广西西部地区壮族难治性肾病综合征患儿肾素-血管紧张素系统基因多态性研究

目的 研究肾素-血管紧张素(RAS)系统3个关键基因血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)基因A1166C多态性、血管紧张素Ⅰ转化酶(ACE)基因插入/缺失(I/D)多态性和血管紧张素原(AGT)基因M235T多态性在广西西部地区壮族原发性肾病综合征(PNS)患儿激素敏感组和难治组中的分布,探讨RAS基因多态性在儿童难治性肾病综合征(NS)中的作用.方法 选取原籍广西西部地区的壮族PNS患儿62例(肾病组),根据其对激素的治疗反应分为显效组42例(激素敏感型NS组)和难治组20例(难治性NS组),并选取50例健康儿童作为健康对照组.采用直接PCR和PCR-限制性片段长度多态性技术检测RAS ACE基因I/D多态性、AT1R基因A1166C多态性和AGT基因M235T多态性在各组中的分布,并进行统计学比较.结果 肾病组ACE基因I/D多态性与健康对照组比较差异有统计学意义,D等位基因在肾病组中占显著优势(P＜0.05),AT1R基因A1166C、AGT基因M235T多态性在2组中分布的差异无统计学意义.难治性NS组与激素敏感型NS组比较,AT1R A1166C、ACE 1/D和AGT M235T基因型与等位基因分布频率差异均无统计学意义.结论 ACE I/D多态性的D等位基因是广西西部地区壮族PNS患儿易感因素之一,未能发现RAS基因多态性在广西西部地区壮族儿童难治性NS中的作用.     

ACE2基因多态性与儿童原发性肾病综合征的相关性研究

目的血管紧张素转换酶2(ACE2)基因多态性与高血压病、糖尿病肾病等多种疾病相关,是否参与儿童原发性肾病综合征(PNS)的发病尚不明确,该研究探讨广东汉族儿童ACE2基因A9570G多态性与PNS的相关性。方法选取广东汉族PNS患儿66例为肾病组,健康体检者60例为对照组,采用聚合酶链反应-限制性核酸内切酶片段长度多态性技术分析肾病组与对照组的ACE2基因A9570G基因型分布和等位基因频率。结果在女性和男性,两组间等位基因频率及基因型分布差异均无统计学意义(P0.05)。肾病组按糖皮质激素治疗反应分为激素敏感组和激素耐药组,亚组分析发现,在女性,激素敏感组GG基因型频率低于激素耐药组(17%vs 45%,P0.05),激素敏感组G等位基因频率亦低于激素耐药组(31%vs 61%,P0.05);在男性,激素敏感组G基因型/G等位基因频率低于激素耐药组(36%vs 64%,P0.05)。结论 ACE2基因A9570G多态性与儿童PNS的发生无明确关联,但可能与PNS患儿对糖皮质激素治疗的反应有关,G等位基因可能是儿童PNS激素耐药的遗传易感因素。     

儿童原发性肾病综合征血管紧张素Ⅰ转换酶基因多态性研究

目的　探讨血管紧张素I转换酶 (ACE)基因多态性在儿童原发性肾病综合征 (PNS)中的作用。方法　PNS76例 ,施行了肾穿刺活检术 4 9例 ,对照组为健康儿童 5 0例 ,检测ACE基因和血清ACE水平。结果　ACE基因多态性在PNS单纯型和肾炎型组、频复发组和非频复发组、肾上腺皮质激素 (激素 )效应组与对照组一样 ,以插入型 (II基因型 )分布频率高 ;耐药组和肾活检病例尤其局灶性节段性肾小球硬化 (FSGS)明显显示缺失型 (DD基因型 )和D等位基因占优势 ,临床耐药的肾活检病例也以DD型和D等位基因明显占优势。PNS和对照组的血ACE水平由高至低排列的基因型依次是DD型、ID型和II型 ;PNS治疗前ACE(85 6 6 7± 17 90 7)U/L ,与对照组 (6 0 13± 2 1 4 1)U/L比较 ,t =- 2 5 96 ,P <0 0 5 ,差异有显著性 ;激素治疗 1周血ACE(4 5 375±18 35 3)U/L ,治疗 4周血ACE(2 8 6 6 7± 7 6 33)U/L ,治疗前后比较 χ2 =12 ,P <0 0 5 ,差异有显著性。结论　D等位基因影响了PNS治疗的反应性 ;D等位基因的血ACE水平高于I等位基因 ,ACE基因在一定程度上调控了血ACE水平 ;激素可降低血ACE水平。     

