鞘内注射KN93对神经病理性疼痛大鼠痛行为学的影响

目的 观察鞘内注射钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(Ca2+/calmodulin dependent protein kinaseⅡ,CaMKⅡ)抑制剂KN93对腰背根神经节慢性压迫(chronic compression of dorsal root ganglion,CCD)大鼠神经病理性疼痛的影响. 方法 SD雄性大鼠48只,按随机数字表法分为3组:假手术组(S组,11只)、CCD模型组(C组,11只)、KN93组(K组,26只).C组、K组制备CCD模型,S组仅暴露L5-6椎间隙.术后14dS组和C组鞘内注射10％溶媒二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)25μl,K组鞘内注射溶于10％DMSO的KN93 50 μg/25μl.各组在造模前1 d(t1),造模后4(t2)、7(t3)、10(t4)、14 d(t5)随机取8只大鼠检测热缩足反射潜伏期(paw withdrawal thermal latency,PWTL)和机械缩足反射阈值(paw withdrawal mechanical threshold,PWMT);并于鞘内注射DMSO或KN93后2(t6)、4(t7)、10(t8)、12(t9)、24 h(t10)时进行相同的行为学检测.各组于给药前以及K组的给药后各时间点(t6～t9)随机取3只大鼠处死并取脊髓腰膨大部分,采用Western blot方法检测CaMKⅡ蛋白表达水平.结果 鞘内给药后t6～t9时点,K组PWTL [(14.7±1.6)、(18.6±1.8)、(21.2±2.5)、(15.3±2.0)s],PWMT [(12.0±1.0)、(15.4±1.4)、(17.5±1.7)、(14.9±1.6)g]比C组PWTL[(11.6±1.8)、(10.7±1.7)、(11.7±2.4)、(9.9±1.7)s],PWMT[(8.4±0.9)、(9.6±1.6)、(10.6±1.7)、(8.9±1.3)g]升高,差异有统计学意义(P＜0.05).给药前及给药后t10时,K组PWTL、PWMT与C组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).和t5时CaMKⅡ值(1.55±0.12)比较,给药后t6～t9时间点CaMKⅡ蛋白[(1.37±0.11),(1.15±0.12)、(0.75±0.08)、(0.86±0.12)]表达下降(P＜0.05). 结论 鞘内注射KN93可有效缓解神经病理性疼痛大鼠的疼痛反应.     

鞘内注射突触后致密物质-95反义寡核苷酸对神经病理性疼痛小鼠痛行为学的影响

目的 探讨鞘内给予突触后致密物质-95(postsynaptic density protein-95,PSD-95)反义寡核苷酸对坐骨神经结扎小鼠疼痛行为的影响. 方法 选取鞘内置管成功的C57BL/6雄性小鼠48只,采用随机数字表法分为4组(每组12只):假手术组(Sham组)、生理盐水组(NS组)、PSD-95反义寡核苷酸组(A组)、PSD-95错义寡核苷酸组(M组).采用结扎坐骨神经的方法制备小鼠坐骨神经慢性压迫性损伤(chronic constriction injury,CCI)模型,结扎坐骨神经后第1～14天,NS组、A组、M组分别鞘内注射生理盐水5μl、反义寡核苷酸5 μg/5μl、错义寡核苷酸5μg/5μl,1次/d.于术前1d及术后1、3、5、7、14、17、21 d测定小鼠结扎侧足底机械缩足反射阈值(paw withdrawal mechanical threshold,PWMT)和热缩足潜伏期(paw withdrawal thermal latency,PWL). 结果 A组小鼠术后1～14 d的疼痛阈值与Sham组维持一致[第14天,PWMT (5.69±1.34)g,P＞0.05;PWL(9.65±1.44)s,P＞0.05].术后17d,A组小鼠损伤侧足出现疼痛[PWMT (4.24±1.83)g,P＜0.05;PWL (7.18±0.41)s,P＜0.05],但是与NS组[PWMT (1.77±0.38)g,P＜0.05;PWL(4.33±1.21)s,P＜0.05]、M组[PWMT(1.6±0.37)g,P＜0.05;PWL (4.38±0.95)s,P＜0.05]比较,疼痛明显减轻,并且持续到术后第21天. 结论 在CCI所致神经病理性疼痛的发展阶段,连续鞘内给予PSD-95反义寡核苷酸可以完全逆转给药期内小鼠痛行为表现,并且在停止给药后7d仍有明显缓解疼痛的作用.     

