LOX-1介导苯扎贝特对内皮细胞凋亡的影响

目的研究苯扎贝特对氧化型低密度脂蛋白（ox—LDL）诱导人脐静脉内皮细胞（HUVECs）凋亡的影响及血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1（LOX-1）在其中的作用。方法用流式细胞仪观察HUVECs凋亡，用RT-PCR技术观察LOX-1基因表达的变化。结果ox—LDL组与正常组比较凋亡明显增加（P〈0．05），LOX-1 mRNA表达明显增加（P〈0．05），苯扎贝特干预后凋亡减少，LOX-1 mRNA的表达降低（P〈0．05），呈浓度依赖关系。用LOX-1阻滞剂多聚肌苷酸预先干预2h后与苯扎贝特组比较细胞凋亡及LOX-1mRNA表达进一步减少（P〈0．05）。结论苯扎贝特可改善ox-LDL对内皮细胞的影响，下调LOX-1表达，减少内皮细胞凋亡，部分机制可能通过LOX-1介导。     

辛伐他汀下调OX—LDL诱导的NRK52E细胞LOX-1表达和ROS生成

目的 探讨辛伐他汀对氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导的NRK52E细胞血凝素样氧化低密度脂蛋白受体（lectin-like ox-LDL receptor,LOX-1）表达和活性氧生成的作用.方法 体外培养NRK-52E,同步化后分为三组：（1）空白对照组（NRK52E细胞＋0μg/ml ox-LDL）;（2） ox-LDL组（NRK52E细胞＋50 μg/ml ox-LDL）;（3）辛伐他汀组（NRK52E细胞＋10μmol/L辛伐他汀＋50 μg/mlox-LDL）,用Western blot测定LOX-1蛋白表达,激光共聚焦检测ROS的表达.结果 （1）正常NRK52E细胞表达LOX-1非常低,50 μg/ml ox-LDL明显刺激NRK52E细胞表达LOX-1增加6.80倍,加用10 μmol/L辛伐他汀后,ox-LDL刺激的NRK52E细胞LOX-1表达降低65％;（2）正常NRK52E细胞内ROS生成很少,50 μg/ml ox-LDL可明显刺激NRK52E细胞内ROS生成增多了4.86倍,加用10μmol/L辛伐他汀后,ox-LDL刺激的NRK52E细胞ROS生成减少60％.结论 辛伐他汀可下调ox-LDL诱导的NRK52E细胞LOX-1表达和ROS生成,从而保护肾脏.     

氧化低密度脂蛋白促进内皮细胞MMP-9mRNA、LOX-1mRNA的表达及LOX-1在其中的作用研究

目的观察氧化低密度脂蛋白（OX．LDL）诱导人脐静脉内皮细胞基质金属蛋白酶．9（MMP-9）mRNA、血凝素氧化型低密度脂蛋白受体1（LOX-1）mRNA的表达及LOX-1在表达中的作用。方法体外培养人脐静脉内皮细胞,逆转录聚合酶链反应检测MMP-9mRNA和LOX-1mRNA的表达。并观察予以LOX-1的抑制剂多聚肌苷酸作用后,人脐静脉内皮细胞MMP-9mRNA表达的变化。结果与对照组比较（0．252±0．032,0．279±0．041）,OX—LDL作用后,人脐静脉内皮细胞MMP-9mRNA、LOX-1mRNA（25ng／组：0．486±0．012,0．586±0．02;50n舀／L组：0．668±0．011,0．739±0．014;100ng／组：0．817±0．030,0．872±0．003）表达明显增加,且诱导作用呈浓度-时间依赖性;与氧化低密度脂蛋白组（1．020±0．039）比较,多聚肌苷酸抑制后,MMP-9mRNA（0．872±0．046）表达明显下降。结论OX—LDL能促进内皮细胞MMP-9mRNA及LOX-1mRNA的表达,LOX-1参与了OX-LDL诱导内皮细胞MMP-9mRNA表达的过程。     

