45例儿童急性淋巴细胞性白血病流式细胞术免疫分型的研究

目的研究儿童急性淋巴细胞性白血病(ALL)免疫表型的特点。方法采用流式细胞仪对45例初治儿童急性淋巴细胞性白血病进行免疫表型分析。结果①45例ALL中T淋巴细胞性ALL(T-ALL)5例(11.1%),B淋巴细胞性ALL(B-ALL)36例(79.9%);ALL1型(L1)9例(20%),ALL2型(L2)27例(60%),ALL3型(L3)5例(11.1%);②45例ALL中4例符合急性混合性白血病(HAL)的诊断标准(8.9%),25例(55.6%)为髓系抗原阳性的ALL(My+ALL),其中CD13阳性率最多,为44.4%(20例),CD33为22.2%(10例),CD15为22.2%(10例)。B-ALL中My阳性率为55.6%,T-ALL中My阳性率为20%,有明显差异;L1中My阳性率为22.2%(2/9),L2中My阳性率为70.4%(19/27),L3中My阳性率为40%(2/5),L2中My阳性率明显高于L1和L3(P<0.05)。结论结合免疫表型分析与细胞形态学检验能为儿童急性淋巴细胞性白血病的诊断提供更可靠和更有价值的分型依据。     

急慢性淋巴细胞白血病免疫表型分析

目的 探讨急性淋巴细胞白血病(ALL)和慢性淋巴细胞白血病(CLL)细胞免疫表型差异。方法 应用ABCAP免疫组织化学方法，选用一系列的淋巴细胞相关抗原的单抗对169例初发ALL与38例CLL患者进行淋巴细胞表面抗原检测。结果 B-ALL患者白血病细胞的CDl9、HLA-DR阳性率较高，T-ALL患者的白血病细胞以CD7、CD5与CD3阳性率较高，CLL患者的白血病细胞除了以CDl9、CD20、CD22阳性率较高外，CD5也有明显表达。结论 对淋巴细胞白血病患者进行免疫表型分析，对于区别细胞类型，鉴别诊断有重要意义，为临床治疗提供依据。     

T细胞受体γ基因和免疫球蛋白重链基因在急性淋巴细胞白血病细胞的重排及其在分型中的意义

用PCR扩增检测27例急性淋巴细胞白血病(acute lymphocytic leukemia,ALL)和1例T细胞淋巴瘤(T lymphocytic lymphoma,T-LL)的T细胞受体(Tcell receptor,TCR)γ基因和免疫球蛋白重链(immunoglobulin heavy chain,IgH)基因重排。TCRγ基因在9例T-ALL及2例未分型白血病病例中全部重排;在6例B-ALL中有1例重排;在10例C-ALL中有1例重排,而IgH基因在24例ALL病例中重排,其中7例为T-ALL,1例为未分型白血病。TCRγ和IgH基因在1例T-LL中均无重排,在T-ALL、B-ALL和C-ALL中均有交叉重排现象。我们探讨了这些结果在分型中的意义,同时还注意到,在28例中的10例病人存在IgH和TCRγ基因双重重排,如作为特异的双标记检测其微小残留白血病细胞,无疑会提高准确率。     

小儿急性白血病IgH基因重排与白血病克隆性和免疫分型的关系

选用一对免疫球蛋白重链基因V区和J区的通用引物,进行PCR检测不同类型小儿急性白血病免疫球蛋重链基因重排。33例小儿急性白血病初诊未治骨髓标本检测结果呈单克隆条带的为U-ALL3/7例,C-ALL4/6例,单/B祖双标记白血病1/3例,T-ALL1/4例,AML1/10例。B-ALL、AMoL、髓/T双标记白血病各1例均阴性。说明免疫球蛋白重链基因重排主要见于B细胞系ALL及其与B细胞相关的双标记白血病,阳性率为47％,可以作为分析白血病细胞来源的标志之一,并辅佐基因分型。另外对20例正常人外周血单个核细胞DNA检测结果均为一片模糊,无明确条带,说明可以区分淋巴细胞系克隆增殖和反应性增生。本文尚对2例PCR产物进行DNA序列分析,结果参与重排的J区分别为J_4和J_5,DNA同源性很小,有可能设计克隆特异性引物和探针作微小残留病检测。     