鞘内注射Roscovitine缓解大鼠慢性神经病理性疼痛

目的 在SD大鼠脊髓后根神经节慢性压迫(CCD)模型上观察鞘内注射Roscovitine的镇痛效果.方法 用不锈钢棒(长4 mm,直径0.7 mm)持续件压迫脊髓背根神经节(DRG)建立慢性神经病理性疼痛模型.术后第7天鞘内注射溶解于DMSO 10 μl中的Roscovitine 50 μg(R组);同时设CCD术后第7天只给予鞘内注射二甲基亚砜(DMS0)10 μl的CCD组(C组)和非CCD处理、并给予鞘内注射DMSO 10 μl的假手术组(S组).三组均于CCD术前、术后第7天(给药前)及给药后2、24、72 h榆测机械痛缩足阈值(PWMT)和热痛缩足潜伏期(PWTL).CCD术前及给药后72 h用免疫组化技术检测脊髓背角N-甲基-D天冬门氨酸(NMDA)受体2A亚基(NR2A)的表达水平.结果 R组和C组给药前PWMT均较术前显著降低[(3.64±0.40)g vs.(14.38±1.53)g,(3.50±0.77)g vs(13.25±2.21)g],也明显低于S组的(11.31±1.13)g(P<0.05).R组和C组给药前PWTL均较术前显著缩短[(9.28±1.18)s vs(18.34±1.23)s,(8.91±1.08)s vs.(18.59±1.92)s],也短于S组的(18.45±1.44)s(P<0.05).R组PWMT在给药后24 h较给药前和C组显著增加[(7.32±0.69)g vs.(3.64±0.40)g,(3.86±1.14)g](P<0.05),而给药后2 h PWTL,较给药前和C组显著延长[(15.464±1.51)s vs.(9.28±1.18)s,(9.91±1.07)s(P<0.05).给药后72 h,R组脊髓背角NR2A受体表达水平明显低于C组[(0.21±0.02)vs.(0.26±0.01)](P<0.05).结论 鞘内注射Roseovitine能有效改善CCD大鼠痛行为学反应;其作用可能与抑制脊髓背角NR2A受体表达有关.     

神经病理性疼痛大鼠鞘内注射SB203580的镇痛作用

目的 观察神经病理性疼痛大鼠鞘内注射p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）抑制剂SB203580的镇痛作用，探讨p38MAPK信号转导通路在慢性神经病理性疼痛中的作用。方法雄性SD大鼠，体重220～250g，建立坐骨神经结扎性损伤（CCI）疼痛模型，第一部分40只CCI大鼠，随机分为5组，对照组、SB0．1μg组、SB0．5μg组、SB2．5μg组和SB5μg组，（n=8），CCI后7d，鞘内注射2％二甲基亚砜或不同剂量的SB203580（0．1、0．5、2．5、5μg）10μl，在给药前和给药后0．5、3、6、12、24h用von Frey丝测定大鼠术侧后爪机械缩足反射阈值（MWT）；另外36只大鼠，随机分为6组（n=6）：Sham组、CCI组、DMSO组、SB0．1、0．5、5μg组，CCI后7d鞘内注射相应剂量SB203580 10μl，给药后6h取L4.5脊髓，用免疫组织化学方法检测脊髓背角磷酸化环磷酸腺苷反应元件结合蛋白（pCREB）的表达。结果CCI后大鼠产生了机械痛敏。鞘内注射SB203580剂量依赖性地提高了MWT。CCI后脊髓背角pCREB阳性神经元增加，鞘内注射SB0．5、5μg抑制了CCI引起的脊髓背角pCREB表达增加（P〈0．01）。结论鞘内注射SB203580能减轻CCI引起的痛敏，抑制脊髓背角CREB的磷酸化，p38MAPK信号通路参与慢性神经病理性疼痛。     

大鼠切口痛模型中鞘内注射不同剂量KN93对瑞芬太尼诱发的痛觉过敏的影响

目的 观察不同剂量KN93对瑞芬太尼痛觉过敏大鼠痛行为的影响. 方法 采用完全随机分组方法,将36只雄性SD大鼠分为6组(每组6只):①空白对照组;②切口组;③瑞芬太尼组;④KN93 25 μg组;⑤KN93 50 μg组;⑥KN93 100 μg组.除空白对照组外,其余各组均制作切口痛模型、瑞芬太尼组及KN93 3个剂量组,手术过程中皮下输注瑞芬太尼(40 μg/kg,1 mg溶于40 ml生理盐水中)30 min.各组大鼠分别于术前24h、术后2、6、24、48 h测定术侧机械缩足阈值(paw withdrawal mechanical threshold,PWMT)和热缩足潜伏期(paw withdrawal thermal latency,PWTL). 结果 与切口组比较,瑞芬太尼组术后出现痛觉过敏表现PWMT (20.9±2.6,19.6±1.8,21.9±2.0,22.3±1.9)及PWTL[(8.5±1.5)s,(8.6±1.5)s,(8.5±2.0)s,(9.1±1.5)s],P＜0.05.鞘内注射KN93 25 μg对痛觉过敏大鼠痛行为无改善作用,鞘内注射KN93 50、100 μg能剂量依赖性改善瑞芬太尼所致痛觉过敏大鼠痛行为,P＜0.05. 结论 瑞芬太尼诱发切口痛大鼠痛觉过敏;KN93剂量依赖性的改善瑞芬太尼诱发的痛觉过敏.     