氧化低密度脂蛋白对树突状细胞表面CD36表达的影响

目的探讨氧化低密度脂蛋白（OX—LDL）对树突状细胞表面CD36表达的影响。方法梯度离心法分离人外周血单核细胞,经含重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和重组人白介素4的DC完全培养液中培养,使其分化为DC。DC分别与不同浓度OX—LDL（分别为10μg／ml、50μg／m1）共同孵育48h后,镜下观察DC形态变化,同时采用流式细胞术检测DCs表型（CDlot、CD83）和CD36的表达,以及用ELISA法检测细胞土清液中IL-10、IL—12含量。结果与对照组相比,OX—LDL50μg／ml组DCs表型CD1α、CD83以及CD36的表达明显上调（P〈0．01）,OX—LDL50μg／ml组细胞上清液中IL-10、IL—12含量明显分别明显升高和降低（P〈0．01）。结论DCs表面CD36的表达与OX—LDL诱导的DCs成熟以及炎症因子的释放密切相关,CD36可能在DCs分化成熟以及抗原递呈过程中发挥重要作用。     

血清氧化低密度脂蛋白水平在动脉粥样硬化中的研究进展

动脉粥样硬化是一种慢性发展的疾病,研究结果表明它已不是老年人的专利。在动脉粥样硬化的基础上许多危险因素促进这一病理过程的发展,如高脂血症、高血压、糖尿病、吸烟、饮酒、年龄、遗传性疾病等,最近研究发现在动脉粥样硬化的形成初始阶段是氧化低密度脂蛋白（ox—LDL）的增加起了关键性作用。在ox-LDL作用下,巨噬细胞形成泡沫细胞,进一步形成动脉粥样硬化斑块,ox-LDL甚至参与血管狭窄,斑块脱落及血栓形成,导致相当严重的后果,威胁人类健康。因此由低密度脂蛋白（LDL）到ox-LDL的认识转变体现了对动脉粥样硬化的深入理解,现就ox-LDL在动脉粥样硬化中的作用综述如下。     

维生素E对体外氧化低密度脂蛋白诱导血管内皮细胞损伤的保护作用

为探讨维生素E(VE)对体外氧化低密度脂蛋白 (ox LDL)所致血管内皮细胞 (VEC)氧化损伤的保护作用。利用体外培养人脐静脉血管内皮细胞 ,建立了氧化损伤模型。将细胞分为 5组 :对照组、ox LDL组、VE L +ox LDL组 ,VE M +ox LDL组和VE H +ox LDL组。各剂量组首先在含有不同浓度的VE培养液中孵育 ,2 4小时后加入ox LDL进行氧化损伤 ,继续培养 2 4小时后收集细胞 ,进行有关指标测定。结果显示 ,ox LDL组MDA含量高于对照组和各VE组 (P <0 0 5) ;ox LDL组SOD活性低于对照组和各VE组 (P <0 0 5) ;ox LDL组、VE L +ox LDL组GSH Px活性低于其它各组 (P <0 0 5)。提示维生素E对ox LDL诱导的血管内皮细胞损伤有一定的保护作用     

银杏叶提取物对急性脑梗死病人血浆氧化修饰低密度脂蛋白水平影响的研究

目的观察银杏叶提取物注射液对脑梗死病人血浆氧化修饰低密度脂蛋白（OX-LDL）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）水平的影响。方法60例急性脑梗死病人分为两组：试验组30例，静脉滴注银杏叶提取物注射液20ml／次，qd，连续14d；对照组30例，每日静脉滴注香丹注射液20ml，连续14d。于治疗前和治疗后14d分别检测血浆0X—LDL、SOD、MDA的水平变化。结果试验组病人治疗前血浆0X—LDL、SOD、MDA水平分别为（0．70±0.19）mg／L、（81．0±8．0）kU／L、（6．6±1．3）μmol／L，治疗后分别为（0．52±0．26）mg／L、（106．0±6．0）kU／L、（4．2±1．2）μmol／L，治疗前后有非常显著差异（P〈0．01）；对照组治疗前后血浆OX-LDL、SOD、MDA水平变化不明显（P〉0．05）。治疗期间两组病人均未出现明显不良反应。结论银杏叶提取物注射液具有清除自由基、降低血浆OX-LDL水平的作用。     

大蒜素通过抑制凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1减轻氧化低密度脂蛋白诱导的血管内皮细胞凋亡

