当归红芪超滤物对X射线引起人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用及其机制

目的：探讨当归红芪超滤物(UFE-AH)对X射线引起人脐静脉内皮细胞(HUVECs损伤的保护作用,阐明其可能的机制。方法：体外培养HUVECs,采用不同剂量(0、2、4、6、8和10 Gy) X射线辐射,筛选出最佳辐射剂量(6 Gy);用不同浓度(0、 50、100、200、400、600、800和1 000μg·L^-1 ) UFE-AH干预HUVECs,筛选出最佳促增殖浓度(100、200和400μg·L-1)。实验分为空白组、模型组(6 Gy X射线)、低剂量UFE-AH组(6 Gy X射线+100μg·L^-1 UFE-AH)、中剂量UFE-AH组(6 Gy X射线+200μg·L^-1 UFE-AH)和高剂量UFE-AH组(6 Gy X射线+400μg·L^-1 UFE-AH)。CCK-8法检测各组细胞存活率,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,透射电子显微镜下观察各组细胞超微结构,Western blotting法检测各组细胞中磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B (Akt)、磷酸化Akt (p...     

当归红芪超滤物抗辐射致心肌细胞损伤的作用及机制

目的探讨当归红芪超滤物抗辐射致乳鼠心肌细胞损伤的作用及其可能机制。方法用X线照射Wistar乳鼠原代培养的心肌细胞建立辐射损伤模型,用不同浓度的当归红芪超滤物进行干预,实验分正常对照组、辐射损伤模型组、当归红芪超滤物不同浓度(3、6、9 mg·mL-1)干预组(UFE-AH)。MTT法检测各组心肌细胞的存活率,2,4二硝基苯肼显色法检测各组细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)的含量,黄嘌呤氧化酶法测定各组细胞内超氧化物歧化酶(SOD)的活性,免疫组化法观测各组细胞Bax的表达,蛋白印迹半定量测定各组细胞Bax蛋白的表达。结果与辐射损伤模型组比较,当归红芪超滤物各干预组心肌细胞存活率明显升高,LDH含量显著降低(P0.05),SOD活性显著提高(P0.05),Bax表达显著降低(P0.05)。结论当归红芪超滤物具有拮抗辐射致心肌细胞损伤的作用,其机制与清除自由基有关。     

当归红芪超滤物对氧化损伤乳鼠心肌细胞的保护作用及其机制

目的 探讨当归红芪超滤物对H2O2致乳鼠心肌细胞氧化损伤的保护作用及其可能机制。方法 用高浓度的H2O2(400μmol/L)在 Wistar 乳鼠原代培养的心肌细胞上建立氧化损伤模型,用不同质量浓度的当归红芪超滤物 (3.75、7.5、15 mg/mL) 进行干预。在倒置显微镜下观察各实验组心肌细胞的搏动频率,用 MTT 法检测心肌细胞的存活率,用试剂盒检测细胞培养上清液中乳酸脱氢酶 (LDH)、肌酸激酶 (CK) 的活性及细胞内超氧化物歧化酶 (SOD) 的活性、丙二醛 (MDA)、髓过氧化物酶 (MPO) 的量。RT-PCR 技术检测 caspase-3、hsp70 基因在心肌细胞中的表达情况。结果 当归红芪超滤物显著提高氧化损伤心肌细胞的细胞活力;与损伤组比较,当归红芪超滤物各干预组心肌细胞 LDH、CK、MPO、MDA 量显著降低 (P〖WT＜0.01),SOD 活性显著提高 (〖WTBX〗P〖WTBZ〗＜0.01),caspase-3 基因表达显著降低 (P＜0.05),hsp70 基因表达显著提高 (P＜0.05),差异具有统计学意义;并且当归红芪超滤物的抗氧化损伤作用呈剂量依赖性。结论 当归红芪超滤物具有良好的抗氧化损伤作用,其机制可能与清除自由基、上调 hsp70 表达、抑制 caspase-3 活性有关。     

当归红芪超滤物对心肌细胞Hsp70表达的影响

目的：探讨当归红芪超滤物对凋亡心肌细胞热休克蛋白70（Hsp70）表达的影响,阐明当归红芪超滤物对心肌细胞的抗氧化作用。方法：原代培养的Wistar乳鼠心肌细胞用高浓度的H₂O₂（400 μmol•L^-1）建立细胞凋亡模型,用不同浓度（3.75、7.50和15.00　g•L^-1）的当归红芪超滤物进行干预,倒置显微镜下观察各实验组心肌细胞搏动频率,流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率,分别用RT-PCR技术和Western blotting技术检测心肌细胞中Hsp70基因及蛋白的表达情况。结果：与对照组比较,H2O2损伤组心肌细胞搏动频率显著降低(P<0.01),细胞凋亡率显著增加(P<0.01),Hsp70 mRNA及蛋白表达量升高 (P<0.05,P<0.01);与H₂O₂损伤组比较,当归红芪超滤物高、中、低剂量组心肌细胞搏动频率显著增加,但低于对照组(P<0.01),凋亡率显著降低(P<0.01),Hsp70 mRNA及蛋白表达量显著升高（P<0.05,P<0.01）。结论：当归红芪超滤物具有抗氧化损伤心肌细胞凋亡的作用,且可上调心肌细胞Hsp70的表达。     