鞘内注射细胞周期素依赖性激酶-5抑制剂Roscovitine对慢性背根节压迫大鼠痛行为学的影响

目的 探讨鞘内注射细胞周期素依赖性激酶-5(Cdk5)抑制剂Roscovitine对慢性背根节压迫(CCD)大鼠痛行为学的影响.方法 雄性SD大鼠24只随机分为4组,每组6只:假手术组+50%二甲基亚砜(S组);CCD+50%二甲基哑砜(C组):CCD+Roscovitine 50μg(R组);CCD0组(C0组)C0组不注入任何药物,只作为对照.各组大鼠在CCD或假手术后第7天分别鞘内注射容积为10μl的50%DMSO或Roscovitine 50μg,分别观察给药后的1、4、8 h大鼠机械缩爪阂值(paw withdrawal mechani-cal threshold,PWMT)和热缩爪潜伏期(paw withdrawal thermal latency,PWTL).结果 与基础值相比,除S组外,各组大鼠从术后开始PWMT和PWTL均明显降低(P＜0.05),R组给药后与C组相比PWMT在各时间点无明显改变,PWTL相比明显增加,且保持在较高水平(P＜0.05).结论 脊髓背角Cdk5参与神经病理性疼痛的信号转导过程.     

蛛网膜下腔注射Ro25-6981对切口痛大鼠的镇痛作用研究

目的 研究蛛网膜下腔注射Ro 25-6981,一种新型选择性的N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体NR2B亚基拮抗剂,对切口痛大鼠的镇痛作用.方法 雄性SD大鼠60只,将大鼠采用随机数字表法分为4组,每组15只:对照组(C组)、切口痛组(Ⅰ组)、鞘内注射Ro 25-6981 50μg/25μl组(R1组)、鞘内注射Ro 25-6981 200μg/25μl组(R2组),每组15只.C组和Ⅰ组均鞘内注射5%DMSO溶剂25 μl.Ⅰ组、R1组和R2组在鞘内注射后行右后足切口痛模型制备.所有动物接受鞘内注射和手术均在吸入七氟醚麻醉下进行.术前24 h、术后2、6、24h检测大鼠痛行为学指标,包括50%机械缩足阈值(paw withdrawal mechanical threshold,PWMT)和热缩足反射潜伏期(paw withdrawal thermal latency,PWTL),同时测定鞘内给药前后大鼠的运动功能.结果 与C组和术前基础值比较,Ⅰ组术后各时间点50%PWMT(7.0±0.9)、(6.7±0.7)、(6.4±1.2)g和PWTL(10.3±1.4)、(10.1±1.0)、(10.0±1.0)s均降低(P＜0.05);与Ⅰ组比较,R1组各时间点50%PWMT和PWTL差异无统计学意义(P＞0.05);R2组术后2 h 50%PWMT(9.0±0.8)g和PWTL(13.7±1.0)s与Ⅰ组相比均升高(P＜0.05),6、24 h痛行为学差异无统计学意义;鞘内给药前后大鼠运动功能差异无统计学意义(P＞0.05).结论 鞘内注射选择性的Np2B拮抗剂Ro 25-6981 200.0μg可以对切口痛大鼠产生明显的镇痛作用而不影响运动功能.