急淋的9号等长臂染色体[i(9q)]:一个新的非偶然性发现

在造血系统恶性疾病诊断时等臂染色体的报道很少,通常作为一个复杂克隆的一部分.本文作者报告了5例诊断为急性淋巴细胞白血病(ALL)时伴i(9q)的病例,其中有一例为单一的核型异常.5例病人,男性2例,女性3例,按FAB标准均诊断为ALL.L1型4例,L2型1例.免疫表型:C-ALL2例,Pre-B2例,T-ALL1例.临床特征:年龄>10岁3例,脾脏及淋巴结肿大4例,无1例肝脏肿大,白细胞>10×10~9/L2例,外周血原始细胞>90%者3例,5例骨髓原始细胞均>70%.有两例病     

儿童急性淋巴细胞白血病免疫表型186例分析

目的:探讨儿童急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)免疫表型特征,为临床诊断、微小残留病(minimal residual disease,MRD)的监测提供依据。方法:采用多参数流式细胞仪(multiparameter flow cytome-try,MFC),对186例儿童ALL病例进行免疫表型分析。结果:186例ALL中,B-ALL78.5%(146/186),T-ALL19.3%(36/186),T/M混合型ALL1.1%(2/186),B/M混合型ALL1.1%(2/186)。结论:儿童B-ALL比率约为T-ALL的4倍,混合细胞白血病在儿童很少见。儿童ALL均具有独特的白血病相关免疫表型(characterization of leukemia-associated immunotyping,LAIP)。     

ALL和N-ALL白血病患者治疗前后外周血T淋巴细胞亚群和免疫球蛋白变化及其对病情监测和预后判断的价值

目的:分析急性淋巴细胞性白血病(ALL)与非急性淋巴细胞性白血病(N-ALL)患者治疗前后外周血T淋巴细胞亚群和免疫球蛋白变化及其对病情监测和预后判断的价值。方法:选取本院106例白血病患者,其中ALL患者48例(ALL组),N-ALL患者58例(N-ALL组),并同期选择在本院健康体检的人员54例为正常对照组。对各组外周血免疫球蛋白IgA、IgG和IgM进行检测,并通过细胞生物玻片法对其T淋巴细胞亚群绝对值进行测定。按照治疗后有无改善将106例患者又分为非改善组55例(其中ALL患者25例,N-ALL患者30例)与改善组51例(其中ALL患者23例,N-ALL患者28例)。结果:106例白血病患者IgA、IgG和IgM的水平均显著低于对照组(P0.05),其外周血CD3~+、CD3~+CD4~+/CD3~+CD8~+比值与CD3~+CD4~+T细胞绝对值均显著低于对照组(P0.05);CD3~+CD8~+T细胞绝对值与对照组比较无明显差异(P0.05)。治疗后改善组IgA、IgG和IgM均较治疗前显著提高(P0.05),与对照组比较无明显差异(P0.05);外周血CD3~+、CD3~+CD4~+/CD3~+CD8~+比值与CD3~+CD4~+T细胞绝对值也较治疗前显著提高(P0.05),与对照组比较无明显差异(P0.05)。相比治疗前,治疗后未改善组各项指标均无明显差异(P0.05),而且CD3~+、CD3~+CD4~+/CD3~+CD8~+比值和CD3~+CD4~+T细胞绝对值均显著低于对照组(P0.05),而CD3~+CD8~+T细胞绝对值均较对照组高(P0.05)。结论:治疗后ALL和N-ALL患者外周血T淋巴细胞亚群(CD3~+、CD3~+CD4~+T细胞)与免疫球蛋白(IgA、IgG、IgM)的水平明显改善,对各项指标进行检测有助于病情监测和预后评估。     

