丹参对类风湿关节炎患者滑膜细胞肿瘤坏死因子α表达的影响

目的探讨丹参对类风湿关节炎（RA）成纤维样滑膜细胞肿瘤坏死因子α（TNF-α）表达的影响。方法抽取RA患者关节液进行体外培养分离滑膜细胞,在细胞培养至3～5代时,给予丹参处理,在处理48h后收集培养上清,ELISA检测TNF-α的表达水平。结果当丹参浓度依次以0,6.25,12.5,25,50,100mg/L递增时,TNF-α浓度分别为（161.68±7.55）pg/ml、（161.68±8.79）pg/ml、（163.49±25.68）pg/ml、（137.33±35.98）pg/ml、（81.32±22.84）pg/ml和（86.89±28.48）pg/ml。丹参浓度为50mg/L和100mg/L时,与加入丹参前比较差异有统计学意义（P值分别为0.001和0.004）。结论丹参可以抑制RA滑膜细胞TNF-α的分泌,并且这一抑制作用可能是其用于RA治疗的理论基础。     

TNF-α和IFN-γ在结核性脑膜炎患者血清和脑脊液中的变化

目的检测结核性脑膜炎（TBM）患者血清和脑脊液（CSF）中肿瘤坏死因子α（TNF-α）和γ-干扰素（IFN-γ）的变化情况,探讨TNF-α和IFN-γ在TBM中的致病机制及其对诊断和预后的预示意义。方法按Thwaites诊断标准入选18例TBM患者,并对患者进行病程分期。采用双抗体夹心法检测患者血清及CSF中TNF-α和IFN-γ水平。同时选取20例无颅内感染征象患者CSF及血清作为对照组。对照组和TBM组TNF-α和IFN-γ水平采用t检验进行比较分析,并对TNF-α和IFN-γ与TBM组不同病期的相关性采用Pearson检验进行分析。结果 TBM患者血清和CSF中TNF-α水平分别为（65.80±5.18）pg/mL和（34.40±2.56）pg/mL,与对照组血清和CSF中TNF-α水平[（4.51±0.50）pg/mL和（3.44±0.40）pg/mL]相比均显著增高,差异有统计学意义（P〈0.01）。TBM患者血清和CSF中IFN-γ水平分别为（125.00±16.00）pg/mL和（77.60±2.33）pg/mL,与对照组血清和CSF中IFN-γ水平[（7.49±0.14）pg/mL和（7.95±0.14）pg/mL]相比均显著增高,差异有统计学意义（P〈0.01）。并且TNF-α和IFN-γ升高水平与TBM患者的病情呈正相关。结论 TNF-α和IFN-γ参与了TBM的发病机制,并与TBM患者的病情相关。检测TBM患者TNF-α和IFN-γ水平有利于疾病的诊断及对病程的判断。     

矽肺患者诱导痰中转化生长因子-β1和肿瘤坏死因子-α的变化

目的探讨转化生长因子-β1（TGF-β1）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）与矽肺发病的关系。方法采用ELISA法对50名某酒店服务人员的对照人群,50名接触矽尘1年以上的接尘工人,32名矽尘作业观察对象及52例矽肺患者诱导痰中的TGF-β1和TNF-α的含量进行测定。结果与对照组（7.81±2.13）pg/mL比较,接尘组、观察对象组和矽肺组TNF-α水平（49.82±15.42）、（112.13±32.19）、（227.36±52.31）pg/mL明显升高,差异有高度统计学意义（P〈0.01）;与接尘组（49.82±15.42）pg/mL比较,观察对象组和矽肺组TNF-α（112.13±32.19）、（227.36±52.31）pg/mL水平明显升高,差异有统计学意义（P〈0.05,P〈0.01）。与对照组（24.12±13.14）pg/mL和接尘组（28.42±15.56）pg/mL比较,观察对象组和矽肺组TGF-β1水平（48.21±16.45）、（61.34±30.22）pg/mL明显升高,差异有统计学意义（P〈0.05,P〈0.01）。结论 TGF-β1、TNF-α在矽肺发生发展中有重要作用,诱导痰中TGF-β1、TNF-α含量可以反映矽尘所致的肺组织炎症反应。     