目的研究大蒜素对氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)诱导的血管内皮细胞凋亡的抑制作用,并探讨其可能的分子机制。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs),给予大蒜素(12.5、25和50 mg/L)、4-苯丁酸(4-phenylbutyric acid,PBA,4 mmol/L)或抗凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1(lectin-like oxidized low density lipoprotein receptor-1,LOX-1)单克隆抗体(4 mg/L)预处理lh,再加入ox-LDL(100 mg/L)继续培养24h。分别采用MTT法和Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞活力和细胞凋亡;说剂盒检测培养基乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)和细胞内caspase-3活性。Western blot法测定LOX-1及内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)关键分子双链RNA依赖的蛋白激酶样ER激酶(double-stranded RNA-activated protein kinase-like ER kinase,PERK)磷酸化水平和促凋亡蛋白caspase-12表达变化。结果与ERS抑制剂PBA相似,大蒜素显著减轻ox-LDL所诱导的HIUVECs损伤,表现为细胞活力增加(P0.05或P0.01),LDH漏出、凋亡率和caspase-3活性降低(P0.05或P0.01)。大蒜素明显抑制ox-LDL所致的LOX-1上调(P0.05或P0.01)。另外,与PBA相似,大蒜素明显抑制ox-LDL所诱导的PERK磷酸化和caspase-12活化(P0.05或P0.01)。抗LOX-1单抗可抑制ox-LDL所致的caspase-12活化(P0.05)。结论大蒜素可减轻ox-LDL所致的HUVECs凋亡,其机制可能与抑制LOX-1上调继而减轻ERS-caspase-12途径活化有关。[营养学报,2019,41(4):379-385]     

乙二醛致大鼠淋巴细胞DNA损伤的实验研究

予大鼠腹腔注射不同剂量（12．5、25．0和50．0mg／kg）的乙二醛后16h采血,分离淋巴细胞,做单细胞凝胶电泳实验。另分离正常大鼠淋巴细胞,加入不同浓度（0、0．25、0．50和1．00mmol／L）的乙二醛孵育1h,做单细胞凝胶电泳实验。结果显示,（1）大鼠腹腔注射25．0和50．0mg／kg的乙二醛,淋巴细胞拖尾率与彗尾长均明显高于对照组（P〈0．05）;各剂量组间比较,差异有显著性（P〈0．05）。（2）体外染毒0．50和1．00mmol／L乙二醛,大鼠淋巴细胞拖尾率与彗尾长均高于对照组,且各剂量组间差异有显著性（P〈0．05）。提示腹腔注射25．0和50．0mg／kg及体外染毒0,50和1．00mmol／L乙二醛可致大鼠淋巴细胞DNA损伤,且随着染毒剂量增加,DNA损伤加重。     

Ox-LDL通过LOX-1促进NRK52E细胞摄取脂质的实验研究

目的 探讨血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1（LOX-1）在氧化低密度脂蛋白（oxLDL）刺激肾小管上皮细胞摄取脂质中的作用.方法 体外培养NRK52E,加入不同浓度（0,25,50,100μg/ml）的ox-LDL及预先与LOX-1阻滞剂多聚肌苷酸（polyinosonic acid,poly I）和爱兰苔胶（carrageenan）作用2 h,再加入50μg/ml的ox-LDL,24 h后用Realtime-PCR测定LOX-1 mRNA的表达水平,Western blot测定LOX-1蛋白表达,用油红O法测定细胞内脂质聚集情况.结果 在25～100μ/ml范围内随着ox-LDL浓度的增加,LOX-1 mRNA和蛋白的表达增加,分别为0 μg/ml的2.13、10.14、20.81倍和2.53、12.18、21.45倍,各组间比较差异均有统计学意义（P〈0.05）;而随着LOX-1 mRNA和蛋白的表达增加细胞内脂质聚集也增加,分别为0μg/ml的3.2,6.4和12.5倍（P〈0.05）;polyI或carrageenan使50μg/ml的ox-LDL诱导的LOX-1 mRNA和蛋白的表达分别下降（48%,47%）和（72%,65%）,同时细胞内脂质聚集减少41%和49%,LOX-1与细胞内脂质呈正相关（r=0.97,P〈0.05）.结论 ox-LDL诱导NRK52E细胞表达LOX-1,又通过LOX-1促进脂质在细胞内聚集从而损伤细胞,这种诱导作用可被LOX-1的阻断剂部分阻断.     