186例儿童急性淋巴细胞白血病免疫表型特征

目的回顾分析186例儿童急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)免疫表型结果,以期了解儿童ALL免疫表型的特征,为临床诊断、微小残留病(minimal residual disease,MRD)的监测提供依据。方法采用多参数流式细胞术(multiparameter flow cytometry,MFC),利用CD45PE-cy5/SS设门,完成186例儿童ALL病人的免疫分型。结果在186例ALL中,B系ALL78．5％(146/186),T系ALLl9．3％(36/186),T/M混合型ALL1．1％(2/186),B/M混合型ALL1．1％(2/186)。白血病相关免疫表型(characterization of leukemia-associated immunotyping,LAIP)的出现频率为:B-ALL CD19 /CD10 /CD117 1．4％; CD19 /CD10 /CD13 25．3％;CD19 /CD10 /CD33 21．3％;CD19 /CD10 /CD2 5．5％;CD10 /CD34 /CD45±86．9％;CD19 / CD34 /CD20 24．7％;CD19 /CD10 /CD45±67．1％;CD19 /CD10-/CD20-4．1％。T-ALL CD7 /CD13 /CD45±5．6％;CD7 / CD33 /CD45±2．8％;TdT /CD3 /CD45±100％;CDT /CD2±/CD45±77．8％;CD7 /CD4 /CD3-16．7％;CD7 /CD8 /CD3- 16．7％。结论儿童B-ALL比率高于T-ALL,约为T-ALL的4倍,混合细胞白血病在儿童很少见。而且儿童ALL均具有独特的LAIP特征,因此免疫表型分析对于白血病的诊断和MR监测可提供非常客观的依据。     

急性淋巴细胞白血病患者免疫表型分析

目的:探讨急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)的免疫表型特点.方法:运用流式细胞术及特异性单克隆抗体CD2,CD3,CD4,CD5,CD7,CD8,CD10,CD13,CD19,CD20,CD22,CD33,CD34,CD38,CD45,CD56,CD117,HLA-DR,sIgM,cyIg,cyCD79a,MPO和TdT对58例形态学诊断ALL患者进行免疫表型检测.结果:通过CD3、CD19、CD33和MPO的表达情况分出T-ALL 8例(13.79%),B-ALL 49例(84.48%),混合细胞白血病1例(1.72%).B-ALL进一步根据CD10,CD20,cyIg,sIgM的表达情况分为早前B型5例(8.62%),普通B型34例(58.62%),前B型9例(15.52%),成熟B型1例(1.72%).B-ALL异常细胞存在抗原跨系列表达、跨阶段表达、缺失表达.儿童ALL免疫分型及白血痛相关免疫表型与成人ALL差异无统计学意义.结论:ALL的异常骨髓细胞有明显本系列特征、原始细胞标记和跨系表达,在此基础上应用多参数流式细胞仪可有效检测微小残留病变.     

复发的成人B细胞系列急性淋巴细胞白血病过表达周期素E

为研究细胞周期调节蛋白——周期素E(cyclin E)和周期素A在成人急性淋巴细胞白血病(ALL)复发中的作用,作者用Western印迹法对19例成人ALL患者的周期素E和周期素A蛋白水平进行研究。19例ALL患者(B-ALL15例,T-ALL4例)年龄16～74岁(平均     

急性和慢性白血病的免疫球蛋白和T细胞受体基因重排

作者通过Southern印迹杂交技术,检测了87例急性、慢性白血病和骨髓增生异常综合征(MDS)病人的免疫球蛋白(Ig)和T细胞受体(TCR)基因排列方式,并结合形态学和免疫表型加以分析。87例病人中,急性淋巴细胞白血病(ALL)26例,慢性淋巴细胞白血病(CLL)10例,急性髓细胞白血病(AML)22例,MDS10例,慢粒(CML,均为Ph′+)急变19例。治疗前根据外周血和骨髓涂片检查确诊,形态学按FAB标准分类。并作细胞化学和免疫表型检查。利用Southern印迹杂交技术,对外周血和骨髓标本进行DNA检测。所用探针:Ig重链结合区(JH)、Igκ轻链恒区(Cκ)、Igλ轻链恒区(C_λ)和TCRβ链恒区。     