部分液体通气技术治疗乳猪急性肺损伤后肿瘤坏死因子-α变化

目的探讨部分液体通气技术治疗乳猪急性肺损伤后肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor,TNF-α）在组织和血浆中变化规律。方法油酸间断注射诱导乳猪急性肺损伤后随机分为部分液体通气组和常规机械通气组各6只。分别于模型建立前、肺损伤后每隔60min抽取血液标本并取左下肺组织检测血浆TNF-α水平。结果部分液体通气组血浆TNF-α（30.715±5.517）pg/mL较常规机械通气组（63.052±12.401）pg/mL降低（P〈0.05）,部分液体通气组组织中TNF-α（31.265±2.337）pg/mL较常规机械通气组（62.288±5.114）pg/mL降低（P〈0.05）。结论部分液体通气治疗可明显减少乳猪血浆和组织中TNF-α的产生。     

肿瘤坏死因子样微弱凋亡诱导因子对骨关节炎软骨细胞作用实验研究

目的研究肿瘤坏死因子样微弱凋亡诱导因子（TWEAK）对体外培养骨关节炎（OA）软骨细胞的作用,同时探讨炎性细胞因子白细胞介素-1β（IL-1β）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）与TWEAK之间的关系。方法体外培养OA患者原代软骨细胞,分别用TWEAK（75ng/mL）,TWEAK（75ng/mL）和IL-1β（5ng/mL）,TWEAK（75ng/mL）和TNF-α（5ng/mL）作用细胞48h,MTT检测细胞因子对软骨细胞的增殖作用影响;ELISA检测细胞培养上清液中MMP-13、IL-6和Fas的分泌表达。结果 MTT结果表明细胞因子刺激软骨细胞后对细胞增殖无明显影响。TWEAK和IL-1β组诱导MMP-13表达增加（P〈0.05）;TWEAK和IL-1β组,TWEAK和TNF-α组均诱导IL-6表达增加（P〈0.05）。3组Fas分泌表达差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 IL-1β与TWEAK,TNF-α与TWEAK分别诱导OA软骨细胞MMP-13和IL-6表达增加,可能参与关节软骨损伤和OA的病程发展。     

血清白介素1β，白介素6，白介素8，白介素10和肿瘤坏死因子α参考区间的初步建立

目的初步建立本实验室Immulite 1000分析系统检测血清白介素1β(IL-1β)、白介素6(IL-6)、白介素8(IL-8)、白介素10(IL-10)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的参考区间。方法收集表观健康成年人的血清,采用化学发光免疫分析检测血清中的IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10和TNF-α水平。结果 IL-1β的95%参考区间为5 pg/mL,IL-6为2.95 pg/mL,IL-10为5 pg/mL。IL-8的95%参考区间男性85.3 pg/mL,女性67 pg/mL;TNF-α的95%参考区间男性10.96 pg/mL,女性9.77 pg/mL。结论初步建立了本实验室的血清IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10和TNF-α在Immulite 1000分析系统的参考区间。     