Abstract：

Objective To investigate the analgesic effects of intrathecal administration of Ro 25-6981, a selective antagonist of the NR2B subunit of NMDA receptors (NR2B), in a rat model of incision pain. Methods Sixty SD rats were randomly divided into 4 groups: control group (C); incisional pain group (Ⅰ); intrathecal group of Ro 25-6981 at the dose of 50 μg/25 μl(R1);intrathecal group of Ro 25-6981 at the dose of 200 μg/25 μl(R2). Intrathecal injection of 5% DMSO solvent at the dose of 25 μl was administrated in group C and Ⅰ. Rat models of incisional pain on the right hind were prepared after intrathecal injection in group Ⅰ,R1 and R2. All rats were anesthetized with sevoflurane. The 50% paw withdrawal mechanical threshold (PWMT) and paw withdrawal thermal latency (PWTL) were tested to evaluate the behavioral changes and measured at 24 h before incision and at 2,6,24 h after incision. And the locomotor functions were also examined at the same time points. Results Compared with group C and baseline,the decreases of 50% PWMT (7.0±0.9), (6.7±0.7), (6.4±1.2) g and PWTL (10.3±1.4), ( 10. 1±1.0), (10.0±1.0) s were observed at each time point after incision in group Ⅰ (P＜0.05); Compared with group Ⅰ, significant changes of 50% PWMT and PWTL were not observed at each time point in group R1 (P＞0.05); Compared with group Ⅰ, increases of both 50% PWMT (9.0±0.8) g and PWTL (13.7±1.0) s were observed at 2 h after incision in group R2 (P＜0.05), while no significant changes of 50% PWMT and PWTL were observed at 6 h and 24 h after incision in group R2. No significant changes in locomotor functions were observed before and after intrathecal administration in rats (P＞0.05). Conclusion Intrathecal injection of Ro 25-6981 at the dose of 200.0 μg, the selective antagonist of the NR2B, exerts significant analgesic effects on incision pain in rats without affecting of locomotor functions.     

鞘内注射不同剂量硫酸镁对小鼠骨癌痛的影响

目的 评价鞘内注射注射不同剂量硫酸镁对小鼠骨癌痛的影响.方法 雄性C3H/HeJ小鼠288只,8～10周,体重18 ～22 g,采用随机数字表法,将其随机分为6组(n=48):对照组(C组)、假手术组(S组)、骨癌痛+5 μl人工脑脊液组(BCP组)、骨癌痛+14.4 μg MgSO4组(M1组)、骨癌痛+43.2 μg MgSO4组(M2组)和骨癌痛+86.4 μg MgSO4组(M3组).S组右侧股骨骨髓腔内仅注入20μlα-MEM;BCP组、M1组、M2组和M3组注入含有2× 105个肿瘤细胞的20 μl α-MEM制备小鼠骨癌痛模型,各组在接种肿瘤细胞后第14天分别定时鞘内注射人工脑脊液5μl、MgSO4 14.4 g/5μl、43.2 μg/5μl、86.4 μg/5μl.分别于给药前0.5 h(T0)、给药后0.5、2、4、8 h(T1-4)时测定机械缩足反射阈值(PWMT)和热缩足反射潜伏期(PWTL),于T0-4时各组随机取8只小鼠处死取脊髓腰膨大,采用免疫组化法检测脊髓含2B亚基的NMDA受体(NR2B)的表达.结果 与C组和S组比较,BCP组、M1组、M2组和M3组T0-4时PWMT和PWTL降低,脊髓NR2B表达上调(P＜0.05);与BCP组比较,M2组和M3组T1-3时PWMT和PWTL升高,脊髓NR2B表达下调(P＜0.05);与M2组比较,M3组T1 -3时PWMT和PWTL升高,脊髓NR2B表达下调(P＜0.05).结论 鞘内注射硫酸镁可减轻小鼠骨癌痛,其效应呈剂量依赖性.     

鞘内注射JNK特异性抑制剂SP600125对CCI大鼠痛行为的影响

目的 观察鞘内注射c-Jun氨基末端蛋白激酶(c-Jun N-terminal protein kinase,JNK)特异性抑制剂SP600125对慢性压榨性损伤(chronic constriction injury,CCI)大鼠痛行为的影响.方法 雄性sD大鼠40只,随机分为5组(n=8). SP5组:CCI模型,鞘内注射SP600125 5μg;SP25组:CCI模型,鞘内注射SP600125 25 μg;SP50组:CCI模型,鞘内注射SP600125 50μg;DMSO组:CCI模型,鞘内注射2%二甲亚砜溶剂10 μl;Naive组:正常大鼠,鞘内注射SP600125 50μg.SP600125均溶于2%二甲亚砜10μl.CCI模型制作7 d后行鞘内注射,并测定大鼠机械缩足反射阈值(mechanical withdrawal threshold,MWT)及热缩足反射潜伏期(thermal withdrawal latency,TWL).结果 鞘内注射SP600125对正常大鼠的痛行为无影响.鞘内注射一定剂量SP600125能减轻CCI大鼠的机械痛敏及热痛敏.结论 鞘内注射一定剂量的SP600125能够减轻CCI大鼠的机械痛敏及热痛敏.     