白血病中FHIT基因的异常表达和缺失

FHIT基因位于染色体 3p14 .2 ,实验室的研究证实FHIT基因具有抑癌基因活性。FHIT基因异常表达或表达缺失出现在多种实体肿瘤和造血系统恶性疾病。为了探讨白血病细胞中FHIT基因的异常表达及意义 ,采用巢式RT PCR法对急性髓性白血病 (AML)、急性淋巴细胞白血病 (ALL)、慢性粒细胞白血病 (CML)以及骨髓增生异常综合症 (MDS)、慢性淋巴细胞白血病 (CLL)、骨髓瘤 (MM )等不同类型白血病患者FHIT基因转录本进行检测 ,并对FHIT基因转录本进行序列测定。 98份血液系统恶性疾病患者的骨髓或外周血标本中AML 38例 ,ALL16例 ,CML 34例 ,其它恶性血液病 10例。全部患者经骨髓细胞形态检查 ,诊断符合FAB诊断标准。肝素抗凝骨髓或外周血 2 - 3ml,分离单个核细胞 ,取 5× 10 7个细胞 ,用RTIZOL 试剂一步法提取细胞总RNA ,行PCR扩增 ,琼脂糖凝胶电泳分析PCR产物。回收目的片段 ,克隆到PGEM T载体 ,进行序列测定。结果表明 :在 5 5 / 98(5 6 % )的被检测病例有FHIT基因的异常表达 ,在AML、ALL和CML异常表达的发生率分别为 2 2 / 38(5 8% ) ,9/ 16(5 6 % )和 19/ 34(5 6 % )。正常骨髓或外周血标本未见有FHIT基因的异常表达。 4 3/ 98(44 % )的患者表达正常转录本 (Ⅰ型 ) ,4 0 / 98(41% )的患者同时表达正常转录本和异常     

小儿急性白血病MTS1基因缺失及点突变的研究

为探讨MTS1基因突变与恶性血液病的关系,应用PCR-SSCP和DNA印迹方法检测35例急性白血病(AL)患儿MTS1基因改变。结果显示:急性淋巴细胞白血病(ALL)缺失(包括点突变)为25.8％(8/31)。B-ALL纯合缺失为16％(4/25),T-ALL为33％(2/6)。点突变则两型各1例。结果证明:我国儿童ALL有MTS1基因失活的存在,T-ALL高于B-ALL,点突变仅见于少数病例。该基因失活与AL的发生发展及临床预后有密切关系。     

初诊成人急性淋巴细胞白血病免疫学亚型和临床特征的关系

报道了荷兰多中心协作组用免疫荧光法对91例初诊成人急性淋巴细胞白血病(ALL)免疫亚型的前瞻性研究结果,阐述了与临床特征的关系。全部病例均根据FAB标准诊断为ALL。在可比较的91例中,B-ALL 67例(73％),T-ALL 18例(21％),急性未分化细胞白血病(AUL)4例,双系ALL 2例(B-ALL/M_4,B/T-ALL)。与文献相似的是,CD_(10)~+ALL最多见,其次是T系ALL或AUL,而B-ALL     

急性淋巴细胞白血病的免疫分型和基因的研究

目的:回顾性分析30例急性淋巴细胞白血病(ALL)患者的免疫分型,融合基因及基因突变的分子生物学检测结果,并探讨其与临床治疗效果及预后的关系。方法:选取哈尔滨市第一医院血液肿瘤研究中心2015年8月到2016年6月经过骨髓细胞形态学、免疫表型、细胞遗传学、分子生物学等检查确诊的ALL患者30例,按照FAB标准分类,27例为B系ALL,3例为T系ALL。分析ALL患者白血病细胞膜表面及胞浆内分化抗原,并且对所有患者都进行43种融合基因定性筛查(BCR-ABL,AML1-ETO,PML-RARα等)和ALL基因突变(IKZF1,TP53,PAX5,JAK1,JAK2,CRLF2,PHF6,NOTCH1,FBXW7,PTEN)的二代测序(NGS)检测。结果:30例ALL患者中男性14例,女性16例,年龄2-74岁,中位年龄11.5岁。30例ALL中B-ALL发病率(90.00%)明显高于T-ALL(10.00%)。27例B-ALL患者主要表达CD19、CD22、CD10和CD34等。CD19和CD22是B-ALL最具有诊断价值的抗原;3例T-ALL主要表达cCD3、CD7、CD10和cTDT等,CD7和cCD3是T-ALL最具有诊断价值的抗原。30例ALL患者的43种融合基因定性筛查发现,BCR-ABL、TEL-AML1、E2A-PBX1、MLL-AF6、MLL-AF4和SIL-TAL融合基因阳性各1例,ALL相关基因突变的NGS检测结果表明,3例B-ALL患者发生TP53突变,1例B-ALL患者发生TET2 I1762V突变;3例患者(2例T-ALL,1例B-ALL)发现NOTCH1基因突变。1个疗程后成人B-ALL的治疗效果(28.57%)明显差于儿童B-ALL(95.00%),截止至2017年7月10日儿童B-ALL的生存率明显优于成人B-ALL,其差异都具有显著性意义。结论:白血病免疫分型技术及分子生物学检测技术在白血病的诊断、治疗方案的选择及疗效评价方面具有重要指导作用,是骨髓细胞形态学诊断的补充。     