当归红芪超滤物对急性心肌梗死大鼠的保护作用及对热休克蛋白70表达的影响

目的 探讨当归红芪超滤物对急性心肌梗死大鼠乳酸脱氢酶(actate dehydrogenase,LDH)、乳酸脱氢酶同工酶(lactate dehydrogenase,LDH1)和热休克蛋白70 (heat shock protein 70,HSP70 mRNA) 表达的影响,阐明当归红芪超滤物对梗死心肌的保护作用.方...     

当归红芪超滤物联合重离子12C6+对肝癌H22细胞辐射增敏的实验研究

目的 观察当归红芪超滤物（Radix Angelicae Sinensis and Radix Hedysari, RAS-RH）增强人肝癌H22细胞对重离子12C6+辐射敏感性的作用,并探讨其可能的作用机制。方法 H22细胞分为空白对照组、药物组（给予RAS-RH）、辐射组（一次性给予12C6+辐射）及联合组（给予RAS-RH+辐射）,用CCK-8法检测RAS-RH对人肝癌H22细胞增殖抑制的影响,筛选合适的RAS-RH工作浓度;克隆集落形成实验检测RAS-RH对人肝癌H22的辐射增敏作用,筛选合适的辐射剂量;通过流式细胞仪检测RAS-RH对人肝癌H22细胞凋亡的影响,利用Western blot法检测Survivin、Caspase-9的蛋白表达水平的改变。结果 RAS-RH对H22细胞的增殖抑制作用在一定的时间（0~72 h)和浓度范围（0~200 mg/L)内呈现时间和剂量依赖性,其细胞抑制率为20%（IC20）时RAS-RH的质量浓度为（117.60±2.15） mg/L,以此选定100 mg/L为工作浓度;利用Prism5.0软件拟合的H22细胞生存曲线均向右下呈弧度的曲线,两条曲线明显分开呈一定的距离,联合组与辐射组相比,曲线低剂量区“肩区”缩小变窄,且各剂量点（1~10 Gy)的存活率降低,2 Gy时,其辐射增敏比（SER）为1.39±0.07,以此选定2 Gy为辐射总剂量。联合组（100 mg/L RAS-RH+2 Gy)凋亡率高于其余3组（ P＜0.01）;Western blot结果显示联合组的Survivin蛋白表达低于其余3组（ P＜0.01）,而联合组的Caspase-9蛋白表达高于其余3组（ P＜0.01）。结论 RAS-RH联合重离子12C6+束对人肝癌H22细胞有辐射增敏作用,其辐射增敏机制可能通过下调凋亡抑制因子Survivin蛋白表达,上调促凋亡因子Caspase-9蛋白表达以促进细胞凋亡有关。     

促卵泡激素对顺铂诱导卵巢癌细胞株凋亡的保护作用

目的 探讨促卵泡激素(FSH)对顺铂诱导卵巢癌细胞凋亡的保护作用。方法 MTT比色法检测人卵巢上皮性癌细胞系OVCAR3转染FSH受体(OVCAR3-FSHR)细胞活性,流式细胞术分析细胞周期变化及细胞凋亡率。结果 促卵泡激素能降低顺铂对细胞生长的抑制作用,同时降低S期的比例和凋亡率。结论 促卵泡激素对顺铂诱导的卵巢癌细胞凋亡有保护作用。     

顺铂诱导人肝癌细胞凋亡模型的构建

目的 建立肝癌细胞凋亡模型,探讨顺铂抗癌作用机理,为进一步研究细胞凋亡分子机制打下基础。方法 用抗癌药顺铂诱导增减的人肝癌细胞株ＳＭＭＣ－７７２１肝癌细胞发生凋亡,用四氮甲唑蓝比色试验（ＭＴＴ）,细胞形态学检查,ＤＮＡ凝胶电泳检测。结果 顺铂可显著抑制ＳＭＭＣ－７７２１细胞的生长,并有很好的量效和时效关系,经药物作用后,肝癌细胞在显微镜下呈现典型的凋亡形态学改变,ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳吴现明显的梯度     