脊髓背角ERK激活在大鼠神经病理性疼痛中的作用

目的探讨脊髓背角细胞外信号调节激酶(ERK)的激活在大鼠神经病理性疼痛诱发和维持中的作用。方法雄性SD大鼠,体重200～300 g。本研究分多剂量给药和单剂量给药两部分,均进行行为学实验和脊髓背角磷酸化ERK(p-ERK)表达检测。实验一48只鞘内置管大鼠随机分6组(n=8):假手术 生理盐水(NS)组(S组)、慢性压迫性损伤(CCI) NS组(C组)、CCI 5%二甲亚砜(DMSO)组(D组)、CCI 错义寡核苷酸10μg组(M组)、CCI U0126 5μg组(U组)、CCI 反义寡核苷酸组10μg组(A组)。鞘内给药后记录大鼠机械缩足阈值(MWT)和热缩足潜伏期(TWL)。实验二48只鞘内置管大鼠随机分3组(n=16),自CCI术前1 d至术后3 d分别注射NS(G1组)、U0126 5μg(G2组)或ERK反义寡核苷酸10μg(G3组),假手术大鼠4只为阴性对照组,检测脊髓p-ERK的表达。实验三CCI术后5 d大鼠40只随机分5组(n=8):CCI 5%DMSO组(D’组)、CCI U0126 0.2μg组(U0.2组)、CCI U0126 0.5μg组(U0.5组)、CCI U0126μg组(U1组)、CCI U0126 5μg组(U5组),假手术大鼠8只注射5%DMSO(S组)为阴性对照组,记录MWT和TWL;实验四另选CCI术后5 d大鼠20只为实验组,鞘内注射U0126 5μg,假手术5 d大鼠(阴性对照组)与CCI术后5 d大鼠(阳性对照组)各4只,鞘内注射5%DMSO 0.5 h后取材,检测脊髓p-ERK的表达。结果实验一与C组比较,U组与A组MWT和TWL升高,作用持续至术后13 d;实验二与G1组比较,G2组与G3组术后3、5 d胞浆p-ERK2表达以及术后3、5、10 d胞核p-ERK1与p-ERK2表达降低;实验三与D组比较,U0.5组给药后MWT和TWL升高,其作用分别持续至鞘内给药后6 h和2 h;与U0.2组比较,MWT:U0.5组鞘内给药后0.5、2、6 h、U1组给药后0.5、2、6、12 h、U5组鞘内给药后0.5、2、6、12、24 h升高,TWL:U1组鞘内给药后12 h、U5组鞘内给药后0.5、6、12、24 h升高;与U0.5组比较,U5组MWT鞘内给药后0.5、12、24 h和TWL鞘内给药后0.5、12 h升高;实验四与阴性对照组比较,实验组鞘内注射U0126 5μg后0.5 h胞浆与胞核p-ERK1和p-ERK2表达下降,与实验组0.5 h比较,实验组胞浆p-ERK1于6、12、24 h升高,胞核p-ERK1于2、6、12、24 h升高,胞浆与胞核p-ERK2于6、12、24 h均升高(P<0.05)。结论脊髓背角ERK激活参与了大鼠神经病理性疼痛的诱发和维持过程。     

大麻素受体2激动剂JWH-015对骨癌痛大鼠脊髓背角磷酸化环磷酸腺苷反应元件结合蛋白的影响

目的探讨腹腔注射大麻素受体（cannabinoid receptor,CB）2激动剂对骨癌痛大鼠脊髓背角磷酸化环磷酸腺苷反应元件结合蛋白（phosphorylated cyclic AMP respons eclement binding protein,pCREB）表达的影响。方法运用随机数字表法将63只雌性SD大鼠分为3组：肿瘤给药组（J组,15只）、肿瘤对照组（D组,24只）和假手术对照组（S组,24只）。J组、D组的大鼠左侧胫骨上端骨髓腔被注入5μl Walker256大鼠乳腺癌细胞制备骨癌痛模型;S组则注入等量的生理盐水。在造模后第10天,J组腹腔注射JWH-015（100μg/500μ1）,D组、s组注射等量JWH-015溶剂二甲基亚砜（dimethylsulfoxide,DMSO）。每组大鼠于造模前1d,造模后4、7、10d,腹腔注射后2、6、24、48、72h,检测手术侧机械刺激缩足阈值（paw withdrawal mechanical threshold,pwMT）和行走痛行为学评分。D组和S组大鼠于造模后4、7d,J组、D组和S组大鼠于造模后10d及腹腔注射后6、24、72h,取脊髓腰膨大进行免疫印迹分析。结果与S组比较,J组和D组大鼠造模后7d PWMT开始降低（P〈0.05）,造模后10d行走痛行为学评分增加（P〈0.05）,脊髓背角pCREB表达水平于7、10d上调（P〈0.05）.与D组比较,腹腔注射JWH-015后24h,J组PWMT（8.7±1.6）g显著上升（P〈0.05）,行走痛行为学评分（1.0±0.6）分和pCREB的表达（0.56±0.10）明显下降（P〈0.05）。结论腹腔注射JWH-015可能通过下调脊髓背角pCREB的表达改善骨癌痛大鼠的痛行为。     