老年高血压及血脂与低密度脂蛋白受体基因的关系

目的：探讨老年高血压及血脂与低密度脂蛋白受体（LDLR）基因HineⅡ多态性的关系。方法：采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）方法测定高血压组126例，对照组150例的LDLR基因型。结果：LDLR包括CC、CT、TT三种基因型。高血压组C等位基因频率高于对照组（P〈0．01）。结论：高血压组C等位基因频率高于对照组，提示低密度脂蛋白受体基因可能与老年高血压相关。     

家族性高胆固醇血症患者低密度脂蛋白受体基因新突变

目的 分析一家族性高胆固醇血症(FH)家系低密度脂蛋白受体(LDLR)基因突变类型,明确其突变位点,探讨LDLR基因突变类型与其临床表型的关系以及FH发病的分子病理学机制.方法 先证者及家系成员进行血脂测定,并行心电图、心脏和全身大血管彩色多普勒超声等检查,之后采用聚合酶链反应(PCR)联合变性高效液相色谱(DHPLG)技术结合扩增产物直接序列分析,检测LDLR基因启动子和全部18个外显子片段,结果与GenBank公布的该基因正常序列比对,找出突变,并检索FH突变数据库(www.ucl.ac.uk/fh).采用PCR结合限制性内切酶技术,检测载脂蛋白B100(ApoB100)基因Q3500R位点突变,以排除家族性ApoB100缺陷症(FDB).结果 先证者LDLR基因第13外显子存在c.1864 G→A错义突变,使得所表达的氨基酸由天冬氨酸→天冬酰胺(Asp622Asn);该外显子同时发现c.1959 C→T(Val 653Val)同义突变.在其母亲及外祖母LDLR基因中均发现上述两种突变,其父亲及外祖父也发现Val653Val的同义突变.克隆测序验证上述两种突变.结论 国内首次发现Asp622Asn突变;该突变可能是FH发病的分子病理学基础,并导致其严重的临床表型.PCR联合DHPLC技术可用于FH可疑人群的确诊.     

白藜芦醇对氧化型低密度脂蛋白所致细胞损伤的防护作用

目的探讨白藜芦醇对氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)所致PC12细胞损伤的保护作用。方法白藜芦醇预处理细胞,再加入不同浓度oxLDL,通过噻唑蓝(MTT)实验、乳酸脱氢酶(LDH)释放实验、TUNEL实验及半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶3(Caspase3)活性测定,观察白藜芦醇对细胞存活率、细胞膜通透性、细胞核及Caspase3活性的影响。结果10mg/LoxLDL组细胞存活率、LDH释放率、TUNEL阳性细胞数、Caspase3活性分别为(62±3)%、(23±3)%、(26±5)%和(0811±0049)mol·min-1·μg-1;10mg/LoxLDL+50μmol/L白藜芦醇组分别为(84±7)%、(13±4)%、(12±4)%和(0553±0048)mol·min-1·μg-1,两组比较差异有统计学意义。结论白藜芦醇具有减轻oxLDL致PC12细胞的毒性作用;对PC12细胞具有神经保护作用。     

阿托伐他汀不同用法降低血清总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇效果观察

目的 探讨社区高胆固醇血症患者隔日与每日口服阿托伐他汀20 mg治疗3个月对降低血清总胆固醇(total cholesterol , TC)和低密度脂蛋白胆固醇( low density lipoprotein cholesterol , LDL-C )浓度的影响。方法 连续入选2014年1月至2017年5月门诊收治的高胆固醇血症患者158例,按电脑随机数字表法分为隔日口服阿托伐他汀组(79例,阿托伐他汀20mg隔天口服1次)和每日口服阿托伐他汀组(79例,阿托伐他汀20 mg每天口服1次),疗程均为3个月,所有患者在治疗前、治疗3个月后分别测定血清三酰甘油(triacylglycerol , TG)、TC、LDL-C 、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol , HDL-C )浓度,同时对2组的血糖、肝功能、肾功能、肌酸激酶进行检测比较。结果 2组在治疗3个月后的TG、TC、LDL-C与治疗前比较,均有明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05 ; P<0.01);2组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 隔日口服与每日口服阿托伐他汀20 mg降低血清总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇浓度疗效相似,隔日口服不良反应少,减少了服药次数,节约了药费开支。     