小儿泌尿系统疾病诊治进展

1 原发性肾小球疾病 1.1 肾病综合征(NS)NS病因、发病机制及激素耐药等相关问题继续受到关注.北京市儿童医院运用PCR-RFLP技术对照分析了148例北方汉族原发性NS(PNS)儿童血管紧张素原(AGT)基因(M335T)和血管紧张素转化酶(ACE)基因(IL/D)多态性的结果显示:     

血管紧张素转换酶基因多态性与儿童原发性肾病综合征关联性的系统评价和Meta分析

目的 系统评价血管紧张素转换酶（ACE）基因多态性与儿童原发性肾病综合征（PNS）的关联。方法 计算机检索PubMed、EMBASE、Wiley Online Library、Cochrane图书馆、Science Citation Index、Google Scholar、中国期刊全文数据库、万方数据库、中国生物医学文献数据库和维普数据库,检索时间为2000年1月1日至2014年5月31日,纳入ACE基因多态性与儿童PNS关联的病例对照研究。提取PNS组和对照组基因型和等位基因频率,计算各纳入文献对照组Hardy Weinberg平衡（HWE）,并进行文献偏倚评价。采用Stata 12.0软件,对PNS组和对照组ACE基因DD、DI、II基因型和D、I等位基因频率的差异行Meta分析。结果 14篇文献进入Meta分析,共纳入2 849例研究对象,其中PNS组1 264例,对照组1 585例。14篇文献偏倚风险较大。①D等位基因频率PNS组高于对照组（OR=1277,95%CI 1080~1509,P=0004）;I等位基因频率PNS组低于对照组（OR=0811,95%CI 0738~0892,P＜0001）。②DD基因型频率PNS组高于对照组（OR=1505,95%CI 1136~1994,P=0004）;II基因型频率PNS组低于对照组（OR=0746,95%CI 0634~0877,P＜0001）;DI基因型频率PNS组与对照组差异无统计学意义（OR=0932,95%CI 0805~1079,P=0347）。③6篇文献对照组不符合HWE,剔除后8篇文献行敏感性分析,结果无明显变化;④DD基因型和D等位基因的文献间具有异质性,对照人群的来源、种族可解释部分的异质性,HWE与否不是异质性的原因。结论 ACE基因DD基因型和D等位基因与儿童PNS的关联性不确定,如果有关联,强度可能较低。     

