0.05);各剂量组胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)的升高差异均有统计学意义(P<0.05).低、中、高酒精剂量组IR、IRS-1mRNA表达水平分别为(0.588 ±0.039),(0.504±0.070);(2.678 ±0.031),(1.178±0.177);(0.761±0.137),(0.515±0.037).与对照组相比,各酒精剂量组IR、IRS-lmRNA表达水平均增加,差异有统计学意义(P<0.05).结论 慢性酒精摄入可以引起雄性大鼠胰岛素抵抗,酒精造成脂肪组织IR、IRS-1mRNA表达的改变可能是引起胰岛素抵抗的分子机制之一.     

乙酰左旋肉碱改善肿瘤坏死因子-α诱导大鼠L6细胞胰岛素抵抗的实验研究

目的研究乙酰左旋肉碱(ALC)对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的大鼠肌细胞胰岛素抵抗的影响。方法分化好的L6肌细胞分为6组,分别为对照组、100nmol/L胰岛素组、100nmol/L胰岛素+10ng/ml TNF-α组、胰岛素+TNF-α+三个不同浓度ALC组(浓度分别为0.1、0.3、0.6mmol/L),继续培养24h。实验结束后分别用葡萄糖消耗实验、葡萄糖转运实验检测胰岛素刺激下L6细胞对葡萄糖的消耗和利用情况,Western blot检测细胞胰岛素受体底物-1(insulin receptor substrate-1,IRS-1)的蛋白表达水平。结果与100nmol/L胰岛素组比较,10ng/ml TNF-α作用24h后胰岛素刺激下细胞上清液中葡萄糖的残存量显著增加和细胞内葡萄糖转运量明显减少(P0.05),而ALC作用后明显改善TNF-α的抑制作用(P0.05),并呈剂量-反应关系。Western blot结果显示,与胰岛素组相比,TNF-α增高IRS-1的Ser307磷酸化表达,而ALC作用后减少IRS-1的Ser307磷酸化表达。结论10ng/ml TNF-α作用24h能诱导L6肌细胞的胰岛素抵抗,而ALC能改善这种胰岛素抵抗,可能是通过减少IRS-1的Ser307磷酸化表达来实现的。     

内脂素在胎盘组织中的表达及其与妊娠期糖尿病并发子痫前期的关系

目的:比较正常孕妇、妊娠期糖尿病(GDM)孕妇、GDM并发子痫前期孕妇胎盘组织中内脂素mRNA及蛋白表达的差异。方法:采用RT-PCR法检测正常孕妇(A组)、GDM孕妇(B组)、GDM并发子痫前期孕妇(C组)胎盘组织中内脂素mRNA水平。采用Western Blot法检测3组胎盘组织中内脂素蛋白表达水平。测定并比较3组孕妇的体重指数(BMI)、空腹胰岛素及空腹血糖水平。结果:空腹胰岛素水平及胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)从A组至C组递增,3组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。B组和C组胎盘组织中内脂素mRNA及蛋白表达水平均高于A组,差异均有统计学意义(P<0.05)。3组胎盘组织中内脂素mRNA及蛋白表达水平与空腹胰岛素、空腹血糖及HOMA-IR均无相关性(P>0.05)。结论:GDM并发子痫前期孕妇胎盘组织中的内脂素mRNA及蛋白表达水平均显著升高。     

明日叶查尔酮对胰岛素抵抗细胞PI3K-Akt-GLUT4信号通路的影响

目的研究明日叶查尔酮(Angelica keiskei chalcones,AC)对胰岛素抵抗L6细胞磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶-葡萄糖转运体4(PI3K-Akt-GLUT4)信号通路的影响。方法采用高浓度胰岛素诱导的胰岛素抵抗L6细胞,分别加入5、10、20μmol/L终浓度的明日叶查尔酮共同培养24 h,葡萄糖氧化酶法测定细胞上清液中葡萄糖含量,逆转录聚合酶链式反应方法检测细胞PI3K和Akt的mRNA表达水平,蛋白印迹法检测GLUT4和Akt的蛋白表达水平。结果胰岛素抵抗组细胞培养液的葡萄糖含量显著高于空白对照组(P0.05),而PI3K mRNA、Akt mRNA和GLUT4、Akt蛋白表达水平则降低(P0.05);中、高剂量AC组细胞培养液葡萄糖含量均低于胰岛素抵抗组(P0.05),而PI3K mRNA、Akt mRNA和GLUT4、Akt蛋白表达水平则升高(P0.05)。结论明日叶查尔酮可上调L6细胞胰岛素抵抗模型PI3K-AktGLUT4信号通路的表达水平,增强其对葡萄糖的摄取利用,改善胰岛素抵抗。     