马尾松树皮提取物对顺铂所致体外人胚肾细胞毒性的保护作用

目的体外研究马尾松皮提取物（PMBE）对于顺铂（CDDP）所致人胚肾细胞毒性保护作用及其作用机制。方法体外进行人胚肾细胞293（HEK293）的培养,分别应用PMBE和CDDP进行处理,并以四甲基偶氮噻唑蓝（MTT）检测细胞生长情况;同时检测细胞中丙二醛（MDA）、活性氧（ROS）、谷胱甘肽（GSH）的含量。结果低浓度（≤80mg/L）PMBE可促进HEK 293细胞的生长,提高细胞GSH的含量,降低MDA和ROS的含量;在较高浓度下可产生轻微的细胞毒性。结论低浓度PMBE对于CDDP所致肾毒性具有一定的保护作用,作用机制与其抗氧化性有关。     

脾肾合剂对顺铂诱导的SD大鼠胃肠损伤的影响

目的 探讨脾肾合剂对顺铂诱导的SD大鼠胃肠损伤的影响。方法 运用尾静脉注射顺铂建立SD大鼠胃肠损伤的模型,动物随机分为对照组、模型组、格拉司琼组、脾肾合剂组,给予相应药物干预,观察大鼠进食量和体重情况,采用酶联免疫法（ELISA）检测血清表皮生长因子（EGF）水平,采用免疫组化法检测十二指肠嗜铬细胞5-羟色胺（5-HT）的表达。结果 与模型组比较,脾肾合剂组大鼠进食量增加,体重增加,血清EGF水平升高（P〈0.01）,十二指肠嗜铬细胞5-HT表达下降（P〈0.05）。结论 脾肾合剂可改善顺铂诱导的SD大鼠胃肠损伤。     

丹参水提物和醇提物对顺铂致肾损伤大鼠的保护作用及其机制

目的探讨丹参水提物和醇提物对顺铂致肾损伤大鼠肾功能的保护作用及其机制。方法将60只SD大鼠随机分为空白组、顺铂组、氨磷汀对照组、丹参水提取物组、丹参醇提取物组,每组12只。采用尾静脉注射顺铂法建立顺铂致肾损伤大鼠模型。建模后第1天空白组、顺铂组给予生理盐水灌胃,其他3组腹腔注射相应药物,连续给药21 d。给药结束后,检测5组大鼠尿肾损伤因子1(KIM-1)、尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)和24 h尿蛋白,血肌酐、尿素氮、胱抑素C、乳酸脱氢酶(LDH),肾脏组织谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、一氧化氮、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛水平及活性氧簇(ROS)含量及KIM-1、转化生长因子β1 mRNA表达水平。结果与空白组比较,各组大鼠24 h尿蛋白、尿NAG、KIM-1,血肌酐、尿素氮、胱抑素C水平、LDH活性,肾组织丙二醛、一氧化氮、ROS水平升高,而肾组织SOD、GSH-Px水平降低(均P<0.05)。与顺铂组比较,氨磷汀对照组、丹参水提取物组、丹参醇提取物组大鼠24 h尿蛋白、尿NAG、KIM-1水平,血肌酐、尿素氮、胱抑素C水平、LDH活性,肾组织丙二醛...     

当归红芪多糖对辐射损伤心肌细胞线粒体凋亡通路的影响

目的探讨当归红芪多糖对辐射损伤氧化应激诱导的心肌细胞线粒体凋亡通路异常的影响。方法原代培养Wistar大鼠乳鼠心肌细胞,X线照射心肌细胞建立辐射损伤模型,用不同浓度的当归红芪多糖进行干预。实验分正常对照组、辐射损伤模型组(照射剂量为6 Gy)、当归红芪多糖低剂量组(终浓度为25 mg/L)、当归红芪多糖中剂量组(终浓度为50 mg/L)、当归红芪多糖高剂量组(终浓度为100 mg/L)。MTT法检测各组心肌细胞生长抑制率;DCFH-DA荧光探针检测各组心肌细胞活性氧自由基(ROS)表达水平;激光共聚焦技术检测各组心肌细胞线粒体膜电位水平;蛋白印迹法检测各组心肌细胞内细胞色素C(Cyt C)、Caspase-3、Caspase-9蛋白的相对表达量。结果与正常对照组相比,辐射损伤组心肌细胞生长抑制率明显升高、线粒体膜电位降低、ROS表达及Cyt C、Caspase-3、Caspase-9蛋白的相对表达量明显升高,差异具有显著性(P0.05)。与辐射损伤组相比,当归红芪多糖各干预组心肌细胞生长抑制率均不同程度下降、线粒体膜电位有所升高、ROS表达及Cyt C、Caspase-3、Caspase-9蛋白的相对表达量均不同程度降低(P0.05)。结论辐射致心肌细胞凋亡的机制之一是线粒体凋亡通路的激活,当归红芪多糖通过调控该通路发挥心肌细胞保护作用。     