蒙、汉族儿童原发性肾病综合征TIM-3基因及IFN-γ检测的意义

目的研究TIM-3基因多态性及γ干扰素(IFN-γ)水平与儿童原发性肾病综合征(PNS)发病的相关性。方法采用病例对照研究,选取汉族PNS患儿21例,蒙古族(祖籍三代以上均为蒙古族)、汉族(祖籍三代以上均为汉族)健康体检各20例为对照组;采用PCR–限制性片段多态性分析方法,分析检测PNS患儿和对照组的T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(TIM-3)基因外显子-574 A/C的单核苷酸多态性,比较基因型及等位基因频率;采用酶联免疫吸附法检测血IFN-γ水平,并分析其变化。结果汉族和蒙古族正常对照组之间TIM-3基因外显子-574A/C位点基因型(AA、AC、CC)分布差异无统计学意义(P=0.741);两组间等位基因频率差异也无统计学意义(P=0.655)。将汉族和蒙古族正常对照组合并与汉族PNS患儿进行比较,汉族PNS患儿-574A/C位点AA、AC和CC基因型频率分别为9.52%、28.57%和61.90%,与40例正常对照组儿童的基因型分布差异有统计学意义(P=0.017);汉族PNS患儿的C等位基因频率为76.2%,高于正常对照组(50.0%),差异有统计学意义(P=0.005),与A等位基因个体比较,C等位基因携带者儿童发生PNS的风险增加3.20倍(95%CI:1.39~7.37)。汉族PNS、汉族以及蒙古族正常对照组之间血清IFN-γ水平的差异无统计学意义(P0.05)。结论 TIM-3基因外显子-574A/C的单核苷酸多态性可能与儿童PNS的发病相关;IFN-γ与儿童原发性肾病综合征的发病无明显相关性。     

血管紧张素转换酶基因多态性与儿童原发性高血压的关系

目的：探讨血管紧张素转换酶(ACE)基因第16内含子中287 bp的插入/缺失（I/D）多态性与儿童原发性高血压的关系。方法：应用聚合酶链式反应（PCR）技术检测105例原发性高血压儿童（高血压组）及105例正常健康儿童（对照组）的ACE基因第16内含子中287 bp的I/D多态性。结果：高血压组及对照组儿童的ACE基因第16内含子均有I/D多态性,分为II、ID、DD 3种形态。高血压组DD型、ID型、II型基因型频率分别为30.5%、47.6%、21.9%,对照组DD型、ID型、II型基因型频率分别为14.3%、46.7%、39.1%,两组比较,DD型、II型基因型频率差异有统计学意义（P＜0.01）。高血压组D等位基因的基因频率明显高于对照组（54.3% vs 37.6%,P<0.01）;而I等位基因的基因频率明显低于对照组（45.7% vs 62.4%,P<0.01）。结论：ACE基因存在II型、ID型、DD型多态性。儿童原发性高血压的发生可能与ACE基因中第16内含子287 bp的缺失相关。     

肥胖儿童脂代谢及血压与ACE基因多态性的临床研究

目的 探讨血管紧张素转换酶(ACE)基因第16内含子的插入/缺失(I/D)多态性和D等位基因频率在健康及单纯型肥胖儿童中的分布及ACE基因多态性对肥胖儿童的血压、脂质代谢及体脂分布的影响.方法 常规酚一氯仿法抽提基因组DNA,用聚合酶链式反应一限制性片断长度多态性(PCR-RFLP)琼脂糖凝胶电泳法分析105例单纯性肥胖儿童及98例健康儿童ACE基因的基因型及等位基因频率并测定两组儿童血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)浓度,并测定两组儿童血压、身高和体质量,按公式计算其体质指数(BMI).结果 检出3种ACE基因第16内含子的基因型D/D、D/I、I/I.与健康儿童相比,单纯性肥胖儿童具有较高的D/D基因型频率(27.5%)及D等位基因频率(43.75%).D/D型儿童与D/I型和I/I型儿童相比具有较高水平血TG、TC、LDL-C及收缩压、舒张压、BMI和较低水平的血HDL-C.结论 健康及单纯性肥胖儿童ACE基因存在多态性,且ACE基因多态性对健康儿童及肥胖儿童的血脂代谢、体脂分布及血压均有影响.     