胸水中TB-DNA、TNF-α、IFN-γ检测对结核性胸水的诊断价值研究

目的：了解结核性和恶性胸水中结核分支杆菌（TB）-DNA、肿瘤坏死因子（TNF）-α、干扰素（IFN）-γ的水平，探讨三者在胸水鉴别诊断中的价值。方法：对75例胸水患者采用荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）法检测胸水中的TB-DNA，使用夹心酶联免疫吸附法（ELISA）检测胸水中的TNF-α和IFN-γ。结果：结核性胸水中IFN-γ（M1039．9pg／mL，95％CI45．8-1077．4pg／mL）、TNF—α（M173．2pg／mL，95％CI 36．0-775．1pg／mL）的水平均显著高于恶性胸水中IFN-γ（M49．4pg／mL，95％CI 41．0-1058．3pg／mL）、TNF-α（M64．8pg／mL，95％CI 33．8-486.9pg／mL）的水平（P〈0.01）。结核性胸水中TB-DNA的阳性率为7.3％。恶性胸水中TB-DNA的阳性率为0％。以IFN-γ〉70.0pg／mL诊断结核性胸水，其敏感度、特异度分别为92．7％、88．2％；以TNF-α〉125．0pg／mL诊断结核性胸水．其敏感度、特异度分别为80．5％、82．4％。结论：检测胸水中TNF-α和IFN-γ的水平有助于结核性和恶性胸腔积液的器别诊断．     

血清白介素1β、白介素6、白介素8、白介素10和肿瘤坏死因子α成人参考区间的初步建立

目的初步建立本实验室Immulite 1000分析系统检测血清白介素1β(IL-1β)、白介素6(IL-6)、白介素8(IL-8)、白介素10(IL-10)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的参考区间。方法收集表观健康成年人的血清,采用化学发光免疫分析检测血清中的IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10和TNF-α水平。结果 IL-1β的95%参考区间为5 pg/mL,IL-6为2.95 pg/mL,IL-10为5 pg/mL。IL-8的95%参考区间男性85.3 pg/mL,女性67 pg/mL;TNF-α的95%参考区间男性10.96 pg/mL,女性9.77 pg/mL。结论初步建立了本实验室的血清IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10和TNF-α在Immulite 1000分析系统的参考区间。     

TNF-α、IFNα-1b和WY14643对鼠贮脂细胞及其表达PPAR-α的影响

目的：观察肿瘤坏死因子α(TNF-α)、α干扰素(IFN-α)1b和匹立尼酸(WY14643)对鼠贮脂细胞及其表达的过氧化物酶体增生激活受体(PPAR-α)的影响。方法：选用大鼠贮脂细胞株,将培养的贮脂细胞分为对照组、TNF-α组、IFN-α1b组、WY14643组、TNF-α+IFN-α1b组和TNF-α+WY14643组。分别加入各作用因素,按照不同的时间点收集细胞标本,采用流式细胞仪观察细胞生长周期变化：透射电镜观察细胞超微结构改变;免疫组化和Western blotting检测PPARα表达情况。结果：MTT检测：TNFα在50U／mL浓度可明显导致贮脂细胞增殖激活;而IFN-α1b在50U／mL浓度对TNF-α激活贮脂细胞无影响。透射电镜观察到IFN-α1b作用组贮脂细胞有明显的凋亡现象发生,而TNF-α+IFN-α1b组贮脂细胞形态未见异常。通过免疫组化和Western blot检测,观察到PPAR-α在贮脂细胞的表达随TNF-α的作用而增加。结论：TNF-α在50U／mL即可明显激活贮脂细胞;IFN-α1b对TNF-α使贮脂细胞增殖激活的过程有抑制作用：其机制可能是通过诱导肝脏贮脂细胞凋亡而产生。从体外培养方面证实了IFN-a1b具有抗肝纤维化的作用：验证了PPARα对TNF-α具有抑制作用的观点;为临床上对肝纤维化的治疗和PPAR-α激动剂在临床上的应用提供了较好的理论依据。     