供者淋巴细胞输注治疗骨髓移植后复发的小儿急性淋巴细胞白血病

异基因骨髓移植(BMT)是治疗急性淋巴细胞白血病(ALL)的一种有效措施,但移植后白血病复发是导致治疗失败最常见的原因。本文应用供者淋巴细胞输注(DLI)治疗4例BMT后复发的ALL,现报告如下。 患儿共4例,男性3例,女性1例,年龄6～16岁,中位数10.5岁。2例Ph(+)ALL第一次完全缓解(CR1),另2例分别为C-ALL CR1、C-ALL CR2、病例1、2、3均接受了HLA相合的同胞亲属骨髓,病例4接     

儿童急性淋巴细胞白血病异常免疫表型的意义

18岁以下急性淋巴细胞白血病(ALL)患者51例。平均年龄5.7岁。根据FAB 分类,L1型37例、L2型12例、具有L1和L2特征者2例。根据免疫学分类,B 细胞系ALL 41例(80%)、T 细胞系ALL10例(20%)。用荧光素连接的抗T 细胞(CD1、2、3、4、5、7、8)、B 细胞(CD10、19、20、21)、髓细胞(CD13、14、15、33)抗体和抗HLA-DR 抗体,与患者骨髓幼稚细胞一起孵育,然后进行流式细胞术分析。异常免疫表型指非常规性抗原缺失或获得。结果:26例(51%)患者具有常规免疫表型,25例(49%)出现异常免疫表型,二者在性别、年龄、白     

Coulter-750全自动血细胞分析仪在白血病诊断中的应用

我们对我院新购置Coulter750全自动血细胞分析仪在白血病诊断中的应用进行初步观察。一、材料和方法1.标本一般血液检查正常健康体检者30名,各型血液病患者45例,其中急性淋巴细胞白血病(ALL)10例,慢性淋巴细胞白血病(CLL)2例,急性粒细胞白血病未分化型(M1)1例,部分分化型(M2)13例,急性多颗粒早幼粒细胞白血病(M3)4例,急性粒单细胞白血病(M4)9例,急性单核细胞白血病(M5)6例,每例取血2ml置于15%EDTA K20.048ml的真空抗凝管中混匀,取血后2h完成测试。2.分析方法使用Coulter750全自动血细胞分析仪对上述血液标本进行检测,打印出各种细胞…     

儿童T、B 和 N细胞急性淋巴细胞白血病电镜检查

作者从电镜观察了13例儿童 ALL 治疗前的含有95%以上原淋细胞的骨髓标本。经表面标记鉴定:T-ALL6例,B-ALL2例,N-ALL5例。原淋细胞表面标记,T-ALL30～90%原淋巴细胞形成 E 玫瑰花结,B-ALL16%以上原淋细胞     

急性淋巴细胞白血病(ALL)免疫表型与临床及化验资料的相互联系

对350例未经治疗的ALL用一组单克隆抗体(Nomenclature of the International Workshop on Leukocyte Typing)确定其恶性细胞的免疫表型,并对其与就诊时患者临床及化验检查特点之间的相互关系进行了研究.全部ALL病例经骨髓涂片形态学及细胞化学确诊.根据免疫表型所见,ALL分为五组:前B-ALL,B-ALL,T-ALL,MO-ALL和未分化ALL,前B-ALL又分为前B1-B4-ALL,T-ALL分为T1-T4-ALL共11个确定的免疫学亚型,其中B细胞系ALL占63.5%,T细胞系ALL24%,未分化ALL4%,MO-ALL2%,多细胞系ALL6.5%.