哮喘与血管紧张素转换酶基因插入及缺失多态性关联的研究

对探讨血管紧张素转换酶（ACE）基因插入（I）及缺失（D）多态性与儿童哮喘易感性及病情程度的关联,应用聚合酶链反应（PCR）确定108例哮喘患儿及56例健康儿童的ACE基因型并结合临床病情程度及总IgE水平进行了分析,结果显示,哮喘组和正常对照组儿童ACE基因纯合子缺失型（DD）,插入型（II）,杂合子插入缺失型（ID）的构成比有显著差异,其中DD型在哮喘组的频率为38％,在对照组为16％,两组比较（DD型与II和ID型）有显著差异（P均＜0．05）,优势比（OR）分别为2．44和5,D等位基因频率亦明显高于对照组（P＜0．05）,携带DD基因型的哮喘患儿病情呈中,重度发作的比例和II,ID型比较明显高于轻型组（P＜0．05）,提示：ACE基因DD型与中国北方儿童哮喘的遗传易感性有关,并且与病情的严重程度有关。     

TIM-1基因多态性与原发性肾病综合征的关系

目的 研究TIM-1基因多态性与儿童原发性肾病综合征(PNS)的相关性.方法 采用病例对照研究,选取PNS患儿57例,应用PCR-限制性片段长度多态性分析、PCR-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析、基因测序技术检测PNS患儿和144例健康儿童(健康对照组)的TIM-1基因启动子区-1454G/A的SNP与外显子4 ins/del多态性,计算基因型和等位基因频率.结果 健康对照组TIM-1启动子区-1454位G/G、G/A和A/A基因型频率分别为0.608、0.328、0.064,而PNS组频率分别为0.772、0.228、0.000,其基因型频率与健康对照组比较差异有统计学意义(χ2=6.561,P=0.038),且PNS组患儿携带-1454G等位基因的频率增高(OR=2.295,95%CI:1.199～4.390,P=0.011);健康对照组TIM-1外显子4 del/del、del/ins和ins/ins基因型频率分别为0.611、0.340、0.049,而PNS组频率分别为0.579、0.368、0.053,其基因型频率与健康对照组比较差异无统计学意义(χ2=0.176,P=0.916).结论 TIM-1基因启动子-1454G/A的单核苷酸多态性可能与儿童PNS的易感性相关.     

Donor and recipient ACE I/D genotype are associated with loss of renal function in children following renal transplantation

Genetic polymorphisms of the RAS correlate with allograft function. We therefore analyzed common RAS polymorphisms in kidney donors and in children following RTx to determine the relationship between genotype and decline in GFR, blood pressure, and LVM. A total of 107 children who underwent RTx were included: 70 male, 37 female, mean age 8.8±4.9 yr, mean follow up 5.4 yr. The following RAS polymorphisms were studied in all 107 recipients, 48 donors, and 120 healthy controls: Renin (Renin Mbol 18G/A), ACE I/D; angiotensinogen (AGT M235T), and angiotensin II receptor type-1 (AT1R A1166C). Only patients homozygous for the ACE D allele had a significantly steeper decline in GFR compared with homozygous carriers of the ACE I allele (slope DD: -4.3±0.8 vs. II: -1.3±1.1 mL/min/1.73 m2 per yr; p=0.035). In four cases, a DD recipient received a kidney from a DD donor, and these patients showed a more pronounced decline in GFR (-5.2±0.5 mL/min/1.73 m2 per yr; p=0.002). MABP was not different before vs. after RTx and was independent of ACE I/D genotype. LVMI increased significantly in the majority of patients (36.6±13.9 g/m2.7 six months before RTx vs. 46.4±15.3 g/m2.7 12 months after RTx, p=0.015). However, this difference disappeared after stratification by ACE I/D genotype. The ACE DD genotype is a potential marker for identifying patients at high risk of poor allograft outcome.     