miR-146 调控TLR4/NF-κB 通路减少卵泡颗粒细胞凋亡及干预卵巢早衰中的机制研究

目的 探究miR-146 通过调控Toll 样受体4（TLR4）/ 核因子-κB（NF-κB）减少卵泡颗粒细胞凋亡和干预卵巢早衰（premature ovarian failure,,POF ）的机制。方法 野生小鼠实验:60 只SPF 级C57BL/6 小鼠随机分为对照组（n=30）和POF 组（n=30）。POF 组建立卵巢早衰模型,造模后15 天qPCR 检测2 组小鼠卵巢组织中miRNA-146表达水平;基因敲除鼠实验:40 只C57BL/6 小鼠和20 只miR-146 敲除小鼠分为三组:对照组（n=20）、野生型POF组（n=20）和miR-146 敲除POF 组（n=20）,野生型POF 组和miR-146 敲除POF 组建立POF 模型,建模后15 天HE染色分析各组小鼠卵巢组织病理情况及原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡和闭锁卵泡数,ELISA 检测各组小鼠卵巢组织炎症信号通路分子TLR,NF-κB, 肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白介素6（IL-6）的表达水平;Western blot 检测卵巢组织凋亡蛋白BCL2-Associated X 蛋白（Bax）,B 淋巴细胞瘤-2 基因（Bcl2）和TLR4 信号通路蛋白TLR4,NF-κB表达水平。结果 野生鼠实验表明与对照组相比,POF 组小鼠卵泡中miR-146 表达水平下调（0.51±0.14 vs 1.52±0.21）,差异具有统计学意义（t=7.338,P<0.01）;基因敲除鼠实验表明:与对照组相比,野生型POF 组和miR-146 敲除POF组原始卵泡（9.43±2.03,6.43±1.60 vs 16.82±2.11）、初级卵泡（6.15±1.11,5.01±1.10 vs 8.88±1.12）、次级卵泡（5.11±1.71,4.01±1.26 vs 7.11±1.34）均降低,闭锁卵泡（10.17±1.41,11.46±1.96 vs 7.18±1.64）升高,差异具有统计学意义（F=7.787, 8.214, 9.726, 7.811, 均P<0.01）。与对照组相比,野生鼠POF 组和miR-146 敲除POF 组小鼠卵巢组织TLR4（68.18±5.92pg/ml,91.11±16.34 pg/ml vs 24.81±2.81 pg/ml）,NF-κB（74.19±8.11 pg/ml,88.11±16.71pg/ml vs 68.18±5.92 pg/ml）,TNF-α（72.81±2.10 pg/ml,94.31±2.26 pg/ml vs 28.07±3.67 pg/ml）和IL-6（69.19±7.11,81.11±16.34 vs 19.43±10.81 pg/ml）分泌显著升高,差异均有统计学意义（F=6.281, 7.264, 8.724, 6.817, 均P <0.01）;与对照组相比,野生鼠POF 组和miR-146 敲除POF 组小鼠卵巢组织Bax 蛋白表达水平降低（1.18±0.19. 0.61±0.14 vs1.81±0.21）,Bcl2 蛋白表达升高（0.59±0.05, 0.91±0.05 vs 0.58±0.02）,TLR4（1.10±0.12, 0.41±0.04 vs 1.13±0.11）和NF-κB（0.81±0.02, 0.31±0.06 vs 0.87±0.27）降低,差异均有显著性统计学意义（F=7.235, 6.714, 7.612 ,7.737, 均P<0.01）。结论 miR-146 具有减少卵泡颗粒细胞凋亡的作用,其机制可能与TLR4/NF-κB 信号通路的调控和抑制炎症因子的释放相关。     