CB2受体激动剂JWH015对大鼠神经病理性疼痛的治疗作用

目的 研究鞘内注射CB2受体激动剂JWH015对背根节慢性压迫(chronic compression of the dorsal root ganglia,CCD)大鼠痛阈和脊髓背角磷酸化NMDA受体NR2B亚基表达的影响,探讨CB2受体激动剂的镇痛作用及其可能机制.方法 鞘内置管成功后的雄性SD大鼠84只,随机分为3组:假手术+50%二甲基亚砜(dimethyl sulphoxide,DMSO)组(Sham组)、CCD+50%DMSO组(Vehicle组)、CCD+JWH015组(JWH015组).Sham组和Vehicle组各有6只大鼠在假手术或CCD后第7天(鞘内未给药)取脊髓标本,作为免疫组织化学法检测脊髓背角Tyr-1472磷酸化NR2B亚基表达的基础值.其余大鼠在假手术或CCD后第7天分别鞘内注射50%DMS010μl或JWH015 10μg.假手术或CCD之前、鞘内给药之前、之后1、2、4、8、24、72 h分别记录机械刺激缩足反射阈值(paw withdrawal mechanical threshold,PWMT)和热刺激缩足反射潜伏期(paw withdrawalthermal latency,PWTL)(n=6),鞘内给药之后4、8、24、72 h分别取脊髓标本(n=6),应用免疫组织化学法检测脊髓背角Tyr-1472磷酸化NR2B亚基的表达情况.结果 鞘内给药前Vehicle组和JWH015组大鼠的PWMT和PWTL均较基础值明显下降(P<0.01);与Vehicle组相比,JWH015组在给药后1、2、4 h PWMT和PWTL显著升高(P<0.01),但在给药后8、24、72 h差异无统计学意义(P>0.05);Sham组大鼠脊髓背角Tyr-1472磷酸化NR2B业基均呈低水平表达,但在CCD后第7天表达水平明显增强;鞘内注射50%DMSO后在各时间点均未能减弱CCD大鼠脊髓背角Tyr-1472磷酸化NR2B亚基的表达;鞘内注射JWH015在给药后4、8 h能明显减弱CCD大鼠脊髓背角Tyr-1472磷酸化NR2B亚基的表达,但在给药后24、72 h Tyr-1472磷酸化NR2B亚基的表达再次增强.结论 CB2受体激动剂JWH015对大鼠的神经病理性疼痛有治疗作用,该作用可能与抑制脊髓背角Tyr-1472磷酸化NR2B亚基的表达有关.     

脊髓CC趋化因子配体2在大鼠吗啡镇痛耐受中的作用

目的 观察脊髓CC趋化因子配体2[chemokine （C-C motif） ligand 2,CCL2）]蛋白在大鼠吗啡镇痛耐受过程中的作用.方法 成功鞘内置管Sprague-Dawley （SD）大鼠按随机数字表法分成10组（每组6只）：IgG＋吗啡（IgG＋MOR）组、CCL2中和抗体＋吗啡（CCL2 neutralizine antibody＋MOR）组、IgG＋生理盐水（IgG＋NS）组、CCL2中和抗体＋生理盐水（CCL2neutralizine antibody＋NS）组、CCL2中和抗体4＋吗啡（CCL2 neutralizine antibody 4＋MOR）组、IgG4＋吗啡（IgG4＋MOR）组、IgG4＋生理盐水（IgG4＋NS）组、CCL2中和抗体8＋吗啡（CCL2 neutralizine antibody 8＋MOR）组、IgG8＋吗啡（IgG8＋MOR）组、IgG8＋生理盐水（IgG8＋NS）组.连续7d鞘内注射吗啡（15 μg）建立吗啡耐受的动物模型.采用50℃热水甩尾潜伏期法（tail flick latency,TFL）和机械反射阈值法（mechanical withdrawal threshold,MWT）观察CCL2在吗啡的镇痛耐受中作用;应用酶联免疫法（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）检测吗啡耐受过程中脊髓背角CCL2免疫活性表达变化.结果 在吗啡注射3、5、7 d时,与IgG＋MOR组大鼠最大镇痛效应百分率（percent of maximal possible potential effect,％MPE）[％MPETFL：3 d（55±6）％、5 d（27±4）％、7 d（17±3）％;％MPENWT：3 d（54±6）％、5 d（27±4）％、7 d（17±4）％]比较,CCL2 neutralizine antibody＋MOR组大鼠％MPE明显增加[（％MPETFL：3 d（65±6）％、5 d（47±4）％、7 d（42±4）％;％MPEMWT：3 d（65±5）、5 d（46±4）、7 d（41±4）（P＜0.01）],与IgG4＋MOR组[％MPETFL：5 d（27.3±3.6）％、7 d（17±3）％;％MPEMWT：5 d（27±4）％、7 d（17±3）％]比较,CCL2 neutralizine antibody 4＋MOR组大鼠％MPE明显增加[％MPETFL：5 d（46±4）％、7 d（43±4）％; ％MPEMWT：5 d（45±4）％、7 d（44±4）％ （P＜0.01）];在吗啡注射9、11 d时,与IgG8 ＋MOR组[％MPETFL：9 d（16±3）％、11 d（15±4）％;％MPEMWT：9 d（16±     