长期酒精摄入对大鼠骨骼肌组织IR、IRS-1和PI-3K基因表达的影响

目的研究酒精长期作用下对大鼠骨骼肌胰岛素受体(IR)、胰岛素受体底物-1(IRS-1)、磷脂酰肌醇3-激酶p85亚单位(PI-3K)mRNA表达的影响,探讨酒精与胰岛素抵抗的关系及相关分子机制。方法清洁级Wistar大鼠80只(雌雄各半),按体重随机分为对照组和低、中、高剂量组,分别给予蒸馏水以及10%、20%和33%酒精溶液,灌胃剂量为每天10ml/kgbw。第19周末,断头处死大鼠,测定空腹血糖和血胰岛素,计算HOMA胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。提取骨骼肌总RNA,通过RT-PCR测定IR、IRS-1、PI-3K(p85)mRNA表达水平。结果雄性大鼠,与对照组比较高剂量组空腹血糖,低、中剂量组空腹胰岛素水平升高,各酒精剂量组HOMA-IR指数均升高。IRmRNA的表达在中、高剂量组降低,而IRS-1、PI-3K(p85)mRNA表达水平表现为随着酒精剂量的增加先升高后降低,与对照组比较差异有显著性(P<0.05);与对照组比较,雌性大鼠高剂量组空腹血糖升高、空腹血胰岛素下降,IR、IRS-1、PI-3K(p85)mRNA的表达在中、高剂量组降低(P<0.05)。各剂量组HOMA-IR指数与对照组比较差异无显著性。结论长期摄入过量酒精可以造成骨骼肌组织IR、IRS-1、PI-3K(p85)mRNA表达的降低,这可能是酒精降低胰岛素敏感性,引起胰岛素抵抗的分子机制。     

妊娠期糖尿病孕妇血清和胎盘组织中FOXO3a的表达水平及其与胰岛素抵抗的关系

目的探讨妊娠期糖尿病(GDM)孕妇血清和胎盘组织中转录因子FOXO3a表达水平及其与胰岛素抵抗之间的相关性,旨在为临床诊断及治疗GDM提供胰岛素抵抗相关新靶点。方法选取2016年1月-2017年1月在陕西省人民医院定期产检并住院分娩的52例GDM孕妇为研究对象(GDM组),另选取同期在该院分娩的52例正常孕妇作为正常组。检测两组孕妇产前体质量指数(BMI)、空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2hPG)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)及空腹胰岛素(FINS),应用胰岛素稳态模型评估法(HOMA)计算胰岛素分泌指数(HOMA-β)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)及胰岛素敏感指数(HOMA-ISI),应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测血清中FOXO3a表达水平,应用免疫组织化学法(SP)检测胎盘组织中FOXO3a蛋白表达水平。结果两组年龄、孕周、收缩压、舒张压比较,差异均无统计学意义(均P>0.05),GDM组产前BMI明显高于正常组,差异有统计学意义(P<0.05)。GDM组FINS、FPG、2hPG、TG、TC、HOMA-IR明显高于正常组,HOMA-β、HOMA-ISI明显低于正常组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。GDM组血清FOXO3a mRNA表达水平明显高于正常组,差异有统计学意义(P<0.05);GDM组胎盘组织中FOXO3a蛋白表达阳性率明显高于正常组,差异有统计学意义(P<0.05)。GDM组血清FOXO3a表达与FINS、HOMA-IR呈明显正相关关系(P<0.05),GDM组胎盘组织中FOXO3a蛋白表达与HOMA-IR呈明显正相关关系(P<0.05)。HOMA-IR是GDM组血清及胎盘组织中FOXO3a表达的独立影响因素(P<0.05)。结论FOXO3a在GDM血清及胎盘组织中均呈显著高表达,可能是GDM胰岛素抵抗发病机制之一。