体外培养APA微囊化肿瘤坏死因子α/293细胞对结肠癌细胞增殖的影响

背景：积极探索结肠癌相关基因及抑癌基因已成为新的研究热点,人肿瘤坏死因子α是一个重要的促炎因子和免疫调节因子,对肿瘤的免疫治疗具有一定的疗效。目的：观察体外培养海藻酸钠-聚赖氨酸-海藻酸钠（alginate-polylysine-alginate,APA）微囊化肿瘤坏死因子α/293细胞对结肠癌细胞增殖的影响。方法：采用前期建立的制备方法,用APA微囊分别包裹人肿瘤坏死因子α/293细胞,APA微囊化0/293细胞。取对数生长期结肠癌（Lovo）细胞,配制成所需浓度的细胞悬液,接种24孔板培养,分别加入低、中、高剂量稳定转染的APA微囊化肿瘤坏死因子α/293,即分为5个实验组,APA微囊化肿瘤坏死因子α/293细胞低剂量组、中剂量组、高剂量组、阴性组为APA微囊化0/293细胞组,阳性组加入肿瘤坏死因子α,MTT法检测490nm吸光度;通过对人肿瘤细胞增殖抑制实验,观察对结肠癌细胞（Lovo）增殖的抑制作用。结果与结论：体外培养中,加入APA微囊化0/293细胞组对结肠癌细胞增殖无抑制作用;而APA微囊化肿瘤坏死因子α/293细胞中、高剂量组和阳性组,在24,48,72h的A值低于APA微囊化0/293细胞组（P〈0.05）,提示APA微囊化人肿瘤坏死因子α/293细胞所分泌肿瘤坏死因子α对结肠癌细胞有增殖抑制效应,均呈现出良好的数量依赖关系。     

类风湿关节炎患者外周血趋化因子检测的意义及其与肿瘤坏死因子-α的关系

[目的]探讨类风湿关节炎患者外周血趋化因子(FKN)表达水平及其临床意义.[方法]应用酶联免疫吸附法检测65例类风湿关节炎、20例骨关节炎患者及20例正常对照血清FKN和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平.[结果]类风湿关节炎患者血清FKN水平为(120.21±74.87)pg/mL,TNF-α水平为(55.64±39...     

大鼠退变髓核腰交感神经干注射对交感神经干炎症因子表达的影响

目的观察X线引导下大鼠退变髓核腰交感干注射对腰交感神经干炎症因子表达的影响。方法实验用雄性SD大鼠共72只,随机分为三组:空白对照组、假手术组、髓核注射组。髓核注射组大鼠行X线下自体退变髓核悬液右侧腰交感干注射,假手术组注射等剂量生理盐水,空白对照组不做任何处理。注射后14天,取各组大鼠右侧腰交感干行组织学观察,并采用ELISA法定量分析炎性细胞因子IL-1β、IL-6和TNF-α表达变化。结果髓核注射组大鼠腰交感干组织学观察发现有明显的炎性细胞浸润及血管肿胀、充血;ELISA检测发现腰交感干IL-1β(20.1±4.40pg/ml),IL-6(26.5±8.9pg/ml)及TNF-α(60.77±6.37pg/ml)蛋白含量比空白对照组IL-1β(8.02±1.31pg/ml),IL-6(10.30±1.43pg/ml),TNF-α(24.38±4.81pg/ml)及假手术组IL-1β(7.52±2.11pg/ml),IL-6(11.58±2.56pg/ml),TNF-α(26.12±6.81pg/ml)表达显著增高(P0.05)。结论大鼠自体退变髓核导致腰交感神经干炎症因子表达升高可能与盘源性内脏痛的发生有关。     