Angiotensin‐converting enzyme gene insertion/deletion polymorphism frequency in normotensive children with a positive family history of essential hypertension

Aim: To evaluate the possible relationship between blood pressure (BP) and angiotensin‐converting enzyme (ACE) gene insertion/deletion (I/D) polymorphism in normotensive children with a positive family history of essential hypertension (EHT). Material and Methods: Three hundred seventy‐six randomly selected normotensive schoolchildren (147 boys, 229 girls) between the ages of seven and 17 years were enrolled. Children were subdivided into a ‘first‐degree relative group’ and a ‘second‐degree relative group’ according to the presence of EHT in parents or grandparents, respectively. BP was measured twice from the right arm and the systolic BP, diastolic BP and mean BP were recorded. ACE gene I/D polymorphism was performed from all studied children and frequency od DD, ID and ID allele were analysed in each study group. Results: Allelic frequencies of the DD genotype of the ACE gene were higher in children with a positive history in the first‐ (36.2%) and second‐degree (38.3%) relatives for EHT than the controls (30.7%) (P < 0.05 for both). Children with a positive family history of EHT and a DD genotype, had significantly higher SBP, DBP and MBP levels (P < 0.05) than the children with ID or II genotypes. Conclusion: We found that the ACE gene DD genotype was common and that BP levels were higher in Turkish children with a positive family history of EHT and DD genotype. Because the presence of DD allele might be the one of the potential contributor of EHT pathogenesis, further studies needed in large cohort for long term follow‐up for EHT in children with DD allele.     

肿瘤坏死因子α和白细胞介素10 基因启动子区多态性与川崎病的相关性研究

目的探讨肿瘤坏死因子α(TNF-ɑ)和白细胞介素10(IL-10)基因启动子区多态性与中国汉族儿童川崎病的易感性和临床表型的关系.方法应用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性分析(PCR-RFLP)方法检测TNF-ɑ和IL-10基因启动子区4个多态性位点,对96例川崎病患儿及160例正常对照儿童进行相关性分析.结果 (1)中国汉族健康儿童TNF-ɑ基因-308(A/G)位点等位基因频率与日本人和美国白人正常人群相近;而IL-10基因-1082(G/A)、-819(C/T)、-592(A/C)3个位点等位基因频率与英国正常人群差异有显著性(P均<0.01);(2)TNF-ɑ基因-308位点等位基因频率在川崎病组和健康对照组间差异无显著性;IL-10 -1082、-819、-592的3个位点等位基因频率和单体型在两组之间比较差异亦无显著性;(3)临床表型分析发现,TNF-α-308 A基因型在静脉注射免疫球蛋白(IVIG)非敏感型川崎病患者中的发生频率高于TNF-α-308 G基因型,比较差异有显著性(67% vs 5%,χc2=90.48,P<0.01),前者发生静脉注射用IVIG非敏感型川崎病的相对危险度(RR)是后者的42.25倍(RR 95% CI=15.81～112.88,P<0.01).IL-10-1082A/-819T/-592A单体型在川崎病合并冠状动脉损伤患者中的发生频率高于Non-ATA单体型, 比较差异有显著性 (52%vs 20%,χ2=18.36, P<0.01), IL-10基因启动子区ATA单体型合并冠状动脉损伤的RR是Non-ATA单体型的4.26倍(RR 95% CI=2.20～8.25,P<0.01).结论 TNF-α、IL-10基因启动子区多态性可能是影响川崎病疗效和预后的重要因素.     

198例哮喘儿童遗传易感性研究

目的：分析4种哮喘相关基因位点在198例哮喘患儿中的单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphismr,SNP）分布特点,并探讨其与儿童哮喘遗传易感性及某些哮喘临床表型的关系。方法：采用聚合酶链反应产物电泳鉴定法及实时荧光定量核酸扩增技术检测4种哮喘相关基因位点SNP在198名哮喘患儿和110名健康对照者中的分布,并测定哮喘患儿的血清总IgE（TIgE）水平及血嗜酸性粒细胞比例（%EOS）,同时对4种哮喘相关基因位点不同基因型间的TIgE及%EOS分别进行比较分析。结果：血管紧张素转换酶（ACE）基因位点纯合子基因型（DD）频率在哮喘组明显高于健康对照组（χ2=30.667,P＜0.01）,且D型等位基因频率在哮喘组亦明显高于健康对照组（χ2=7.151,P<0.01）;各基因位点多态性分布与血清TIgE水平及%EOS均无相关性（均P＞0.05）。结论：ACE基因DD基因型与儿童哮喘的遗传易感性有关,可能是儿童哮喘的危险因素。     