氯胺酮预防瑞芬太尼痛觉过敏的实验研究

目的 观察预先皮下注射氯胺酮对瑞芬太尼诱发切口痛模型大鼠痛觉过敏的影响.方法 雄性SD大鼠60只,将大鼠随机分为5组:对照组(C组)、切口痛组(Ⅰ组)、氯胺酮(K组)、瑞芬太尼组(R组)、氯胺酮+瑞芬太尼组(K+R组).Ⅰ组,K组,R组和K+R组行右后足跖肌切口;K组和K+R组术前单次皮下注射氯胺酮0.1 ml(10mg/kg);R组和K+R组切皮开始同时皮下泵注瑞芬太尼0.4 nl(0.04 mg/kg),泵注时间为30 min,所有动物手术和接受微量泵皮下输注均在吸入七氟醚麻醉下进行.于术前24 h、术后2、6、24、48 h检测痛行为学指标,包括机械缩足阈值(paw withdrawal mechanical threshold,PWMT)和热缩足反射潜伏期(paw withdrawal thermal latency,PWTL).结果 与C组和基础值比较,Ⅰ组术后各时间点PWMT和PWTL均降低(P＜0.05);与Ⅰ组相比,R组术后2 h PWMT(6.48±1.23)g和PWTL(11.13±1.95)s即开始降低,此水平持续至术后48h(P<0.05);K+R组术后各时间点PWMT(9.36±1.76,9.41±1.50,10.18±1.42,10.15±1.48)g和PWTL(15.66±2.42,16.24±2.55,15.13±3.07,15.66±2.44)s均高于R组(P＜0.05).结论 术前预先皮下注射氯胺酮可有效预防瑞芬太尼诱发的切口痛模型大鼠痛觉过敏.     

鞘内注射外源性神经生长因子对利多卡因致大鼠脊髓损伤的保护作用

目的 探讨鞘内注射外源性神经生长因子（nerve growth factor,NGF）对利多卡因致脊髓神经毒性损伤的保护作用.方法 选择鞘内置管成功的大鼠60只,按随机数字表法分为生理盐水对照组（S组）和NGF治疗组（N组）两个大组,每大组分为P0、P1、P8三个不同时点的亚组,每组10只.S组P0亚组：仅行假手术,S组P1亚组,鞘内注射20％盐酸利多卡因20 μl;S组P8亚组,鞘内注射20％盐酸利多卡因20μl,连续7d鞘内注射NS,每次注射0.9％NS 20 μl;N组P0亚组：仅行假手术;N组P1亚组：鞘内注射20％盐酸利多卡因20 μl;N组P8亚组：鞘内注射20％盐酸利多卡因20μl,连续7d鞘内注射NGF,每次注射NGF 10 μg/20μl..连续评测两组中P8亚组大鼠的热痛阈值（tail-flick latency,TFL）及运动功能评分（motor function,Mr）,观察比较两组大鼠各亚组光镜及透射电镜下脊髓的病理改变.结果 与S组P8亚组比较,在5d～8d4个时点N组P8亚组的TFL最大镇痛效应百分率（percent of maximal possible potential effect,％MPE）（％MPETFL）显著降低[（62.5±20.3）％vs（32.6±23.5）％,（51.9±23.7）％vs（25.8±26.3）％,（43.8±22.5）％vs（20.5±24.3）％,（38.4±25.7）％vs（18.5±23.7）％]（P＜0.05）;且MF评分显著降低[3vs0,3vs0,3 vs0,3vs0]（P＜0.05）.光镜病理改变：S组P8亚组脊髓后角白质广泛水肿、脊膜细胞大量增生、广泛空泡变性;N组P8亚组见后角白质神经纤维水肿,脊膜细胞少量增生,空泡变性不明显.透射电镜病理改变：S组P8亚组见有髓神经纤维的髓鞘板层结构广泛肿胀疏松,无髓神经纤维模糊不清;N组P8亚组见有髓神经纤维的髓鞘板层结构局部疏松,可见肿胀的无髓神经纤维.结论 鞘内注射NGF能够减轻利多卡因引起的脊髓毒性损伤,改善脊髓神经细胞的超微结构.     