顺铂诱导的喉癌细胞凋亡及其对细胞周期的影响

目的 探讨顺铂对喉癌Ｈｅｐ２细胞株诱导细胞调恨的作用,为抗肿瘤药物的筛选和用药方式提供理论依据。方法 体外培养的Ｈｅｐ２细胞与不同浓度顺铂作用２小时,利用充式细胞仪,荧光显微镜和ＤＮＡ凝胶电泳技术,研究不同时间细胞凋亡的发生,形态学改变和对细胞周期的影响。     

热疗联合顺铂诱导人胃癌MKN45细胞凋亡作用的研究

为研究顺铂及同时合并43℃30min热疗作用下胃癌细胞的凋亡过程,采用细胞培养的方法,通过AO染色、DNA微电泳及电镜观察,发现人胃癌MKN 45细胞在25mg/L浓度的顺铂作用2h、43℃30min热疗作用及两者同时作用下,呈现不同程度的凋亡。电镜观察到凋亡的细胞表;现DNA微电泳呈拖尾现象,提示凋亡细胞内DNA片断化;凋亡细胞AO染色呈阳性反应,且顺铂与热疗共同作用时AO阳性率高于两者单独作用时,有显著性差异(P<0.05),但两者单独作用时AO染色比较无显著性差异。提示热疗与顺铂合用时对人胃癌细胞的凋亡具有协同作用。     

维生素C对顺铂诱导卵巢癌CAOV3细胞凋亡的影响

目的探讨维生素C是否能影响顺铂诱导卵巢癌CAOV3细胞凋亡,以及它对细胞内端粒酶活性的影响。方法MTT法和流式细胞术检测细胞生长和凋亡的情况,TRAP-ELISA法测定端粒酶活性变化。结果DDP联合AA作用组比单独用DDP组细胞凋亡率明显增高,端粒酶活性明显降低。单独10μmol/LDDP处理组细胞生长未受到明显抑制,但联合AA后其生长受到抑制。结论AA能增强DDP诱导卵巢癌CAOV3细胞凋亡,并增强DDP对细胞内端粒酶活性的抑制作用。     

顺铂诱导人食管癌Eca-109细胞凋亡的观察

在体外采用光镜、电镜及ＤＮＡ断片检测方法对顺铂作用于人食管癌Ｅｃａ１０９细胞后的形态学及生化改变进行了观察。药物作用后细胞皱缩变小，呈圆形，细胞核固缩、破裂或消失，胞浆红染，有的细胞似出芽状，可见到凋亡小体及凋亡小体被吞噬的现象。顺铂低浓度时凋亡现象不明显，５ｍｇ／Ｌ以上时作用明显。药物作用２４ｈ时经ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳，可见到呈梯状的条带。结果提示：顺铂可引起Ｅｃａ１０９细胞凋亡，ＤＮＡ降解是细胞凋亡过程中的重要变化之一。     

顺铂诱导人食管癌Eca—109细胞凋亡的观察

在体外采用光镜、电昏头昏脑主ＤＮＡ断片检测方法对顺铂作用于人食管癌Ｅｃａ－１０９细胞后的形态学及生化改变进行了观察。药物作用后细胞皱缩变小，呈圆形、细胞核固缩、破裂或消失、胞浆红染，有的细胞似出芽状，可见到凋亡小体被吞噬的现象。顺铂低浓度时凋亡现象不明显，５ｍｇ／Ｌ以上时作用明显。药物作用２４小时经ＤＡ琼脂糖凝胶电泳，可见到呈梯状的条带。结果提示，顺铂可经起Ｅｃａ－１０９细胞凋亡，ＤＮＡ降蟹 细胞     

顺铂诱导人卵巢癌COC1,COC1／DDP细胞凋亡的研究

目的：探讨顺铂作用于卵巢癌细胞的作用机理。方法：通过电镜,光镜,流式细胞仪等方法观察顺铂诱导人亲代和耐药卵巢癌细胞ＣＯＣ１、ＣＯＣ１／ＤＤＰ凋亡,进行细胞周期分析及计算凋亡率。结果：顺铂引起细胞Ｓ期增多、Ｓ期细胞凋亡,ＣＯＣ１,ＣＯＣ１／ＤＤＰ细胞凋亡率不同,结论：顺铂药理机制之一是诱导细胞凋亡,耐药与凋亡减少有关。