血小板活化因子水解酶基因突变与原发性肾病综合征的相关性

目的研究血小板活化因子水解酶（PAF—AH）基因突变与不同类型原发性肾病综合征（PNS）的相关性。方法94例PNS患儿，依据对激素治疗的效应分为激素敏感型NS（SSNS）组37例,激素耐药型NS（SRNS）组26例，激素依赖型NS（SPNS）组31例，239例健康对照组儿童作为对照，应用聚合酶链反应（PER）及聚丙烯酰胺凝胶电泳分析的方法检测其PAF—AH基因第9外显子-994位点基因型及等位基因频率，同时对各种PAF—AH基因型的PNS患儿的病情反复情况进行对比分析。结果NTNS患儿血浆型-PAF—AH基因-994位点基因突变频率显著高于STNS及健康对照组；所有PNS及SSNS、SRNS与健康对照组儿童比较，PAF—AH基因．第9外显子-994位点基因突变频率差异无统计学意义，SDNS组突变频率显著高于健康对照及SSNS组；PAF—AH基因第9外显子-994位点基因GT型或TT型第1年内反复次数显著高于GG型者。结论血浆型PAF—AH基因第9外显子-994位点基因突变的PNS患儿在临床类型上多为NTNS，且易于在以后的治疗中出现依赖倾向。     

Role of angiotensin-converting enzyme gene polymorphisms in children with sepsis and septic shock

Background: Sepsis is characterized by a systemic inflammatory response. Its development and outcome are associated with host defense, pathogenicity of the microorganism and genetic polymorphisms. Genetic polymorphisms of the immune system genes have been shown to have a close relationship with the clinical outcomes of sepsis. Angiotensin-converting enzyme (ACE) plays a major role in the host defense against invading pathogens. It is therefore likely that polymorphisms in the ACE gene may have an important effect on determining the development and the outcome of sepsis.
Methods: Ninety-eight children diagnosed as having sepsis and 287 healthy children were included in the study. Insertion/deletion polymorphisms were analyzed using reverse-hybridization assay.
Results: The carriers of I allele (D/I genotype and I/I genotype) were found to have an increased risk of developing sepsis compared to the controls.
Conclusion: DD genotype may play a positive role against the development of sepsis in healthy children.     

瘦素受体外显子突变与ACE基因联合作用对肥胖儿童血脂的影响

目的探讨瘦素受体(LEPR)外显子突变与血管紧张素转换酶(ACE)基因(I/D)多态性联合作用对肥胖儿童血脂的影响。方法选择肥胖儿童116例(肥胖组)和非肥胖的健康儿童78例(健康组)为研究对象。空腹12 h后抽取静脉血。用聚合酶链反应-限制性片段多态性(PCR-RFLP)方法及聚丙烯凝胶电泳分析瘦素受体第20外显子的基因频率及其突变频率,对ACE基因型进行分析。测定血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的水平。于相同条件下测身高、体质量,计算BMI。结果瘦素受体基因第20外显子检出3种基因型,分别为A/A型、G/A型、G/G型。肥胖儿童较健康儿童LEPR基因第20外显子第3057位G→A突变频率增高;ACE基因共检出3种基因型,分别为DD、DI、II。肥胖组比健康组D等位基因检出率高;两者对肥胖儿童脂质代谢均有影响,且有一定的协同作用,表现为LEPR基因型为A/A的肥胖个体中携带D等位基因的儿童更易发生血脂代谢异常。结论肥胖儿童较健康儿童LEPR基因第20外显子第3057位G→A突变频率增高,且D等位基因检出率高;两者对肥胖儿童脂质代谢均有影响,且有一定的协同作用。