活体荧光显微镜技术在观察肝硬化门静脉高压大鼠肝脏微循环结构变化中的应用

目的探讨活体荧光显微镜技术观察肝硬化门静脉高压模型大鼠的肝脏微循环结构变化的应用效果。方法取雄性SD大鼠70只,将其中40只SD大鼠采用随机数字表法分为假手术组、胆总管结扎（BDL）模型2周组、BDL模型4周组及BDL模型6周组,每组10只,应用活体荧光显微镜技术观察大鼠肝脏微循环结构变化。将余下的30只sD大鼠于BDL模型建立4周后采用随机数字表法分为3组,动态观察给予生理盐水（生理盐水组）、内皮素-1（ET-1,ET-1组）、NO供体亚硝基半胱氨酸（GSNO,GSNO组）后BDL模型大鼠肝脏微循环的急性改变。组间比较采用单因素方差分析,组内比较采用配对样本t检验。结果BDL模型大鼠共死亡9只,存活率为85．0％（51／60）。假手术组大鼠全部存活。随着BDL造模时间延长,肝脏肝窦直径逐渐变小,BDL模型2周组、BDL模型4周组及BDL模型6周组肝窦直径分别为（13．6±1．0）μm、（8．8±0．7）μm和（8．0±0．5）μm,与假手术组的（17．4±1．0）μm比较,差异有统计学意义（t=5．86,18．24,15．57,P〈0．05）。随着BDL造模时间延长,肝窦开放数量逐渐减少,BDL模型2周组、BDL模型4周组及BDL模型6周组肝窦开放数量分别为（6．8±0．8）个／200μm、（4．3±1．8）个／200μm、（4．0±1．2）个／200μm,与假手术组的（8．8±0．5）／200μm比较,差异有统计学意义（t=3．25,2．77,2．12,P〈0．05）。注射生理盐水15min后,生理盐水组肝窦直径为（7．2±1．2）μm,与注射前的（6．9±0．5）Dm比较,差异无统计学意义（t=0．89,P〉0．05）;肝窦开放数量为（6．8±1．4）＋／200μm,与注射前的（6．6±0．4）个／200μm比较,差异无统计学意义（t=1．12,P〉0．05）。注射ET-115min后,ET-1组肝窦直径为（5．4±0．5）μm,与注射前的（7．9±0．6）μm比较,差异有统计学意义（t=7．39,P〈0．05）;肝窦开放数量为（5．4±1．8）＋／200μm,与注射前的（5．8±1．2）个／200μm比较,差异无统计学意义（t=0．84,P〉0．05）。注射GSNO15rain后,GSNO组肝窦直径为（11．4±1．3）μm,与注射前的（7．5±1．7）μm比较,差异有统计学意义（t=5．95,P〈0．05）;肝窦开放数量为（6．4±1．6）＋／200μm,与注射前的（5．6±0．8）个／200μm比较,差异无统计学意义（t=0．54,P〉0．05）。结论活体荧光显微镜技术可以通过观察肝脏微循环结构变化在一定程度上评价肝纤维化的程度,并且能够通过动态捕捉肝窦直径和肝窦开放数量在药物作用影响下发生的改变。     

鞘内注射Akt抑制剂Ⅳ对注射式根性神经痛大鼠痛行为学的影响

目的 探讨鞘内给予Akt抑制剂Ⅳ对注射式根性神经痛大鼠痛行为学的影响.方法 选择成功鞘内置管后无运动障碍的雄性SD大鼠18只,用分段随机分组法分为假手术组(S组)、溶剂对照组(C组)和Akt抑制剂组(A组),每组6只.C组和A组均采用注射surgiflo制备注射式根性神经痛模型,A组于造模前30 min给予Akt抑制剂...