The inhibiting activity of areca inflorescence extracts on human low density lipoprotein oxidation induced by cupric ion

The oxidative modification of human low density lipoprotein (LDL) plays a significant role in atherosclerosis. In this study, the inhibiting activity of areca inflorescence extracts (AIEs) on LDL oxidation was investigated by an in vitro study with Trolox as the standard antioxidant. The kinetics of LDL oxidation, thiobarbituric acid reactive substances assay, ferric-reducing antioxidant power assay and copper chelation assay were also evaluated to assess the antioxidant activities of AIEs, and the results revealed that AIEs could delay the lag time and inhibit the formation of malondialdehyde in the process of LDL peroxidation induced by Cu²⁺. The boiled water extract displayed the highest antioxidant activity compared with the ambient water extract and ethanol extract. The total phenolic contents and phenolic components of AIEs were also measured by high performance liquid chromatography method. Epicatechin, gallic acid and coumalic acid were the primary phenolic acids in AIEs.     

Increased dietary cholesterol does not increase plasma low density lipoprotein when accompanied by an energy-restricted diet and weight loss

BACKGROUND: Diets enriched with dietary cholesterol, frequently from eggs, have been shown to produce a small but variable increase in plasma low density lipoprotein (LDL) cholesterol. There is evidence to suggest that energy-restricted diets, that may contain a relatively high proportion of fat and cholesterol, can attenuate the cholesterol-raising effect of dietary cholesterol on plasma LDL. AIM OF THE STUDY: To determine the combined effects of increased dietary cholesterol and weight loss produced by energy restriction on plasma LDL cholesterol and lipoproteins. METHODS: A randomized, controlled, parallel study was performed in two groups of free-living volunteers on an energy-restricted diet for 12 weeks, one group was instructed to consume two eggs a day (n = 24), the other, to exclude eggs (n = 21). Dietary advice on energy restriction was based on the British Heart Foundation guidelines on how to lose weight for men and women. RESULTS: Energy intake fell by 25 and 29% in the egg-fed and non-egg-fed groups, resulting in a moderate weight loss of 3.4 kg (P < 0.05) and 4.4 kg (P < 0.05), respectively. The daily intake of dietary cholesterol increased significantly in the egg-fed group from 278 to 582 mg after 6 weeks. The concentration of plasma LDL cholesterol decreased in the non-egg-fed groups after 6 weeks (P < 0.01) and in the egg-fed and non-egg-fed at 12 weeks relative to baseline. There were no other significant changes in plasma lipoproteins or LDL particle size. CONCLUSIONS: An increased intake of dietary cholesterol from two eggs a day, does not increase total plasma or LDL cholesterol when accompanied by moderate weight loss. These findings suggest that cholesterol-rich foods should not be excluded from dietary advice to lose weight on account of an unfavorable influence on plasma LDL cholesterol.     

非酒精性脂肪肝与血液中总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇的相关性研究

目的 探讨非酒精性脂肪肝（NAFLD）与血液中总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）的相关性,为临床诊断和治疗提供参考依据.方法 选择无脂肪肝的80例中青年正常男性作为对照组,80例中青年男性有NAFLD但不合并2型糖尿病患者作为单纯NAFLD组（A组）,80例中青年男性有NAFLD且合并2型糖尿病者作为NAFLD合并2型糖尿病组（B组）,对三组的血脂进行分析比较.结果 对照组TC、TG、LDL-C分别为（4.09±1.01）,（1.94±2.14）,（2.47±0.93） mmol/L,A组分别为（5.16±2.13）,（3.01±1.56）,（3.15±1.12） mmol/L,B组分别为（6.21±1.17）,（4.35±1.20）,（3.21±0.15） mmol/L,三组比较差异有统计学意义（P＜0.05）,且A、B组TC、TG、LDL-C显著高于对照组,B组TC、TG、LDL-C显著高于A组,差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 NAFLD与血脂密切相关,影响了人体部分脂代谢功能的正常运转,且合并有2型糖尿病的患者脂代谢显著异常.