川芎嗪可影响肿瘤坏死因子α刺激肝星状细胞结缔组织生长因子、核因子κB及相关基因产物的表达

背景：川芎嗪延缓肝纤维化形成的机制尚不清楚。目的：观察川芎嗪对肿瘤坏死因子α刺激的肝星状细胞增殖及结缔组织生长因子、核因子κB及其相关基因产物白细胞介素6表达的影响。方法：体外培养HSC-T6细胞株,取对数生长期的细胞用于实验。实验分为4组：对照组仅加入细胞;TNF-α组加入10μg/L TNF-α;川芎嗪干预组先加入终浓度为10μg/L的TNF-α作用30min后,分别加入川芎嗪50,100,200,400,600,1000mg/L;PDTC组先加入终浓度为10μg/L的TNF-α作用30min后,再加入终浓度18μmol/L的核因子κB阻断剂PDTC。结果与结论：MTT结果显示100,200,400,600,1000mg/L的川芎嗪均能抑制HSC-T6增殖,且呈剂量依赖性。免疫细胞化学染色及Western blot检测发现10μg/L的肿瘤坏死因子α刺激后,HSC-T6细胞结缔组织生长因子、核因子κB及白细胞介素6的表达明显增多（P〈0.01或P〈0.05）,200,400,600mg/L的川芎嗪及18μmol/L的PDTC均可明显降低肿瘤坏死因子α刺激后HSC-T6细胞结缔组织生长因子、核因子κB及白细胞介素6的表达（P〈0.01）,且随着川芎嗪质量浓度的增加,抑制作用增强,PDTC的抑制作用最明显。相关性分析结果显示HSC-T6细胞结缔组织生长因子和核因子κB的表达呈正相关（r=0.980,P〈0.01）。说明川芎嗪可以抑制肝星状细胞结缔组织生长因子、核因子κB及白细胞介素6的表达,抑制肝星状细胞的增殖。     

乌司他丁对脓毒性休克婴幼儿白介素-1、肿瘤坏死因子α及降钙素原的影响

目的：探讨乌司他丁对脓毒性休克婴幼儿白介素-1（IL-1）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）及降钙素原（PCT）的影响。方法将60例脓毒性休克患儿按随机数字表法分为对照组和治疗组,每组30例。对照组给予抗休克和病因治疗,治疗组在对照组治疗的基础上,给予乌司他丁2万 U·kg-1加入5%葡萄糖注射液50 mL中静脉滴注,q8h。2组均5 d 为1个疗程。2组患儿分别于入住ICU时及治疗5 d 后采集静脉血4 mL,测定TNF-α、IL-1及PCT,观察治疗前后TNF-α、IL-1及PCT水平的变化。结果2组治疗前IL-1、TNF-α和PCT水平的变化比较差异均无统计学意义（均 P＞0.05）;治疗组治疗5 d 后 IL-1、TNF-α和 PCT 分别为（86.48±17.29）pg·L-1、（105.86±20.79）pg·L-1和（5.33±0.85）ng·mL-1,对照组治疗5 d 后IL-1、TNF-α和PCT分别为（112.34±18.54）pg·L-1、（189.04±28.36）pg·L-1和（8.54±1.43）ng·mL-1,治疗组明显低于对照组（均P＜0.05）。结论乌司他丁对脓毒性休克婴幼儿IL-1、TNF-α及PCT有明显降低作用,从而能改善患儿的预后。     

评估联合检测炎症性因子IL-6、TNF-α和MCP-1对冠心病的临床诊断价值

目的探讨联合检测人血清中自细胞介素一6（interleukin-6,IL-6）、肿瘤坏死因子-α（tu-nornecrosisfactor-α,TNF-α）和单核细胞趋化因子一1（monocytechemotacticfactor-1,MCP-1）水平对冠心病（coronaryheartdisease,CHD）的临床诊断价值。方法选择150例CHD患者和50例健康对照者,采用ELISA法检测受检者血清中IL-6、TNF-α和MCP-1水平,并且评价各指标单项检测及多项联合检测对CHD的诊断价值。结果CHD组IL-6、TNF-α和MCP-1水平显著高于正常对照组,且差异均有统计学意义（P均〈0．01）。血清IL-6、TNF-α和MCP-1诊断CHD的受试者工作特征曲线下面积分别为0．88、0．86和0．91,三者诊断CHD的cut-off值分别为7．46pg／mL、23．03pg／mL、68．53pg／mL。血清IL-6、TNF-α和MCP-1单项检测CHD的敏感性分别为80．70％、79．30％和86．00％,三项联合检测的敏感性为97．30％。结论联合检测血清中IL-6、TNF-α和MCP-1水平可提高诊断CHD的敏感性,对cHD的早期诊断具有重要价值。